空间学习记忆能力

空间学习记忆能力（精选11篇）

空间学习记忆能力 第1篇

关键词：异氟醚,Y-迷宫,老年大鼠,RhoGTPases,RhoA

近年来, 许多研究从大脑海马区神经突触形态学的变化来探究神经结构对学习记忆功能的影响。异氟醚对神经轴突与树突结构有很大的可塑性, 而这种可塑性的变化可能是学习与记忆能力的细胞基础[1]。Rho蛋白家族是与受体偶联的小G蛋白家族, 分子量为20~30 k D, 属于Ras超家族成员, 在细胞内信号传导中具有重要的功能[2]。其主要成员Rho A蛋白调节细胞肌动蛋白骨架的聚合, 对神经纤维延长与塌陷、神经生长方向具有导向作用, 通过对肌动蛋白的调控而起调控树突状伪足和树突棘形态的动态变化, 影响神经可塑性, 而这一现象在学习基本形式的长时程增强 (LTP) 中有充分的体现[3]。本研究以老龄SD大鼠作为研究对象, 通过建立吸入麻醉模型, 使用动物行为学实验观察异氟醚麻醉后老年大鼠兴奋性、探索性指标以及空间辨别能力的变化, 通过免疫组织化学方法观察大鼠海马区Rho A蛋白的表达变化, 为探讨22月龄大鼠短时间异氟醚麻醉后兴奋性、空间辨别能力改变的的机制提供理论依据, 从而更好地阐明吸入异氟醚后对认知功能障碍的发病机制。

1 材料与方法

1.1 动物分组

22月龄老龄SD大鼠, 订购于湖南农业大学动物科技学院实验动物养殖场 (生产许可证SCXK湘2006-0001) 体重550~620 g。饲养条件为 (22±1) ℃, 相对湿度40%~50%, 自然昼夜非直接光照。经穿梭箱回避实验筛选出30只学习记忆能力正常的大鼠, 随机分为对照组C组 (n=10) 、麻醉后24 hⅠ组 (n=10) 和麻醉后72 hⅡ组 (n=10) 。

1.2 模型建立

采用Deatex-Ohmeda气体监测仪监测自制麻醉箱中异氟醚浓度。待麻醉箱内异氟醚浓度调节至3%时将麻醉组大鼠放于麻醉箱内5 min, 再将处于诱导状态的老年大鼠, 置于自制拱形气管插管台上, 采用经口明视气管插管方法, 将14G静脉套管经钢丝引导插入老鼠气管中[4]。Pet CO2探头确定气管插管操作成功后, 将气管导管与麻醉机相连, 大鼠自主吸入麻醉气体, 异氟醚浓度调为2%。应用鼠尾无创血压检测仪与分析系统 (北京中西远大科技有限公司) 于麻醉诱导前, 麻醉诱导过程中, 麻醉维持2 h与苏醒后分别检测大鼠鼠尾无创收缩压、舒张压、平均动脉压 (MAP) 、心率 (HR) 。麻醉结束后, 大鼠在吸入纯氧下自然苏醒。

1.3 行为学实验方法

1.3.1 Y-迷宫实验

根据文献[5], 将大鼠放入Y-迷宫箱中适应3~5 min, 然后随机开始实验:随机变换电击区和安全区, 观察动物学会逃离电击区而进入安全区的反应能力。大鼠进入安全区后, 灯光继续维持5 s, 以便大鼠确认安全位置。两次测试时间间隔为30 s, 每次训练20次, 休息5 min, 连续测试直到学会为止, 若测试次数﹥100次则不再测试, 并以100为最大计数值。每次测试后, 清理Y-迷宫箱, 以免动物气味对下次测试结果造成影响[6]。

1.3.2 旷场实验

参照文献[7-8]采用自制旷场实验观察箱100 cm×100 cm×50 cm (长×宽×高) , 箱底分为25个方格 (20 cm×20 cm) , 墙壁涂黑。将旷场分析箱从左上开始, 按左到右顺序以不同编号为相同的25个小格, 其中7、8、9、12、13、14、17、18和19为中央区域, 其余为外周格, 13号为中央格子。每次实验时捏住大鼠尾巴距根部2/3处轻放入中央格中, 观察大鼠5 min内活动情况, 每次测定结束将动物排泄物清除干净, 每只仅测定1次。实验时间结束录像分析结果。设两位观察者分别观察记录不同指标。以跨格次数为水平活动得分, 直立次数为垂直活动得分, 记录中央格停留时间。

1.4 标本制备

行为学测试后, 用麻醉致死法对大鼠腹腔注射麻醉药, 在大鼠心脏还在跳动时通过左心耳快速灌注4℃生理盐水100 m L洗净血液, 然后以4%多聚甲醛200~300 m L灌注固定。止血钳剥离大鼠颅骨, 取出完整大脑置于4℃4%多聚甲醛中浸泡6 h, 而后移入4℃的30%蔗糖溶液, 将大脑冰冻切片 (片厚为30μm) , 用p H 7.4的0.01%PBS切片, 接着进行免疫组织化学染色。

免疫组织化学染色:切片移入0.1Triton~0.001%H2O2溶液中, 在37℃下反应30 min, PBS缓冲液漂洗后, 以3%正常羊血清封闭30 min, 然后加兔抗Rho A抗体, 4℃温盒内孵育72 h。漂洗后加入即用型二抗 (上海长岛生物技术有限公司) , 37℃孵育30 min, PBS冲洗, 0.05%DAB~0.01%H2O2溶液显色, 脱水, 封片。应用彩色病理图片分析系统, 对所有切片在同一光度下, 每张切片随机选取3个200倍镜下视野计数阳性细胞, 以单个标本为单位, 取平均值。

1.5 Rho A分析

参照大鼠脑图谱, 每只大鼠选含背侧海马相应断面, 选择其中显色较好且非特异性背景染色控制良好的切片3张。在光镜下从每张切片的海马CA3区有代表性区域分别随机选择3个高倍视野 (10×40倍) , 统计各视野Rho A阳性细胞数。阳性标准:棕黄色颗粒, 特异性分布于胞质与胞核。染色深度达到足以区分细胞周界的神经元被计数, 计算平均值。同时分别在20倍与400倍镜下采集图像, 通过图像分析软件Image-Pro Plus 6.0对切片免疫组织化学阳性染色细胞进行定量分析。

1.6 统计学方法

采用SPSS 13.0软件进行统计处理, 计量资料以均数±标准差 (±s) 表示, 采用方差分析, 组间两两比较采用LSD-t检验, 以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般情况

三组22月龄大鼠体重无统计学意义 (P>0.05) 。麻醉组老龄SD大鼠中麻醉前后收缩压、舒张压、MAP、HR、鼠尾氧饱和度保持在正常范围, Pet CO2维持在36~42 mm Hg (1 mm Hg=0.133 k Pa) 且波形规则, 皮肤颜色红润, 未出现血压较大波动及缺氧现象。

2.2 三组大鼠行为学实验结果比较

旷场实验:三组大鼠跨格次数、直立次数、总活动量次数及中央格停留时间比较, 差异均无统计学意义 (均P>0.05) ;Y-迷宫实验:Ⅰ组Y-迷宫学习次数明显多于Ⅱ组和C组 (P<0.05) , 而Ⅱ组与C组比较差异无统计学意义 (P>0.05) 。见表1。

注:与Ⅰ组比较, *P<0.05

2.3 三组大鼠免疫组织化学反应结果

光镜下免疫组织化学结构显示:大鼠海马组织中可见Rho A主要分布于椎体细胞层和辐射层, 阳性细胞呈棕褐色, 染色均匀, 排列规则, 呈弧形分布。200倍镜下随机选取3个视野大鼠海马区Rho A阳性细胞计数, Ⅰ组Rho A阳性细胞计数多于Ⅱ组和C组 (P<0.05) , Ⅱ组与C组比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 表明在异氟醚吸入麻醉后24 h, 大鼠海马区Rho A表达增加, 吸入麻醉后72 h有所恢复。见表2。

注:与Ⅰ组比较, *P<0.05

3 讨论

术后认知功能障碍 (postoperative cognitive dysfunction, POCD) 是指麻醉术后老年患者性格改变、学习记忆能力下降等中枢神经系统功能障碍[9,10,11]。作为老年患者术后常见并发症给患者术后生活带来严重烦恼, 导致患者丧失社会活动、工作学习以及生活自理能力, 因此减少麻醉术后认知障碍发生具有非常重要的意义。调查显示, 尽管医疗技术水平有了很大提高, 但是对于POCD发病机制以及预防和治疗方法未得到显著改善。鉴于中枢神经系统和认知相关研究的复杂性, POCD发生、发展的机制一直没有得到圆满解答。突触是一个神经元的冲动传到另一个神经元或传到另一个细胞间相互接触的结构, 是神经元之间在功能上发生联系的部位, 也是信息传递的关键部位。神经轴突与树突结构有很大的可塑性, 而这种可塑性的变化可能是学习与记忆能力的细胞学基础[12]。

在动物实验中, 主要采用行为学实验研究药物对动物学习记忆能力的影响, 人和动物的内部心理过程很难直观观察到, 通过客观的动物实验模型来间接推测脑内所发生的过程, 从而反映动物认知能力的水平与变化[13]。目前, 国内外多采用建立条件反射方法检测动物的行为能力和高级脑功能。旷场实验是将一定面积划分为不同区域, 并以相应的格子对应。大鼠在新环境中是由紧张、兴奋、探索再到适应的一系列过程, 兴奋性的老鼠在适应的环境中表现为行动活跃, 四处走动, 留下自身的生物气息, 跨格次数的多少反映其兴奋程度。跨格次数的多少与动物的行动量成正比, 跨格次数多, 活动的距离也相应增加, 这些观察指标可以间接地反映动物中枢神经系统的兴奋或抑制状态。实验中, 三组大鼠中央格停留时间、跨格次数、直立次数、总活动量次数差异无统计学意义, 表明2%异氟醚麻醉后24、72 h对大鼠的紧张、兴奋、探索等兴奋性指标没有显著变化, 因此可以认为短时间吸入异氟醚对老年大鼠的空间学习能力影响不是由于其中枢兴奋状态的改变而产生的。Y-迷宫用于检测大鼠的空间辨别能力, 老年大鼠在迷宫中对电刺激和光刺激出现被动的逃避反应, 经过多次训练后大鼠就能学会并记住迷宫的安全位置, 间接地反映出老年大鼠的学习记忆能力[14]。Y-迷宫达到学会标准的次数能够较客观地表现大鼠的学习能力。

