电脑病毒的特性及预防

电脑病毒的特性及预防（精选9篇）

电脑病毒的特性及预防 第1篇

1 方法

1.1 外观及电镜观察

肉眼观察病鱼外观, 解剖观察。取病鱼肌肉、鳃、肠道、肝、脾和肾组织样品, 样品经清洗、固定、脱水、置换、切片、染色等样品制备环节后进行电镜观察。

1.2 PCR检测

1.2.1 DNA抽提

取病鱼肌肉、鳃、肠道、肝、脾和肾组织100 mg, 放在1.5 m L的离心管中, 加入300μL裂解液 (异硫氰酸胍0.5%, 二硫苏糖醇1mmol/L, 醋酸钠300 mmol/L, 糖原20μg) , 将组织捣碎、充分溶解, 在12 000 r/min下离心5 min, 取上清液置于1.5 m L离心管中, 加入10-15μLGolden bead (上海申能博彩) 充分摇匀, 室温下充分混匀后, 在12 000 r/min离心1 min。弃上清, 加入200μL 70%乙醇, 反复洗涤2次。弃去上清, 50℃条件下干燥10 min。30μL灭菌水溶解, 充分摇匀。12 000 r/min下离心1 min, 上清液即为待测样品DNA。

1.2.2 PCR检测

根据鲤疱疹病毒TK基因序列 (AJ535112) [7]和Sph基因序列 (AY568950) [8], 设计扩增TK和Sph基因片段引物, TKF:5'-GGGTTAC-CTGTACGAG-3', TKR:5'-CACCCAGTAGATTAT-GC-3';Sph F:5'-GACACCACATCTGCAAGGAG-3', Sph R:5'-GACACATGTTACAATGGTCGC-3'进行PCR检测。PCR反应体系为50μL, 其中模板DNA为3μL, 25μL Ampli Taq Gold 360 Master Mix (life technologies) , 2μL 360 GC Enhancer, 正反向引物各1μL, 双蒸水18μL。PCR反应程序为:预变性95°C 5 min, 94°C变性1 min, 55°C退火1 min, 72°C1 min延伸, 共40个循环, 最后72°C 10 min延伸。取7μL PCR液在2%琼脂糖电泳, TK、Sph扩增片段分别为409 bp和292bp。

2 结果

2.1 组织病变

患病鱼外观表现的最主要的特征是鰓上有明显的白色斑块 (图1) , 且表皮充血, 眼球突出, 解剖结果发现肝、脾、肾颜色较深, 都有充血的现象。

肝脏电镜结果表明:肝、脾、肾组织内都有病毒颗粒, 样品细胞内都观察到了胞疹病毒颗粒, 大小100~200 nm。相比之下, 肾样品内最多, 肝、脾次之 (见图2) 。

2.2 PCR检测

PCR结果在肝脾肾组织中均检测到疱疹病毒基因, 图3AB为TK基因检测结果, 从结果可见脾脏 (4点样孔) 和肾脏组织 (6号) 中病毒颗粒比较多, 肌肉中没有检测到。

2.3 KHV的传播和预防

KHV的传播为接触性传染, 主要通过病鱼、水体、渔网、操作工具等传播, KHV病毒通过鳃或内脏进入鱼体, 感染的锦鲤会大量死亡, 少数幸存者会成为KHV携带者, 这部分鱼一般认为不会再发病, 但在外界条件适宜时会传播KHV病毒。因而在实际生产中, 往往出现一个池塘发病, 就会迅速波及整个渔场的现象;而蛙类和鸟类则加快了病毒的传播。

虽然KHV病毒危害很大, 然而目前尚没有根治KHV的有效办法, 在生产中只能以预防为主, 可以注意从这几方面加强预防: (1) 确保新进的锦鲤来自非疫区。对新引进的锦鲤必须进行隔离检疫30 d以上, PCR检测合格后才可与其他锦鲤混养。 (2) 锦鲤养殖场不能养殖其他观赏鱼类。有研究表明在健康的金鱼[9]和其他一些观赏鱼身上也携带有KHV病毒, 但其本身并没有任何症状。锦鲤与这些观赏鱼混合或接触会感染病毒。 (3) 尽量采取措施保证锦鲤养殖环境的相对独立, 包括养殖土池的相对隔离及锦鲤售卖池的相对独立;渔网、捞海、容器等最好专池专用, 定期消毒。 (4) 尽量减少不必要的交流活动, 如锦鲤比赛、展示等。如需参加则必须充分考虑隔离消毒措施, 避免参赛鱼种间相互接触, 避免人手触碰, 参赛结束也要对参赛锦鲤做适当的隔离观察以确保锦鲤健康。 (5) 一旦发现锦鲤不明原因的大量死亡, 就要首先从KHV的典型症状入手查验死亡的原因;如找不出确定的原因, 就要考虑送有专业资质的实验室进行检测。如果确诊就将涉及的锦鲤全部扑杀, 对所有的养殖环境和养殖工具进行彻底的消毒。 (6) 加强对所有渔场工作人员的知识培训和安全意识教育, 普及锦鲤KHV的相关知识, 尽量减少人为的失误造成KHV的引入和传播。

注:A.肝脏, B.脾, C.肾.箭头指示病毒粒子。

注:A.TK基因, B.Sph基因;M:DNA marker DL2000;1:肌肉;2:鳃;3:肝脏;4:脾脏;5:肠道;6:肾脏;7:Negative control;8:Positive template for KHV。

3 讨论

疱疹病毒简称KHV, 具有很强的传染性, 常会引起鲤鱼的大量死亡。自从1996年在英国被发现以来, 由于世界范围内频繁的展会、商业活动, 锦鲤病毒随着锦鲤迅速传播到世界上几乎所有的锦鲤养殖国家和地区。

目前的技术在KHV携带者上尚不能完全检测出, 且检出结果也不可靠。被感染发病的锦鲤可以通过PCR基因检测得到确诊, 辅助电镜扫描可以看清锦鲤疱疹病毒的形态。

锦鲤通常在感染KHV后1~2 d内就会大量死亡, 最主要的外部症状是体表充血、眼睛凹陷、鳃部出现白色的斑块;光学显微镜检查鳃部, 会发现较多细菌、藻类、原生动物, 通常会误以为是细菌或寄生虫感染引起的病变, 实则是KHV感染鱼体后免疫力下降后引起的各种病原体乘虚而入。

锦鲤KHV病毒病目前还没有治疗方法, 抗病毒药物对已感染KHV病毒的锦鲤无效;日本一些养殖场, 平时会严格的将室内养殖池温度控制在26℃左右, 在KHV爆发时, 会及时将水温升至30℃, 大部分锦鲤能够存活, 但这种方法只能相对提高锦鲤的成活率, 并且容易引起其他细菌和寄生虫的爆发。高温中存活的个体也是KHV的携带者, 这些携带者会在条件适合时将KHV传播给易感群体, 而自身甚至不会显示出任何症状。

美国实验阶段的KHV灭活疫苗在给锦鲤注射后锦鲤确实能够产生抗体, 并且能够抵抗KHV, 但这些锦鲤依然可能是潜在的KHV携带者。

KHV的爆发会引起锦鲤鱼的大量死亡, 存活者也被确认为KHV携带者, 所以一旦发现KHV的存在就要考虑将锦鲤整体杀灭, 所有的工具和养殖系统都要彻底清洗和消毒。

参考文献

[1]Hedrick RP, Gilad O, Yun S, et al.A herpesvirus associated with mass mortality of juvenile and adult koi, a strain of common carp[J].Journal of, Aquatic Animal Health, 2000, 12:44-57.

[2]Davison A J, Kurobe T, Gatherer D, et al.Comparative Genomics of Carp Herpesviruses[J].Journal of Virology, 2013, 87 (5) :2908-2922.

[3]El-Matbouli M, Saleh M, Soliman H.Detection of cyprinid herpesvirus type 3 in goldfish cohabiting with Cy HV-3-infected koi carp (Cyprinus carpio koi) [J].Veterinary Record, 2008, 161 (23) :792-793.

[4]Sadler J, Marcecaux E, Goodwin A E.Detection of koi herpes virus (Cy HV-3) in goldfish, Carassius auratus (L.) , exposed to infected koi[J].Journal of Fish Diseases, 2008, 31 (1) :71-72.

[5]Bergmann SM, Schutze H, Fischer U, et al.Detection of koi herpes virus (KHV) genome in apparently healthy fish[J].Bulletin of the European Association of Fish Pathologists, 2009, 29:145-152.

[6]Kempter J, Sadowski J, Schutze H, et al.Koi herpes virus:do acipenserid restitution programs pose a threat to carp farms in the disease-free zones?[J]Acta Ichthyologica Et Piscatoria, 2009, 39 (2) :119-126.

[7]Bercovier H, Fishman Y, Nahary R, et al.Cloning of the koi herpesvirus (KHV) gene encoding thymidine kinase and its use for a highly sensitive PCR based diagnosis[J].BMC Microbiology, 2005, 5:13.

