流行病毒A型范文

流行病毒A型范文（精选8篇）

流行病毒A型 第1篇

1 材料与方法

1.1 临床发病情况调查

于2010~2014年间, 对本中心门出诊中已经临床检查和实验室诊断确认为PCV2感染的29个病例进行统计和分析, 了解PCV2和其它病原的混合感染情况, 同时通过临床追溯调查, 了解不同季节、不同场户的发病情况, 以及发病猪的临床表现形式。

1.2 检测方法

PCV-2a与PCV-2b荧光PCR分型试剂盒, 由北京匹基公司提供。

1.3 PCV-2 ORF2核苷酸序列的测定与分析

对29个临床PCV-2阳性内脏样本提取PCV2 DNA, 扩增ORF2片断, 并经克隆和鉴定。取上述经双酶切鉴定的阳性重组质粒送上海桑尼生物技术有限公司进行测序, 利用DNAS-TAR软件将测序结果同已发表的PCV-2 ORF2的核苷酸序列进行比较, 确定各PCV-2分离株与已发表的PCV-2 ORF2核苷酸序列的同源性。

2 结果

2.1 临床发病情况调查结果

通过对29个PCV2感染病例的统计和分析, 发病场户构成比例中, 规模猪场占62.1%, 专业养猪户占37.9%, 发病猪群均为未免疫或疏忽漏防;发现PCV2引发的临床病症中, PMWS比例最高, 占58.6%;PDNS次之, 占24.1%, 其它病症占17.2%;经对不同季节发病情况的统计, 冬季发病比例最高, 达44.8%, 夏季次之, 占27.6%, 春季和秋季则分别占17.2%和10.4%。具体结果见表1、表2和表3。

2.2 PCV2和其它病原的混合感染调查结果

经对29个PCV2感染病例的病原学检测结果分析, 在PCV-2阳性样本中, 与其它病毒混合感染率平均达到60.2%, 与细菌混合感染率达到61.2%, 病毒与细菌同时混合感染率为41.8%, 平均混合感染率达到53.1%;其中病毒以PRRSV为主, 细菌以大肠杆菌为主, 其它致病菌包括沙门氏菌、链球菌及副猪嗜血杆菌等, 同时寄生虫和支原体也有少量混合感染, 从而共同构成上海地区猪群疫病的感染现状。

%

2.3 分离株核苷酸同源性分析

将29株阳性样本的ORF2序列与已知序列进行比对, 获得核苷酸序列的同源性。比对结果表明, 29株阳性样本ORF2序列间同源性在91.0%~100%, 与5株已知毒株的同源性在89.6%~99.1%, 序列较为保守。

2.4 系统发育树分析

将获得的PCV-2 ORF2基因核苷酸序列同已知的核苷酸序列绘制系统进化树。结果表明, 其中2株属于PCV-2a亚型, 占6.9%;其余27株属于PCV-2b亚型, 占93.1%, 且绝大多数PCV-2b亚型的毒株同源性关系较近, 呈地方流行性。

3 小结和讨论

3.1 由于PCV-2单独存在于猪体时, 并不能造成猪体或猪群的严重疾病和高死亡率, 所以国内猪场一般对它并不重视, 从而导致一些猪场疫情一直不稳定。PCV-2单独感染可出现轻微的病变, 但与其它病原混合感染后则致病力明显攀升, 同时PCV-2可以导致感染猪群处于免疫抑制状态, 造成猪群的抵抗能力下降以及其他疫病免疫抗体的下挫, 从而更易与其它病原发生混合感染或继发感染。2006年我国暴发猪“高热病”以来, 猪圆环病毒作为多种疾病的“帮凶”地位已经毫无疑问[1]。我们在PCV-2阳性样本中, 发现PCV2与其它病原平均混合感染率达到53.1%, 这与许多学者的研究结果具有吻合性。

3.2 PCV2可分成3个拓谱亚型, PCV2a为北美拓谱型, PCV2b为欧洲拓谱型, 这2型均分离自PMWS病猪, PCV2c则分离自上世纪80年代丹麦健康猪群。在1997年至2003年之间, PCV2a基因型病毒占主导地位, 而从2004年PMWS暴发之后, PCV2b毒株则变得越来越普遍。经对上海PCV2分离毒株的基因测序, 表明所测序的毒株之间的同源性在91.0%~1 0 0%, 与5株已公开发表毒株的同源性在89.6%~99.1%, 且绝大多数毒株的序列较为保守, 呈地方流行态势。通过基因进化树的分析, 29份阳性样本中PCV-2a检测到2株, 其余27株均为PCV-2b, 这与张建武[2]等和李文洁等[3]的调查结果具有一致性。研究表明PCV-2b在PCV-2感染中占绝大多数, 属于上海乃至全国范围内猪群PCV-2感染的优势毒株, 所以在PCV-2的疫苗免疫中, 应当首先选择PCV-2b亚型毒株作为疫苗毒株[4,5]。

3.3 猪群感染PCV2后可引起多种临床病症, 但以PMWS最为常见。临床上特征是感染率高, 但病死率较低, 一般为10%~30%, 并易于受环境应激因素促发, 其中热应激和蚊虫叮咬可促发PCV2感染, 所以在不同季节发病情况调查中, 夏季发病比例较高。对上海地区PCV2感染状况的调查结果也表明PMWS在临床病症中所占比例最高, PDNS次之, 同时也出现一定比例的PNP、PRDC和妊娠母猪流产等繁殖障碍病例。

3.4 近几年上海规模猪场生猪重大疫病防控态势良好, 与2型圆环病毒疫苗的推广使用密切相关, 临床病例数逐年下降。但猪2型圆环病毒病对尚未开展免疫的小型猪场和专业养猪户猪群的危害加深, 病猪出现消瘦、生长不良, 咳嗽气喘等症状, 虽然死亡率不高, 但生长性能降低, 同时引发其它疫病的混合或继发感染, 影响经济效益。因此应向养猪场户灌输积极免疫的理念。鉴于不同厂家的疫苗使用效果存在一定的差异, 应合理选用疫苗并注意临床观察。

摘要：为了解上海地区猪2型圆环病毒病的流行现状, 于20102014年间开展了流行病学调查和分离毒株的基因型分析, 结果表明发病场户构成比例中, 规模猪场占62.1%, 专业养猪户占37.9%;PCV2引发的临床病症中, PMWS比例最高, 占58.6%;PDNS次之, 占24.1%, 其它病症占17.2%;经对不同季节发病情况的统计, 冬季发病比例最高, 达44.8%, 夏季次之, 占27.6%, 春季和秋季则分别占17.2%和10.4%。经对29个PCV2感染病例的病原学检测结果分析, 平均混合感染率达到53.1%。经对病原学阳性样本的基因型分析, 以PCV-2b感染为主, 所占比例为93.1%;其次为PCV-2a, 占6.9%。

关键词：猪,2型圆环病毒,流行病学调查,基因型分析

参考文献

[1]吕艳丽, 杨汉春, 郭鑫.用PCR检测猪圆环病毒Ⅱ型.中国兽医学报, 2002 (06) :552-554.

