复合氨基酸范文

复合氨基酸范文（精选7篇）

复合氨基酸 第1篇

1 资料与方法

1.1 一般资料

复方氨基酸 (深圳万和制药有限公司, 纯度大于99%, 批号H20000478, 根据各氨基酸的分子量和含量, 加权平均得到其平均分子量为126) , Cu SO4·5H2O (分析纯) , 氢氧化钠 (分析纯) , 85-1恒温磁力搅拌器 (常州国华电器有限公司) , CO2培养箱 (美国Thermo Electron公司) , 96孔培养板 (美国Costar公司) , 超净工作台 (苏州净化设备厂) , 健康昆明小鼠 (体重20±2g, 购于重庆医科大学实验动物中心, 许可证号SCXK (渝) 2007-0001) , 金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus SA ATCC25923) 、大肠杆菌 (Escherichia coli EC ATCC 25922) , 由西南大学药学院微生物教研室提供。

1.2 方法

1.2.1 复合氨基酸铜配合物的合成

将称取的15g复合氨基酸 (甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、苏氨酸、丝氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸、精氨酸) , 搅拌溶解, 过滤除去不溶成分, 称取Cu SO4与Na OH反应, 得Cu (OH) 2沉淀, 将Cu (OH) 2加入氨基酸溶液中, 分别按复方氨基酸:铜=2:1、1:1或1:2摩尔比反应, 温度首先控制在20℃, 再进行水浴加热, 控制温度逐渐升高 (但温度不应超过100℃以上, 以防部分氨基酸结构破坏) , 滴加氢氧化钠溶液时, 应该缓慢, 防止局部碱性过强, 时间大约控制为6h, 使反应完全充分 (反应时间不应过长, 以防氨基酸在高温碱性环境中破坏) , 反应得产物, 过滤, 除去未反应完全的Cu (OH) 2沉淀等不溶物质, 得深蓝色滤液, 通过旋蒸浓缩再经乙醇沉淀, 烘干得蓝色固体。

1.2.2 复方氨基酸及复合氨基酸-铜配合物急性毒性实验

将复方氨基酸、复方氨基酸-铜配合物溶于配成10%复方氨基酸或复方氨基酸-铜配合物溶液, 按最大耐受剂量法每只小鼠灌胃给予5g/kg, 连续观察2w, 记录小鼠活动及死亡情况。

1.2.3 复合氨基酸-铜配合物抗菌实验

使用划线法将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌培养后, 配置菌液浓度为2×105个/ml, 采用96孔板法倍比稀释5个浓度 (浓度/mg·ml:2、1、0.5、0.25、0.125) 的化合物, 每个浓度设5个复孔, 再在每个孔中加入等量的菌液, 细菌在培养箱中37℃培养24h, 观察各孔是否透明, 对应化合物溶液浓度最小的透明的孔即为最小抑菌浓度MIC。

2 结果

2.1 复方氨基酸与铜离子反应所得产物的产率

见表1。

2.2 复方氨基酸与铜离子络合比的确定 (金属含量测定)

为确定复方氨基酸的化学结构, 即复方氨基酸与铜离子的络合比, 采用EDTA滴定法测定所得产物中铜离子的含量。见表2。

2.3 急性毒性实验结果

复方氨基酸及复合氨基酸-铜配合物灌胃给药后, 所有小鼠活动均稍微减弱, 短时间内得到恢复, 食量和呼吸等均正常, 均未出现明显中毒表现;给药2周后, 未观察到有中毒反应, 所有小鼠均未出现死亡, 生长良好, 表明复方氨基酸及复合氨基酸-铜配合物对小鼠灌胃LD50>5000mg/kg。根据急性毒性 (LD50) 剂量分级[4], 复方氨基酸及复合氨基酸-铜配合物经口给药均属实际无毒范围。

2.4 抗菌作用结果

见表3。

3 讨论

该实验方法中复方氨基酸与Cu2+在2:1、1:1、1:2三种投料比下所得产物均为一分子Cu2+螯合两分子复方氨基酸的结构, Cu2+与复方氨基酸在投料比为1:2时产率最高, 产率达96.64%。

由于复方氨基酸无毒, 但无机金属铜离子存在一定的毒性, 由于文献报道一般无机金属离子与有机化合物发生络合反应后的毒性会降低[5,6], 故本实验未进行各药物的急性毒性预实验, 直接使用最大耐受剂量法进行试验。实验所合成复方氨基酸-铜配合物对小鼠的经口LD50>5000mg/kg, 表明所合成的复方氨基酸-铜配合物毒性极低, 提示该类化合物毒性低、使用安全, 具有新药开发价值。复方氨基酸对小鼠经口给药的毒性极低, LD50>15000mg/kg, 属完全无毒范围, 而无机金属离子 (人体内的常量金属元素除外) 均存在一定的毒性, Cu2+等机体所需的微量元素或非必需元素在机体内积蓄到一定的量时会引起中毒。复方氨基酸-铜配合物毒性低的原因可能是由于无机金属离子由于与复方氨基酸形成了配位共价键, 其离子键的性质消失, 故其毒性也相应消失或减小。张振学等[7]认为配合物的形成改变了金属离子在体内存在的状态, 也引起了生物活性的改变, 即以络合物形式进入体内时改变了金属离子离子的某些性质, 减少了金属离子使体内某些多肤失活和导致胞溶的可能性, 从而降低了无机金属离子的的毒性。

本实验使用10%氢氧化钠作为碱性介质, 将反应溶液的p H值固定在10左右, 目的是将氨基酸的羧基形成钠盐, 氨基酸当中的羧基和氨基可提供孤对电子给缺电子的金属离子, 本实验中使用的中等强度的碱性环境使金属配合反应更容易进行, 生成的复方氨基酸-铜离配合物产率为96.64%, 产率较高。实验合成复方氨基酸-铜离配合物抗菌强于复方氨基酸, 对革兰氏阳性菌的金黄色葡萄球菌和革兰氏阴性菌的大肠杆菌均有抑制作用, 显示出较好的抗菌活性, 有望在临床中使用。

参考文献

[1]Pereira R M, Andrades N E, Paulino N, et a1.Synthesis and Characterization of a Metal Complex Containing Naringin and Cu, and its Antioxidant, Antimicrobial, Antiinflammatory and Tumor Cell Cytotoxicity[J].Molecules, 2007, 12 (7) :1352-1366.