如何才能提高学习记忆能力 第2篇

要相信科学，相信自己能记住。奇迹常常产生于自信，产生于坚持。实际上，同学们对自己的记忆能力充满自信是有根据的。据说，拿破仑能记住每一位士兵的面孔与姓名。惊人记忆力当然并不是拿破仑所独有的。据专家们研究，一个人的脑子能够记住的信息量大体相当于目前世界上全世界各图书馆的藏书量(七亿七千万册)，一般人只发挥了约4%的能力，如果能利用人所拥有能力的10%，你就将成为超人。

第二，要对所学知识进行选择与归类，在此基础上再分层次识记。

首先是要敢于并善于对知识进行取舍，尽量把握重点。对非重点的知识要敢于忽略。这是因为“天才的实质就是知道该忽略些什么”。在高三一年的学习中你必须决定什么知识需要掌握，什么可以忽略，因而要要学会按考纲要求进行判断与选择。其次是分层次，可将经过选择而确定的知识划分适当层次，确定相应的学习程序和识记要求。

第三，要合理用脑。

所谓合理，一是要交替复习不同性质的课程，如文理交替，历史与地理交替，这可使大脑皮层的不同部位轮流兴奋与抑制，有利于记忆能力的增强与开发;二是在最佳时间识记，一般应安排在早晨、晚上临睡前或是饭后半小时后，其中关键是早晨，“记忆之道就在于早晨十分钟”，早晨的十分钟，可相当于深夜的一小时。

第四，对所背知识要力求理解。

没有理解的知识是很难记住的，没有理解的知识更是无法应用的。目前的历史高考，要求再认再现的历史知识，已经不会照搬教材的文字表述，而是经过了语言或形式的转换，没有理解是很难再认再现的。即使是选择题，也常常要经过分析、归纳、比较与综合才能得出结论。

第五，要经常复习。

经常复习不是简单地反复背诵，而应按以下方式进行：

各种器官齐上阵。

对新知识可按“熟悉默读书写”的顺序进行识记。这种方式能让手、口、耳、眼等器官共同参预复习，从不同的途径刺激大脑，取得较好的识记效果。

重新组织材料，使之产生新的意义。

制图、制表、分类、比较均是重新组织材料的好方法。自己组织好的材料，才更有意义，更易于识记。这种方法更适合用于某一单元或专题的复习与识记。

及时地循环复习。

记忆的实质是与遗忘作斗争，因而对需要识记的东西要有计划地循环复习。一般而言，新学习的内容应在当天结合笔记的整理进行识记，一周以内应结合单元(或专题)的整理对本周学习的知识要点进行一次浏览，一个月以内可结合卡片的制作进行背诵。如果再结合重要考试(如期中、期末考试、模拟考)进行全面复习，就不太会出现知识的遗忘了。当然，在每次背诵时，要切忌“照本宣科”，而是要将试图回忆与阅读交替进行。

空间学习记忆能力 第3篇

一、从导入新课入手

“好的开始是成功的一半”，一堂成功的课，导入一环非常重要。初中生的心理尚未成熟，他们对各种事物充满好奇心，有极强的求知欲。作为历史教师，要高度重视并充分利用学生的这种积极的心理因素，根据不同的教学内容，设计出能够激发学生好奇心和产生兴趣的导语导入新课，来尽快缩短学生同教材的距离，从而使导语成为一堂课成功的铺垫。例如，我在讲“西安事变”一节时，考虑到学生喜欢看电影、电视这一特点，在课堂上播发《西安事变》中“华清池捉蒋”的片段，学生学习兴趣高涨，起到了很好的教学效果。

除此之外，设计妙趣横生、形式多样的导入语，也能缩短学生与教材之间的距离，使学生产生渴求知识的积极心理因素。我们还可以以历史事件导入，故事、谜语、诗歌、音乐、电影、典故导入。

二、学以致用，从基础知识的实用入手

初中历史测试题，越来越注重学生对历史知识的综合运用，特别是一些基础知识。因此，从某种意义上讲学习还是为了考试，这是我们不能回避的问题。在初中历史教学中，遇到一些重点课，在教学时我就对学生特别强调这一章节的重要性，在历届中考中常出现一些题，在上课时应重点抓几方面问题等等。例如：1. 有哪些内容？这使学生一开始就了解到学习这章应该掌握哪些知识。2. 同哪些章节有联系？学生就会去回忆以前学过的知识，或者是自己在课外学到的知识，使学生认为所学的知识重要，注意力就集中，讲述课文时，学生的兴趣就提高了，记忆力水平也能相继提高。

三、生动形象的语言，辅以直观的教具

历史学科特点决定了人们很难直接从现实生活中获得活生生的感性材料。教学中我们历史教师只有通过生动形象、趣味性强的语言，配上直观的教具（如挂图、录音、电影片段等），去再现一幅幅波澜壮阔、英勇悲壮的历史画面，去复活一个个栩栩如生的历史人物，才能使学生形成正确的历史表象，才能引起学生心灵上共鸣，激起学生的激情和学习兴趣，增强记忆，收到事半功倍的效果。

四、“授人以渔”

“授人以鱼不如授人以渔”。历史教学中除了培养学生学习兴趣，在学生好学、乐学的基础上，还应教给学生科学的记忆方法，使学生会记、记熟，才能真正提高学习效率。在教学实践中，我总结出以下几种记忆方法：

（一）线索记忆法

线索记忆法，就是把同一类型的历史事件或同一人物在不同时期的活动，按历史发展的线索，呈现于学生面前，便于学生理解和巩固。例如：初中《中国历史》教材中有关李大钊的主要革命活动的内容，教学时，我就按时间的先后把它整理为：（1）领导新文化运动；（2）领导“五四”运动；（3）创办《每周评论》，宣传马克思主义；（4）参与创建中国共产党；（5）参与组建国共两党和各革命阶级的统一战线；（6）1927年在北京英勇就义。

（二）温故知新记忆法

大教育家孔子说过：“温故而知新”。复习是巩固知识的重要手段之一。在历史教学中我们应该做到：

第一，在课堂中指导学生抓重点，攻难点，反复强调历史诸因素。创造各种条件，让时间、地点、人物、事件的内容、性质、意义、因果等要素牢牢地印在学生脑海中。

第二，及时做好课后练习。要求学生能用自己的语言简要叙述课堂所学的内容，完整地回答课文后面的问题及教师根据教材内容所提出的问题。

第三，抓好周清、月清。即对学生进行课时和单元复习，对部分教材、内容进行重点练习，使学生进一步加深对教材的理解，巩固所学知识。

第四、做好总结性复习。就是某一历史主题教学结束后对学生进行综合复习和训练。目的是使学生了解历史发展的基本线索，把所学知识分类归纳、比较、分析并运用历史唯物主义的观点对重要的历史事件和历史人物进行分析评价，进一步增强学生的记忆、表达、观察、分析问题的能力。

（三）比较记忆法

俗话说，有比较才有鉴别。所谓比较，就是对性质相同或相似的历史事件进行对比，找出异同。例如：对《南京条约》《马关条约》《辛丑条约》的内容进行比较，使学生认识到中国社会是如何一步步地沦为半殖民地半封建社会的。还可把我们国家现在实行的改革开放政策，与清末的“门户开放”进行比较等等。

（四）简化记忆法

所谓简化记忆法，就是将已有的知识，加以改造、梳理和想象，赋予新的含义的一种记忆方法。例如：《天津条约》可记作“公开行贿”。“公”是指外国公使可以进驻北京，“开”是指增开南京、汉口等十处通商口岸；“行”是指外国商船和军舰可以在长江各口岸自由航行；“贿”是（与钱财有关）指英法两国得到巨额赔款。

再如：1901年，清政府被迫同英、法、美、俄、德、日、意、奥等国，签订了丧权辱国的《辛丑条约》。主要内容有：①清政府赔款白银4.5亿两，分39年还清，本息共计9.8亿两，可简化为“钱”；②要求清政府严禁人民反帝，可简化为“禁”；③允许外国驻兵于中国铁路沿线，可简化为“兵”；④划定北京东交民巷为“使馆界”，允许各国驻兵保护，可简化为“馆”。这四项内容可简化串联记作：“前进宾馆出新丑”。

空间学习记忆能力 第4篇

1 资料与方法

1.1 一般资料

本次研究选用我省医学动物实验中心提供的SPF级40只SD大鼠作为研究样本, 40只大鼠均在标准试验条件下喂养, 生长环境自然采光, 进食、饮水自由, 体重为250~300 g, 平均体重为 (273.5±8.6) g。随机抽取20只健康大鼠建立慢性脑缺血大鼠实验模型, 并将该组大鼠设为试验组, 将另外20只健康大鼠设为对照组, 两组大鼠日龄、体重比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 建立脑缺血大鼠试验模型

建立模型前禁食12 h, 禁水4 h, 给予大鼠腹腔注射5%水合氯醛进行麻醉, 用药剂量为0.35 ml/100 g。麻醉成功后, 将实验大鼠固定为仰卧位, 逐层分离颈前部皮肤、肌肉, 暴露并分离大鼠双侧颈动脉及迷走神经, 完成后使用4号丝线常规缝合, 肛温维持在36~37℃, 继续进行常规饲养, 术后2个月进行行为评价和免疫组化测定。