[2]张建武, 庄金山, 刘长龙, 等.2007年中国部分地区猪圆环病毒2型分子流行病学分析.中国农业科学, 2009 (08) :325-333.

[3]李文洁, 李文涛, 严伟东, 等.中国部分地区猪圆环病毒2型的基因型分析.畜牧兽医学报, 2009 (09) :80-84.

[4]Horlen K P, Dritz S S, Nietfeld J C, et al.A field evaluation of mortality rate and growth performance in pigs vaccinated against porcine circovirus type 2.J Am Vet Med Assoc, 2008, 232 (06) :906-912.

流行病毒A型 第2篇

这是病毒4月14日左右出现的，中毒后所有EXE文件被感染，被这个病毒感染的EXE文件的创建日期是不会被修改的，但是程序的图标会变成默认的EXE文件图标，杀毒软件能查出，但不能恢复被感染的文件，只能删除感染文件，有重要数据被感染就很麻烦。推荐使用下面看雪论坛新出的修复工具。

加入远景晟地总版BBZ的分析

QUOTE:卡巴发现Virus.Win32.Alman.a新病毒

卡巴发现Virus.Win32.Alman.a病毒，无法清除，只能删除感染的文件。因为该病毒感染.exe程序执行文件，所以好多.exe程序执行文件将被删除。

建议大家将卡巴斯基的主动防御保护全部开启，特别是启用注册表防护和程序完整性保护。

此病毒每感染一个文件，病毒特征就会变一次，杀毒引擎想通过特征码查杀来修复被感染的文件，困难重重。因此，到目前为止，还没有发现哪个杀毒软件能够修复被virut感染的EXE，只能选择隔离。这样一来，中此病毒的系统，将会很惨，可能不得不备份文档后重装系统。

提醒用户及早升级防范virut病毒，如果不幸中招，可根据受损程度处理。如果系统EXE破坏严重，可以采用备份进行还原，没有备份的情况下，覆盖安装可以最大程度减少损失。实在不想麻烦，可以将机子停用个把星期的时间，然后升级病毒库，再查杀，说不定一切迎刃而解了。

这个病毒使用的加密引擎来自波兰，那个IRC服务器域名为 proxim.ircgalaxy.pl，貌似也是波兰的域名。

该病毒的其它行为：

感染后缀为：EXE和SCR的可执行文件：

如果文件名以下面的开始，则不感染

WINC

WCUN

WC32

PSTO

连接IRC服务器:

proxim.ircgalaxy.pl

加入频道:

#virtu

接收远程指令。

摘录：

估计我和你中了相同的病毒,附上我的处理方式供你参考

有问题的文件包括

1 windows 目录下的linkinfo.dll(33792 字节),正常的linkinfo.dll(8 字节)在windowssystem32目录下,该文件是病毒的感染与传播部分,一旦该文件启动之后,就会从网上下载apphelps.dll(有正常的apphelp.dl文件l,但不在该目录下) 到windowsapppatch目录,并注入explorer.exe,以及多种常见的网游客启端,并利用自带字典猜解局域网内所有机器的共享密码 (sb,估计是从熊猫那学来的,基本上不会成功),若成功则将病毒文件复制过去,并启动守感染程序(ins.exe,只从代码中看出,不过我没有发现这个程序)和守护服务riodrvs.sys(tmd,驱动),那像还会注入一些程序,没仔细看.

2 windowssystem32drivers下的riodrvs.sys,正常的是riodrv.sys,这个程序估计是感染部分exe文件(我的一些exe文件坏了,有些没坏,看不出规律),阻止反编译软件,令icesword,sms之类强力工具不能启动用的,真是强,不过还没有分析这个文件.

还有没有不正常的文件还有待进一步分析.

初步的解决方案:

下载xdelbox最新版,先删除hklmsystemcurrentcontrolsetservicesriodrv项,运行xdelbox 后,选中“抑制再生”与“驱动安全删除”选项,删除以上提到的三文件,重启删除即可,部分被破坏的程序好像不能用了,但至少大多数还好,等等吧,等这个病毒流行之后,下个专杀工具再来处理

linkinfo病毒初步解决方案

先讲初步的解决方案:

1) 首先在windowssystem32driversetchosts文件中添加以下几行

127.0.0.1 www.imrw0rldwide.com

127.0.0.1 pic.ruiwen.com

127.0.0.1 tj.imrw0rldwide.com

2)       (系统盘是ntfs格式者勿用,xdelbox据说对ntfs格式有问题 )

下载xdelbox 1.2, 给一地址,仅供参考 www.i170.com/attach/51fd704f-c0bd-41e7-b0e9-60673a888fd6

运行xdelbox,将windowssystem32driversriodrvs.sys,(有些机器上还有dkis6.sys,若有也加入) windowsapppatchapphelps.dll, windowslinkinfo.dll (这个一定要删) 加入到删除列表,选中“抑制再生”与“驱动安全删除”选项 , 重启删除.

3)       删除注册表中的删除hklmsystemcurrentcontrolsetservicesriodrvs项

我的机器经过这样处理之后就没有再复发了,虽然运行感染了的程序之后,hklmsystemcurrentcontrolsetservices riodrvs还可能出现,不过己经没有感染力了,被破坏的程序如果舍不得删除的话就留下等有专杀工具出来吧.还有一点说明就是,用 xdelbox1.2,主要是由于其抑制再生的功能可以阻止该病毒再次感染,很不错.

以上是剑盟一位高人的帖子,我在这里转过来,没有别的意思,百度比较容易搜到,我也是中了这个病毒的人,可怜啊,自认为自己还可以,结果和这病毒斗了两天才找到这个帖子.杀毒时注意最好断网,因为病毒会不断在指定的网址下载病毒.杀毒时最好先关闭卡巴斯基,然后再用下面的修复工具,可以免除重装系统和安装软件的麻烦.如果不幸卡巴斯基已经把感染的文件隔离了,就先把卡巴斯基的杀毒和保护功能关闭,然后在把每个染毒的文件还原,因为每个中毒的文件只是一个钥匙,不是炸弹.这时吧卡巴斯基关闭,打开修复工具,从C盘开始修复,知道把所有盘都修复一遍为止.