[2]ZHOU Peng, WU Jian-zhang, QIU Pei-hong, et a1.Studies on Synthesis of Rutin-Se Complex and Their Antitumor Activities[J].Chin Pharm J (中国药学杂志) , 2007, 42 (24) :1905-1907.

[3]Zhou J, Wang LF, Wang JY, et a1.Synthesis, characterization, antioxidative and antitumor activities of solid quercetin rare earth (III) complexes[J].J Inorg Biochem, 2001, 83 (1) :41-48.

[4]中华人民共和国卫生部, 中国国家标准化管理委员会.GBl5193.3.中华人民共和国国家标准急性毒性试验[C].北京:化学工业出版社, 2003.17-31.

[5]戴郁青.天然产物配位化学应用研究—葛根素配位色谱分离[D].安徽合肥:合肥工业大学, 2002.

[6]Wang Q, Wang YT, Pu SP, et a1.Zinc coupling potentiates antiHIV-1 activity of baicalin[J].Biochem Biophys Res Commun, 2004, 324 (2) :605-610.

复合氨基酸 第2篇

本试验采用微波螯合工艺,通过单因素和正交试验研究在不同复合氨基酸与锌的.配位比、微波时间、微波功率及反应pH条件下人工养殖鲟鱼皮复合氨基酸螯合锌的制备工艺.结果表明,螯合的最佳工艺为:反应体系pH为8,微波功率为340W,微波时间为10min,氨基酸与七水硫酸锌配位比为2:1.在此条件下复合氨基酸螯合锌产量为0.6172 g,螯合率达68.72%.同时,对复合氨基酸螯合锌进行了红外表征及紫外吸收测定,发现复合氨基酸螯合锌的最大紫外吸收波长为215 nm.

程波(绿色化工工程省部共建教育部重点实验室)

吕中(湖北省新型反应器与绿色化学工艺重点实验室)

复合氨基酸 第3篇

1.1 仪器

ZF-2型三用紫外仪(上海官亭仪器厂) GB-204型电子天平(0.1mg)(梅特勒-托利多)。

1.2 试药

复合氨基酸口服液由三九企业集团江西认真药业科技有限公司提供(批号:20110101);枸杞子对照药材(中国药品生物制品检定所提供);阴性对照(缺枸杞子,自制);硅胶G薄层板(烟台德信生物科技有限公司生产),其他所用化学试剂均为分析纯。

2 实验样品制备

2.1 供试品溶液制备

复合氨基酸口服液20mL,加乙酸乙酯萃取3次,每次20mL,合并乙酸乙酯液浓缩至约2mL,作为供试品溶液。

2.2 阳性对照品溶液制备

取枸杞子对照药材1g,剪为碎块,加水30mL,加热煮沸30min,放冷,滤过,滤液加乙酸乙酯萃取,同供试品溶液制备方法浓缩至约2mL,作为对照药材溶液。

2.3 阴性对照溶液制备

缺枸杞子阴性对照溶液(实验室自制)。

3 层析与结果

照薄层色谱法(2010版《中国药典》一部附录VIB)试验,吸取上述3种溶液各10μL,分别点于同一硅胶G薄层板上。以乙酸乙酯-三氯甲烷-甲醇-甲酸(5∶3∶1∶0.2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视,供试品与阳性对照品溶液在相应位置上显相同颜色的荧光斑点,阴性对照溶液无此荧光斑点。见图1。

4 小结

按照本文所述薄层方法对复合氨基酸口服液中枸杞子进行鉴别实验,供试品在与对照药材色谱相应的位置上,能得到清晰的相同颜色的斑点。通过此方法检验所显斑点清晰、专属性强、重现性好、分离度高,易于判定,阴性样品无干扰,可用于该制剂的质量评价。

摘要：目的:研究复合氨基酸口服液中枸杞子的定性鉴别方法,制定其定性鉴别质量标准。方法:采用TLC法进行定性鉴别。结果:方法学考察表明,TLC法定性鉴别特征明显,专属性强。结论:该方法灵敏、准确、重现性好,可作为该复合氨基酸口服液的质量评价方法。

关键词：TLC,复合氨基酸口服液,枸杞子

参考文献

复合氨基酸 第4篇

生物活性羟基磷灰石(Bio-Hydroxyapatite, BHA)是一种性能优异的人体硬组织修复材料,置入体内能逐步参与代谢并且最终与人体骨结合成一体,具有良好的生物相容性。但是,纯羟基磷灰石材料脆性大且成型困难[1,6,7]。另一方面,氨基酸聚合物具有酰胺键结构,与人体骨胶原结构相似;降解产物为氨基酸小分子,经人体新陈代谢作用最终变为二氧化碳和水,对人体无毒害作用。因此,氨基酸共聚物具有良好的生物相容性,是理想的生物合成材料[8]。张伟鹏等人设计的多元氨基酸共聚物,通过调节单体配比,实现了材料的降解速率和周期的可控性[9,10]。但是此类共聚物通常为柔性链段,刚性较差。本实验组前期将具有刚性结构的羟脯氨酸与六氨基己酸共聚,合成了一种新型的二元氨基酸共聚物(Poly (Amino Acid),PAA),提高了聚合物的力学强度并且使其具有一定的降解性能[11]。本工作是将合成的二元氨基酸共聚物与生物活性羟基磷灰石(BHA)原位聚合制备了新型可降解生物活性羟基磷灰石/二元氨基酸共聚物(BHA/PAA)复合材料,并对其化学结构、结晶特性、力学性能和降解性能进行了研究。