[8]Gray WL, Mullis L, La Patra SE.Detection of Koi herpesvirus DNA in tissues of infected fish[J].Journal of Fish Disease, 2002, 25:171-178.

电脑病毒的特性及预防 第2篇

关键词：电磁辐射电脑辐射人体健康

0 引言

电子产品盛行的信息时代，人们充分享受到由电子产品带来的乐趣、便利。电脑、手机等最具代表性的电子产品更是深入到了千万户家庭，但是人们对其所存在的健康隐患又了解多少呢？经过多方资料查询，此论文就电脑辐射给予简单的描述，以及个人见解的表述。

1 电脑辐射的来源

1.1 辐射的概念 每当人们听到辐射这个词时都会感到害怕，因为辐射无色无味，无声无臭，看不见，摸不着。‘辐射’这个词最容易让人联想起的就是原子弹、核污染等危险，比如说，前不久日本的核泄漏事件发生时，社会上出现的“抢盐”现象就是人们极度害怕辐射的一种最直接的表现。

其实，人们大概不知道，在自然界中存在的物体，只要它的自身温度在绝对温度零度以上，都会以电磁波的形式不停地向外界传送能量，这种传送能量的方式就称为辐射。

1.2 辐射污染 当人们在辐射源集中的环境中工作、学习、生活时，容易头疼、失眠、视力下降等，其癌细胞的生长速度也比正常人快二十四倍，这是因为人们受到辐射污染的危害。

在我们的生活环境中，辐射无处不在！家里的电器、信号塔、自然环境等都是辐射源的存在地。但是只有当辐射强度超过某个限度的时候才称得上是辐射污染，在辐射低于人类的承受范围内时人们不会感觉明显的身体不适。

因为每个人对于辐射的自身抵抗能力存在差异，所以并不是所有人在辐射超标的环境下生活都会出现上述现象的，也就是说辐射污染并不是草木皆兵的。

1.3 电脑辐射 随着科技的进步，人们进入信息时代。电脑的问世让人们的时间瞬间变小，我们能用它实现网络交流。在网络世界中，人们能及时掌握全球资讯，进而，人类的生活已离不开电脑。但是世界万物的存在，有利必有弊。电脑给人们的生活带来便捷、乐趣的同时也埋下了对人类健康的隐患。

电脑对人们身体健康最大的危害当属电脑辐射，电脑辐射就是我们常听到的电磁辐射，电磁辐射的来源主要包括CRT显示器、机箱、键盘以及音箱等。虽然显示器的屏幕都是含铅玻璃制成的，能够遮挡一定的辐射，但显示器的两侧和后部都是没有屏蔽的。因此，它工作时，其内部的高频电子栓、偏转线圈、变压器以及周边电路都会产生诸如电离辐射（低能X射线），非电离辐射（低频、高频辐射），静电电场、光辐射（紫外线、红外线和可见光等）等多种射线及电磁波。此外，主机机箱的主板、CPU、显卡、声卡等设备工作时也会产生辐射[1]。

2 电脑辐射的危害

电磁辐射和电磁辐射污染是两个概念，任何带电体都有电磁辐射，当电磁辐射强度超过国家标准，就会产生负面效应，才会引起人体的不同病变和危害。

对长期在电脑前工作的人们来说，电脑辐射已经给我们的身体健康带来一些不利的影响，给我们的工作生活学习带来了一些烦恼。第一、电脑辐射对我们伤害最大的首先是眼睛。电脑屏幕发出的光，这光里面含有大量不规则频率的高能短波蓝光，这些短波蓝光有着极高的能量，能够直达我们的视网膜，使之产生自由基，导致视网膜色素上皮细胞衰亡，从而引起视力损伤。第二、皮肤出现黄斑或者过敏，皮肤衰老加快。电脑辐射污染会引起人的分泌系统紊乱，导致皮肤代谢不规律，加快了皮肤衰老。第三、降低孕妇、儿童、老年体弱者的免疫力，特别对胎儿损害更大。电磁辐射对胚胎而言，会阻碍其早期的细胞分裂，甚至造成细胞死亡，同时还会阻止胎盘的正常发育。受到强电磁辐射时孕妇有可能会流产，也可能造成胎儿肢体缺损或畸形，婴儿智力低下，新生儿抵抗力弱。第四、诱发癌细胞。人体内本身存在的癌细胞在电脑辐射的污染下被激活的概率大大增加，增加人们患癌症的机率。

3 预防电脑辐射的方法

3.1 电脑摆放物理位置 在网上有数据显示，电脑辐射最强的就是电脑的后部，其次是它的两侧，而被我们认为是辐射最强的显示屏，事实证明它的辐射最弱。所以有专家建议，PC机使用者应与显示屏保持不少于70厘米的距离，电脑两侧和后部应与他人保持不少于120厘米的距离。

但是生活中，由于工作空间的限制，很多人在所处的工作和生活环境中要实现与辐射源保持一定距离有困难，这时我们只好采取其他的防护措施。

3.2 电脑及时更新换代 电脑使用者应该会有这样的感觉，一台电脑使用时间越久，它的运行速度就会明显变慢。使用者的眼睛会很快感觉疲劳，精神消耗也会增加。这都是电脑辐射增强的表现，在同距离、同类机型的条件下，一般是新电脑的1－2倍。只要使用者及时更换新的电脑，就能避免这种现象的产生。

3.3 改善使用者对电脑的养护 电脑虽然是无生命物质，但是使用者也要对电脑做好清洁工作，比如说机箱除尘、屏幕清洁。电脑机箱除尘能使它及时散热，加快电脑本身的运行速度。清洁电脑屏幕能清晰画面，对使用者的眼睛起到保护作用。

3.4 从饮食上防护 胡萝卜、白菜、豆芽、豆腐、红枣、橘子以及牛奶、鸡蛋、动物肝脏、瘦肉等食物，含有丰富的维生素A和蛋白质，可以补充人体内维生素A和蛋白质，对视力有保护作用。茶叶中的茶多酚、菊花茶、螺旋藻、沙棘油也具有抗辐射的作用，、有利于吸收与抵抗放射性物质，起到抵抗电脑辐射和调节身体功能的作用。

香蕉中的钾能帮助人体排出多余盐分，使身体达到钾钠平衡状态，能缓解眼睛的不适症状。与此同时，香蕉中含有大量β胡萝卜素，可防止人体因缺乏这种物质而产生的眼睛疼痛、干涩、眼珠无光、失水少神。

油菜、青菜、芥菜、卷心菜、萝卜等十字花科蔬菜，不仅是人们餐桌上常见的可口菜肴，而且还具有防辐射损伤的功能。

3.5 借助他物降低辐射 降低辐射最简单的办法就是在电脑前摆上一盆仙人掌，因为仙人掌可有效的吸收电脑辐射，而且仙人掌的市场价值便宜，所以这也是电脑使用者最常采用的办法之一。

当然，人们也可以借助现在先进的科技水平更有效的预防电脑辐射对人体造成的危害。例如，由特殊纤维制成的防辐射外衣、马甲、围裙、孕妇装等，具有较好的防电磁辐射、抗静电作用。防辐射屏：具有防辐射、防静电、防强光等多种作用，对保护视力也有一定的效果。防辐射眼镜：携带方便，价格适中，没有超过大部分电脑使用者的购买能力，市场前景好，发展空间大，便于推广。电脑辐射消除器：价防辐射效果最好，但由于价格昂贵，难于在电脑使用者中推广。

3.6 科技创新 部分电脑使用者还可以应用自身所具备的知识技能设计出一款适合自己使用的防辐射产品，这既能省去购买其他产品产生的高额费用，又能恰到好处的利用自己的创新思维，发挥个人的设计才干。

4 结束语

随着信息时代的到来，计算机逐渐成为人们的宠儿，但是它所带来的安全隐患不得不引起重视。虽然，人们对于电脑辐射已经有了预防意识，但是还应该更加强化，要让电脑辐射对人类的危害降到最低，这需要的是电脑生产商严格按照国家标准制造，需要电脑使用者培养自己良好的使用习惯。在购买电脑时应该选定辐射低的，要降低连续使用电脑工作、娱乐的时间，多食用一些抗辐射的食品。只要人们保持良好的生活习惯，加强体质锻炼，加上对电脑辐射的防护意识就能避免忍受电脑辐射带来的身心折磨。

参考文献：

[1]李晓静.谈电子阅览室内女性工作者如何应对电脑辐射[J].中国学术期刊（光盘版）电子杂志社，1002-1248（2009）11-0244-03.

[2]王国健.电脑辐射，不容忽视的健康杀手[J].网络与信息，2010，(11).

[3]电脑一族必吃的防辐射食物[J].天津社会保险，2011，（03）.

[4]胡萝卜.巧防电脑辐射[J].湖南农机，2008，(12).

[5]钱静庄.辐射对健康的影响及其预防[J].检察风云，2011，(07).