1.2.2 空间学习记忆能力评估方法

采用Morris水迷宫试验评估两组大鼠的空间学习记忆能力, 本次研究使用的水迷宫由一个圆形水池和一个隐藏在水面下2 cm的平台组成。圆形水池的直径为1.5 m, 高度为0.5 m, 将水温设置为24℃。水面下平台的直径为0.1 m, 高度为0.27 m。另配备摄像机和计算机。进行Morris水迷宫试验期间, 保持水迷宫内外的参照物位置不变, 两组大鼠均训练5 d, 每天分上、下午两段训练, 每段训练4次, 间隔1 h训练一次。采用定位航行试验评估大鼠的学习能力, 训练时, 将大鼠面向圆形水池池壁缓慢放入术中, 准确记录大鼠四肢登上水下平台的时间, 设定大鼠的游泳时间为2 min, 在水下平台停留的时间为5 s, 若大鼠在下水后2 min内仍未登上水下平台, 则记录逃避潜伏期为2 min。采用空间探索试验评估大鼠的记忆能力, 在两组大鼠学会寻找水下平台后, 将水下平台撤出, 然后再将大鼠放入水中, 记录大鼠2 min内穿越目标区域的次数。

1.2.3 前额叶皮质SNAP-25检测方法

两组大鼠空间学习记忆能力评估结束后, 将大鼠断头处死, 冰上迅速分离前额叶脑组织, 置于4%的多聚甲醛溶液中固定, 固定时间为48 h, 进行脱水、透明、石蜡包埋, 冠状切片5μm, 使用35℃水漂展开后, 贴在干预处理的载玻片上, 石蜡片在60℃的烤箱中烘烤20 min后进行脱蜡染色, 磷酸盐缓冲液 (phosphate buffered saline, PBS) 为阴性对照, 在4℃的环境中孵育过夜, 在室温暗环境下显色, 使用显微镜观察染色情况。使用生物图像分析系统分析前额叶皮质SNAP-25免疫反应产物的光密度值。

1.3 统计学方法

本院本次研究得到的呈正态分布的研究数据均采用统计学软件SPSS 13.0处理, 量性观察指标采用均数±标准差 (±s) 表示, 以t检验进行独立样本检验, 计数资料采用X2检验, 慢性脑缺血大鼠空间学习记忆能力与前额叶皮质SNAP-25蛋白表达的相关性进行Logistic回归分析, P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组大鼠Morris水迷宫试验结果比较

经数据统计发现, 试验组大鼠的逃逸潜伏期明显长于对照组大鼠 (P<0.05) , 撤出水下平台后穿越目标区域的次数明显少于对照组大鼠, 组间比较存在的差异均具有统计学意义 (P<0.05) , 具体研究数据见表1所示。

2.2 前额叶皮质SNAP-25蛋白表达水平比较

经检测发现试验组大鼠的前额叶皮质SNAP-25蛋白表达水平明显高于对照组大鼠 (P<0.05) , 详见表2所示。

2.3 慢性脑缺血大鼠认知功能损害程度与前额叶皮质SNAP-25蛋白表达水平的相关性

观察发现大鼠认知功能损害程度越高, 前额叶皮质SNAP-25蛋白表达水平越高, Logistic回归分析结果显示大鼠认知功能损害程度与前额叶皮质SNAP-25蛋白表达水平呈正相关性, 具体研究数据见表3。

3 讨论

临床观察发现慢性脑缺血患者起病具有隐匿性, 病情发展较为缓慢, 发病早期病理改变以认知功能轻度损害为主, 随着病情的不断发展, 可发生能量代谢障碍、蛋白质合成异常及神经元缺失等病理改变, 最终导致认知功能发生严重损害[5,6]。前额叶皮质是机体学习记忆的关键脑区, 研究发现机体发生慢性脑缺血后, 突触的可塑性会受到影响, 导致神经递质释放所必需的突触前血浆膜蛋白SNAP-25在前额叶皮质中的表达水平升高, 并直接参与神经递质释放和神经元细胞可塑性的调节[7,8]。因此本院推测慢性脑缺血患者机体空间学习记忆能力与前额叶皮质SNAP-25的蛋白表达存在一定程度的相关性。

为验证上述推测结果的客观性和准确性, 本院建立实验动物模型, 开展了实践研究。Morris水迷宫定位航行试验结果显示试验组大鼠的逃逸潜伏期明显长于对照组健康大鼠, 空间探索试验结果显示试验组大鼠的目标区域穿越次数明显少于对照组大鼠, 免疫组织化学染色结果显示试验组大鼠的前额叶皮质SNAP-25的蛋白水平明显高于对照组大鼠。采用Logistic回归分析对慢性脑缺血大鼠认知功能损害程度与前额叶皮质SNAP-25蛋白表达水平的相关性进行分析发现, 两者呈正相关性, 即大鼠认知功能损害越严重, 前额叶皮质SNAP-25的蛋白表达水平越高。

综上所述, 虽然本研究结果证实了本院上述推测的客观性, 但由于现阶段我国医疗领域关于该课题的临床研究较少, 本次研究所得结果的指导意义仍需临床通过大量实践研究进行证明。

参考文献

[1]姚朝辉, 张少锋, 李岚.蛋白磷酸酶2在慢性脑缺血大鼠学习记忆功能障碍中的作用和机制[J].中华行为医学与脑科学杂志, 2014, 23 (12) :1075-1078.

[2]张超, 李晓红, 涂悦, 等.一种适用于颅内外血管重建研究的大鼠慢性脑缺血模型[J].中华行为医学与脑科学杂志, 2014, 23 (11) :1041-1043.

[3]马宇行, 张文蔚, 蒋廷云, 等.促红细胞生成素改善慢性脑缺血大鼠空间学习记忆能力的机制探讨[J].中国民康医学, 2011, 23 (21) :2615-2618.

[4]李斐.丹参酮ⅡA对慢性脑缺血大鼠脑组织的保护机制[J].中医临床研究, 2011, 3 (20) :50-51.

[5]吕斌, 娄季宇.慢性脑缺血大鼠OXR表达的实验分析[J].中国实用神经疾病杂志, 2011, 14 (19) :22-25.

[6]赖克道, 李燕婧.剑麻皂素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制[J].广西医学, 2014, 36 (10) :1424-1427.

[7]周毅, 牛丽静.丁基苯酞预处理对大鼠脑组织缺血/再灌注后HSP70表达的影响[J].中国应用生理学杂志, 2015, 31 (2) :136-140.

如何培养高一地理学习中记忆能力 第5篇

如何培养高一地理学习中记忆能力

一、记忆在高中地理学习中的重要性

地理学科是在大量的地理事实和地理现象的基础上建立起来的一门学科。在区域地理的学习中，要记忆大量的地理事实，诸如地理事物的名称、物产等等，成为区域地理主要的组成部分，也是形成地理思维能力的关键。在系统地理的学习中，也仍然免不了对具体地理事物和地理现象的记忆，因为它们是理论的实证部分。因此面对大量的地理事物和现象，必不可少地要加强训练学生的地理记忆能力。

二、记忆高中地理的一般过程

根据Melton的研究显示，记忆有三个基本环节：编码—→贮存—→提取。记忆实际上是由“记”和“忆”两个不同的部分组成，前者是知识的编码和贮存过程，后者是知识的提取过程，它们的综合含义是知识在大脑中的保持程度。“遗忘”则是记忆的反义词。人的记忆有两个层次，一是对基础知识的记忆，二是对思维过程的记忆，后者等同于学生对知识的分析、运用过程。在地理教学中，教师应按照《高中地理课程标准》中对地理知识要求的不同层次，从“了解、说明、分析和运用”四个层次考虑对地理基础知识的处理。尤其对要求“分析和运用”的知识点，则必须采取一些科学的方法，力求让学生切实掌握。

三、对学生记忆高中地理能力训练的主要途径

1.形成地理知识结构

不同层次的结构组成了地理学科的整体。美国著名教育家布卢姆认为：(1)如果懂得了基本结构中的基本原理，有助于理解其它类似的事物;(2)把一件事物放进构造好的模式里，就不易忘记。地理科学是一个复杂的巨系统，而“结构”则是系统的基本特征。从某种角度看，学生的学习实际上主要是对地理知识结构的理解和掌握。教师应通过各种方式，让学生获得一定的地理知识结构，促进地理知识的系统化，以达到最终理解和掌握地理知识的目的。

2.重视地理图像

图像是地理信息的主要载体，也是学生学习地理知识的重要工具。教师应充分应用地理图像，努力在学生大脑中建立一定的地理知识表象，以加强学生的记忆效果。

3.利用地理技巧

大量的研究实践证明，按照生理学和心理学的规律归纳总结出来的科学记忆方法在地理学习中会产生巨大的作用。就像训练其它技能一样，记忆能力也可以经过训练而达到快速、准确、持久的目的。在地理教学中，许多教师也先后结合自己的教学实践，总结出了许多可贵的记忆方法，例如口诀、歌谣、谐音等记忆法，都是些很成功的记忆方法。在地理教学实践中，教师可有意识地对学生进行训练，提高地理课堂教学效果。

4.重视非智力因素

非智力因素主要包括自信心、愿望和兴趣等。对于生理健康的人，都有记忆能力，而且潜力巨大，但善于利用它的人很少。在地理教学中，教师应利用不同的地理教学手段，采取不同的教学方法，努力培养学生学习地理的兴趣，以提高地理课堂教学质量。只要学生愿意学，主动去学，那么记忆地理知识的潜能就能够得到充分挖掘。

5.及时复习和练习

著名心理学家艾宾浩斯遗忘曲线告诉我们：遗忘总是先快后慢。这就要求教师及时组织复习，利用课前提问、阶段测验等方式反复加强学生对地理知识的记忆。

知识只有在运用以后，才可能加深理解，而理解是记忆的前提。教师在地理教学中，适时、适当地设计些适应性练习，让学生在地理练习中运用已掌握的知识强化记忆，不断增强学生学习地理的能力。

高中地理高效的学习方法

一、纵向联系法

从知识的纵向联系看，它是指沿一定思路使知识向纵向延伸发展，从而掌握部分知识的联系。

按地理知识体系的先后顺序来联系。如地质作用——外力作用——风化、侵蚀、搬运、沉积、固结成岩作用。在许多局部知识范围中，也有纵向思路的体现，如从上到下，从老到新的岩层变化等。