1 实验

1.1 原材料

6-氨基己酸,(陕西海欣庆华医药化工有限公司);羟脯氨酸,(上海试验试剂有限公司);生物活性羟基磷灰石(BHA)由本实验组制备[12]。

1.2 二元氨基酸共聚物(PAA)及其复合材料的制备工艺

PAA的制备如图1所示,参考文献[13]将118.05g 6-氨基己酸,13.11g 羟脯氨酸,0.5mL磷酸和50mL水加入到250mL三颈瓶中,开启氮气保护并搅拌,逐步升温至190℃,脱水完成后,升温至210℃,待单体熔融1h后,升温至220℃反应2h,再升温至230℃反应1h后,样品在氮气保护下冷却至室温。

复合材料的制备与聚合物制备条件相同。待聚合反应在220℃反应2h后,加入48.50g BHA,即得到含30%(质量分数,下同)羟基磷灰石的BHA/PAA复合材料。

1.3 测试表征

燃烧实验:将同一复合材料分成大小不等的颗粒样品,随机选取3份,真空90℃烘干8h后,在马弗炉中800℃燃烧6h,称量燃烧残余物的质量,计算复合材料中残余物的百分含量。

采用日立-S4800型扫描电镜观察表面形貌;核磁共振仪(Brüker Advance 400 spectrometer)分析复合材料中PAA基底的结构基团,溶剂为D2SO4;红外光谱分析仪(Spectrum 170SX),KBr压片法分析BHA,PAA和复合材料的结构基团;X射线仪(D/max-rA Advance)对BHA,PAA以及复合材料进行物相分析,测试条件:铜靶,工作电压为40kV,工作电流为25mA,扫描速率为2(°)/min;采用XSAM800型X射线光电子能谱对其表面元素进行分析;用DSC TA200型差示扫描量热仪进行升温、降温、升温扫描,速率均为10℃/min,温度范围20～230℃,第1次升温消除样品热历史。

力学性能:采用REGER30-50型万能力学试验机进行测试,以5mm/min的实验速度测量试样。抗压强度参照GB/T 1041-2008进行测试,样品尺寸为10mm10mm15mm;抗弯强度参照GB/T 9341-2000进行测试,样品尺寸为4mm10mm50mm。

降解性能:将制备的BHA/PAA复合材料固体切成10mm10mm15mm的方块和4mm10mm50mm的条状样品,用于磷酸缓冲溶液(Phosphate Buffered Saline,PBS)降解实验。浸泡前,超声洗净,90℃真空干燥4h,准确称量样品质量M0。按照1g样品30mL比例将样品置于PBS中,(37±0.2)℃恒温振荡[14]。每周更换PBS溶液。浸泡后,在第1,2,4,6,8,12周后分别取出3个样品真空干燥至恒重后称其质量Mdry,按式(1)计算质量损失百分率(Mass Loss Rate,ML)。

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2 结果与讨论

2.1 复合材料均一性

表1为不同比例的BHA/PAA复合材料燃烧残余物的含量。燃烧实验最终燃烧温度为800℃,PAA完全分解,剩余残留物应为BHA粉末。由表1可知,同一复合材料中不同部分的BHA含量基本相同并且与理论值相当,说明复合材料具有良好的均一性。结合含30%BHA的BHA/PAA复合材料SEM形貌图(图2),可知,BHA颗粒均匀地分布在PAA基底上,未发现无机颗粒团聚现象,进一步说明复合材料良好的均一性。

2.2 化学结构

图3为PAA的傅里叶红外光谱,3419cm-1属于NH键的伸缩振动峰,2932cm-1和2859cm-1属于-CH2-的吸收峰,1638cm-1属于C=O伸缩振动峰,1542cm-1属于CN的伸缩振动峰和NH的弯曲振动峰,1258cm-1属于-CHN-酰胺Ⅲ带吸收峰,686cm-1属于CN酰胺Ⅳ面内弯曲振动峰。说明所合成的聚合物主要以酰胺键结构为主。图4为PAA的1H NMR图谱。PAA中出现了酰胺键的特征吸收峰,其中化学位移δ为3.71和3.88时为与羰基相连的亚甲基的氢谱峰位移,δ为4.55时为与氨基相连的亚甲基的氢谱峰位移,δ为5.44和5.54时为氨基的氢谱峰位移;同时也出现了吡咯烷环的特征吸收峰,分别为δ=6.07,6.24,6.45和6.56[9,10]。由图4可知,氨基的特征峰分裂成几个小峰,很有可能是氨基上的氢与吡咯烷环上的氢发生了耦合。因此可判断,所得到的二元共聚物与预期设计一致,羟脯氨酸与六氨基己酸发生了共聚反应,形成了二元氨基酸共聚物。

图5为BHA,PAA和含30%BHA的BHA/PAA复合材料的红外光谱。在BHA中,3431cm-1和605cm-1属于-OH-的弯曲振动峰,1037cm-1和567cm-1属于POundefined的特征峰,在复合材料中分别移至3428,602,1022cm-1和561cm-1处。其原因可能是PAA与Ca2+之间形成配位键,使POundefined晶格振动的键力常数变小。在复合材料中,NH伸缩振动峰由3419cm-1移至3343cm-1,原因可能是-OH与PAA形成氢键,使参与形成氢键的NH伸缩振动键的键力常数减小,吸收频率向低波数移动。除NH伸缩振动峰外,复合材料中其他各峰均发生较小位移,这可能是在复合材料中受无机相的影响,聚合物中分子链段的排布发生了一定的变化。结果表明,复合材料中BHA与PAA基体之间存在一定的化学键和分子间相互作用,这种作用对复合材料的界面结合和力学强度都产生了重要的影响。