[6]9个办法赶走辐射侵袭[J].农村实用技术，2009，(12).

该课题为浙江省新苗人才资助项目（项目号：2011R429017）。

牛羊的病毒病及疫苗预防 第3篇

1 口蹄疫 (Foot-and-mouth disease, FMD)

口蹄疫是偶蹄动物共患的急性、热性、接触性传染病。人亦感染。世界各国对该病非常重视, 无论是存在口蹄疫的国家, 还是已经消灭口蹄疫的国家, 都动用大量的科研和经济力量控制和防止口蹄疫的发生。国际兽医局将口蹄疫列为动物A类疾病, 我国农业部把口蹄疫列为第一类动物疾病。本病传播途径多、传染性强、为多种动物共患, 曾多次在世界上发生大流行, 据联合国粮食组织和国际兽医局 (OIE) 家畜卫生年鉴统计, 1953年欧洲、非洲、拉丁美洲有66个国家流行口蹄疫。1959年有57个国家流行, 1979年有68个国家和地区流行口蹄疫。1987年不完全统计, 尚有48个国家和地区有发生口蹄疫的报道[2]。1997年台湾省发生了80年不遇的猪口蹄疫暴发, 共有20个县、市、6 147个牧场被染疫, 毁灭牧场6 054个, 病猪1 011 674头, 死亡184 231头, 屠宰3 850 581头[2,3]。

口蹄疫病毒 (Foot-and-mouth disease virus, FMDV) 属于微核糖核酸病毒科 (Picornaviridae) 中的口蹄疫病毒属 (Aphthavirus) 。FMDV的外壳蛋白主要由VP1、VP2、VP3和VP4这四种结构多肽组成, 其中VP1是诱导机体产生免疫反应的主要结构蛋白。FMDV具有多型性、易变性的特点, 根据其血清学特性, 现已知有7个血清型, 即O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3 (即南非1、2、3型) 以及Asia1 (亚洲1型) 。1977年世界口蹄疫中心公布有7个型与65个亚型, 每年还会有新的亚型出现[4]。

疫苗接种作为特异性预防口蹄疫的有效手段, 在口蹄疫的防控中已被广泛使用, 并取得了显著成效, 现有预防口蹄疫的疫苗有传统疫苗、亚单位疫苗、病毒活载体疫苗。

传统疫苗包括弱毒疫苗和灭活疫苗。灭活疫苗是现今使用最广泛的疫苗, 安全可靠, 免疫效果良好, 但只能提供短期保护。另外灭活疫苗所用的毒种均为强毒, 必须有严格的防范设施和严格的操作规程, 并存在生物安全隐患。目前除了少数国家和地区外, 世界各国几乎不再研制和使用FMD活疫苗。

亚单位疫苗就是采用基因工程手段, 利用各种表达系统表达VP1蛋白而制成的疫苗。1981年Kupper等[5]克隆了VP1基因, 并实现其原核表达, 通过间接ELISA和放射免疫试验证实了其表达产物具有抗原性;同年, Kield等[6]在大肠埃希菌中表达了VPl, 以这种融合蛋白制备的试验疫苗, 在牛和猪中均可诱导中和抗体产生。其优点是它只含有病原体的一部分, 不会导致动物发病, 并且与灭活疫苗相比, 亚单位疫苗能获得相同程度的保护力。缺点是必须重复大量注射。

病毒活载体疫苗是将外源基因插入到某些病毒载体基因组织内, 使之高效表达但不影响该疫苗株的正常生存与繁殖。另外将不同型FMDV VP1基因插入到同一病毒活载体中, 组成多价基因工程疫苗可防控、控制FMD及其他相关疾病。金明兰等[7]将FMDV的衣壳蛋白前体P1-2A和蛋白酶3C基因插入到鸡痘病毒表达载体中, 构建重组鸡痘病毒转移载体, 重组病毒连续传30代并免疫BALB/c小鼠, 结果免疫小鼠能产生较高水平的FMDV特异性抗体和中和抗体。一个载体中可同时插入多个外源基因, 表达多种病原微生物的抗原, 同时起到预防多种传染病的作用。

2 小反刍兽疫 (Peste de-spetits ruminants, PPR)

小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒 (Peste despetits ruminants virus, PPRV) 引起的小反刍动物的一种急性接触性传染病性疾病。其特征是发病急剧, 高热稽留、眼鼻分泌物增加、口腔糜烂、腹泻、和肺炎[8]。

PPRV属副黏病毒科, 与牛瘟病毒 (RPV) 、犬瘟热病毒 (CDV) 、海豹瘟病毒 (PDV) 、海豚瘟病毒 (DDV) 、麻疹病毒 (MV) 同属麻疹病毒属;PPRV目前分4群, 其中3群源于非洲, 1群源于亚洲。目前, 发现该病毒仅有1个血清型。该病毒的核衣壳呈螺旋对称, 由核衣壳蛋白 (N) 、磷蛋白 (P) 和大蛋白 (L) 构成。PPRV的RNA链从3端至5端依次是N-P-M-F-H-L 6个基因, 分别编码核衣壳蛋白 (N) 、磷蛋白 (P) 、大蛋白 (L) 、囊膜基质蛋白 (M) 、纤突糖蛋白 (F) 和血凝索 (H) 6种结构蛋白以及C和V 2种非结构蛋白[8]。

小反刍兽疫属OIE法定通报动物疫病, 我国规定其为一类动物疫病。本病主要感染绵羊和山羊。该病自上世纪80年代后期一直严重威胁着我国畜牧经济和动物卫生安全。2007年7月西藏日土县热帮乡龙门卡村发生小反刍兽疫疫情, 死亡262只山羊[9]。对PPR的控制主要靠疫苗, 现在的疫苗种类很多, 均有一定的免疫效果。

西藏发生疫情后, 西藏自治区兽医生物药品厂首次接受国家农业部小反刍兽疫活疫苗紧急研制生产任务, 首次研制细胞活疫苗, 毒种为小反刍兽疫75/1株Vero细胞毒, 并于当年研制, 当年生产。提供小反刍兽疫活疫苗4批共180万头份, 经检验, 各项主要指标均达到或超过试行标准, 取得了显著的社会效益和经济效益, 截止2010年共计生产小反刍兽疫疫苗34批4 207万头份, 产品合格率94.11%, 为我区及时防控小反刍兽疫做出积极贡献。

因为PPRV和RPV的抗原具有相关性, 可用牛瘟 (RP) 弱毒疫苗来免疫绵羊和山羊进行PPR的预防。RP弱毒疫苗免疫后产生的抗RPV抗体能够抵抗PPRV的攻击。具有良好的免疫保护效果。西非某些地区用此疫苗成功地控制了PPR。其主要缺点是:免疫动物仅产生抗RPV的中和抗体, 而未产生抗PPRV的中和抗体[8]。

1989年, Diallo等通过Vero细胞的连续传代, 成功研制了Nigeria 75/1PPR弱毒疫苗。该疫苗无任何副作用。尽管PPRV Nigeria 75/1属于I群, 但能交叉保护其他群毒株的攻击感染。由于PPRV对热高度敏感, 致使Nigeria75/1疫苗的稳定性很差, 不利于基层运输和使用。除Nigeria 75/1弱毒疫苗外, 印度用当地流行毒株研制的sungri/96弱毒疫苗也已成功应用于生产[10]。

PPR灭活疫苗采用感染山羊的病理组织制备, 一般采用甲醛或氯仿灭活。实践证明甲醛灭活的疫苗效果不理想, 而用氯仿灭活制备的疫苗效果较好[10]。

由于麻疹病毒属的表面糖蛋白具有良好的免疫原性。无论是使用H蛋白或N蛋白都作为亚单位疫苗, 均能刺激机体产生体液和细胞介导的免疫应答, 产生的抗体能中和PPRV和RPV[10]。

3 蓝舌病 (Blue tongue, BT)

蓝舌病室由蓝舌病病毒 (Blue tongue virus, BTV) 引起的、以昆虫为传播媒介的反刍动物的一种非接触性传染病。主要发生于绵羊, 其他反刍类牲畜也能被感染。其临诊特征为发热、消瘦, 口、鼻和胃黏膜有溃疡性炎症变化, 且口腔粘膜及舌发绀, 因此命名为蓝舌病。蓝舌病最早于1876年发现于南非的绵羊, 1905年被正式报道, 1934年发现于牛, 1979年我国云南省首次确定存在绵羊蓝舌病, 随后, 在湖北、安徽、四川、甘肃、山西等29个省均检出BTV血清学阳性畜[11,12], 随着全球气候变暖, 蓝舌病在欧洲许多国家相继暴发, 且分布范围不断扩大。2006年8月, 德、比、法、荷等国首次发现了牛感染蓝舌病。2007年7月, 英、法、意等国暴发了蓝舌病。世界动物卫生组织通报, 2008年34月, 法、意等国暴发了蓝舌病[13]。