按时间发展演化有从旧到新或从古到今的知识联系，如人口再生产的类型：原始型—传统型—过渡型—现代型。

按地理事物发展演变的不同阶段或层次有由浅入深或由初级到高级的联系。如工业的发展，从手工业——以蒸汽机的发明为标志的第一次技术革命——以电气化为标志的第二次技术革命——以微电子技术的发展及其普遍应用为主要标志的第三次技术革命等，这些地理事物的演变、发展的纵向联系中，在每一阶段或层次上又存在着多向或横向联系。

按地理事物的运动变化过程逐步推进的前后联系。如空气水平运动产生的根源：太阳对各纬度加热不均——引起近地面空气或升或降的垂直运动——导致同一水平面空气密度差异——同一水平面气压差异——水平气压梯度力——空气水平运动。

按地理事物存在的点、线、面、体的空间分布反映了由近及远、由始至终的纵向联系，如学习工业分布中的工业基地、工业地带，城市群等，容易混淆，可在图中抓住几个中心城市，沿铁路、或河流、或海岸线都可作纵向联系，使地理事物之间的联系沿一定思维线索发展，便于理解其空间分布与空间联系，也加强了记忆。

二、横向联系法

从知识的横向联系看，是指地理知识间的对比、相关、影响、制约等关系，反映了地理事物的广延性。

地理事物间相互影响、相互制约关系。如自然地理环境各要素之间就存在着这种横向联系，因为它们都是由日光、空气、水、矿物、生物、土壤、岩石等自然要素组成的，一个要素的变化引起其他要素相应变化，从而使它们紧密联系起来，成为自然环境不可分割的重要组成部分，组成自然地理环境的整体性。在人文地理知识中，类似的影响与制约的内容也很多，而以人类活动与气候的关系最为典型，气候影响人类活动，使农业、工业、城市规划、交通运输、水利建设等受制于气候;人类活动则通过改变局部地区的地面状况，来影响或改变局部地区的气候，象植树造林、修水库等就是通过人类活动来改善气候的重要途径;相反，毁林开荒、乱砍滥伐则会使气候恶化，进而影响环境，使人类越来越难以在环境中生存下去，更谈不上可持续发展了。所以，人类活动要遵循自然界的客观规律，从而造就更有利于人类社会不断发展、进步的环境。

地理事物在空间分布上的相互关系，可从多方面横向联系。如水能的丰歉程度是由落差和水量共同决定的，我国水能资源储量居世界首位，与我国地势、降水特点紧密相关，我国地势西高东低，降水南多北少、东多西少，导致水能在空间分布上西南最多，华北最少。通过空间分布上的横向联系，可帮助我们全面思考问题，广泛地联系各项地理事物，并按一定思维线索使知识形成网络。

各地理事物间的对比，无论相同、相似、相反、相异，都属横向联系。区域差异可以对比，地理要素间也可进行对比，运用比较法是学好地理的一项重要方法。如冷锋和暖锋的比较，气旋与反气旋的比较，太阳日与恒星日的对比，地球公转与自转的对比，天气与气候的对比，内、外力作用的对比，不同地域类型的农业生产特点、措施的对比，三次技术革命对工业生产影响的对比，良性循环与恶性循环的对比等等，高中地理的每一章节都蕴含着许多这样的横向联系。横向联系的对比一般要列表说明要点、概括特征、总结规律，并指出被比较事物的联系。

同一时间出现的不同自然现象或生产活动，在这些现象或活动之间，反映了同一时间地理事物的横向联系。这种联系可解决一些覆盖面广、知识空间、时间跨度较大的问题。如地球在公转时位置、太阳直射点位置、南北半球昼夜长短及季节状况、气团及气压带、风带势力的强弱、气候的变化等，可结合起来考虑，掌握地球运动的规律与气候形成变化的原因。总之，要广泛考虑在固定时间内的地理现象，才能适应这种横向联系的有关问题。

从知识的多向联系看，这里既包括地理知识与学科内各部分之间的联系，也包括与学科外各方面的联系，前者称内部联系，如自然地理与人文地理，地形、气候、水文、生物、土壤、资源、能源、农业、工业、城市、人口、环境等，都存在可以联系的线索;后者称外部联系，如地理与数学、物理、化学、生物等的联系，特别是与政治、历史、生活实际、生产实际的联系，与社会热点等问题联系，有助于知识的理解，能力的提高，也有助于在高考文综试卷中取得较好的成绩。

三、多向联系法

同一地理事物从多角度进行解释，是运用发散思维进行知识的多向联系的方式之一。如太阳直射23°26′N，可以从下面几点取得联系：(1)地球表面正午太阳高度的变化;(2)北半球夏至日;(3)北半球昼最长、夜最短，北极圈及其以北地区出现极昼;(4)地球公转速度慢;(5)亚欧大陆受低气压控制，北太平洋受高气压控制等。(6)气压带移动与北半球气候变化等。

地理事物中一因多果的推导，是进行多向联系的又一种方式。如因地理自转产生地方时的变化、昼夜更替等。在高中地理中一因多果的例子很多，经常主动思考有关问题，有助于使知识的多向联系更为广泛。

地理事物中多因一果的分析，也是进行多向联系的一种方式，它能帮助我们全面细微地考虑问题，加强对知识内在联系的理解。如降水的成因有：(1)暖湿气流前进时受地形阻挡上升冷凝而成地形雨(2)湿热气流强烈受热上升冷凝而成对流雨(3)冷暖气流相遇，暖空气沿锋面爬升冷凝而成锋面雨(4)暖湿空气沿台风中心旋转上升冷凝而成台风雨。

四、逆向思维

逆向思维即打破习惯定势，不按常规从正面去思考，而从反面来思考，这样既可加深对地理事物的理解，又可培养多向思维能力。如地球是太阳系中唯一有生命的天体的条件，课本讲了两点：(1)有介乎0——100℃的温度，这是液态水存在的温度条件;(2)有适合生物呼吸的大气。为什么会有水、大气呢?我们可逆向分析如下：

地球适当的体积、质量——吸住大气生命物质存在条件

日地距离适中——温度适宜——水

打破习惯定势思考问题的方法，有时也如数学上定理与逆定理，定理成立，逆定理不一定成立。如含化石的岩石一定是沉积岩，但沉积岩并不一定有化石。

假想性推测是加深对概念的理解和多角度思考问题的有效方法。如黄赤交角扩大或缩小引起的变化——阳光直射范围、极昼、极夜范围、五带的划分范围亦随之变化等。

空间学习记忆能力 第6篇

合作学习是当今一种创新的教学理念和策略，是我国新一轮课程改革所提倡的一种重要学习方式，如何科学地组建学习小组，培养学生的参与意识和合作技能，使小组合作学习在课堂教学中有意识地培养初中生单词记忆的能力。

一、构建合理的合作小组

1.正确划分小组

合理分组是提高英语单词记忆效率的前提。小组的划分一般遵循“组内异质，组间同质”的原则，根据学生的英语学习能力的具体情况，教师将全班分成若干个异质学习小组，以提高个人的学习成效和达成该团体的学习目标为原则，尽量使组员性质均衡配。 学生可以用自己的方式给单词编辑密码，用自己感兴趣的方式记忆单词。对于篇幅较多的内容，可以分三步走：寻找关键点，整合关键点，对照关键点。

2.科学安排座位

座位的安排应根据学生合作完成任务的目标、性质和人数，可采用以下形式：

①“横线”型。即同桌两人为一个合作小组，适合做pair-work。

②“田字格”型。即前后两桌4人为一个合作小组，适合group discussion和dialogue，尤其是角色表演。

③U型。即前后或左右六人为一个合作小组，适合完team work. interview或task。 座位的科学安排可以缩短学生间的空间距离，便于学生交流，而且可以为每个学生提供表现自我、展示个性的机会，满足学生个体发展的需求。

3.合理分配角色

根据不同的合作任务由2—6人组成学习小组，确保每位组员都能担任一定的角色，如组长、记录员，并要求组员明确分工，落实职责。教师还应要求小组成员相互支持、密切配合，发挥团队精神，有效地完成小组学习任务。

二、培养学生合作学习的意识和能力

教师应尽最大可能使学生认识到合作技能对于个人和集体的重要意义。在教学中，教师应努力营造轻松愉快、合作竞争的学习氛围，注意培养学生的合作意识，逐渐培养学生的合作学习能力。但合作学习不能代替个体独立思考。独立思考是合作学习的前提，没有独立思考，没有自己的思想与认识，那么在合作学习中只能是听众和观众。因此，在教学中，教师应让学生先独立思考，然后进行小组合作学习。只有在独立思考的过程中，学生的思维能力和创新意识才能得到发展。

三、要给学生自我表现的机会，并展开组与组之间的竞赛

心理学认为：人与生俱来就有一种积极的自我表现的欲望，希望把自己的长处展示于众人面前。小组合作活动给那些平时比较害羞，不大敢开口的学生提供了合适的空间，教师要多加留意。随着经验的积累，自信心的增强，还要逐步鼓励他们在全班同学面前表现。另外，为了提高全体学生的积极性，提高学习效率，要开展组与组的比赛。这种组内合作的竞赛活动既强化了学生的集体荣誉感，也会使学生对所学的知识产生兴趣，变苦学为乐学，使学生大脑处于高效率的最佳状态，能有效提高教师与学生之间的互动率，同时也培养了现代人所需要的竞争意识。只是在奖励时切忌太多、太泛，否则学生会没有了成就感，也就失去了竞赛的意义。 教师可以经常举办一些英语单词记忆力竞技比赛活动，促进学生们对单词的记忆。

空间学习记忆能力 第7篇

1 大麻素简介及人工合成大麻素HU210

1.1 大麻素简介

大麻素的活性成分四氢大麻酚(△9tetrahydrocannabinol,△9THC)于1964年从印度大麻(hashish)中提取获得[5]。现在已经发现的2种大麻素受体都是含有7次跨膜结构的G蛋白偶联受体[6]:大麻素一型受体(cannabinoid 1 receptor,CB1),主要分布在中枢神经系统;大麻素二型受体(cannabinoid 2 receptor,CB2),主要分布在免疫组织和细胞中[7]。