切记:一定要断网!如果EXE文件还原的不全,在修复后很可能导致很多文件无法运行.祝大家都能成功修复自己的系统吧

大家只要安装卡巴斯基,然后下载这作者的修复小工具就可以了,不但可以删除病毒还不用重装系统和安装软件.

下面是下载链接:download1.gbaopan.com/44bf8a759cc64e67b9473870ee5ff530.gbp?supplierID=2898001    这个链接需要注册,我也找不到别的了,大家将就吧.

www.tomdisk.com/pick.aspx?code=    提取码是:686648703

流行病毒A型 第3篇

1 材料

样品:无菌采集猪肺脏、脾脏、肾脏、淋巴结四种组织各194份。样品均来自于佛山科学技术学院动物医院, 为临床疑似病料。

仪器与试剂:高速冷冻离心机;ABI7500荧光PCR仪;生物安全柜;研钵;微量可调移液器;猪圆环病毒2型荧光RT-PCR检测试剂盒, 购自北京世纪元亨动物防疫技术有限公司;无RNA酶水;其他试剂均为分析纯。

2 方法

2.1样本前处理

每份组织分别从三个不同的位置取样约1 g, 用手术剪剪碎混匀后取0.05 g于研磨器中研磨, 加入1.5 m L生理盐水继续研磨, 待匀浆后转至1.5 m L灭菌离心管中, 8 000 r/min离心2 min, 取上清液100μL加于1.5 m L灭菌离心管中。

2.2 病毒RNA提取

1) 取已处理的样品、阴性对照和阳性对照, 分别加入裂解液600μL, 充分颠倒混匀, 室温下静置3~5 min。

2) 将液体吸入吸附柱中 (吸附柱要套上收集管, 吸取液体时尽量不要吸到悬浮杂质, 以免离心时堵塞吸附柱) , 13 000 r/min离心30 s。

3) 弃去收集管中液体, 加入600μL洗液, 然后于13 000 r/min离心30 s。

4) 重复步骤3) 。

5) 弃去收集管中液体, 13 000 r/min空柱离心2 min, 以除去残留的洗涤液。

6) 将吸附柱移入新的1.5 m L离心管中, 向柱中央加入洗脱液25~50μL, 室温静置1 min, 13 000 r/min离心30 s, 离心管中液体即为模板RNA。

2.3 PCR检测

μL

将以上配制的反应体系充分混匀, 然后分装于每个反应管中各18μL, 分别取2μL模板DNA加入相应反管中混匀并作好标记。在荧光PCR扩增仪上进行以下反应:95℃2 min;循环95℃5 s, 60℃35 s (收集荧光信号) , 共40次。

3 结果

3.1 不同地区PCV-2检测结果

阳性对照Ct值30并出现特定的扩增曲线, 阴性对照无Ct值并且无特定扩增曲线, 试验结果成立;被检样品Ct值3 0并出现特定的扩增曲线为PCV-2阳性;被检样品30

3.2 不同组织样本中PCV-2检测结果

将组织器官进行分类检测, 其结果见表2。

3.3 不同猪群PCV-2型检测结果

将采自不同猪群的样品进行检测, 结果见表3。

4 讨论

PCV-2主要侵害机体的免疫系统, 导致感染猪免疫抑制, 降低对其他病原体的抵抗力, 从而有利于其他病毒和细菌的继发感染, 使病猪的死亡率明显升高, 损失极为严重。曹正等[1]采用普通PCR的方法对江苏省规模化养殖场的疑似病例进行PCV-2病原监测, 其阳性率达到63.44%。吴瑗等人[2]对金华地区疑似病例进行PCV-2病原进行检测, 阳性率达到59.8%。本研究从佛山兽医科学技术学院动物医院采集临床组织样品, 用荧光PCR的方法对其进行检测, 发现阳性率高达97.9%。阳性率相对要高很多, 可能与所使用的方法有一定的关系, 因为荧光PCR的灵敏度要比普通PCR高很多。调查结果显示PCV-2病毒在广东省的感染率非常高, 无论是规模养殖场还是散养户, 都普遍存在该病毒的感染, 防治形势十分严峻。

PCV-2常存在于淋巴组织、肺脏、肝脏和肾脏等组织器管中。本研究采集临床病猪的淋巴结、肺脏、肝脏、脾脏等组织器官进行检测。从结果来看, 所有的组织中都能够检测到病原, 不能看出PCV-2最先感染哪个器官, 这可能与样品的来源有关。本研究的样品均采自佛山科学技术学院动物医院, 而送到动物医院解剖的病例多半是病的非常严重或即将死亡的, 此时病毒已经扩散至全身各个部位, 因此不能够看出其感染的先后顺序。

PCV-2的主要易感动物是猪, 各种年龄、不同性别的猪都可以感染, 但临床症状不尽相同。常见的PMWS主要发生在哺乳期和育成期, 病猪和带毒猪是本病的主要传染源。调查结果显示, 保育猪和育肥猪的感染率为100%, 哺乳猪的感染率为86.7%。仔猪在哺乳期时, 母源抗体水平较高, 能够在一定程度上保护仔猪不受病毒的感染。但随着母源抗体的消减, 仔猪就容易被病毒感染发病。因此做好免疫措施很重要。

养殖户对PCV-2病毒的认识不足, 不打疫苗是造成该病如此流行的重要因素。各级兽医主管部门和技术人员应当向养殖户普及PCV-D的知识, 使养殖户意识到该病毒的危害性, 从而自觉地做好该病的免疫工作, 这样才能减少该病的传播, 减少损失。

参考文献

[1]曹正, 季伟.江苏省规模化猪场猪圆环病毒2型感染的流行病学调查[J].畜牧与兽医, 2011, 43 (3) :85-88.