图6为BHA和含30%BHA的BHA/PAA复合材料中Ca2p的XPS谱图。BHA中Ca2p3/2的结合能为346.8eV,Ca2p1/2的结合能为350.5eV,在复合材料中分别移至347.7eV和351.1eV,即均向高结合能方向移动,这说明在复合材料中Ca2+的化学环境发生了变化。分析其原因,复合材料中游离的部分-COO-取代BHA中的POundefined,由于-COO-的电负性略大于POundefined,造成Ca原子周围的负电荷密度降低,这时Ca的2p电子同原子核结合得更紧,因此,Ca2p的结合能会提高[15]。图7为BHA,PAA及BHA/PAA复合材料中O1s的XPS谱图。BHA中O1s的结合能为530.7eV,与BHA阴离子中O元素相对应,PAA中O1s的结合能为531.7eV,与羰基中的O元素相对应。而在复合材料中O1s的结合能为531.3eV,比PAA中的O1s的结合能低,比BHA的O1s的结合能高。分析原因,复合材料中Caundefined与聚合物中残留的-COO-形成Ca2+COO-配位键,导致C=O双键的键能减弱,Ca-O键能增强,因此两项中O原子化学环境趋于近似,进一步说明BHA与PAA界面间存在一定的相互作用。

因此,综合IR和XPS结果可判断,复合材料中的无机相BHA和有机相PAA界面间存在较强的化学键和分子间相互作用。

2.3 结晶特性

图8为PAA,含30%BHA的BHA/PAA复合材料和BHA的XRD光谱曲线。由图8可知,PAA为半结晶型共聚物,结晶度为33.87%,其特征衍射峰出现在2θ=20°和24°。在复合材料中,PAA的特征峰明显下降,其聚合物部分结晶度由33.87%下降到10.27%。分析可能原因:BHA分散在PAA基底中,与氨基酸共聚物链段形成氢键,阻止链段的运动和晶体的生长,使得结晶厚度变薄,结晶度下降。另一方面,BHA在晶向(002), (211), (300), (202), (310)和(222)对应的特征峰25.9,31.8,33,33.9,39.8°和46.8°在复合材料中均出现,这意味着BHA在复合材料中仍保持其特征结构。

图9为PAA和含30%BHA的BHA/PAA复合材料DSC降温结晶和升温熔融曲线。表2为PAA及BHA/PAA复合材料的熔融和结晶过程的DSC数据,其中第一次升温过程消除样品热历史,Tg,Tm,ΔHm分别为第二次升温过程的玻璃化温度、熔融温度和熔融焓,Tc和ΔHc分别为结晶过程的结晶温度和结晶焓。与单纯PAA相比,图9(a)中复合材料的结晶峰值明显提高11℃,半峰宽略微减小。这表明复合材料的结晶速率增加,结晶度减小。原因可能是在复合材料中,羟基磷灰石颗粒分布于PAA基体上起到了异相成核的作用,从而导致晶核形成速率增大,使得复合材料的结晶速率增加。另一方面,BHA的加入破坏了PAA大分子链段的规整性,阻碍了晶体的生长,导致PAA的球晶变小,结晶度降低,其结果与XRD分析结果一致。从图9(b)可知,复合材料熔融峰出现在201.61℃,相对于聚合物变化不大;但熔融峰面积明显减小,即熔融焓减小,表明合成的复合材料所需能量减小,有利于材料的加工。

2.4 基本力学性能

BHA/PAA复合材料的基本力学性能测试结果如表3所示。可以看出,随着BHA含量的增加,复合材料抗压强度明显增加,抗弯强度略有减小。分析原因:无机相和有机相间的化学键和分子间相互作用,增加了材料的力学性能;随着复合材料中无机相成分BHA含量增加,材料的刚性增大,脆性也增大,弯曲时材料中的缺陷和亚微观裂纹对抗弯强度影响较大,而在压缩时则有利于亚微观裂纹的闭合,从而能承受较大的压缩应力[16]。当BHA含量达30%时,材料的抗压强度和抗弯强度分别达到(141.02±2.35)MPa和(86.32±7.56)MPa,与人体皮质骨力学强度相当(分别为抗压强度50～140MPa,抗弯强度80～100MPa[17]),这表明BHA/PAA复合材料具有良好的生物力学性能。

2.5 体外降解性能

图10为不同比例的BHA/PAA复合材料在PBS溶液中的失重率变化。可知,纯聚合物和复合材料在第一周的失重率变化较大,并随着BHA含量的增加而增大。纯聚合物PAA,复合材料PAA/10%BHA,PAA/20%BHA,PAA/30%BHA的失重率在一周后分别达到(3.77±0.30)%,(6.38±0.30)%,(8.11±0.49)%和(9.17±0.47)%。分析原因可能是,在降解初期聚合物中残留的单体或者低聚物的溶出,导致材料的质量损失;无机填料BHA的加入,影响了聚合物分子链的规整性,聚合度降低,低聚物溶出增大,复合材料降解速率增加;同时,复合材料表面无机物的溶出,进一步增大了质量损失。在第2周到第8周,材料的降解速率逐渐降低,到第8周后基本保持稳定,失重率分别达到(6.50±0.23)%,(9.97±0.31)%,(11.30±0.35)%和(12.18±0.25)%。

