百合胚的组织培养技术

百合胚的组织培养技术（精选3篇）

百合胚的组织培养技术 第1篇

1 材料与方法

1.1 材料种类

采用百合鳞片做外植体。

1.2 方法

1.2.1 无菌材料获得灭菌方法

于晴天早上取得鳞片材料, 先用1%的洗衣粉溶液浸泡5min, 再用自来水冲洗干净, 在超净工作台上用70%酒精浸泡消毒10s, 然后用0.1%升汞溶液消毒10min-15min (视材料健壮幼嫩度而定) , 无菌水冲洗6-8次, 用滤纸吸干, 将鳞片接种到诱导培养基M S+6-B A 2.0 m g/L+NAA0.2mg/L中, 每瓶一片, 进行培养。

1.2.2 不同基本培养基对百合增殖的影响试验

植物组织培养的基本培养基能给植物提供基本营养成分, 对植物生长发育影响较大, 试验以几种配方全面的常用基本培养基为试验对象, 即以MS、B5、N6、H、WS这5种培养基为基本培养基, 添加6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L, 进行试验筛选。每个处理重复50瓶, 每瓶1苗。30d后观察生长情况。

1.2.3 不同激素组合对芽分化的影响比较试验

植物激素以生长素和细胞分裂素对植物分化作用明显。在确定基本培养基后, 进行生长素和细胞分裂素的种类和浓度配比试验。试验分15组处理, 每组处理重复30瓶, 每瓶3苗。60d为一代。培养结束时记录各标记培养基中生长的芽数。

1.2.4 不同激素组合对百合的壮苗生根影响比较试验

针对植物生长素和细胞分裂素对植物生长健壮和生根上是否有作用进行对比试验。试验使用苗高3cm-5cm的外植体进行生根培养。试验分5组处理, 1组对照。每组处理重复30瓶, 每瓶3苗。30d后观察记录各配比小苗的生根率、根长及小苗生长情况。

1.3 培养条件

培养温度:20℃-25℃;光照强度1500lx-2000lx, 每日光照时数12h/d, 采用固态静止方式培养。

1.4 其它

以上所选用的培养基配方中, 蔗糖浓度为:3%;琼脂浓度为0.7%-0.8%;Ph为5.4-5.8;生根培养基配方中, 加入活性炭浓度为0.1%。

2 结果与分析

2.1 无菌体系的形成

经过25d的培养, 未污染的百合外植体鳞片变粗大, 形成愈伤组织, 4 5 d后, 愈伤组织上开始少量分化出新的小苗, 60d后的外植体为无菌材料, 无菌体系已建成为以后试验的材料来源。

2.2 不同培养基对百合增殖的影响

从表1可以得出, 在百合增殖率上M S>B 5>N 6>H>W S, 这和培养基中无机盐种类、数量和浓度有关。MS培养基中含有高无机盐成分, 种类丰富, 浓度高。B5和N6也是高无机盐成分, 但是其中硝酸盐含量较高, 增殖情况没有MS培养基好。而H培养基属于中等无机盐含量的培养基, 因而增殖率明显下降。WS培养基中无机盐含量低, 只产生愈伤, 而无芽的分化。所以采用MS培养基较适宜百合增殖。

2.3 不同激素组合对百合分化培养的影响

从表2可以得出, 不同激素组合对百合的增殖均可产生一定效果。当BA浓度由0.5mg/L升到1.0mg/L时, 芽分化数量明显增加, 当BA浓度到2.0mg/L时, 芽分化数量又开始下降。增殖效果上, 生长素N A A>I B A>I A A, 而N A A浓度为0.2mg/L效果优于0.5mg/L, NAA浓度为0.05mg/L效果较差。因而得出, 当培养基配比为MS+BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L时, 对百合增殖效果最好。

2.4 不同激素组合对百合的壮苗生根影响

由表3可以看出, 不同生长素对百合的壮苗和生根有一定效果, 其中IAA促进苗发生作用弱, IBA促进强, NAA居中。IBA还明显促进小苗粗壮作用。因而, 百合的壮苗和生根配方配比以1/2MS+IBA0.3mg/L为宜。

3 移栽

当百合瓶苗有3-5条根系, 且根长达2cm-3cm及以上时, 即可打开培养瓶的瓶盖。在常温条件下, 放入培养室中进行练苗3d。然后洗净百合根部培养基, 并将其移栽于基质中。基质可以选择园土:珍珠岩=1:1。保持20-25℃温度, 空气湿度为70%以上, 自然光照为50%。在30d后, 成活率达90%以上, 培养60d后就可到大田种植。

4 种植

定植前, 对土壤进行消毒, 深耕, 施基肥, 做高畦。高温季节应遮光, 通风降温, 防止生长过高。其他只要进行相关的常规管理即可。

5 结论

在百合组织培养快速繁殖中, 当培养基配方为MS+BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L时, 分化成苗数量最多, 对百合增殖效果最好, 而当培养基配方为1/2MS+IBA0.3mg/L时, 生根率高, 是适宜百合生根的最佳培养基。