流行病毒A型 第4篇

A型流感病毒的致病力由多种因素决定, 其亚型众多, 极易发生变异, 且各亚型之间诱导的抗体不能相互交叉保护, 但核蛋白 (NP) 比较保守, 在病毒进化过程中变异率很低, 不同宿主分离株氨基酸差别不超过11%, 在流感病毒感染中起着重要作用, 文章对A型流感病毒核蛋白结构和功能方面的研究进展进行了简要综述, 以期为流感病毒发病机制、宿主特异性的研究以及流感的预防、诊治提供理论依据。

1 A型流感病毒核蛋白的结构

A型流感病毒核蛋白是由RNA第5节段基因编码的一种单体磷酸化多肽, 分子质量为56ku, 开放阅读框含1 494个核苷酸, 编码长度为498个氨基酸, 富含精氨酸、甘氨酸、丝氨酸及少量半胱氨酸残基。核蛋白与PB 1、PB 2、PA及RNA共同形成核糖核蛋白体 (RNP) 。电镜观察可发现核蛋白为卷曲“香蕉”样的棒状颗粒, 在一端常形成环状。核蛋白具有碱性特征, 可能含有2个结构域, 通过UV交换、荧光光谱、化学修饰和突变试验证明, 核蛋白上几个碱性氨基酸和芳香族氨基酸对核蛋白与RNA的结合起很重要作用, 核蛋白与RNA之间的相互作用是协调的, 每24个核酸与1个核蛋白相互作用, RNA缠绕在核蛋白单体周围

2006年, 陶怡芝等发现H 5N 1亚型禽流感病毒核蛋白有长的尾巴, 并绕成环形, 约含有30个氨基酸, 尾部环状区有1个微型蛋白结合结构域, 核蛋白以螺旋形式盘绕到双螺旋发夹结构上, 几个核蛋白结合形成1个类似建筑块的小环, 许多核蛋白小环一个接一个地呈隙缝状堆叠, 形成螺旋对称柱, 不同亚型的A型流感病毒尾部环状部几乎是相同的。

NgA K等[1]也研究了H 5N 1亚型禽流感病毒核蛋白的3, 3-A晶体结构, 揭示了连接部分 (区域397～401, 429～437) 的重要性, 可将核蛋白环状结构的尾部连接到被大量精氨酸包裹的分子残基凹槽上, 应用表面等离激元发现环状结构和富含精氨酸的凹槽含有大量对核蛋白结合RNA起重要作用的Arg174和Arg175。

在感染流感病毒的细胞中, 核蛋白常以核蛋白-核蛋白形式存在, 翻译后期核蛋白多聚体多数转变成寡聚体, 这是核蛋白在细胞内构像成熟的最后阶段。ProkudinaE N等发现A/Duck/Ukraine/63 (H 3N 8) 新合成的核蛋白单体存在链内二硫键, 随后二硫键减少或断裂, 这有助于寡聚体的稳定性和紧密性。

核蛋白至少含有3个不同的核定位信号 (NLS) , 一个为位于N末端3～13位氨基酸之间、非传统的NLS1, 另一个为位于198～216位氨基酸之间、传统的NLS2, NLS1、NLS2对核蛋白的核输入和核糖核蛋白体的形成起关键作用。MakotoO等[2]发现:消除核蛋白的NLS1会改变核蛋白的核定位功能, 使核蛋白优先定位于胞浆, 且影响其在vRNA转录中的活性;NLS2也会一定程度地限制核蛋白核转运功能, 但其主要作用在于vRNA转录和核蛋白的核内聚积。KethaK M等发现, 消除这2个核定位信号时核蛋白仍能定位于核内, 证实核蛋白上存在着第3种核定位信号。

2 A型流感病毒核蛋白的功能

核蛋白是病毒核衣壳蛋白的主要成分, 大约占病毒蛋白总量的30%, 除使病毒RNA形成核糖核蛋白体保护vRNA免受RNA酶的降解外, 在病毒基因转录、复制、装配、转运及确定病毒宿主特异性等方面也有重要作用。

2.1 在病毒增殖中的作用

核蛋白通过与病毒RNA、蛋白成分及被病毒感染细胞上的一些大分子间作用影响病毒转录、复制、装配及转运功能。流感病毒核蛋白虽保守, 但在应用单克隆抗体分析时发现核蛋白亦可发生变异。核蛋白至少有3个互相重叠的抗原区, 其中1个区在流感病毒各株间均存在, 针对此区的单克隆抗体可抑制病毒RNA的转录, 说明此区与病毒转录有关。在RNA复制的过程中, 核蛋白寡聚体通过尾部环状结构插到邻近分子中, 其尾部柔软, 使得核蛋白形成松弛型聚合物, 同时也有单环的形式, 两者对核蛋白的功能都很重要, 松弛型尾部单一位点的突变会使核蛋白完全丧失寡聚体结构, 而RNA的结合位点正处于核蛋白寡聚体上。核蛋白与多聚酶、宿主细胞成分RAF-2p48间的相互作用能增强病毒RNA的合成。核蛋白也可以防止RNA合成中断, 有利于RNA链的延伸。

ZhirnovO P等[3]利用反向遗传学操作技术将人流感病毒A/WSN/33 (H 1N 1) 突变株与禽流感病毒核蛋白组成重组病毒, 应用点突变将核蛋白Asp16用Gly替代。结果发现:同野生自然状态下的病毒相比, 点突变后病毒的复制速度减慢, 而且突变病毒以野生病毒的方式在感染细胞一段时间后引起细胞凋亡, 证实了人A型流感病毒核蛋白的N末端第16位的Asp与病毒复制过程的调控有关。JamieL等利用反向遗传学操作技术构建了2株对鸡呈现不同致病性的重组H 5N 1亚型禽流感病毒, 单基因替换后发现核蛋白基因会影响重组病毒的复制, 同时还会影响特定宿主基因的表达。

LiZ等对核蛋白上保守的氨基酸序列进行突变, 应用反向遗传学操作技术试图拯救74株含突变氨基酸的核蛋白病毒, 结果只成功拯获了48株, 且其中有26株是不稳定的。该试验结果表明, 核蛋白上某些有代表性的氨基酸在病毒基因组转录或复制、核蛋白核定位、病毒RNA组装成完整病毒粒子的过程中起关键性作用, 其发生突变后可影响病毒的存活能力。

SemenovaN P等发现核蛋白成熟构像对于病毒进入细胞核是很重要的, 其为核转运所必须的, 因此对于病毒基因组的转录和复制也是必须的。

2.2 决定宿主特异性

流感病毒宿主广泛, 从禽类到哺乳动物有交叉感染现象存在, 这直接关系到公共卫生及人类的安全。A型流感病毒核蛋白以种形式存在, 一种是可以移入核内的磷酸化形式 (NP.56) , 另一种是一直留在细胞质内的非磷酸化形式 (NP.53) 。核蛋白的主要序列被磷酸化修饰, 丝氨酸是唯一磷酸化的残基, 核蛋白磷酸多肽模式是株特异的, 它的磷酸化取决于宿主细胞, 与流感病毒感染的宿主谱有关。