图11为不同比例的BHA/PAA复合材料在PBS溶液中降解前后的力学强度变化。可知,复合材料PAA/10%BHA,PAA/20%BHA,PAA/30%BHA的抗压强度和抗弯曲强度在第一周变化较大,从第二周到第八周变化逐渐减小,第8周以后力学强度随降解时间的延长基本保持稳定,复合材料PAA/10%BHA,PAA/20%BHA,PAA/30%BHA的抗压强度在第八周时分别达到(84.22±2.86)MPa,(90.19±2.43)MPa,(97.01±2.50)MPa,均处于人体皮质骨力学强度范围内;复合材料PAA/10%BHA,PAA/20%BHA,PAA/30%BHA的抗弯曲强度在第8周时分别达到(80.98±0.86)MPa,(78.34±0.54)MPa,(72.75±0.65)MPa,接近人体皮质骨力学强度,具有良好的生物力学相容性。对于骨修复材料而言,降解过程中的机械力学性能的稳定性至关重要,它决定了植入材料的稳定性和生物安全性。以上结果表明所制备的材料具有一定的降解性能,且降解后力学性能仍具有生物力学相容性和稳定性。

3 结论

(1)采用原位聚合法制备的BHA/PAA复合材料具有良好的均一性。

(2)综合分析结果表明,PAA结构与预期设计一致;PAA中的C=O和BHA中的Ca2+之间存在配位键作用,PAA中的酰胺键与BHA中的-OH形成氢键作用,两相之间结合较为稳定;复合材料结晶度有所下降,但仍然保持良好热稳定性。

(3)随着BHA的加入,材料的抗压强度增强,抗弯强度略有减小,并且与人体皮质骨相匹配。

复合氨基酸 第5篇

关键词：氨基酸微量元素螯合物,生长育肥猪,生产性能,屠宰性能

微量元素的存在形式有两种形态, 即无机形态和有机形态。微量元素的生物利用率大小, 与其存在形式密切相关。微量元素在动物体内被利用的能力, 受其构成化合物的溶解度、浓度、离子状态及饲料中其它组分等因素的影响较大[1]。无机形态的微量元素, 如硫酸铜、硫酸铁、硫酸锌及硫酸锰等的生物利用率研究较多, 且较为人们熟知。而有机形态的微量元素, 如氨基酸螯合微量元素的生物利用率的研究较少且较迟。近年研究已表明:与无机形态的微量元素相比, 氨基酸螯合形态的有机微量元素具有更高的生物学效价、特殊的生理功能及食品安全性。本试验旨在研究复合氨基酸微量元素螯合物对生长育肥猪生产性能及屠宰性能的影响。

1 材料与方法

1.1 微量元素的选择

选用成都奥丰牧业有限公司生产的复合氨基酸微量元素螯合物预混料进行试验。1 kg复合氨基酸微量元素螯合物预混料中含有:铁80 000 mg、锌20 000 mg、铜5 000 mg、锰15 000mg、碘100 mg和硒10 mg。试验组:预混料在日粮中添加量为0.1%;对照组:在日粮中添加各元素相同含量的无机微量元素预混料, 并补平赖氨酸、蛋氨酸及苏氨酸等主要的限制性氨基酸水平。复合氨基酸微量元素螯合物预混料是由去皮豆粕经充分水解后加入硫酸铁、硫酸锌、硫酸铜、硫酸锰、碘酸钙及亚硒酸钠无机微量元素, 在特定条件下充分螯合, 经脱色和干燥等工艺后形成;无机微量元素预混料则是将硫酸铁、硫酸锌、硫酸铜、硫酸锰、碘酸钙及亚硒酸钠无机微量元素与玉米芯粉、沸石粉等载体、稀释剂直接在V形不锈钢搅拌机中混合形成。

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注:添加复合氨基酸微量元素螯合物预混料为试验组, 相同水平的无机微量元素预混料为对照组。1 kg日粮中, 复合氨基酸微量元素螯合物预混料提供Fe 80 mg, Zn 20 mg, Cu 5 mg, Mn 15 mg, I 0.1 mg, Se0.01 mg。每千克日粮中, 维生素预混料所提供维生素A 6 500 IU, 维生素D31 000 IU, 维生素E 12.0mg, 维生素K30.5 mg, 维生素B11.2 mg, 维生素B24.0 mg, 维生素B62.5 mg, 维生素B120.15 mg, 叶酸0.3 mg, 生物素0.05 mg, 烟酸20.0 mg, 泛酸钙10.0 mg, 胆碱500 mg。

1.2 试验动物

选用成都大邑县金鑫猪场70日龄的“杜长大”三元良种杂交猪, 试验组20头, 对照组21头。试验猪只胎次接近、遗传相近、体重相近。

1.3 试验日粮

试验日粮参照NRC (1998) 配制, 试验日粮为“玉米-豆粕”型日粮, 粒径Φ3.5mm的颗粒饲料。基础日粮配比与营养水平如表1。

1.4 试验期限

试验期从70日龄到195日龄。

1.5 饲养管理

饲养管理按生长育肥猪的饲养管理要求进行, 每天定时喂料, 定时清洁, 保证充足清洁饮水。

1.6 测定项目

记录试验开始和结束时的空腹体重、每日饲料喂料量、疾病发生及治疗用药情况。试验结束后, 实验组与对照组的猪只全部屠宰, 测定酮体重、屠宰率, 记录肝脏重, 并观察评判肝脏色泽、形状, 以及肉色、系水力等。