1.2 人工合成大麻素HU210

人工合成大麻素HU210的化学名为1,1-乙基庚基-11-羟基四氢大麻酚(1,1-dimethylheptyl-11-hydroxytetrahydrocanna binol),由希伯来大学的Raphael Mechoulam等人于1988年首次合成[8]。它是△9THC的结构类似物,通过作用于CB1受体发挥作,和△9THC相比它与受体的亲和力更强,作用持续时间更久。

2 Morris水迷宫实验

Morris水迷宫实验(Morris Water Maze,MWM)是Morris于1981年设计并用来研究实验动物空间学习记忆能力的实验[9]。由于它具有设备简单,技术易于掌握,能排除旱迷宫实验中动物气味影响等优点,已经成为行为神经科学领域中最常用的实验技术之一[10]。

2.1 实验装置简介

实验装置包括圆形水池、平台(platform)、线索(cues)、记录系统、数据分析系统。试验动物入水后,根据周围的线索进行导航定位、找到平台并在平台上停留30s后,认为其逃逸(escape)成功。在水池正上方用摄像机记录实验信息,再用计算机软件分析实验数据(见图1)。

2.2 统计分析方法及常用的检测指标

为研究不同处理对实验动物的影响,可采用重复测量数据(Repeated Measures)的方差分析及单因素方差分析(one-way ANOVA)对实验数据进行统计学分析。常采用的检测指标有:逃逸潜伏期(escape latency);游泳距离(distance);游泳速度(swimming speed);平台穿越次数(crossing times);四个象限停留时间(time in quadrant)[11]。

3 HU210影响实验动物在Morris水迷宫试验中表现的机理

HU210能够影响啮齿类动物在Morris水迷宫实验中的表现,延长实验动物的逃逸潜伏期,各研究者从不同方面对产生这一现象的机理进行了探索。有研究认为,HU210影响了动物的活动性或造成动物紧张,从而使动物在水迷宫实验中的逃逸潜伏期增长,并非影响了动物的空间学习记忆能力。也有研究表示,也有可能是因为HU210通过受体介导机制影响动物的空间学习记忆能力。

3.1 HU210对实验动物活动性的影响

实验动物注射HU210后,在Morris水迷宫实验中观察到逃逸潜伏期延长,同时也观察到动物活动性的降低,所以是否是因为HU210降低了动物的活动性才增加了逃逸潜伏期?Ferrari在隐藏平台实验后,又进行了可视平台实验,在可视平台实验中各组的表现相类似。并且在实验过程中,实验动物很努力地完成实验,有足够的活动性使其到达平台,即使注射了高剂量的HU210(100μg/kg)后,除了刚入水时有几秒钟漂浮不动外,动物之后的游泳活动都很正常。另外,当一些动物在平台上失去平衡落入水中后,它们会努力重新爬回平台[2]。也有研究表明:在注射HU210后,虽然初期动物在饲养笼中的活动性降低,但是在进行水迷宫实验时,动物的游泳速度却有所增加[1,2,3]。所以,在实验中所观察到的全身注射HU210所引起的活动性改变并不会影响其完成水迷宫实验游泳任务,因此,实验动物活动性改变并不能作为Morris水迷宫实验中逃逸潜伏期延长的解释。

3.2 HU210可造成实验动物应激

有研究者在实验中观察到,注射HU210后实验动物会变得非常紧张,每当实验人员接触动物时就会强烈地尖叫[2]。既然活动性的改变不能解释HU210如何影响动物在Morris水迷宫实验中的表现,那么是否是由于注射HU210后使实验动物应激才影响了其在水迷宫实验中的表现?有研究表明大麻素会造成动物应激,它可以促进促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropin homone,ACTH)和促肾上腺皮质激素释放因子(corticotropin releading factor,CRF)的释放[12],这二者在引起应激反应过程中发挥重要作用。然而又有研究表明:注射HU210的实验动物在每天的第4次训练时,反应应激程度的指标(趋边游泳)已达到最低水平,而反映空间学习能力的指标(游泳距离、逃逸潜伏期)仍有所增加,这就说明虽然HU210会对实验动物产生应激反应,但是它可以在训练过程中逐渐被克服[1],因此并不能将HU210所产生的应激反应作为逃逸潜伏期的延长主要原因。

3.3 HU210通过受体介导机制影响实验动物的空间学习记忆能力

已有大量的证据表明:大麻素通过CB1受体介导的机制影响实验动物的空间学习记忆能力[13,14]。然而也有一些相反的实验证据,即使用CB1受体的特异性拮抗剂SR141716A或者AM281都不能减弱或者逆转HU210对动物在Morris水迷宫实验中影响[1]。所以有研究推断HU210可能并非是通过CB1受体发挥作用[6],或者甚至并不是通过受体介导机制发挥作用[15]。随后有研究者使用脑立体定位技术,将CB1受体的拮抗剂SR141716A注射到海马CA1区中,可以完全阻断全身注射大麻素所产生的作用;将SR141716A注射到海马边缘以外,则不会阻断大麻素对学习记忆的影响[16]。这更加精确的定点注射实验,说明HU210确实是通过CB1受体介导机制发挥作用,之前的一些相反的实验结果,可能是由于全身注射药物使药物不能有效的运送到靶点位置,或者实验中所选择的药物剂量不能有效的发挥作用所致。

3.4 海马区在HU210影响动物在Morris水迷宫实验表现中的重要作用

海马区属于边缘系统,是人类及其他哺乳动物脑中的一个重要组成部分。已经有许多研究表明海马区的活动在啮齿类动物进行空间记忆和导航定位时发挥着重要作用[10,17,18],在海马区的齿状回、CA1区、CA3区分布着高密度的CB1受体[7]。HU210可以通过影响海马区的神经元活动对动物在Morris水迷宫中的表现造成影响。

(1)HU210影响海马突触可塑性:海马区的突触可塑性改变包括长时程增强(Long-term Potentiation,LTP)和长时程抑制(Longterm Depression,LTD),与海马区的学习记忆功能有密切关系。大麻素可以通过影响海马区的突触可塑性而影响学习记忆功能。Sullivan等认为大麻素可作用于海马锥体细胞突触前膜上的CB1受体后,使G蛋白的βγ亚基与α亚基分离,βγ亚基移动并作用到N型或P/Q型钙离子通道,使Ca2+不能通过离子通道进入膜内,从而影响了运载谷氨酸的突触小泡的运输,使得突触前膜对谷氨酸的释放量降低。神经递质量的减少,也降低了突触后膜的去极化,进一步阻碍了突触后膜上NMDA受体上Mg2+的移除,使得Ca2+不能通过NMDA受体进入细胞膜内,最终使得突触后膜上的长时程改变减弱[7]。并且大麻素还会降低海马区LTP和LTD的场电位[19]。另外,持续注射15dHU210,与急性注射HU210相同,可以抑制在体海马CA1区LTP的诱导,在最后一次药物注射18h以后还能够观察到这种影响[3],说明慢性注射药物以后产生了神经适应性改变,而不是药物处理本身所造成的。这种改变可能是由于树突萎缩造成的,也可能是由于长期注射HU210改变了突触后膜上谷氨酸受体亚基的表达[7]。(2)HU210影响海马神经元放电活动:实验动物海马区的神经活动对其在Morris水迷宫实验中的表现是至关重要的[20]。在采用延迟匹配采样实验(delayed match to sample)进行短期记忆的研究时发现,大麻素可以抑制海马CA1区神经元在采样阶段(sampling phase)放电的增高,改变配对阶段(matching phase)放电的形式。研究者推测:如果需要实验动物在配对阶段有良好的表现,则需要在采样阶段海马CA1区的神经元放电增加来进行信息的编码。由于大麻素抑制了采样阶段的神经放电活动,所以在配对阶段的实验结果受到了影响[21]。HU210并不能使海马区神经细胞完全静息,但是却可以抑制CA1区和CA3区的自发放电频率,而且可以使得簇放电的频率、持续时间、簇放电中峰的数目降低了近50%。因为与记忆形成有关的信息编码需要海马细胞放电频率持续增加0.5s,而HU210抑制了神经放电,使得放电频率不能持续增加0.5s,从而影响了实验动物记忆形成时对信息的编码过程[1]。

综上所述,人工合成大麻素HU210通过CB1受体介导机制影响海马区的神经元放电活动和突触可塑性,从而影响了啮齿类动物的空间学习记忆能力,最终使其在Morris水迷宫实验中的表现受到影响。

4 结语

本文分析综述了有关HU210影响动物空间学习记忆能力的研究进展,强调HU210通过作用于大麻一型受体,影响海马区神经元的放电活动以及突触可塑性,进而影响动物的空间学习记忆能力的观点。

海马区与空间学习记忆过程固然存在着密切的关系,但是从整体来看,大脑的工作机能不是单一的一个脑区就能完全发挥全部功能的,它需要各个脑区形成一个神经网络来发挥完整的作用。比如啮齿类动物的空间学习记忆能力所涉及到的脑区除了前文提到的海马,还包括嗅皮质[22]纹状体、基底前脑、小脑以及一些新皮层区等[10]。但是目前对这些脑区在学习记忆中的作用还研究得不够深入。对学习记忆的神经机制做出更加完整合理的解释,还需要将研究的注意力也投入到这些脑区的功能及各个脑区之间的联系上,需要将其作为一个完整的神经网络来研究。

空间学习记忆能力 第8篇

1 材料与方法

1.1 实验动物与分组

2月龄昆明品系小鼠(清洁级),雌雄各半,体重20±2g,购自山东鲁抗医药动物实验中心。自然昼夜节律光照下,自由饮水,进食,实验人员每日抓捉小鼠使之适应操作。小鼠随机分为对照组和急性应激组,每组12只。