A型流感病毒核蛋白末端半胱天冬酶切割位点与病毒的来源相关, 因此可能也是决定病毒宿主范围的因素。ScholtissekN P等的研究表明, 人流感病毒不能直接跨越种属界限感染禽, 而有可能通过在猪体内的重配实现这种交叉感染, 而这种宿主特异性是由流感病毒核蛋白结构决定的。通过系统分析核蛋白基因结构发现, 所有的哺乳动物流感病毒都间接或直接源于禽流感病毒, 核蛋白结构变化在宿主的变化中起着决定性作用。ProkudinaE N等发现, 在感染细胞内A型流感病毒核蛋白形成寡聚体的能力与病毒的宿主来源有关。

RameixW M A等通过研究禽流感病毒在人细胞中多重复制分子机制的限制性因素证实, 禽流感病毒感染人细胞生长的限制性与感染细胞中低水平的核蛋白相关。

2.3 在诊断方面的研究

A型流感病毒核蛋白结构高度保守, 且不同分离株核蛋白存在共同的B细胞表位, 针对此表位的单克隆抗体具有型特异性。YangM等制备了2株抗A型流感病毒核蛋白的单克隆抗体F26-9和F28-73, 可以快速精确地诊断流感病毒。

BaoY H等分析了人A型流感病毒 (IFV-A) 的核蛋白基因, 研究了保守区域的抗原性, 试验制备的3种不同病毒粒子核蛋白的高效价多克隆抗体可以与IFV-A 3和IFV-A 1发生交叉反应, 为A型流感病毒感染的早期检测和亚型分析奠定了基础。

WuR等表达了H 9N 2亚型禽流感病毒核蛋白, 并建立了ELISA方法, 其敏感性高于琼脂扩散和血凝抑制试验, 可用于流感病毒血清学的快速诊断, 尤其适合于流感病毒抗体的检测。

2.4 在免疫方面的研究

针对A型流感病毒保守的核蛋白序列研制出的疫苗可以同时预防多种血清亚型, 因此研究核蛋白免疫学功能可为解决流感的交叉保护问题及新型流感疫苗的研制奠定基础。

2.4.1 在细胞免疫中的作用

在流感病毒核蛋白核酸疫苗研究中发现, 外源蛋白进入机体后不光与MHCⅡ结合递呈给CD4+T细胞, 也能与MHCⅠ结合递呈给CD8+T细胞, 从而激活细胞免疫, 在一定程度上可超越病毒亚型限制而引起交叉免疫反应。

MbawuikeIN等[4]用A/Taiwan/1/86 (H 1N 1) 病毒感染或先用A/PR/8/34 (H 1N 1) 制备的核蛋白DNA疫苗免疫再以A/HongKong/68 (H 3N 2) 病毒感染Balb/c小鼠, 于小鼠脾细胞中获取流感病毒核蛋白特定的CD8+细胞毒T淋巴细胞, 之后体外接触核蛋白重组痘疫苗, 高纯度的CD8+T细胞能将感染了A/HongKong/68 (H 3N 2) 病毒的P815靶细胞上的病毒清除掉, 而CD8-T细胞不具有细胞毒T淋巴细胞的活性。将纯化的CD8+T细胞和CD8-T细胞经静脉接种注射给4h前以A/HongKong/68 (H 3N 2) 病毒攻毒的裸鼠, 结果采用转移性核蛋白重组痘疫苗诱导的CD8+T细胞可显著降低鼻腔内的病毒效价, 证实核蛋白诱导的特异性CD8+T细胞具有清除上呼吸道黏膜表面流感病毒的作用, 并且有助于促进病毒感染后的恢复, 以及增强预防流感病毒的功能。

VignuzziM等利用塞姆利基森林病毒 (SFV) 的RNA及A型流感病毒核蛋白构建的RNA疫苗免疫C 57BL/6小鼠, 不但能诱导产生抗体, 而且还产生了针对H-2D-b表位NP366的细胞毒T淋巴细胞反应, 该RNA疫苗保护效力类似DNA疫苗的效果。

OhbaK等对核蛋白N末端进行突变制备DNA疫苗, 可以有效定位于细胞质内, 具有很好的保护力并且在异型之间可引起交叉反应, 免疫小鼠后突变毒较亲本毒的免疫效价高1.5～2.0倍。

王群等构建的真核表达质粒pCAGGS-NP能在原代鸡胚成纤维细胞中瞬时表达, 免疫SPF鸡能产生针对核蛋白的特异性血清抗体, 证明重组表达质粒不仅能够正确表达核蛋白, 具有良好的免疫原性, 且具有良好的种间交叉反应性, 不受流感病毒亚型的影响, 为新型、广谱流感病毒疫苗的研制指明了新的研究方向。

2.4.2 免疫逃逸

近年研究人员发现, 某些A型流感病毒核蛋白的细胞毒T淋巴细胞表位有氨基酸序列的变化。一个是位于核蛋白第384位氨基酸的突变, 它是HLA-B*2705限制性抗原肽NP383-391 (SRYWAIRTR) 和HLA-B*0801限制性抗原肽NP380-388 (ELRSRYWAI) 的锚定残基。VoetenJT和KashiwagiT分别从分离的禽流感病毒中发现了R 384G突变。BerkhoffE G等利用定点突变构建重组病毒, 发现R 384G突变可明显减弱细胞毒T淋巴细胞的特异性反应。RimmelzwaanGF等利用自然突变的流感病毒株也证明, 核蛋白的R 384G突变能破坏细胞毒T淋巴细胞的特异性识别。另一个突变位置在HLA-B*3501限制性抗原肽NP418-426, 变异主要出现在非锚定残基上。这些位点的突变使得流感病毒出现了免疫逃逸现象。RimmelzwaanGF等通过对流感病毒基因库的序列分析发现, 许多流感病毒变异株伴随着R 384G突变及一些共突变。推测病毒在产生突变逃避细胞毒T淋巴细胞免疫的同时, 还需要其他位置的共同突变以克服其功能的局限性。