1.7 统计分析

对试验数据, 用SPSS11.0统计处理软件进行统计处理。

2 试验结果

表2可见, 试验组的日增重比对照组高33.6g, 提高3.21%。试验组的料重比也优于对照组, 比对照组低0.13。故试验组的生产性能好于对照组。

试验组的屠宰率比对照组高2.5个百分点。但对照组的肝脏重量要比试验组重;同时, 试验组的肝脏外观性状要好于试验组, 这表明对照组的无机微量元素使肝脏有病变的可能, 说明试验组的屠宰性能也好于对照组。

试验组的肉质颜色好于对照组。试验组的肉质表面干燥, 无水样液体渗出, 而对照组则相反, 有水样液体渗出。表明试验组的肉质商品性更好。

3 分析与结论

大量的研究结果证明, 有机微量元素的生物利用率高于无机元素 (Du等, 1996;Shi等, 1995) 。氨基酸微量元素的螯合物在小肠被机体吸收时, 使用的是氨基酸和肽类的吸收通道, 而不是普通矿物元素离子的吸收通道, 从而避免了矿物元素之间在小肠吸收时竞争相同的吸收通道。同时, 微量元素与氨基酸螯合后的分子结构电荷趋于中性, 在体内p H值酸性环境下微量元素的溶解度提高, 吸收率增加, 并阻止螯合物中的微量元素与其它物质形成不溶或难溶的金属化合物, 因而有机微量元素螯合物的生物利用率不但高于无机的矿物元素, 也更易于在体内运输, 促进它们在肠道的吸收[2]。微量元素的螯合物形式相对更稳定, 受到生物化学的保护, 不会与日粮中的其它营养成分发生不利于吸收的反应, 效率是无机微量元素的几倍乃至十几倍[3]。有机微量元素螯合物可特定地作用于机体的某一个器官组织发挥功能。这些优势越来越吸引动物营养学家和养殖者在猪日粮中使用有机微量元素螯合物[4]。

李绍钰 (1999) 研究也认为, 添加有机矿物质能缓解动物应激, 增强机体抗氧化能力, 从而减少脂质过氧化, 提高畜禽产品质量。铁是过氧化氢酶的成分, 但缺乏时GSH-Px活性也下降, 细胞代谢过程中产生的过氧化氢的清除产生障碍, 过氧化氢作用于细胞膜上的蛋白质巯基, 影响膜的完整性[5]。因此, 应控制日粮中含铁量。要获得良好的肉质, 除在提供的微量元素数量上有要求外, 建议这些元素应部分 (50%以上) 以有机螯合形式提供, 以降低无机化学元素。硒是一种动物必需的微量元素, 作为谷胱甘肽过氧化物酶的必要组分而发挥抗氧化作用, 添加硒还可节省抗氧化维生素E的需要量。因此, 在日粮中添加硒, 尤其是有机硒可清除自由基, 防止脂质过氧化的发生, 从而提高畜禽肉品质量[6]。

本试验使用有机态的氨基酸微量元素螯合物的日增重和料重比等生产性能优于无机微量元素, 也表明有机微量元素的生物利用率高于无机元素。肝脏感官表明使用有机微量元素要好于无机微量元素, 这可能与有机微量元素对肝脏代谢毒性低有关。肉质颜色与系水力等物理感官也是使用有机微量元素要好, 这也与增强了机体抗氧化能力, 减少脂质过氧化, 从而对提高畜禽产品质量有着因果关系[7]。

总之, 有机微量元素的效果在本试验结果中也得到印证。有机微量元素的使用也符合食品安全的需要和未来的发展趋势。将有机微量元素作为常规的矿物元素添加到动物日粮中, 值得大力推广。

参考文献

[1]赵军.复合氨基酸螯合铁、铜、锰、锌在肉鸡生产中的应用研究.雅安:四川农业大学, 2003.

[2]赵波.氨基酸微量元素螯合物对蛋鸡生产性能和生理功能的影响研究.雅安:四川农业大学, 2003.

[3]黎日利、冯定远.有机微量元素在繁殖母猪日粮中的应用.广东饲料, 2003 (01) :26-27.

[4]宋青龙、潘宝海, 秦玉昌, 等.有机微量元素在猪营养中的应用.中国饲料, 2006 (03) :26-27.

[5]李绍钰.添加有机物质改善畜禽肉质.中国饲料, 1999 (11) :13-15.

[6]邓志刚, 潘玉春, 张银芝, 等.VE和有机微量元素对猪肉质的影响研究.饲料广角, 2011 (01) :19-23.

复合氨基酸 第6篇

1 资料与方法

1.1 一般资料

经本院伦理委员会批准, 并经病人家属同意签字后, 2012年6—2012年10月选择在本院拟行包皮环套手术患儿60例, 年龄3岁~6岁, 平均4.6岁, 美国麻醉师协会 (ASA) Ⅰ级~Ⅱ级。随机分为观察组和对照组, 每组各30例。排除对象: (1) 严重肝肾功能不全者。 (2) 对对乙酰氨基酚栓和阿司匹林过敏者。两组病人年龄、ASA分级、手术时间等比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。

1.2 方法

两组患儿均常规禁食、禁水。诱导开始前给氧去氮, 继之吸入氧3 L/min, 3 min后吸入七氟醚浓度从0.5%开始, 每呼吸4次增加1%, 逐渐增至6%。将麻醉面罩用四头带紧扣患儿口鼻部, 根据情况行辅助呼吸或控制呼吸, 刺激无睫毛反射及疼痛反应时, 均在切口处用1%利多卡因3 m L实施局部浸润麻醉。观察组患儿另加对乙酰氨基酚栓1粒, 经润滑后从肛门缓慢塞入至直肠。观察两组患儿术后躁动发生情况、苏醒和恢复室停留时间。