BTV是呼肠孤病毒科 (Reoviridae) 环状病毒属 (Orbivirus) 蓝舌病病毒亚群 (Bluetingue virus sub-group) 的成员。应用中和试验可将分离到的BTV分为25个血清型, 各型之间无交互免疫力。各个国家和地区血清型的分布各不相同, 南非和西部非洲主要流行血清型1~15、18、19、22、24型;中东主要流行1、3、4、10、12、16型;美国主要流行2、10、11、13、17、24型;澳大利亚主要流行1、20、21、23型;南美 (巴西) 主要流行4型;在我国优势血清型为1、4、2、16型[14]。

对于本病, 目前尚无有效的治疗方法。普遍认为控制本病的关键是研制疫苗。可考虑使用弱毒疫苗、灭活疫苗及重组疫苗, 这三种类型都有血清型特异性。

弱毒疫苗是将分离自牛、羊的野毒株通过体外组织或鸡胚连续传代后获得。弱毒疫苗在控制地方流行性蓝舌病暴发方面很有效, 但弱毒株可能与野毒株重组产生新的基因型毒株而改变其生物特性。

随着分子生物学及免疫学的发展, 几种BTV重组疫苗已经被研究, 如杆状病毒重组疫苗、重组痘苗病毒疫苗、重组病毒样颗粒 (NLP) 或核芯样颗粒 (CLP) 疫苗等。不过这些重组疫苗在BTV的传染防御上总的来说不理想, 仍需要大量的试验证实。目前仍未用于BTV疫苗的大量生产[13]。

理想的蓝舌病疫苗应该能阻断本地区的所有血清型的蓝舌病, 而对接种动物和胎儿没有致病作用, 不会发生毒力回升、不与野毒株重组, 性能稳定, 价格低廉。

4 小结

口蹄疫、小反刍兽疫、蓝舌病是几种牛羊重要的病毒性传染病, 一旦发病将严重危害该发病地区畜牧业的发展及人民的安全, 所以接种疫苗能有效预防疾病的发生。而传统疫苗在安全性及特异性上都有一定的缺陷。应用现代生物技术制备的疫苗, 于传统疫苗相比, 其安全性、特异性以及产品纯度方面大大提高, 但机体对感染的免疫应答是综合性的因素, 而大多数新型疫苗的设计仅能考虑其中的部分因素。所以, 今后应重点加强不同病原发病与免疫机理的研究, 为新型疫苗设计和现有疫苗改进提供理论依据。要采取综合措施, 提高现有疫苗的免疫效果, 发展应用现有免疫效果好的传统和新型疫苗, 提高动物疾病的防治水平。

参考文献

[1]吴锋.论西藏草地畜牧业的发展对策与措施.西北农林科技大学学报 (自然科学版) .2005, 33 (4) :29-34.

[2]农业部畜牧兽医司家畜口蹄痤及其防制.北京:中国农业科技出版社, 1994.

[3]金明兰, 金宁一, 鲁会军, 等.重组口蹄疫鸡痘病毒vUTAL3CPl的构建及其遗传稳定性和免疫原性.中国生物制品学杂志, 2008 (5) :360～363.

[4]骆学农, 郑亚东, 才学鹏.小反刍兽疫的研究进展.中国兽医科学, 2007.37 (11) :994-999.

[5]王志亮, 包静月, 吴晓东, 等.我国首例小反刍兽疫诊断报告.中国动物检疫, 2007, 24 (8) :24-26.

[6]张亮, 史耀旭, 卫广森.小反刍兽疫的研究进展.中国动物检疫, 2008, 25 (10) :4649.

[7]林汉亮, 冉多良.蓝舌病研究进展.新疆畜牧业, 2008 (1) :4-7.

[8]孙好学, 白建.蓝舌病及其防制研究进展.畜禽业, 2005 (3) :48-49.

[9]殷丽霞.蓝舌病的研究现状.吉林畜牧兽医, 2009, (5) :8-10.

鸭病毒性肝炎病毒特性简介 第4篇

鸭病毒性肝炎是雏鸭高度致死性的传播迅速的病毒性疾病，以肝脏损伤为其主要症状。每年雏鸭的发生率较高，死亡率较高，是夏季养鸭必防的雏鸭传染病。

1 病毒分类

按病原学分类，鸭肝炎病毒（DHV）可分为1型、2型、3型，三个型之间没有交叉免疫力，发病最严重的是1型病毒，而2、3型病毒还可以使免疫了1型DHV的雏鸭发病。因此，我们很有必要了解病毒性肝炎病毒的相关知识，以便采取相关措施应对。

1.1 鸭肝炎病毒1型 鸭肝炎病毒1型含RNA，属于小核糖核酸病毒属，大小约为20～40nm，其生物学特性是细胞培养物不能吸附和凝集鸡、鸭、鹅、绵羊、马、豚鼠、小白鼠、蛇、猪及家兔的红细胞。

1.1.1 物理因素及抵抗力 1型鸭肝炎病毒可耐受乙醚和碳氟化合物、氯仿、胰酶、pH3和30%的甲醇或硫酸铵的处理，在1%的甲醛或2%的氢氧化钠2h（15～20℃）、2%次氯酸钙中3h或0.2%福尔马林2h可完全灭活。1型鸭肝炎病毒在热环境中有一定的耐受性，50℃加热1h不受影响，56℃加热30min部分失活，62℃加热30min后失活。1型鸭肝炎病毒在37℃的条件下可存活21d。在自然环境中病毒可在未清洗的污染的孵化器中存活10周，在阴凉处的垃圾、湿粪中能存活37d以上。在4℃的环境条件下能存活2年以上，在-20℃环境中可存活达9年。因此说，在夏季1型鸭肝炎病毒可在自然环境中长期存活，必须认真防范。

1.1.2 变异性 国外发现一个1型鸭肝炎病毒的明显的血清学变异株。

1.1.3 细胞培养 1型鸭肝炎病毒弱毒株可在鹅、火鸡、鹌鹑、雉、珍珠鸡和鸡的胚细胞培养物上生长，而1型鸭肝炎病毒强毒只能在珍珠鸡、鹌鹑和火鸡的胚细胞上有不同程度的生长。鸭胚成纤维细胞接种1型鸭肝炎病毒鸡胚适应毒后可连续生长，并产生很强的细胞致病作用，正是这一特有特性可进行疫苗生产。

1.1.4 致病力 鸭1型肝炎病毒接种9日龄的鸡胚，经6d可致鸡胚60%的死亡，继续用鸡胚绒毛尿囊膜和胚液的匀浆接种传代，在第63代时可致鸡胚100%的死亡，说明对鸡胚有致病力。而1型鸭肝炎病毒通过鸭胚传代后，可失去对雏鸭的致病力。

1.2 鸭肝炎病毒2型

1.2.1 鸭肝炎病毒2型 鸭肝炎病毒2型归类于星状病毒（astrovirus），将来可能称为鸭星状病毒（duckastrpvirus）。

1.2.2 形态 在电子显微镜下病毒颗粒的形状类似星状病毒，直径为28～30nm，可耐受氯仿、pH3和胰酶的处理，50℃加热60min病毒的感染性不受影响，甲醛熏蒸消毒和标准的消毒药消毒措施可以有效控制感染。

1.2.3 细胞培养 2型鸭肝炎病毒不能在多种鸭和鸡的继代细胞上生长。

1.2.4 致病力 通过鸡胚传代可使2型鸭肝炎病毒的致病力减弱。

1.3 鸭肝炎病毒3型

1.3.1 鸭肝炎病毒3型 鸭肝炎病毒3型含有RNA，归类于小核糖核酸属，但与1型鸭肝炎病毒无关，没有共同的抗原成分。

1.3.2 形态 电镜下的鸭肝炎病毒3型的形态可见胞浆中有大约直径30nm的呈晶子格排列的颗粒。可耐受氯仿和pH3的处理，对50℃的加热敏感。

1.3.3 培养 接种9～10日龄鸭胚绒毛尿囊膜敏感，而接种鸡胚则不敏感。可在鸭胚或雏鸭的肝或肾细胞培养物中增殖。

1.3.4 致病力 3型鸭肝炎病毒对雏鸭的致病力较低，用鸭胚绒毛尿囊膜传代接种可使3型鸭肝炎病毒对雏鸭的致病力减弱，而对鸭胚的致病力增强。

2 传播与媒介

2.1 自然宿主 在自然环境中，1型鸭肝炎仅发生于雏鸭，成年的种鸭即使在污染的环境中也无临床症状，也不影响产蛋。而鸡和火鸡对该病毒有抵抗力，人工感染雏鸡、雏火鸡、雏番鸭、幼鸽、鹌鹑未发生死亡和死亡率很低，而雏雉、鹅和珍珠鸡死亡率则很高，而该病毒不能传染给家兔、豚鼠、小白鼠和狗。