2.4.3 在抗病毒方面的研究

MukhtarM M等应用A型流感病毒核蛋白作为研究抗病毒疗法的靶蛋白, 在酵母抗原-抗体双杂交系统中以核蛋白作为诱饵筛选细胞内人单链抗体的cDNA文库, 证实细胞内存在多种可以与核蛋白发生特定作用的抗体, 细胞内抗核蛋白抗体与核蛋白一样可以改变病毒在细胞内的分布, 进一步研究表明抗核蛋白的蛋白消除了cRNA、RNA及mRNA的聚集, 另外细胞内抗核蛋白的抗体通过阻塞核蛋白与PA、PB 1和PB 2作用显著抑制了A型流感病毒的转录和复制。

为了更有效地抑制流感病毒的转录与复制, 李瑶琛等选择在A型流感病毒复制过程中起重要作用的核蛋白编码基因中的高度保守序列作为siRNA靶序列, 将其克隆到表达载体中, 在狗肾传代细胞中观察诱导核蛋白基因沉寂情况, 结果表明核蛋白基因的siRNA质粒可明显抑制核蛋白基因的转录和表达, 并可有效抑制流感病毒在狗肾传代细胞中的增殖, 为预防与治疗流感寻找了一种有效的措施。

陶怡芝等发现H 5N 1亚型流感病毒核蛋白的长环形蛋白尾区的主要用途是潜入宿主细胞制造病毒, 只要核蛋白尾区弯曲部分30个氨基酸中有1个氨基酸残基突变就可以抑制核蛋白互相结合成圆柱状, 使之不能复制和感染细胞, 以阻碍病毒的扩散。研究表明A型流感病毒尾区环状部分几乎是相同的, 因此针对尾区的药物对多种亚型流感病毒都应该是高疗效的, 这个发现有助抑制流感病毒, 更为新的潜在治疗靶点提供了一个令人欣喜的依据。

参考文献

[1]NG A K, ZHANG H, TAN K.Structure of the influenza A virusH5N1 nucleoprotein:implications for RNA binding, oligomeriza-tion, and vaccine design[J].FASEB J, 2008, 22 (10) :3638-3647.

[2]MAKOTO O, KEN F, YUKIKO M, et al.Contributions of twonuclear localization signals ofinfluenza Avirusnucleoprotein to viralreplication[J].J Virol, 2007, 81 (1) 30-41.

[3]ZHIRNOV O P, VOROB'EVA I V, VESLOVSKIE M, et al.Keyrole of Asp16 in proteolysis of influenza ANP protein by caspases ininfected cells[J].Vopr Virusol, 2003, 48 (6) :8-14.

流行病毒A型 第5篇

1 资料与方法

1.1 一般资料

10例中女6例, 男4例, 年龄5～70岁。儿童 (4例) 和老人 (3例) 比重较大, 男女比例相当。10例患者中, 发烧、咳嗽1例, 浑身酸、痛流涕2例, 出汗、咳嗽、流涕1例, 发烧浑身酸痛2例, 发烧并出汗1例, 浑身酸痛兼出汗1例, 发烧、浑身酸痛、出汗、咳嗽流涕2例。两组在性别、年龄、病情等一般资料上比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。

1.2 方法

对照组5例进行常规检测, 采用血清学检测方法和病毒分离培养方法进行检测。试验组5例采用荧光定量RT-PCR方法进行检测。

1.3 统计学处理

采用SPSS 13.0统计学软件, 计数资料行χ2检验, P<0.05差异有统计学意义。

2 结果

试验组荧光定量RT-PCR方法检测时间短, 可在4h内完成所有步骤, 与对照组 (4～7d) 差异显著, 且具有特异性高、敏感性高的特点。对照组3例病情加重, 其中1例并发淋巴系统疾病2例并发肺部细菌感染, 继发性肺炎主要症状表现为持续发烧、头痛、呕吐、恶心、嗜睡、食欲不振、吐浓痰、痰液黏稠且黄、少数痰中带血、病人面色发黄。并发淋巴系统疾病的患者表现为淋巴结中大、身体浮肿、淋巴管扩张扭曲、局部淋巴管管壁及其周围组织发生炎症细胞浸润、浸润的细胞中有大量噬酸性粒细胞。试验组有2例并发肺部细菌感染, 症状表现为发烧、恶心、呕吐、嗜睡惊厥等, 未发现淋巴系统病变的病例。经检验, 肺部细菌感染的继发性肺炎主要是感染金黄色葡萄球菌、嗜血杆菌和肺炎链球菌。试验组治疗时间为1～3w, 对照组治疗时间为2～4w, 其中1例病情严重者6w。有1例因病情恶化转至上级医院。见附表。

3 讨论

A型流感病毒即人们常说的甲型流感病毒, 容易变异, 这已引起全球广泛的关注。根据其H和N抗原的不同, 又可分为多个亚型。其中H抗原有15个亚型, N抗原有8个亚型。众所周知的禽流感就为H5N1。人类容易感染和传播的主要有H1N1, H2N2, H3N2这三种亚型, 但也有报道人感染H5N1的病例。A型流感病毒易变异这一特性要求在检测中要尽快确定感染者感染的是哪种亚型, 以便对症治疗和采取相应的防治措施。

注:与对照组比较, *:P<0.05

荧光定量RT-PCR检测方法的灵敏度高, 并且可以有效的防止检测过程中样品的污染, 极大提高了检测的准确性。此外荧光定量RT-PCR检测方法灵活性也好, 可一次获得样品的多个遗传信息, 这就大大的缩短了检测时间, 为A型流感病毒患者的治疗创造了最佳治疗时间。

流行病毒A型 第6篇

1 材料与方法

1.1 样品来源

2015年9—11月份,从新疆阿克苏地区不同县市奶牛场采集牛血清共计1 110份,所有血清都有年龄记录。其中阿克苏市150份,阿瓦提县200份,新和县60份,温宿县120份,柯坪县140份,沙雅县80份,库车县250份,乌什县35份,拜城县75份。

1.2 主要试剂及仪器

戊型肝炎病毒Ig G抗体双抗原夹心法酶联免疫诊断试剂盒,购自北京万泰生物有限公司;High Pure Viral RNA Kit,购自Roche公司;Prime ScriptTMⅡFirststrand c DNA Synthesis Kit,购自宝生物工程(大连)有限公司;Hi Pure Gel Pure DNA Kits,购自Magen公司;p GEM-T载体,购自Promega公司;Trans 2K DNA Markers、Trans Taq-T DNA聚合酶,购自北京全式金生物技术有限公司;梯度PCR仪、全自动凝胶成像分析系统、高速离心机,购自德国Eppendorf公司。