1.3 观察指标

患儿躁动标准:0级, 安静合作, 基本不躁动;1级, 有轻度躁动, 用言语安慰可改善;2级, 躁动, 哭闹, 试图爬起、挣扎, 需要医护人员制动;3级, 激烈挣扎, 需多人按住。1级~3级均为躁动。恢复室停留时间指患儿从入恢复室至符合出恢复室标准时的时间。

1.4 统计学方法

计数资料采用χ2检验, 以P<0.05为差异有统计学意义;苏醒时间和恢复室停留时间, 符合正态分布, 用t检验, 不符合正态分布, 采用秩和检验, 以中位数表示。

2 结果

3 护理

3.1 术前护理

(1) 术前1 d访视患儿及家属, 签知情同意书, 介绍术前准备的目的、手术及麻醉方法, 术后可能出现的问题和配合方法。与家长沟通, 家长良好的心态和行为能促进患儿的康复。 (2) 手术当天与麻醉医师在手术室门口迎接患儿, 站在床旁轻轻安抚、鼓励表扬患儿。避免由于护理人员的语言不慎而加重患儿的心理负担。Sadhasivam等[3]的研究中发现, 家长和小儿在术前和诱导时出现不恰当的行为可导致包括苏醒期烦躁在内的术后诸多不良行为的发生。 (3) 常规监测心电图 (ECG) 、血压 (BP) 、心率 (HR) 、呼吸频率 (RR) 、指脉氧饱和度 (SPO2) 。

3.2 术后护理

(1) 一般监测:所有患儿动态监测病人的SPO2、心率、血压、呼吸、意识、疼痛、恶心、呕吐、皮肤、安全措施、伤口情况, 并在麻醉恢复室的记录单详细记录。 (2) 观察指标:根据躁动标准观察并评价躁动发生情况, 观察组患儿总共躁动有8例 (27%) , 其中1级躁动有5例, 2级和3级分别有2例和1例;对照组患儿总共躁动有14例 (47%) , 其中1级躁动有3例, 2级和3级分别有8例和3例, 从中可以发现观察组患儿的躁动较为轻微, 对照组患儿的躁动较为严重, 经χ2检验, P<0.05, 差异有统计学意义。说明七氟醚复合对乙酰氨基酚栓能有效减少小儿包皮环套术后躁动。 (3) 并发症的观察:麻醉恢复期气道护理是重中之重。由于小儿的解剖和生理因素, 全身麻醉术后容易出现呼吸系统的并发症。其中呕吐与反流在麻醉恢复期较常见, 如不及时处理, 患儿吸气时可将呕吐物和反流物误吸入下呼吸道引起窒息, 误吸和窒息处理的重点在于预防, 小儿术前8 h禁水禁食, 以保证胃彻底排空, 术后严密监护, 防患于未然。本组患儿均无出现低氧血症 (SPO2<90%) 、恶心、呕吐和反流。 (4) 安全护理:术毕入恢复室后两组患儿均给以去枕平卧, 头偏一侧, 用本科室特制的约束带约束四肢, 对于清醒合作的患儿解除约束带, 根据患儿的需求, 给予半坐卧位或坐起, 由护士或家属一对一守护。对照组共有3例重度躁动 (10%) , 需追加芬太尼1μg/kg, 不但增加麻醉药物的使用或还能延长在恢复室的停留时间。

4 小结

小儿在苏醒期出现烦躁不但影响手术效果和复苏的质量, 同时增加复苏室医护人员的工作量, 处理原则主要是去除病因, 解除诱发因素和不良刺激, 本组观察病例通过七氟醚复合对乙酰氨基酚栓的预处理, 达到镇痛、镇静的作用, 且不易引起呼吸抑制。复苏期护理关键是加强防护, 避免发生意外伤害或严重的并发症。

参考文献

[1]王东披, 胡瑶琴, 胡智勇.七氟醚吸入麻醉在小儿短小手术中的应用[J].临床麻醉学杂志, 2003, 23 (6) :511-512.

[2]苑江, 李学仁, 张倩.七氟醚、氟烷分别用于小儿麻醉恢复期澹妄发生率的临床观察比较[J].医学理论与实践, 2003, 16 (4) :399-401.

复合氨基酸 第7篇

水合肼还原芳香族硝基化合物是一种特殊的催化还原法,即肼在催化剂存在下为还原反应提供氢源。其中Fe系催化剂克服了一些贵金属作为催化剂时需要较高浓度的水合肼且水合肼必须过量的缺点,而且苯环侧链上CN、COOR等基团也不受影响[4]。而在FeCl36H2O/C中添加Al3+后,不仅提高了催化剂的催化活性,而且也节省了催化剂的用量[5]。笔者以邻硝基对甲基苯酚为原料,在自制的以活性炭为载体的Fe/Al复合催化剂作用下,研究了水合肼还原反应,确定了最佳工艺条件。

1 实验部分

1.1 主要试剂和仪器

1.1.1 主要试剂

邻硝基对甲基苯酚(工业),浓硝酸(AR),FeCl36H2O(AR),AlCl36H2O(AR),无水乙醇(AR)、保险粉(AR),水合肼(80%),去离子水(自制),活性炭粉。

1.1.2 主要仪器

三口烧瓶(500mL),恒温水浴箱,滴液漏斗,T4A显微熔点仪,L-7000型液相色谱仪,IRPrestige-21红外光谱仪,反向C18色谱柱,薄层色谱。

1.2 实验步骤

1.2.1 邻氨基对甲基苯酚的合成

在250ml烧瓶中加入1.5g活性炭(处理方法参照文献[4]),1.2gFeCl36H2O和0.3g AlCl36H2O,并加入10ml去离子水浸渍2h制备Fe-Al/C复合催化剂。