2.2 传播途径 自然条件下，鸭病毒性肝炎在雏鸭中传播很快，死亡率很高。传播速度快说明有很强的接触传染性。

在有感染存在的地区孵化出的种鸭后代，孵出就变换新的环境饲养，则不发病，说明不会经过种蛋传播鸭肝炎病毒。

总之，雏鸭肝炎病毒的特性揭示了自然界中的媒体不是该病毒的传播媒介，而易感染的雏鸭才是易感群体传播的根源，做好自然环境的消毒和雏鸭的免疫接种，才是防止接触传染本病的根本有效措施。

食品的病毒污染途径及预防措施 第5篇

1 常见食源性病毒感染种类

1.1 轮状病毒感染

轮状病毒感染而引起的疾病, 在世界范围内都存在。其传染源为患者及病毒携带者, 可通过密切接触和粪口途径传播, 发病率和死亡率很高。轮状病毒感染主要引起婴幼儿急性胃肠炎, 早期有短时间轻度上呼吸道感染症状, 然后迅速出现发热、呕吐、腹泻, 导致脱水及电解质紊乱。

1.2 甲型肝炎病毒感染

甲型肝炎是世界性疾病, 全世界每年发病数量超过200万人次, 我国是甲型肝炎的高发国家之一。粪口途径是甲肝病毒的主要传播途径, 随水和食物传播是甲肝暴发流行的主要传播方式。较差的环境卫生和不良个人卫生习惯[3], 是造成甲型肝炎病毒地方性流行的主要原因。甲型肝炎的潜伏期通常为1~6周, 症状一般表现为厌食、发热、乏力、恶心、呕吐、肌痛、肝肿大、出现黄疸、血清转氨酶异常升高等, 经对症治疗后无后遗症, 病死率较低。重症肝炎的发病比例较低, 症状表现为突然发热、剧烈腹痛、呕吐、黄疸, 之后有肝性脑病表现, 病死率较高。

1.3 乙型肝炎病毒感染

乙型肝炎是世界性传染病。其发病对象主要为青壮年人, 在高发地区, 除儿童外, 无特殊危险人群。乙型肝炎的传播途径为肠道外传播, 如血液和其他体液等, 但通过唾液、胃肠道和食品传播的也有报道。

1.4 戊型肝炎病毒感染

戊型肝炎以前曾被称为非甲非乙型肝炎, 通常认为是一种在发展中国家通过粪口途径和病人健康人接触传播的疾病。其潜伏期比甲型肝炎长, 一般为22~60 d, 症状与甲型肝炎类似。

1.5 疯牛病病毒感染

牛海绵状脑病, 俗称疯牛病, 于1986年11月第1次在英国报道。该病的感染因子目前认为是一种不含核酸, 具有自我复制能力的感染性蛋白质粒子朊病毒。自然感染的牛脑、脊髓和视网膜具有高度感染性。目前, 众多证据显示该病是由于使用牛吃了被朊病毒感染因子污染的肉骨粉饲料引起的。20世纪80年代中期至90年代中期, 是疯牛病暴发流行期, 主要的发病国家为英国及其他欧洲国家。

人类可传播性海绵状脑病, 又名克雅氏病, 是一类侵袭人类及多种动物中枢神经系统的退行性脑病, 潜伏期长, 致死率100%。研究表明, 该病与疯牛病的暴发存在密切关系。疯牛病感染因子可通过消化道进入人体, 在局部消化道淋巴组织中增殖, 以后进入脾脏、扁桃体、阑尾等淋巴器官, 最后定位于中枢神经系统。因此, 食用由疯牛病感染因子污染的食品, 被认为是疯牛病传播给人的重要发病途径之一。由于目前对朊病毒感染因子和发病机理的认识有限, 对类似的神经退行性疾病缺少有效的治疗, 同时发病后的免疫耐受使得特异性预防难以实现。因此, 对于疯牛病的暴发, 防止其对人类形成灾难性的后果, 以及在可预见的时期内彻底消灭疯牛病, 只有依靠有效的监控。

1.6 禽流感病毒感染

禽流行性感冒简称禽流感, 是由正粘病毒科的A型流感病毒引起的禽类病毒性传染病, 主要引起鸡、鸭、鹅、火鸡、鸽子等禽类发病。可引起从轻微的呼吸系统到全身呈严重败血症等多种症状。被世界动物卫生组织列为A类动物疾病, 我国将其列为一类动物疾病。人类流行性感冒的病原, 也属正粘病毒科。可由该科的A、B、C 3个型的病毒引起, 以A型为主。由于流感病毒的易变异性, 禽流感的发生, 除了造成经济上的损失, 也对人类健康有一定的威胁, 因而引起人们的普遍关注。禽流感病毒对低温有很强的适应力。如果在-20℃左右, 它可以存活几年, 但是如果在20℃的温度下它只能存活7 d。经过加温的食品, 应该是不存在有活性的病毒的。禽流感病毒在56℃条件下30 min就能被灭活, 在70℃条件下用2 min就能被灭活。

2 病毒的传播途径

不同的病毒, 其传播、感染的途径不同。例如, 肝炎病毒主要是通过日常生活接触而经口传染, 亦可由输入带有病毒的血液或血液制品而传染;输血、输液、预防接种、肌肉注射时, 注射器、针头等器具污染病毒而未彻底消毒, 食品从业人员感染肝炎病毒未及时调离, 食具消毒不严, 食物或水源被病毒污染, 也会造成肝炎病毒的感染传播, 甚至大面积暴发。禽流感病毒的传播途径有以下3种, 一是经过呼吸道飞沫与空气传播, 病禽咳嗽和鸡叫时喷射出带有禽流感病毒的飞沫在空气中漂浮, 人吸入呼吸道被感染发生禽流感。二是经过消化道感染。进食病禽的肉、病禽的蛋及其制品, 病禽污染的水、食物, 用病禽污染的食具、饮具, 或用被污染的手拿东西吃, 受到传染而发病。三是经过损伤的皮肤和眼结膜, 容易感染禽流感病毒而发病。

3 预防病毒感染的措施

3.1 搞好环境卫生和个人卫生

办公室、宿舍、厨房、食堂的环境要干净、卫生[5], 做到周围无杂草、无积肥坑、无污染源。食品从业人员要做到勤洗手、剪指甲, 勤洗澡、理发, 勤洗衣服、被褥, 勤换洗工作服。所有人员要做到饭前便后洗手。集体就餐时, 要做到分餐或公筷公勺, 防止互相传染。

3.2 注意清洁水源

饮用水一定要干净、清洁。对病死的鸡、鸭、鹅等要进行焚烧或用石灰深埋处理, 严禁病、死禽类流入市场, 并注意搞好隔离消毒。防止水被污染或病毒经水污染, 必要时请卫生防疫部门对饮用水进行化验[6]。合理处理粪便和污水, 防止粪便直接或间接污染食品。

3.3 严格处理病人用具

及时消毒处理病人的衣物、餐具、用具等。特别是医院要注意搞好隔离、消毒, 对病人用过的注射器、输液用具等, 要进行焚烧处理, 严禁与生活垃圾一起随意处理, 或出售给废品收购人员, 以防个别企业简单加工后制成再生品, 威胁人们的健康。

3.4 定期注射疫苗

要根据每个人的具体情况, 定期注射疫苗, 如甲肝疫苗、乙肝疫苗等。食品从业人员要每年进行1次健康检查, 发现食源性病毒感染者, 要立即调离饮食服务工作岗位, 并及时进行隔离治疗, 以防止病毒的传播而对人们的健康产生影响。

摘要：介绍了常见食源性病毒感染种类, 阐述了病毒传播途径, 提出了预防病毒感染的措施, 以期为预防病毒对食品的污染提供参考。

关键词：食品,病毒污染,传播途径,预防措施

参考文献

[1]陈倩, 骆海朋, 赵春玲, 等.北京市食品中五种食源性致病菌污染状况调查研究[J].中国卫生检验杂志, 2003, 13 (5) :570-571.

[2]张森富, 赵婷.浅析现阶段我国食品安全问题[J].内蒙古煤炭经济, 2009 (3) :101-103.

[3]杨萍, 牛春艳.浅谈环境污染对食品安全的影响[J].世界农业, 2009 (12) :43-46.

[4]杨继远, 袁仲.食品污染的危害及其防治措施[J].农产品加工:学刊, 2008 (7) :239-241, 244.

[5]方剑锋, 云昌均, 于飞, 等.试论食品污染与食品安全综合控制策略[J].食品工业科技, 2008 (5) :38-40, 42.