1.3 抗体检测

按照戊型肝炎病毒Ig G抗体双抗原夹心法酶联免疫诊断试剂盒说明书检测血清样品中的戊型肝炎病毒抗体。在BIO-Te K酶标仪上读取OD450/620值,临界值=阴性对照孔OD平均值+0.12,样品OD值≥临界值者,为HEV抗体阳性;样品OD值<临界值者,为HEV抗体阴性。

1.4 引物的设计与合成

根据参考文献[16,17]报道,合成如下两套简并引物,引物由生工生物工程(上海)有限公司合成。第一套引物:外引物E1 5'-CTGTTTAAYCTTGCTGA-CAC-3',E5 5'-WGARAGCCAAAGCACATC-3';内引物E2 5'-GACAGAATTGATTTCGTCG-3',E4-15'-TGTTGGTTRTCATAATCCTG-3',E4-4 5'-TGCTGGTTATCGTAATCCTG-3'。

第二套引物:外引物P1 5'-AATGGWGTTG-GYGAGGTC-3',P2 5'-WGARAGCCAAAGCACAT-C-3';内引物P3 5'-TGTTTAATCTTGCTGATACG-3',P4 5'-TGYTGGTTRTCRTAATCCTG-3'。

1.5 病毒RNA提取及RT-n PCR扩增

取200μL血清样品按照High Pure Viral RNA Kit说明书提取病毒RNA,用P2引物(或第一套引物E5)按照Prime ScriptTMⅡFirst-strand c DNA Synthesis Kit说明书反转录合成c DNA。PCR反应体系:c DNA或第一轮PCR扩增产物2μL,10×PCR缓冲液2.5μL,10 mmol/L d NTPs 1μL,内引物或外引物(E4-1和E4-4各取0.5μL混合作为第一套引物的内侧下游引物)各1μL(10μmol/L),Taq DNA聚合酶(5 U)0.5μL,用dd H2O调整终体积至25μL。PCR反应条件:95℃预变性5 min;94℃变性30 s,53℃退火30 s,72℃延伸40 s,共35个循环;72℃再延伸10min。PCR反应结束后,取5μL反应产物在1%琼脂糖凝胶上电泳,紫外灯下观察结果。

2 结果与分析

2.1 不同地域血清HEV Ig G抗体检测

对新疆阿克苏地区8县1市共计1 110份奶牛血清进行HEV Ig G抗体检测,其中阿瓦提县的抗体阳性率最高,达12.50%;拜城县的抗体阳性率最低,为4.00%。血清来源及HEV Ig G抗体检测结果见表1。

2.2 不同年龄奶牛抗HEV Ig G抗体检测

将1 110份检测血清按照年龄分为2岁以下、2~4岁和4岁以上三个年龄组,比较不同年龄组HEV感染率的差异,χ2检验结果显示,不同年龄组的阳性率差异显著(P<0.05),见表2。

2.3 HEV RNA RT-PCR检测

通过对全部1 110份血清样品进行HEV RNA检测,结果没有扩增出目的条带。

3 结论与讨论

戊型肝炎为一种新型人兽共患病,目前已有多种动物感染HEV的报道,并且在鸡[18]、鼠[19]、野猪[20]、雪貂[21]、蝙蝠[22]和鳟鱼[23]等动物中鉴定出HEV的变种。新疆阿克苏地区经济水平相对落后,畜牧业养殖的机械化程度普遍较低,奶牛是当地与人们生活密切接触的动物之一,本研究对从新疆阿克苏地区采集的1 110份奶牛血清进行HEV Ig G检测,结果表明,所测血清总的抗体阳性率为7.03%(78/1 110),当地奶牛已经存在HEV感染。为了进一步了解当地奶牛HEV感染的情况及流行特点,本研究将全部检测血清按照年龄不同分为4岁以上、2~4岁和2岁以下三个检测组,其抗体阳性率依次为18.82%(32/170)、5.13%(40/780)、3.75%(6/160),抗体阳性率与年龄呈正相关,且不同年龄组的阳性率差异显著(P<0.05),估计与随着年龄增大接触感染HEV的概率增加有关,这与T.Masaharu等[24]报道的日本大多数猪感染HEV与年龄呈正相关的结论一致。研究表明,HEV在粪便、肝脏和淋巴结中含量较高,且具有明显的季节性,夏秋季明显高于冬春季[25],本研究采用RT-n PCR对所有血清样品进行HEV RNA检测,结果未能扩增出对应的目的条带,其原因可能与样品收集的时间有关。

流行病毒A型 第7篇

1 资料与方法

1.1 资料

病毒性肝炎报告数据来源于我市法定传染病报告系统收集的资料。病毒性肝炎分型由具备资格的二级以上医疗机构的实验室进行。操作严格按相应说明书进行。

1.2 统计学方法

采用SPSS17.0软件进行统计学处理, 计数比较采用χ2检验, 以P<0.05为有统计学意义。

2 结果

2.1 年度分布

2008年、2009年、2010年、2011年、2012年戊型病毒性肝炎在同期报告病毒性肝炎的占比分别为8.03%、8.51%、8.67%、8.67%、9.19%, 呈逐年上升趋势。见表1。

2.2 地区分布

除海永乡外, 其他22个乡镇均有散发病例出现, 其中海门、德胜、王浩、包场等4个镇分布较多, 报告例数分别为67、24、22、22例。报告病例数最少为江心沙3例。

2.3 人群分布

5年内戊型病毒性肝炎的报告病例中, 男女之比为4.97∶1, 男性明显高于女性, 与文献报道一致[2]。按年龄组划分, 以30~50岁青壮年组发病最高。也与其他文献报道基本一致[3]。见表2。

2.4 季节分布

戊型病毒性肝炎在全年各月均有发生, 但是以11月下旬到第二年5月上旬发病率比较高, 与其他文献报道的发病季节性基本吻合[4]。见表3。

2.5 职业分布

戊型病毒性肝炎在商服人员及农民中检出率最高, 分别为10.39%与9.47%, 与其他职业相比较, 在统计学上具有显著性意义 (χ2=21.121, P<0.05) 。见表4。

3 讨论

戊型病毒性肝炎是一种近年来比较常见的消化道传染病, 传播途径为主要是粪、口传播, 也可以经水、食品和密切接触等途径直接传播, 在急性发病的患者之间也能够相互传播[5]。近年来戊型病毒性肝炎报告有逐渐上升趋势, 应引起必要的重视。

我市海门等三个镇戊型病毒性肝炎报告率相对较高, 与这些地区公共娱乐场所较多, 一些乡镇临近黄海, 附近居民又喜食生猛海鲜等饮食习惯和卫生习惯有关, 应加强餐饮业、公共服务场所的卫生管理, 教育沿海居民改变生食海鲜的饮食习惯。