1.2 建立急性应激模型

急性应激组采用足底电击作为单一应激源(电压36V,15s/次,每次持续30s,共30次)。对照组不接受电击,正常状态饲养。

1.3 Morris水迷宫检测学习记忆能力

采用Morris水迷宫,检测两组小鼠的学习记忆能力。Morris水迷宫由圆形水池和池内一可移动平台组成,直径80cm,高50cm,水温26±1℃。测试程序包括定位航行和空间搜索两个实验步骤。水迷宫被均分为4个象限,平台置放于第一象限(目标象限),并在第三象限池壁做红色标记,使之于平台连线为水池直径。定位航行实验共2d,每只小鼠每天两个训练周期,每个周期内接受4次找平台训练,小鼠分别对应一个象限入水,每次训练120s。记录小鼠入水至找到水下平台的逃避潜伏期(escape latency)。第3d进行空间搜索试验,撤除平台,小鼠由第三象限入水点入水,记录小鼠120s内在4个象限的游泳时间,以检测小鼠对平台(目标象限)的记忆能力。在定位航行的每个训练周期前和空间搜索试验前对应激组的小鼠足底电击。

1.4 小鼠海马和前额叶皮层NT-3的表达

在完成水迷宫空间试验后,戊巴比妥钠注射麻醉小鼠,开胸腔暴露出心脏,快速经心先后灌注37℃生理盐水50ml及4℃的4%多聚甲醛溶液50ml,开颅取脑,然后再固定2h,经梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋后进行冠状切片(厚约5μm)。然后进行免疫组化实验,一抗及试剂盒均购自武汉博士德生物公司,按照试剂盒的要求操作。阴性对照选择PBS(磷酸缓冲液)代替一抗。选择每只小鼠相应海马部位和前脑皮层(PFC)切片3张,每张随机选取两个不相重叠的视野,用Motic Images Advanced 3.2图像处理系统对海马和前脑皮层的NT-3阳性细胞平均目标灰度值进行分析。

1.5 统计学处理

2 结果

2.1 各组小鼠空间学习记忆功能的变化

统计数据显示,两天的定位航行试验中,对照组和应激组小鼠的逃避潜伏期迅速下降(表1);有统计学显著性差异(F=6.172,P<0.01);与对照组相比,应激组在第2、3、4训练周期的逃避潜伏期明显缩短,有显著性差异(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。结果表明,急性应激能明显增强小鼠的空间学习能力。

在空间搜索实验中,在目标象限(第一象限)对照组和应激组小鼠均停留最长时间(表2);对照组小鼠(F=10.03,P<0.01)和应激组小鼠(F=20.61,P<0.01)在目标象限停留的时间均显著长于在二、三、四象限的时间。与对照组比,在目标象限应激组小鼠的停留时间显著延长(P<0.05),而在目标象限的对面象限(第三象限)停留测时间显著减短(P<0.05)结果表明,急性应激后小鼠空间记忆保持能力增强。

2.2 各组小鼠海马和前脑皮层NT-3蛋白的表达

免疫组织化学染色表明,急性应激后,与对照组小鼠比较,应激组小鼠海马CA1、CA3区、DG区及前额叶皮层NT-3的表达显著增强。与对照组比较(表3),应激组小鼠在各脑区的NT-3阳性神经元平均目标灰度值显著减少(P<0.05)。

*P<0.05,与对照组比较(非配对t检验);n=12.

3 讨论

研究表明,应激对机体的影响具有双重性,适度的应激对机体起积极作用,而长久、强烈的刺激使中枢神经元形态改变及功能障碍,影响脑的认知功能,引起学习记忆能力的下降。海马在应激导致行为变化方面发挥重要作用,是学习记忆的关键脑区[5]。英国心理学家Morris设计水迷宫用于学习记忆脑机制研究,能对动物空间学习记忆能力作出较准确的反映。本实验结果显示,急性应激后小鼠在Morris水迷宫中的逃避潜伏期明显缩短,在空间搜索试验中,小鼠目标象限停留时间明显延长,说明急性应激能使动物的空间学习记忆功能显著增强。

NT-3在中枢和外周神经系统广泛分布,主要在海马、脑干、背根节、脊髓等[6]。NT-3的一级结构与NGF家族其他成员有一致的保守区,又有可变区。NT-3主要通过酪氨酸激酶受体(trk C)受体来发挥生物学效应。NT-3生物学效应广泛,在体内能够支持感觉的运动神经元存活,在神经系统发育早期,能够促进神经嵴细胞的发育,对外周感觉神经元的发生及数量起调节作用[7]。NT-3缺乏或表达降低会影响学习记忆等功能,并与神经退行性疾病密切相关。NT-3能阻止老年痴呆患者胆碱能神经元退变,对于基底前脑胆碱能神经元退变导致的学习记忆功能障碍有改善作用。NT-3选择性的结合trk C受体而发挥生理效应。trk C是trk受体家族的重要成员,作为NT-3的高亲和力受体,分布在海马的锥体细胞层、齿状回、大脑皮质的外层细胞簇及小脑颗粒细胞层,NT-3也在这些区域表达,提示NT-3与trk C形成联合自分泌环路,对神经元存活起一定作用[8]。

我们先前的研究表明,急性应激引起小鼠空间学习记忆功能增强,脑内海马和前脑皮层GDNF的表达明显增加[9]。本实验结果表明,急性应激后,应激组小鼠的海马和前额叶皮层NT-3的表达显著增强。结果显示,急性应激使小鼠海马和前脑皮层的神经元活动发生明显变化。海马和前脑皮层与学习记忆功能密切相关,海马更是调节应激反应的高级中枢[10]。急性应激后,小鼠空间学习记忆功能的提高与海马和前脑皮层NT-3表达增强是一致的,结果提示NT-3可能参与调控急性应激对动物空间学习记忆功能的改变,其表达上调可能是导致空间学习记忆功能改变的机制之一。

摘要：目的 :研究急性应激对小鼠空间学习记忆的影响及其机制。方法 :以足底电击来建立急性应激小鼠模型,采用Morris水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力,以免疫组化方法检测神经营养因子-3(NT-3)在小鼠海马和前脑皮层的表达。结果:水迷宫实验中,急性应激组小鼠与对照组相比,空间学习记忆显著提高(P<0.01)。在海马CA1区、CA3区、齿状回及前脑皮层NT-3的表达显著增强(P<0.05,P<0.01)。结论:急性应激所致小鼠空间学习记忆功能的提高可能与脑内NT-3表达上调相关。

关键词：急性应激,学习记忆,神经营养因子-3,海马,前脑皮层

参考文献

[1]Selye H.The stress of life[M].New York:Mc Graw-Hill,1956.

[2]夏国玲.应激损害大脑[J].国外医学精神病分册,2000,27:43-46.

[3]张亚楠,王玉其,陈亚静,等.慢性应激对小鼠空间学习记忆功能及脑内GDNF的影响[J].曲阜师范大学学报,2011,37:70-74.

[4]Chalazonitis A.N eurotrophin-3 as an essential signal for the developing nervous system[J].Mol Neurobiol 1996,12:39-53.

[5]Gould E,Tanapat P,Rydel T,Hastings N.Regulation of hippocampal neurogenesis in adulthood[J].Biol.Psychiatry,2000,48:715-720.

[6]Ernfors P.Identification of cells in rat brain and perioheral tissues expressing m RNA f or members of the nerve growth factor family[J].Neuron,1990,5:511.

[7]Sheard PW,Bewick GS,Woolley AG,et al.Investigation of neuromuscular abnormalities in neurotrophin-3-deficient mice[J].Eur J Neurosci,2010,31:29.

[8]Lamballe F,Klein R,Barbacid M,et al.A new member of the trk family of tyrosine protein kinases,is a receptor for neurotrophin-3[J].Cell,1991,66:967-979.

[9]陈亚静,史建勋,张冠雄,李亚.急性应激对小鼠空间学习记忆功能及脑内GDNF表达的影响[J].信息科技,2012,6:53-54.

空间学习记忆能力 第9篇

1 材料与方法

1.1 实验动物的分组

健康性成熟WISTAR大鼠60只 (由济南军区总医院实验动物中心提供) , 其中雄性20只, 雌性40只。按完全随机的方法将40只雌鼠分为对照组及照射组。照射组按照射时间分为:10min组、20min组、30min组。

1.2 动物模型的制备

雌鼠在孕前一周, 选取1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉方法, 剂量为30mg/kg, 麻醉满意后, 将雌鼠缚于实验台上, 下腹部涂耦合剂, 超声探头在雌鼠下腹部按既定的时间进行滑行扫查, 对照组进行假辐照, 其余条件相同, 每日一次, 连续辐照7d后将雌雄按2ı1比例合笼, 使之自然受孕及分娩。

1.3 超声辐照条件

仪器:GE 730型彩色超声诊断仪;辐照条件:4V1探头, 频率3.5MHz;机械指数MI=1.6, 热指数Tis=1.8;ISPTP:1mW/cm2;ISATA:240 mW/cm2。40只雌鼠共产下仔鼠327只, 仔鼠出生后观察其发育情况 (出生体质量、睁眼时间、皮毛发育情况等) 及出生病死率。

1.4 Morris水迷宫实验

随机选取各组仔鼠10只, 在成熟期 (生后90d) 进行测试。根据动物在每一区内花费的时间, 与规定的加权值相乘, 结果相加来计算学习记忆成绩。Morris水迷宫是一高50cm、直径160cm的圆形水池, 水池内壁为黑色, 池内水深23cm, 水温在 (22±2) ℃, 实验室温度24~25℃, 房间内光照恒定, 水池内无光线直射。池壁上以四个等距离的点将水池分为四个象限, 第一象限设为目标象限, 在距离池壁35cm处放有一个高21cm、直径为12cm、的圆形黑色站台, Morris水迷宫中加入墨汁混匀, 水中不能明显见到安全平台。水池四周存在丰富的空间参考线索 (门、窗、灯、实验者等) , 应保持不变以供大鼠定位平台。迷宫上方安置带有显示系统的摄像机, 同步记录仔鼠运动轨迹。本实验我们选取内环得分作为学习、记忆能力的评价指标。