猪圆环病毒病的诊断及预防 第6篇

1猪圆环病毒病的诊断

通常对猪圆环病毒病可根据临床症状、病理变化、淋巴组织、肝、肺等的特征性病变与组织学的变化等做出初步判断。由于猪圆环病毒2型的感染很少单独发生,其所诱发的其他各种疾病的临床表现等并不是该病毒感染独有的,因此,必须依靠实验室检测才能确诊。

间接免疫荧光抗体法、病毒分离鉴定法、酶联免疫吸附试验、聚合酶链式反应以及原位核酸杂交试验都是实验室检测中的常用方法。其中聚合酶链式反应检测最为敏感,现在猪圆环病毒已经在各大猪场中广泛存在,并且只有当猪感染猪圆环病毒2型到一定程度后才会表现出临床症状与病变,如果我们还使用传统的聚合酶链式反应对其进行检测,其诊断结果也只能做一个参考,而定量聚合酶链反应技术可以准确检测出组织中病毒的含量多少,因此可以对其诊断结果进行计算从而推测出动物感染的具体情况。酶联免疫吸附试验是一种血清学检测方法,在部分规模化猪场已经开始普及,但由于该病毒的覆盖率太高,因此利用酶联免疫吸附试验检测出的结果不能用来判定猪群感染了猪圆环病毒相关疾病。

2猪圆环病毒的预防措施

2.1减少应激

要保持猪舍的清洁卫生,通风要好,氨气以及其他有害气体的浓度不能太高;不同日龄的猪不混养,以此保证合适的饲养密度;饲料中适当添加抗氧化剂等。仔猪在21日龄断奶时,要让仔猪在原产床上停留几天,给予优质的饲料与充足的水,并添加抗应激药物。断奶过程中,不要与其他窝的仔猪混养,避免仔猪打斗的情况,以此减少应激反应。

2.2加强检疫

工作人员应对早期发现或者疑似感染的猪只及时诊断、隔离,将病猪与带毒猪清理掉,从而消灭传染源,净化猪场。

2.3加强消毒

工作人员应对猪场、空猪舍进行彻底的消毒,外来人员入场也需要消毒,在饲养的过程中对猪进行消毒。在消毒用品的使用上可选择氢氧化钠、过氧化氢等消毒剂,这些都能对该病毒起到有效的预防作用。

2.4提高抵抗力与免疫力

要增强猪只的抵抗力与免疫力,在饲料上选择营养全价的日粮,提供含有电解质和多种维生素的饮水,并使用如转移因子、干扰素等这类新型的抗病毒剂,同时还可以搭配中草药抗病毒制剂,以此来减少临床症状。采用亚单位疫苗,按程序进行免疫接种,能有效抑制病毒蔓延,提高免疫能力。

2.5控制其他疫病

高致病性猪蓝耳病会诱发猪圆环病毒的发生甚至是加重病情,猪瘟、肺炎支原体病等这类免疫抑制性疾病会造成猪圆环病毒2型的复发,因此,应控制这类疫病的发生。

2.6血清预防与主动感染

(1)将猪场内育肥猪的血清采集出来通过腹腔注射的方式注射给断奶仔猪。为了安全起见,在选择供血者、处理血清、储存以及注射等方面都要考虑周全,并且只能在本猪场采集血清。

(2)主动免疫“感染物质”,已感染猪的粪便、死胎以及木乃伊胎等都属于“感染物质”,将这种“感染”物质在配种前饲喂给母猪,特别是针对初产母猪,能起到较好的效果。一些有一定抗体的母猪可在80d后再补喂,通过这种方式能使其有更高水平的免疫反应,并且还可以通过初乳传给仔猪。这种方法不仅能有效防制猪圆环病毒,而且对其他由肠道病毒引起的繁殖障碍也能起到良好的效果。

3结语

总之,我们应严格做好预防措施,按时接种疫苗,通过各种途径提高猪群的抵抗力与免疫力,不断探索猪圆环病毒的检测方法,在对猪群进行诊断时应结合自己的实践经验以及设施条件,选择出最合适的检测方式,从根本上解决该病的预防控制问题。

关键词：猪圆环病毒,诊断,预防,措施

参考文献

[1]张琦,等.猪圆环病毒感染诊断方法研究进展[J].动物医学进展,2008,06:90-93.

[2]游一,等.规模化猪场猪圆环病毒病的诊断及综合防制[J].中国畜牧兽医,2009,09:152-155.

电脑病毒的特性及预防 第7篇

本研究中番鸭养殖户采集疑似MDRV病料, 经常规处理, 分离和鉴定了一株MDRV, 并对该毒株在不同细胞上的培养特性进行初步研究。

1 材料及方法

1.1 材料

1.1.1 病料

无菌采集发病番鸭的肝脏、脾脏。

1.1.2 试剂

Tissue DNA/RNA Kit购自OMEGA公司, Premix TaqTM (Ex TaqTM Version) 、DNA Marker DL2000购自TaKaRa公司, DMEM细胞培养液购自GBICO公司, 新生牛血清购自兰州荣晔公司。

1.2 方法

1.2.1 病毒分离

将病料剪碎, 按1:5体积加生理盐水, 匀浆器匀浆后反复冻融3次, 12000r/min4℃离心30min, 吸取上清液, 0.22μM滤膜过滤除菌。取上述滤液, 经卵黄囊途径接种7日龄番鸭胚10枚, 接种量为0.2ml/枚。接种后, 置37℃生化培养箱恒温孵化。弃去24h内死亡的鸭胚, 观察2周, 收获死亡的胚体及尿囊液。

1.2.2 病毒在番鸭胚成纤维细胞上的培养

按常规方法制备鸭胚成纤维细胞 (Muscovy duck embryo fibroblast, MDEF) , 取已经长满单层的MDEF, 弃去生长液, 10ml培养皿接种病毒液0.1ml, 加入足量维持液, 于37℃5%CO2培养, 观察7d细胞病变, 收毒。至-20℃反复冻融3次, 收集细胞病毒液。

1.2.3 病毒在DF1鸡胚成纤维细胞系培养

将上述成纤维细胞培养后细胞病毒液接种于DF1传代细胞系, 观察细胞病变情况。

1.2.4 病毒TCID50测定

将病毒用维持液进行10倍系列倍比稀释, 分别接种于长满MDEF和DF1单层细胞的96孔微量细胞培养板上, 同一稀释度接种4孔, 每孔0.1ml, 于37℃5%CO2中培养, 逐日观察细胞病变, 至第7d, 根据Reed-Muench法计算TCID50。

1.2.5 病毒鉴定

按照试剂盒Tissue DNA/RNA Kit说明书, 从收获的尿囊液及细胞培养液中提取RNA, 按照参考文献[5]方法进行番鸭呼肠孤病毒 (MDRV) 的RT-PCR检测。

2 结果

2.1 病毒初步分离结果

病毒接种7日龄番鸭胚, 在接种后7～14d番鸭胚全部死亡病毒致死的胚体全身严重出血。

2.2 病毒在MDEF上培养特性

YF株在MDEF上盲传10代, 细胞在4d内未见明显细胞病变, 第5d细胞开始出现圆缩, 融合等细胞病变, 但融合细胞数量少、体积小, 感染细胞颗粒变性、崩解、碎裂也不明显 (图3) ;待传代至第13～25代时, 病毒感染细胞出现病变提早, 病变也明显, 约72h有70%细胞出现病变, 大量细胞圆缩、融合、聚集成团, 并部分脱落, 悬浮于培养基内, 感染细胞颗粒变性、碎裂、崩解, 致密单层细胞出现较大空洞 (图4) ;传代至第35～50代时, 接种病毒24h后即出现病变, 细胞圆缩、融合, 48h后有80%出现病变, 大量圆缩细胞脱落, 悬浮于培养液中 (图5) 。

2.3 病毒在DF1上培养特性

YF株接种单层DF1传代细胞系, 病毒在DF1传代细胞系上适应良好, 细胞病变明显, 随着代次的增加, 细胞病变出现时间缩短, 细胞病变和在MDEF上基本一致, 感染细胞圆缩, 出现融合细胞, 随着时间的推移, 融合细胞越来越多, 越来越大, 形成悬浮于培养基中的巨细胞, 体积是单个细胞的几倍至10几倍, DF1细胞颗粒变性, 形成大量空泡然后碎裂、崩解, 单层致密细胞形成空洞 (图6) , 病变出现时间较在MDEF上要早8～12h。

2.4 TCID50测定结果

YF株在细胞上传代至第50代后, 细胞病变出现比较稳定, 将病毒用维持液进行10倍系列倍比稀释, 分别接种于长满MDEF和DF1单层细胞的96孔微量细胞培养板上, 观察细胞病变至第7d, 根据Reed-Muench法计算TCID50。结果YF株在MDEF、DF1上培养后测得的TCID50分别稳定在10-6.75和10-7.33。

2.5 RT-PCR检测结果

按照参考文献的方法合成引物, 对收获的尿囊液及细胞培养液进行MDRV检测, 能扩增出目的片段约为300bp (图8) , 证明该分离株为番鸭呼肠孤病毒, 命名为YF株。