参考文献

[1]程广有.名优花卉组织培养技术[M].北京:科学技术文献出版社. 2001

[2]谭文澄, 戴策刚.观赏植物组织培养技术[M].北京:中国林业出版社.2000

精粹百合的组织培养与快速繁殖技术 第2篇

以鳞片为外植体,以MS为基本培养基,研究了精粹百合的组培快繁技术.结果表明:精粹百合的最佳诱导培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.05 mg/L;最适增殖培养基为MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L;以1/2MS为基本培养基,NAa浓度0.3～0.5 mg/L时,生根率可达97%以上.室内移栽充分炼苗后再定植到大田,利于提高成活率.

作 者：景艳莉 周蕴薇 张金玉 郑岩 Jing Yanli Zhou Yunwei Zhang Jinyu Zheng Yan 作者单位：东北林业大学,哈尔滨,150040刊 名：东北林业大学学报 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF NORTHEAST FORESTRY UNIVERSITY年，卷(期)：34(6)分类号：S7关键词：精粹百合 组织培养 快速繁殖

香水百合花瓣组织培养 第3篇

1 材料与方法

1.1 试验材料

外植体:香水百合花瓣;6-BA、NAA、75%酒精、0.1%升汞、无菌水、蔗糖、琼脂等。

1.2 试验设计

为选择最佳的培养基体系,根据组培不同阶段设计了多种培养基配方,具体如表1、2所示。

1.3 培养方法与条件

将香水百合花苞流水冲洗30 min,在超净工作台用75%酒精和0.1%升汞分别消毒(75%酒精消毒3 min,0.1%升汞消毒10 min),无菌水漂洗4~5次。分瓣,切割成0.5 cm0.5 cm的小块进行试验。以MS、1/2 MS为基本培养基,添加不同浓度的激素、30 g/L蔗糖、12 g/L琼脂、p H值5.8左右、温度(25±2)℃,光照强度1 500 lx,光照时间每天12 h[5,6]。

2 结果与分析

2.1 不同激素对小鳞茎的影响

将外植体接种在6组加入不同浓度的6-BA与NAA组合诱导培养基上,15 d左右外植体切口处膨大,部分出现黄绿色小突起,28 d后外植体上长出小鳞茎或细小的绿叶片。由表3可以看出,处理A2诱导出小鳞茎的外植体数量最多,外植体数量为13个,诱导效果最好,诱导率为86.67%;在6-BA浓度不变时,NAA浓度偏低或偏高都对诱导小鳞茎不利,当6-BA、NAA浓度过低或过高时也不利于诱导小鳞茎。由此可见,最佳小鳞茎诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA。

2.2 生根培养

将诱导出的小鳞茎从基部切下,接种至4组生根培养基中,采用1/2 MS为基本培养基,其中添加不同浓度的NAA诱导生根。10 d后,处理B2可以观察到有白色的根长出,4周后观察,根长最长为10 cm。由表4可以看出,处理B2诱导生根效果最好,其他3组生根培养基有少数外植体诱导出根,诱导率低。由此可见,最佳生根培养基为1/2 MS+0.05mg/L NAA。

2.3 移栽

将生根良好且健壮、长2 cm左右、叶片2片、高度2 cm左右的小苗移出培养室,打开培养瓶盖炼苗,1周后将试管苗根部培养基洗净,移栽入高温灭菌处理的蛭石中,3周后将成活苗移至苗圃进行常规栽培。

3 结论与讨论

综合试验研究结果可以看出,以香水百合花瓣作为外植体,在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA培养基中,诱导出小鳞茎的外植体数最多,诱导速度较快,诱导率为86.67%。在1/2 MS+0.05 mg/L NAA生根培养基中诱导生根快,生根数量多,诱导效果好。与目前香水百合鳞茎组织培养相比较,培养周期较长,尤其在前期采用不同浓度的6-BA与NAA对以未开放香水百合花瓣为外植体诱导小鳞茎的启动时间长。选用根部健壮、苗长2 cm左右的试管苗,可以提高其移栽成活率。

参考文献

[1]潘佑找,陈香丽,胡琼,等.香水百合的组织培养技术研究[J].安徽农学通报,2009,15(17):46-95.

[2]李冰华,金晓玲,刘雪梅.香水百合鳞片组织培养再生体系的建立[J].江苏农业科学,2008(4):83-85.

[3]高敏.香水百合的组培快繁[J].广西农业科学,2002(3):120-121.

[4]阮少宁,杨华,梁一池,等.香水百合组织培养的试验研究[J].福建林学院学报,2001,21(2):142-145.

[5]莫昭展,符韵林,戚萌.野百合鳞茎的诱导和增殖的初步研究[J].安徽农业科学,2007,35(31):9990-9992.