1.5 内环得分

用SPSS17.0软件, 实验所获的数据采用 (χ—±s) 表示, 主要统计分析采用t检验。

2 结果

见表1。

注:与对照组相比较*P<0.05

孕前给予超声辐照30 min组的雌鼠所产仔鼠出生后90d在Morris水迷宫测试中内环得分与对照组的差异具有显著性意义 (P<0.05) 。孕前给予超声辐照10min组及20 min组的雌鼠所产仔鼠在Morris水迷宫测试中所得分数均与对照组无明显差异 (P>0.05) 。

3 讨论

超声检查作为一种便捷、无创、可重复手段成为生殖医学实践中不可缺少的工具, 尤其在孕卵监测中起到关键性作用。在此背景下, 超声辐射的安全性问题得到世界范围内的广泛关注。国内学者已对早孕期及晚孕期胎儿不同剂量超声辐照所致组织、细胞损害进行大量研究, 目前针对孕前超声辐照对孕卵影响的研究甚少。超声辐照孕卵是否会导致子代脑功能的损害还是一个全新的研究领域。目前有研究已经证实孕期给予超声辐照可引起胎儿脑组织细胞的凋亡。段云友等[1]研究发现给予诊断剂量的超声辐照可引起胎鼠小脑外颗粒层细胞的凋亡;程颜苓等[2]采用诊断剂量超声辐照孕18d的胎鼠, 证实超声辐照射超过20min即可诱导胎鼠脑皮层组织神经细胞凋亡。另有研究证实超声辐照大鼠生殖系统对精细胞及卵巢细胞有损伤作用, 其影响程度与辐照时间长短有关。如张希平等[3]通过动物实验发现诊断剂量超声照射可引起小鼠睾丸和精细胞的形态学及超微结构变化, 并发现辐照时间相同而辐照次数不同的精子畸变率无明显差异, 提示超声辐照对生精细胞损伤的程度主要取决于辐照时间, 与辐照的频率关系不大, 与刘望彭等[4]的研究结论相一致。曹敏丽等[5]通过照射大鼠卵巢相应部位10min, 偶见c-fos的表达, 随照射时间延长阳性表达呈上升趋势, 至60min时阳性表达最高;持续照射30min可致c-fos-mRNA阳性表达升高, 即超声持续辐照大鼠卵巢达到一定时间后可导致卵巢细胞的免疫组织发生化学反应, 并通过c-fos和c-fos-mRNA系统途径诱导卵巢细胞的凋亡。目前对于超声辐照引起的子代脑功能损害的研究相对匮乏, Kieler等的研究发现胎儿时期接受超声检查会导致左利手的概率增加。周宁等对孕18d的SD大鼠给予诊断剂量 (3.0MHz, MI=1.6, Tis=1.8) 的超声辐照, 30min组仔鼠在水迷宫测试中内环得分与对照组之间的差异具有显著性 (P<0.05) , 对孕鼠给予诊断剂量的超声辐照30 min可导致仔鼠的学习记忆能力下降。本实验采取Morris水迷宫对仔鼠的学习、记忆能力进行测定。在动物学习、记忆实验研究上, 仪器和方法是重要的, Morris水迷宫是经典的研究动物学习、记忆的仪器, 其优点:用摄像系统代替了肉眼观察, 可避免人为因素的影响, 更为真实、客观;依靠计算机系统和程序, 不仅能测定各种实验数据, 还能自动显示动物游泳轨迹。本实验采用内环得分作为评价指标。在实验中, 照射30min组动物游迷宫形式呈周边型。而对照组及照射10min组、20min组动物经过3~5d的加强训练, 大部分能够快速、准确找到平台位置。本实验结果显示, 在孕前给予超过30min的诊断剂量超声辐照的雌鼠其子代的学习记忆能力下降。原因主要考虑为卵细胞对超声辐照敏感, 超声的热效应、机械效应及空化效应等导致卵细胞发育异常。在生长发育敏感期的胎儿, 即使少量细胞的损伤也可能引起严重的后果。凋亡是依赖能量的细胞内死亡程序活化而致的细胞自我清除, 凋亡过多则导致过多的细胞死亡, 影响脏器甚至机体的功能导致疾病。神经系统的发育是在神经细胞的增殖与自然凋亡的动态平衡中进行的。超声的生物学效应会成为影响脑细胞凋亡的因素。陈文雪等在研究诊断剂量超声对大鼠卵巢细胞凋亡的影响时发现, 超声辐照可诱发卵巢组织细胞凋亡, 而且处于不同发育时期的卵泡内细胞敏感度不同, 不仅发生在原始卵泡、生长卵泡, 在间质细胞及卵泡膜细胞也可发现明显的凋亡现象。给予诊断剂量超声辐照30min, 12h后其细胞凋亡率增加, 24h达到高峰, 48h凋亡率开始下降, 96h细胞凋亡率继续下降, 120h恢复至对照组水平。诊断剂量的超声辐照大鼠卵巢组织后细胞凋亡率随时间变化的曲线呈近似抛物线状。由此证明诊断剂量超声辐照大鼠卵巢可诱导细胞凋亡增加, 这种损害存在一定的可复性, 且细胞凋亡率与超声输出功率呈正相关。如果发育期的卵细胞接受超声辐照不但引起卵细胞凋亡增加, 间质细胞和卵泡膜细胞的凋亡增多也会引起卵细胞发育异常, 打破胎鼠脑组织发育的动态平衡, 可能表现为其出生后的学习、记忆能力的下降。因此在临床常规超声检查时应尽量避免长时间的辐照。

摘要：目的 探讨孕前诊断剂量超声辐照对子代生长发育及学习记忆能力是否有影响。方法 对孕前1周Wistar大鼠分别给予每日10min, 20min, 30min诊断剂量 (3.5MHz, 65Mw/cm2MI=1.6, Tis=1.8) 的超声辐照, 并给予对照组假辐照。一周后雌雄大鼠合笼使之自然受孕及分娩, 待仔鼠出生后观察其发育情况 (如出生体质量、睁眼时间、皮毛发育情况等) 及出生病死率, 并于出生后第90d进行Morris水迷宫测试, 评价其学习记忆能力。结果 照射组与对照组仔鼠发育状态及出生病死率无明显差异 (P>0.05) 。30min组仔鼠在水迷宫测试中内环得分 (0.1201±0.0799) 与对照组得分 (0.2135±0.0831) 之间的差异具有显著性 (P<0.05) 。20min以下照射组与对照组的内环得分无显著性差异 (P>0.05) 。结论 给予孕前雌鼠诊断剂量的超声辐照30min对仔鼠的学习记忆能力可产生影响。

关键词：超声辐射,Morris水迷宫,学习记忆,大鼠

参考文献

[1]Oh H, Lee SE, Yang JA, et al.Establishment of a biological indicat-orfor the radiation and safety of diagnostic ultrasound using apo-ptosis[J].In Vivo, 2000, 14 (4) :345-349.

[2]程颜苓, 段云友, 曹铁生.诊断剂量超声与胎鼠中枢神经元的凋亡[J].中华超声影像学杂志, 2001, 10 (9) :624-626.

[3]张希平, 曹晓哲, 张绍增, 等.诊断超声对小鼠精细胞影响的研究[J].中华超声影像学杂志, 1998, 7 (4) :245.

空间学习记忆能力 第10篇

1 材料与方法

1.1 实验动物

Wistar雄性大鼠, 体重 (250±50) g, 8周龄, 共30只, 由中国医科大学实验动物研究中心提供。

1.2 模型制作及分组

根据Longa法制作局灶性脑梗死模型[1]。取20只大鼠分别给予水合氯醛 (350mg/kg) 腹腔注射麻醉后, 颈部正中切口找到右侧颈总动脉分叉处将其暴露;对将颈外动脉分支实施热凝, 并用5-0丝线将翼腭动脉结扎;取4-0的尼龙线尖端热化呈圆锥状后, 将其插入颈总动脉分叉处, 进入16~18 mm后达到大脑中动脉起始处及大脑前动脉近端, 然后将其固定2 h后取出, 完成大脑中动脉的栓塞模型制作, 缝合切口。术中恒温水袋保证大鼠直肠温度维持在 (37.0±1.0) ℃。另外10只大鼠仅实施手术不做插线栓塞, 处理侧均选右侧。右侧大脑中动脉缺血模型成功动物的入选标准:动物苏醒后, 提尾试验时表现左侧前肢内收屈曲, 同侧Horner征;爬行时向左划圈;站立时左侧倾倒者列入研究对象。符合条件共计16只, 随机分为两组即脑梗死自由活动组 (模型组) 和脑梗死康复训练组 (康复组) , 未行栓塞大鼠, 存活8只, 为正常组。模型组不施加任何训练, 任其在康复训练器中自由爬行;康复组于术后第5天开始接受康复训练;正常组亦不施加任何处理。所有动物均保证能够自由获得食物和水。

1.3 康复训练

康复组于第5天后置于滚筒式圆主形网状仪上。滚筒式网状训练器为长100 cm, 直径60 cm的圆形网状仪器, 中间分为4个格, 可同时训练4只大鼠, 底座有一固定架, 一端有一手摇柄, 可手摇按5 r/min进行转动训练, 将大鼠放入该容器内可训练大鼠的抓握、旋转、行走等功能。

1.4 学习记忆的行为学研究方法

采用国际通用方法Morris水迷宫测试[2], 观察指标为逃避潜伏期。分别在大鼠造模前、造模后5 d、康复训练后14、21和28 d时进行学习记忆能力测试。Morris水迷宫为一直径150 cm、高70 cm的圆池, 内有乳白色溶液, 水深47 cm。池壁上标有东南西北4个入水点, 将水池分为4个象限。将大鼠分别从4个入水点放入水中, 记录2 min内寻找到平台时间。

1.5 统计学处理

采用SPSS 13.0软件统一录入分析, 组间采用t检验, P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