M.Marker DL2000、1.MDRV阳性对照、2.病毒接种的尿囊液、3.病毒接种细胞培养液、4.阴性对照

3 讨论

(1) 番鸭呼肠孤病毒主要引起雏番鸭的感染发病, 直接影响番鸭的育雏存活率, 发病率高, 死亡率与环境等因素差异很大, 感染发病鸭痊愈后, 生长受阻或成为僵鸭, 失去饲养价值该病给番鸭养殖业带来极大危害和经济损失[6][8]。

(2) 本研究在云浮地区番鸭养殖场成功分离到一株MDRV野毒, 并命名为YF株, 为后续研究该毒株的生物学特性奠定了基础。

(3) 番鸭呼肠孤病毒YF株在番鸭胚成纤维细胞、DF1鸡胚成纤维细胞传代细胞系上适应良好, 培养增殖产生明显的细胞病变, 病变基本一致, 主要是引起细胞圆缩、融合、聚集成团, 随着病变成度加深, 纤维细胞碎裂、崩解、颗粒变性, 单层致密细胞内形成大量不规则小空泡, 大量圆缩细胞脱落悬浮于培养液中[7]。病毒感染细胞, 出现细胞病变的时间早晚不同, 在DF1细胞上最早出现病变也最明显。病毒传至35代后, YF株在MDEF、DF1上培养测得的TCID50分别稳定在10-6.75和10-7.33。可见, 该番鸭呼肠孤YF株在DF1上传代最好, 毒价最高, 病变最明显, 并且该细胞是传代细胞, 生物安全性好, 为今后研制番鸭呼肠孤病毒弱毒疫苗奠定了良好基础。

参考文献

[1]郑腾, 曹治云, 张志灯.我国番鸭呼肠孤病毒病的研究现状[J].畜牧与兽医, 2005, 37 (8) :52-54.

[2]吴宝成, 陈家祥, 姚金水.番鸭呼肠孤病毒B3分离株的致病性研究[J].中国预防兽医学报, 2001, 23 (6) :422-425.

[3]吴宝成, 姚金水, 陈家祥等.呼肠孤病毒B3分离株感染番鸭的病理组织学研究[J].福建农业大学学报, 2001, 30 (4) :514-517.

[4]陈少莺, 胡奇林, 江斌等.番鸭肝白点病病理学研究[J].福建农业学报, 2002, 17 (4) :220-222.

[5]胡奇林, 林锋强, 陈少莺等.应用RT-PCR技术检测番鸭呼肠孤病毒[J].中国兽医学报, 2004, 24 (3) :231-232

[6]潘晓斌, 胡奇林, 陈少莺等.番鸭呼肠孤病毒病病原学研究[J].生物技术通报, 2008, 1:72-78.

[7]张娜, 程安春, 汪铭书等.鸭呼肠孤病毒强毒株致鸭胚原代成纤维细胞凋亡的研究[J].病毒学报, 2008, 24 (3) :213-218.

电脑病毒的特性及预防 第8篇

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病料

收集广东省内3个不同区域6个鸡群, 疑似患IB鸡群气管、支气管、肺、肾等组织样品, 样品1、2、3为区域一不同鸡群样品, 样品4、5为区域二不同鸡群样品, 样品6为区域三不同鸡群样品。

1.1.2 材料

9日龄健康鸡胚, 1日龄健康仔鸡均购自某集团公司。

1.1.3 菌株、质粒和试剂

菌株E.coli TG1、连接载体pMD18-T Vector、两步法RT-PCR扩增试剂盒购自Takara公司;其它所用试剂均为国产分析纯试剂。

1.1.4 引物设计与合成

根据Genbank中注册IBDV A片段基因序列, 设计合成多对引物, 经过反复筛选出一对特异性引物IBV1/IBV2 (IBV1:5’-CAGGCCGTCAAGGTCTTGTTC-3’;IBV2:5’-ACCGGCACAGCTATCCTCCTT-3’) , 跨度1600bp。引物由上海英骏公司合成, 引物使用终浓度为20nmoles/mL, -20℃保存。

1.2 方法

1.2.1 病原分离与鉴定

1.2.1. 1 细菌分离

无菌操作挑取病鸡肝脏接种于普通营养琼脂及鲜血琼脂, 37℃培养48小时。

1.2.1. 2 病毒鉴定

应用鸡胚尿囊腔接种方法进行病毒分离, 利用血凝试验 (HA) 、鸡胚发育受阻试验、新城疫病毒增殖干扰试验对病原进行实验室鉴定。

1.2.1. 3 动物回归实验

取研磨处理后病料, 以滴鼻、点眼、滴口方式接种50日龄SPF鸡 (0.5ml/只) , 每天观察鸡只变化情况。

1.2.2 IBV S1基因分析

1.2.2. 1 IBV RNA提取和S1基因扩增

按照RNA提取试剂盒说明书提取IBV RNA。在24.4μL反应体系中, 加入RNA free水16.6μL, 5PCR buffer 5μL, 酶0.2μL, cDNA 2μL, 引物各0.3μL。扩增参数为:94℃3min, 94℃30s, 52℃30s, 72℃30s, 循环30次;72℃延伸10min。扩增产物通过1%琼脂糖凝胶电泳进行检测。

1.2.2. 2 目的基因克隆

将扩增PCR产物通过1%琼脂糖凝胶电泳, 回收目的条带进行抽提、纯化。将纯化后PCR产物与pMD18-T按要求 (16℃, 4h) 进行连接, 按常规方法转化至JM109感受态菌中, 涂布于含有AMP、X-gal和IPTG LB琼脂平板上, 37℃培养18～24h, 进行蓝/白斑筛选。挑取生长良好白色菌落接种于LB培养基中 (含AMP50mg/L) , 扩增培养。按碱裂解法提取质粒, 以备进行酶切鉴定和PCR鉴定。

1.2.2. 3 重组质粒鉴定

将筛选的阳性重组质粒为模板, 应用相同引物进行PCR扩增, 扩增产物通过琼脂糖凝胶进行电泳检测。

1.2.2. 4 S1基因核苷酸序列测定和比较分析

经PCR鉴定均为阳性重组质粒由上海英骏生物技术有限公司进行序列测定。对测定序列和发表于GenBank的IBV S1基因序列进行比较分析, 确定分离株在IBV毒株中的进化位置。各参考毒株名称和在GenBank中的登录号为:41 (X04772) 、CU-T2 (U04739) 、Gray (L14069) 、Holte (L18988) 、Conn (L18990) 、Beaudetle (X02342) 、D1466 (M21971) 、Florida18288 (AF027512) 、A1171 (AF250005) 、4/91 (AF093794) 、ZJ971 (AF352311) 、H120 (M21970) 、H52 (AF352311) 、VicS (U29519) 、Ma5 (AY561713) 、D41 (AF036937) 、LX4 (AY189157) 、QXIBV (AF193423) 、CK/CH/LGD/04II (DQ167134) 、CK/CH/LGX/06I (EF213580) 、CK/CH/LSC/99I (DQ167147) 和CK/CH/LDL/05I (EF213563) , 进行同源性比较分析。

2 结果

2.1 病毒分离鉴定

病料研磨后, 取上清液经绒毛尿囊腔接种鸡胚。收集经3代盲传均无血凝性的鸡胚液进行鸡胚发育受阻试验、对新城疫病毒增殖干扰试验和动物回归试验。

鸡胚发育受阻试验结果显示, 实验组呈明显的蜷曲胚或侏儒胚, 胚体比正常小, 胚体卷缩呈球形, 趾爪变形并紧抱头部, 羊膜增厚紧贴鸡胚, 卵黄囊皱缩, 鸡胚尿囊液中有白色的尿酸盐结晶, 肾小管、输尿管有白色尿酸盐沉着, 而对照组鸡胚则发育正常。

对新城疫病毒增殖干扰试验表明, 分离株均能干扰新城疫病毒增殖, 实验组与对照组血凝价相差3个点以上。

动物回归试验表明, 接种样品1、2、3、4、6分离株试验鸡群4天内出现IB典型临床症状, 主要表现为:精神沉郁, 张口呼吸、咳嗽、打喷嚏、气管啰音, 夜间倾听有明显尖叫声;接种样品5分离株4天后, 出现较轻呼吸道症状, 一周后病鸡精神沉郁, 羽毛松乱, 畏冷、扎堆、拉白色水状粪便。剖检可见发病鸡只病理变化主要集中在呼吸系统和泌尿系统, 其他组织和器官肉眼尚未见有明显病理变化。

2.2 IBV分离株S1基因特征

2.2.1 IBV分离株S1基因RT-PCR扩增结果

取盲传的第3代分离物的尿囊液, 抽提RNA后进行RT-PCR鉴定, 结果5份鸡胚尿囊液样品均扩增出约1500bp的IBV特异性目的片段, 见图1。

2.2.2 IBV分离株S1基因分析结果

2.2.2. 1 S1基因序列分析

运用DNAStar软件对6株分离株与17株GenBank登录株进行S1基因核苷酸及氨基酸相似性分析, 结果表明, 各分离株与标准株间核苷酸同源性均低于80%, 氨基酸同源性均低于60%, 见附表。