向放有催化剂的烧瓶中加入邻硝基对甲基苯酚0.1mo(15.3g)、无水乙醇150ml,在搅拌的作用下加热至温度75℃,此后在1h内将45ml的ω(NH2NH2H2O)=80%水合肼滴加完毕并加热回流5h。

将回流后的混合溶液进行抽滤,除去催化剂,然后在滤液中加入0.5g保险粉(连二亚硫酸钠),回流1小时后再次进行抽滤,除去保险粉。将所得的滤液放入1000ml的大烧杯中,并加入200ml去离子水。将烧杯置于78℃的水浴中进行乙醇的蒸发,待大烧杯中溶液不足200ml时,停止蒸发,快速冷却,可迅速得到大量白色结晶,抽滤,可得到白色晶体,然后将晶体置于60℃~70℃的烘箱中进行干燥,即得成品。

2 结果与讨论

2.1 产品分析与表征

2.1.1 熔点测定仪分析

用熔点测定仪测定产品熔点为136.5℃,与文献数据135℃~137℃基本一致[6]。

2.1.2 HPLC检测(峰面积法)

液相色谱的条件如下:反向C18色谱柱;流动相中v(CH3OH):v(H2O)=90∶10;流量0.7mL/min;L-7420型UV-Vis检测器;L-7100型泵,紫外检测波长:254nm。

2.1.3 IR检测

如图所示:3034cm-1为苯环上(=C-H)碳氢伸缩振动峰,且1520cm-1与1601cm-1处也有吸收,证明了该化合物中苯环的存在;2954cm-1与2870cm-1分别为甲基(CH3-)的碳氢不对称和对称伸缩振动峰;3652cm-1为苯酚羟基(-OH)的伸缩振动吸收峰;1396cm-1为苯酚羟基(-OH)的弯曲吸收振动峰;1289cm-1与1230cm-1为苯环与羟基的(C-O)伸缩振动吸收峰;804cm-1处的吸收峰说明了该芳香化合物是1,2,4-取代。

2.2 温度对反应时间及产率的影响

在其他反应及操作条件不变的情况下(1.5g活性炭,1.2gFeCl36H2O,0.3g AlCl36H2O,0.1mol邻硝基对甲基苯酚,45ml80%的水合肼),改变反应的温度,每隔1h对产品取样,并进行HPLC检测分析,结果如图(产率结果由液相色谱检测计算而得)。

由于反应体系中的溶剂主要是乙醇和部分的水,反应温度不可能达到太高,所以最高温度我们选择了80℃。由图可知,反应温度越高,则达到相同产率时所需的时间越短;在相同的反应时间条件下,温度越高产率越高,而75℃和80℃的曲线比较接近,故从经济角度出发,我们选择的最佳温度为75℃。

2.3 反应时间对产率的影响

由图中各曲线可知,反应时间为5h左右,可以达到一个比较高的产率。虽然5h以后的产率也有增长,但增幅较小,故选择最佳反应时间为5h。

2.4 水合肼用量对反应的影响

我们通过改变水合肼的用量(n原料:n水合肼),在反应时间为5h的情况下检测其对产率的影响:

邻硝基对甲基苯酚与水合肼反应的理论物质量的比为1:1.5。通过实验我们发现水合肼用量较少时,产率很低,而随着加入量的增大,产率逐渐增高,当二者物质量的比为1:8时,产率可以高达95.8%,若再加大水合肼的用量,产率基本不变,分析原因可能是部分释放出来的氢气没有参与反应而损失掉了。故我们选择n原料:n水合肼=1:8,即对应0.1mol邻硝基苯酚应加入45ml的80%水合肼。

2.5 催化剂用量及配比(质量比)及对反应的影响

其他反应条件不变,分别改变催化剂的总质量及配比来检测对反应最终产率的影响,结果如下。

由图可知,Al3+在此反应中起到了助催化剂的作用,单纯的使用FeCl36H2O作为催化剂或者催化剂中FeCl36H2O所占比重很大时,最终的产率并不是很理想,而且AlCl36H2O加的过多,最终产率也不是很高,故选择FeCl36H2O和AlCl36H2O的质量比为41,催化剂总质量为1.5g。

3 结论

以活性炭为载体的FeCl36H2O-AlCl36H2O复合催化剂水合肼法制备邻氨基对甲基苯酚工艺具有清洁、工艺简单、污染小等特点。由于催化剂价格便宜,易于制备,而且在整个还原及后处理的过程中,水合肼不还原硝基物分子中的氰基和偶氮基,因此产率较高,选择性好,尤其适合多用途间歇式常压反应器内小批量精细化工产品的生产,具有很好的工业应用价值。

摘要：研究了以活性炭为载体的FeCl3·6H2O-AlCl3·6H2O复合催化剂水合肼法制备邻氨基对甲基苯酚。在以乙醇为溶剂的前提下,得出了最佳的反应条件:邻硝基对甲基苯酚15.3g(0.1mol),温度75℃,反应时间为5h,80%水合肼用量为n原料:n水合肼=1:8,催化剂:1.5g活性炭,m(FeCl3·6H2O):m(AlCl3·6H2O)=4:1(总质量1.5g),邻氨基对甲基苯酚的产率大于95%(HPLC)。

关键词：Fe/Al复合催化剂,水合肼,邻硝基对甲基苯酚,邻氨基对甲基苯酚

参考文献

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[2]王玉国,王少昆.邻氨基对甲基苯酚的电解合成[J].河北化工,1998,3:6-7.

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[4]周莹,叶翠层,李水芳.Fe-Al复合催化合成对氯苯胺[J].精细化工中间体,2004,34(6):5-59.

[5]黄培,王朋朋,黄丽萍.硝基化合物还原制备芳香胺工艺研究进展[J].南京工业大学学报,2007,29,(4):103.