在造模前后不同时段, 分别对三组大鼠进行Morris水迷宫行为测试, 由表1数据显示, 大鼠单侧脑梗死后较梗死前学习记忆功能下降 (P<0.01) ;康复组不同时相的学习记忆成绩较模型组恢复 (P<0.05) 。无论是模型组还是康复组, 脑梗死大鼠隐匿平台逃避潜伏期与正常组比较明显延长, 康复组大鼠与模型组大鼠比较其隐匿平台逃避潜伏期显著性缩短 (P<0.05;P<0.01) 。

注:与正常组比较, *P<0.05, **P<0.01;与模型组比较, #P<0.05, ##P<0.01

3 讨论

脑梗死又称缺血性脑卒中, 脑梗死后脑组织的坏死、软化, 导致部分脑功能障碍, 高级智能活动受到影响。国内学者发现, 康复训练对大鼠记忆功能的恢复有促进作用[3]。本文通过比较三组不同大鼠隐匿平台逃避潜伏期发现, 与正常组大鼠相比脑梗死大鼠其隐匿平台逃避潜伏期明显延长, 而接受康复训练的脑梗死大鼠 (康复组) 与未接受康复训练大鼠 (模型组) 相比较, 隐匿平台逃避潜伏期明显缩短。提示, 脑梗死后大鼠学习记忆能力减弱, 康复训练可以提高大鼠学习记忆能力。本实验结果也进一步表明, 脑梗死后大鼠的学习记忆能力大幅下降, 经过一段时间的康复训练脑梗死大鼠的学习记忆功能较未接受康复训练大鼠有显著提高, 从而证实了康复训练对学习记忆功能的恢复有重要作用。研究发现, 脑梗死致运动皮质损伤后, 康复训练能使脑损伤的周边区发生功能重组, 非损伤区在运动功能恢复上发挥重要作用[4]。

摘要：目的 探讨康复训练对脑梗死后学习记忆功能的影响。方法 共计30只Wistar雄性大鼠, 对其中20只大鼠实施线栓法制作脑梗死模型, 其余10只大鼠仅给予相同手术处理而不施行动脉栓塞, 24 h后将存活并符合选择条件的大鼠分为三组, 其中脑梗死模型组16只大鼠随机分为自由活动组 (模型组) 和脑梗死康复训练组 (康复组) , 8只非栓塞大鼠作为正常组;康复组于造模5 d后开始给予康复训练, 分别在大鼠造模前、造模后5 d、康复训练后14、21、28 d时进行学习记忆能力测试。结果 大鼠单侧脑梗死后较梗死前学习记忆功能下降 (P<0.01) ;康复组不同时相的学习记忆成绩较模型组恢复 (P<0.05) 。结论 康复训练可促进脑梗死大鼠学习记忆功能的恢复。

关键词：脑梗死,学习,记忆,大鼠,康复训练

参考文献

[1]Longa EZ, Weinstein PR, Carlson S, et al.Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats[J].Stroke, 1989, 20 (1) :84-91.

[2]Morris RGM.Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat[J].J Neurosci Meth, 1984, 11 (1) :47-60.

[3]李玲, 徐莉, 袁华, 等.康复训练促进脑梗死大鼠记忆功能的恢复[J].第四军医大学学报, 2000, 21 (12) :1555-1558.

空间学习记忆能力 第11篇

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组

健康雄性大鼠40只, 清洁级, 体重230±20g, 由甘肃中医学院实验动物中心提供。采用随机数字表法将大鼠分为:假手术组 (SO) 、模型组 (M) 、药物对照组 (N) 、当归多糖低剂量组 (AP A) 和当归多糖高剂量组 (AP B) , 每组5只。

1.2 模型制作及给药方法

参照吴章福[8]等的方法, 采用改良的分期永久性结扎双侧颈总动脉法 (2-VO) 制作CCH大鼠模型, 10%水合氯醛 (0.3ml/100g体重) 腹腔注射全身麻醉。取颈部右侧旁正中纵行切口, 暴露颈总动脉 (CCA) 和迷走神经, 分离迷走神经和CCA, 将CCA用1 号手术线双重结扎, 1 周后取左侧旁正中切口, 同样的方法结扎左侧CCA;SO组只切开皮肤暴露双侧CCA。在M组的基础上, AP A组和AP B组分别予以5%和10% AP液 (甘肃康达有限责任公司) 按1ml/100g灌胃 (分别为:50mg/kg和100mg/kg) , 1次/d, 药物对照组: 采用尼莫地平作为对照药物, 尼莫地平120mg溶于81ml蒸馏水中, 以20mg/kgd的比例给药, 模型组和假手术组不灌任何药物和液体。

1.3 行为学实验方法

应用Morris 水迷宫检测定位航行潜伏期和空间探索次数观察大鼠空间学习记忆能力。定位航行实验: 术前对实验大鼠进行定位航行训练, 将大鼠从4个不同象限放入水中, 让其自行寻找平台, 以120s为限, 规定时间内未能找到, 实验者将大鼠引导至平台, 上下午各2次, 共4d。第5d进行空间探索实验:撤去平台, 将大鼠从同一地点入水, 观察时间为120 S, 测定搜索时间, 上下午各2次。分别于术后1 个月、2 个月和3 个月分别用定位航行实验检测大鼠的逃避潜伏期, 以测定其学习记忆能力。保持平台位置固定不变, 随机从不同象限将大鼠放入水中, 测定大鼠从入水到找到平台所需要的时间 (即逃避潜伏期) , 以120s 为限, 大于120s 以120s 计算。空间探索实验:撤除平台, 观察大鼠在120s 内经过平台相应位置的次数作为空间探索能力统计指标。Morris 水迷宫检测完毕处死大鼠检测其他观察指标。

1.4 统计学分析

每只大鼠定位航行实验数据去掉最高值和最低值。数据均以均数±标准差表示, 用SPSS 19.0统计软件进行统计学分析, 统计方法采用q 检验。

2 结果

2.1 定位航行实验结果

术后1 个月, 各组间比较差异无显著性意义 (P>0.05) 。术后2 个月和3 个月时M组定位航行潜伏期较术后1个月明显延长, AP低、高剂量组无明显变化; 术后2 个月和3 个月时, 与SO组和N组比较, M组定位航行潜伏期明显延长, 而AP低、AP高剂量组无明显变化。各组比较结果见表1。

注:第2 月时, ⑵与⑴、⑶比较P<0.05, ⑴与⑶比较P>0.05。第3 月时, ⑷与⑴、⑶比较P<0.01, ⑴与⑶、⑶与⑶比较P>0.05。组内不同时间点比较: 与第1 月时比较, ⑵P<0.05, ⑶P>0.05, ⑷P<0.01。

2.2 空间探索实验结果

术后1 个月, 各组间比较差异无显著性 (P>0.05) 。与术后1 个月比较, 术后2 个月和3 个月时M组空间探索次数明显减少, AP A和AP B组无明显变化; 术后2 个月和3 个月时, 与SO组和N组比较, M组空间探索次数明显减少, 而AP低、AP高剂量组无明显变化。各组比较结果见表2。

注:第2 月时, ⑵与⑷比较P<0.05, 与⑴和⑶比较, P<0.01; ⑷与⑶、⑴比较P>0.05。第3 月时, ⑸与⑴、⑶比较P<0.01, ⑶与⑴比较, ⑶与⑶比较P>0.05。组内不同时间点比较: 与第1 月比较⑵、⑸P<0.01。⑸与⑵比较, P<0.01。⑶与⑶比较, ⑶与⑷比较, P>0.05。

3 讨论

VCI已成为二十一世纪严重威胁老年人生存质量的疾病。目前, 对VCI的认识还很不足, 对其病因、发病机制、药物治疗及预后仍未阐明。血管性因素不仅包括脑卒中, 也包括脑白质疏松、慢性脑缺血等不明显的脑血管疾病, 尚涵盖了高血压、糖尿病、高脂血症等导致脑血管病发生的危险因素, 且亦包括了所有脑血管源性认知功能损害而未有痴呆及显著的记忆缺失[9,10,11,12]。发病的的机制涉及血流动力学改变、能量代谢障碍、胰岛素抵抗、神经递质改变、蛋白质磷酸化异常、脑白质损害和神经元-突触丢失等多个环节。本实验采用改良的分期2-VO法复制大鼠慢性脑低灌注模型, 使脑组织呈低灌注状态, 比较符合人动脉粥样硬化导致颈总动脉和颈内动狭窄后的病理过程。通过Morris 水迷宫检测大鼠学习记忆能力, 结果发现, CCH大鼠术后2 个月和3 个月呈进行性下降, 表明2-VO导致的CCH可引起认知功能障碍, 与相关文献报道一致[13]。对VCI的治疗, 目前主要是应用脑血循环及脑代谢改善剂、胆碱酯酶抑制剂、神经元保护剂、抗氧化剂、自由基清除剂和毒蕈碱受体激动剂等几类药物治疗。AP是当归提取物中的主要活性成分之一, 具有广泛的生物药理作用, 近年来国内外学者对AP的分子药理学方面进行了深入的研究, 研究成果涉及多个系统多个方面。AP对大鼠免疫系统和造血系统具有显著的免疫促进调节作用, 作用机理可能与AP对免疫器官和淋巴细胞介质的免疫激活作用有关[14,15], 对小鼠造血干细胞、小鼠与人髓系造血祖细胞的增殖、分化有显著促进作用, 同时, 还具有抗病毒感染, 镇痛, 及防止过氧化损伤的作用等[16]。

本组实验表明:CCH后2 个月和3 个月时, AP A和AP B组大鼠的学习记忆能力明显好于M组, 与SO组无显著性差异, 表明AP能改善CCH后的认知功能障碍, 这种作用在高低剂量组间差异无显著性。在CCH时, 脑组织自由基代谢紊乱, 超氧化物岐化酶活性降低, 丙二醛含量明显升高, 并进一步引起学习记忆功能减退[17], 同时脑组织β淀粉样蛋白表达增高, Bax表达明显增加, Bax/Bcl-2比值明显增高加速了细胞凋亡[18]。推测AP改善CCH大鼠学习记忆能力的机制可能与上述作用有关。