2.2.2. 2 系统进化分析

从S1基因氨基酸系统进化树可发现, 26株IB毒株分为3个基因型。第一个基因型为LX4-type, 5个分离株属于此基因型;第二个基因型为CK/CH/LSC/99I-type, 样品2分离株在此基因型进化树分枝上;第三个基因型为Mass-type, 包括H52、H120和4-91等常用疫苗株。6个分离株与常用疫苗株亲缘关系较远, 见图2。

3分析与讨论

应用传统鸡胚接种法分离病毒, 盲传3代后出现明显的侏儒胚, 不凝集鸡红血球, 在鸡胚内对NDV有干扰作用;应用RT-PCR对鸡胚第3代分离物尿囊液进行检测, 均扩增到目的片段;动物回归试验均能复制出与发病鸡群相同临床症状。结果表明分离到6个IBV地方流行毒株, 为IBV分子流行病学及病毒分子遗传变异的研究奠定了基础。

本研究对IBV分离株S1基因测定与序列分析发现, S1基因与参考株间核苷酸及氨基酸相似性差异较大, 由此推测, 广东地区存在多种基因型IB流行毒株:一是自然界长期流行的野毒株。二是由传统疫苗株变异造成毒力变化而引起新流行的毒株。从S1基因核苷酸及氨基酸系统进化树可发现, 6株分离株在进化树不同的分枝上, 与常用疫苗株H52、H120及M4-91亲缘关系较远。结果与刘兴友等根据分离株S1基因相似性分析绘制系统进化树结果一致, 表明进行IBV基因遗传变异性分析选择S1基因分析具有一定的代表性。

计算机病毒的特点及预防措施分析 第9篇

1 计算机病毒的概念

计算机病毒是一种特殊功能的程序, 可以导致计算机的数据程序受到破坏, 引发计算机故障的发生, 而且计算机病毒种类繁多。计算机病毒最早开始于1982年, 通过病毒程序来破坏计算机的功能, 使计算机内的数据受到损坏, 而且这种病毒程序代码还可以实现自我复杂, 严重破坏了计算机的使用功能, 威胁着计算机的信息安全。计算机病毒在刚开始出现时, 由于人们对其缺乏足够的认识, 而且也没有相应的防范意识, 而当人们刚开始认识到病毒的危害性时, 计算机病毒已开始进行大规模的爆发。最初的计算机病毒还仅仅局限在单机中进行传播, 但随着网络的盛行, 计算机病毒借助着互联网开始进行了迅速的传播和繁殖, 其危害已远远超出了人们对其的认识程度, 其已成为一种有效的网络攻击手段, 由于病毒所带来的巨大危害性, 人们开始对其越来越重视。

2 计算机病毒的特点

2.1 传染性

因为计算机在运行的过程中, 会通过网络传输各种数据信息, 如果一台计算机感染了病毒, 那么就会通过网络或者其他媒介传染到其他的计算机上, 这是计算机病毒的主要特征之一。如果在条件允许的情况下, 病毒传播的速度会非常快, 涉及范围广, 对其他计算机的安全造成巨大的威胁。

2.2 隐蔽性

计算机病毒是以程序代码存在的于其他程序当中, 或是较为隐蔽的地方, 有时也会以隐含文件的形式存在, 这样就很难将其与正常程序区分开来, 而作为独立程序体的病毒源程序, 其在扩散过程中会有再生病毒出现, 而这些再生病毒则会采用附加或是插入的方式在可执行程序和数据文件中存在, 一旦这些程序被调用时, 病毒程序也会合法的进入, 从而再将分散的程序部分再在非法占用的空间内进行重新分配, 形成一个完整的病毒体投入运行。

2.3 潜伏性

很大一部分病毒并不是计算机感染后就立即进行破坏, 很多时候其会隐藏在系统当中, 其扩散和繁殖通常都不会被人所察觉到, 而这些病毒只有在满足特定条件后, 才会将破坏模块进行启动, 从而导致计算机无法正常运行。

2.4 破坏性

病毒只在在系统中存在, 就会对系统和程序带来不同程度的影响, 破坏性是病毒的又一大特点, 但从破坏性的角度来看, 病毒还可分为良性和恶性两种, 对于良性病毒其破坏性行为并不明显, 或者说基本没有什么破坏性, 但其会占有系统资源。但恶性病毒则具有明确的破坏性, 不仅会对计算机数据、文件等进行破坏, 还可能将磁盘进行格式化, 从而给计算机使用者带来极大的损失。

2.5 不可预见性

病毒在传播的过程中会因为人为修改或者程序差异而发生变化, 从而衍生出不同的病毒类型, 并且制作病毒的技术也在不断的提高。预防病毒的技术往往要慢于制作病毒的时间, 而这些都是不可预见的, 而病毒的传播制造了机会。

2.6 触发性

病毒因某个事件或数值的出现, 诱使病毒实施感染或进行进攻的特性称为可触发性。病毒既要隐蔽又要维持攻击力, 就必须有可触发性。

病毒的触发机制用于控制感染和破坏动作的频率。计算机病毒一般都有一个触发条件, 它可以按照设计者的要求在某个点上激活并对系统发起攻击。如时间、计数器、特定字符及组合触发条件等。

2.7 针对性

有些病毒的制作具有的一定的针对性, 往往是针对一种程序而设置的, 所以只有在适应的环境下才会感染, 其他系统并不会受到感染。

2.8 寄生性

计算机病毒程序嵌入到宿主程序中, 依赖于宿主程序的执行而生存, 这就是计算机病毒的寄生性。病毒程序在浸入到宿主程序后, 一般会对宿主程序进行一定的修改, 宿主程序一旦执行, 病毒程序就被激活, 从而进行自我复制。

3 计算机病毒防治

3.1 计算机病毒的预防

预防病毒技术主要有两种类型, 一种是在病毒出现以后研发的应对技术, 这种预防措施往往是对于具有普遍性的病毒, 这种病毒比较常见, 不具有任何的针对性, 研发出的预防技术适应性较强。另一种是针对未制作的病毒而研发的, 对于制作病毒的方向进行设想, 然后有针对性的研发预防技术, 这种技术具有较高的难度, 往往应用于某种程序或者保护某些重要的计算机。下面主要对于第一种预防技术进行阐述

3.1.1 不使用盗版软件, 有些盗版软件中含有病毒。

3.1.2 第一次运行新软件前应使用病毒查杀软件检查它是否有毒, 对不能确定来源的文件一定要进行扫描查毒。

3.1.3备份硬盘引导区和主引导扇区数据, 系统盘一般只安装系统, 各种软件和文档不要安装在系统盘, 对重要的数据还要经常进行备份也就是说要定期备份硬盘的重要参数, 如主引导记录、文件分配表等以减少因病毒而造成的损失。

3.1.4使用杀毒软件, 定期扫描检查整个系统。

3.1.5上网的计算机应安装病毒防火墙、邮件监控系统和上网助手等软件, 不打开来历不明的邮件及其附件, 预防网上病毒。

3.1.6及时升级软件。每一个软件都有许多的缺陷, 都在不断的完善, 新版本要比旧版本的缺陷少得多, 性能更稳定, 可靠性更高, 所以我们要使用新版本对旧版本不断进行升级。操作系统也会不断发布补丁, 及时打上补丁, 堵塞安全漏洞。

3.1.7对新插入计算机的优盘、移动硬盘、光盘等其他可插拔介质, 要先进行病毒扫描, 确保无感染病毒后再打开其中的文档或程序。

3.1.8从互联网上下载各种软件、文档后, 不要先行打开, 应该先进行病毒扫描, 确保安全后再打开。九是文件共享后及时取消共享, 防止受到其他电脑上病毒的攻击。

3.2 查杀计算机病毒

计算机都需要安装查杀病毒软件, 经常上网的计算机还需要安装网络防火墙等, 当发现计算机可能感染病毒时, 需要及时运行查杀病毒程序查杀病毒, 若有文件受到感染, 还需要隔离受感染文件。常用查杀病毒软件有金山毒霸、瑞星杀毒软件等。

4 结束语

随着信息技术的快速发展, 无论是在人们的生活中还是在工作中, 计算机技术已经成为了重要的组成部分, 有很多的工作是必须依靠计算机才能够完成的, 所以计算机的安全稳定运行具有非常重要的意义。在信息技术发展的同时, 各种病毒也日益猖獗, 对计算机的安全造成了极大的威胁, 影响到计算机的正常运行。为了保证计算机能够安全运行, 在应用计算机的过程中, 要做好各项防范措施, 避免病毒的入侵。在信息技术不断的研发中, 病毒防御技术将会越来越完善, 为计算机技术的安全运行创造有利的环境。

参考文献

[1]冯栋.基于ASP技术开发的网站安全防范[J].电脑知识与技术, 2010 (6) .

[2]赵政宇.浅析计算机维护中的常见故障及其处理方式[J].计算机光盘软件与应用, 2012 (5) .