戊型病毒性肝炎报告男性高于女性, 30~50岁年龄组发病率最高, 与青壮年男性更多的参与公共聚餐和娱乐等有关。所以应加强对这类人群的健康教育, 在外进餐尽量选择卫生消毒条件好的餐馆, 注意使用消毒餐具, 注意分餐制。

戊型病毒性肝炎在11月下旬到第二年5月份为高发季节, 与冬春季气温等条件适合戊肝病毒的繁殖和播散有关。另外, 商服人员、农民中戊型病毒性肝炎报告病例较多, 应针对这一特点, 该在高发季节前加强公共场所、商业场所的疫情监测, 加强从业人员相关传染病防治知识的培训, 定期对商业从业人员及学校进行健康体检。在农村应该重点监控生活饮用水以及食品的卫生情况, 对人畜粪便进行无害化处理, 减少农民的发病率。

防治戊型病毒性肝炎流行, 还需加强戊型病毒性肝炎的疫情的监测, 建立有效的预警系统, 提高预警能力。

参考文献

[1]江永珍, 鲁健, 张丽萍.四川地区部分人群和与人接触密切的家畜禽戊型肝炎病毒感染的调查及基因分型的研究[J].中华实验和临床病毒学杂志, 2008, 22 (6) :468-474.

[2]庄辉.我国非甲非乙型肝炎研究进展[J].中国公共卫生杂志, 1996, 12 (5) :56.

[3]劳向前, 邵瑞太, 王若涛.戊型肝炎危害状况研究进展[J].中国公共卫生, 2002, 18 (2) :243-244.

[4]穆卫明, 张宏.苏州市甲、戊型病毒性肝炎流行病特征比较分析[J].实用预防医学, 2003, 10 (5) :689-690.

流行病毒A型 第8篇

关键词：猪流行性腹泻病毒,猪圆环病毒2型,猪繁殖与呼吸综合征病毒

引起猪腹泻疾的病因很多，其中猪流行性腹泻 (PED) 和猪传染性胃肠炎 (TGE) 引起的经济损失较为严重。猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒 (PEDV) 引起的一种猪的急性肠道感染传染病，主要表现为发热、厌食、呕吐、腹泻以及脱水等症状，各年龄段的猪对本病均易感染，其中对哺乳仔猪危害最严重，致死率高[2];猪传染性胃肠炎是由猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV) 引起的猪的一种高度接触性传染病。

现今规模化猪场中多病原体混合感染越发普遍，据李春花等调查研究发现断奶前仔猪感染猪圆环病毒2型能够显著影响PEDV所引起的临床症状[4]，因此在诊断猪腹泻疾病的同时应注意诊断其他病原体的感染，才能更好的防治本病。本次检测通过的TGEV和PEDV多重RT-PCR方法对贵阳市某猪场疑似感染TGE或PED的病料进行了病毒核酸检测，并同时用已建立的猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CFSV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重PCR方法对其进行检测，确诊该猪场为PEDV、PCV2和PRRSV的混合感染，现将结果报道如下。

1 发病情况和临诊症状

贵州省都匀市某猪场有存栏母猪约580头、总存栏猪3800多头。自2013年3月以来，大量仔猪4日龄左右出现水样腹泻，其中个别仔猪有呕吐症状，仔猪死亡率高达60%，常单窝整窝发病;母猪正常。

2 解剖病理变化

解剖后病理变化主见于肺脏、肾脏、肠道。其中肺脏主要呈现不同程度的间质性肺炎，肺表面可见明显的出血斑、部分肺组织发生实变;肾脏可见出血斑或密布点状出血，且失去原有形态而呈凹凸不规则状;胃内有大量未消化的凝乳块，十二指肠及空肠胀气、壁变薄呈透明状，肠系膜充血，肠系膜及腹股沟淋巴结肿大、出血呈深褐色。

3 实验室PCR诊断

应用建立的TGEV和PEDV多重RT-PCR以及PRV、PCV2、HCV和PRRSV的多重PCR检测技术，对送检病料进行快速检测。在TGEV和PEDV多重RT-PCR扩增出了669bp左右大小的特异性条带。与所预期的PEDV目的条带大小相符，无TGEV的相应条带;在PRV、PCV2、HCV和PRRSV的多重PCR扩增出了353bp和603bp左右大小的特异性条带，与所预期的PCV2和PRRSV的目的条带大小相符，无PRV和HCV的相应条带(见图1)。

4 防治措施

鉴于上述病毒性疫病使用抗生素和化学抗病毒药治疗基本无效，其防治重在饲养管理、疫苗注射、和增强猪自身免疫力等方面。

全场加强隔离和消毒，对外来车辆和人员进行严格消毒，防止交叉污染，对猪群的粪便应加强管理，可进行生物热发酵消毒，减少病毒传播，切断传播途径。同时，应注意加强猪舍的保温措施，保持猪舍干燥，可减少该病的发生。

注:1.PRV、PCV2、HCV和PRRSV的多重PCR电泳结果;M:DL 2000 Marker;2.TGEV和PEDV多重RT-PCR电泳结果。

提供标准的的配合饲料，确保各阶段年龄生长猪的营养需要，从而使猪体免疫系统正常，能够有利于猪体抵抗外来病原体的感染。因此，在该猪场饮水中加入补液盐和电解多维，以防仔猪脱水衰竭;同时，可加入长效土霉素或氟哌酸，以防止继发细菌感染。严禁饲喂发霉变质的饲料，饲料中的霉菌毒素是引发猪皮炎与肾炎综合征的主要原因之一[1]。

该猪场全场紧急接种猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻二联弱毒苗。母猪应加强PRRSV、PCV2等疫苗的免疫接种，同时注意监测疫苗免疫效果。

5 小结

结合临床症状、病料剖解及病原学检测结果，综合分析认为送检仔猪可能系因其在母体内已感染PRRSV、PCV2，致使肺脏、肾脏病变，出生后感染PEDV野毒，致使原本亚健康状态的仔猪经2～3d潜伏感染后，在4日龄左右出现严重腹泻，在共病因的作用下导致死亡率极高。

随着规模化猪场的发展，密集型饲养方式及猪群的跨区域流通导致猪群之间接触的几率增大，加快了疾病的传播，导致患病猪群出现混合感染现象。因此，在疫病的核酸诊断领域之中，多重PCR具有广泛深入的研究及应用，它具有特异性强、灵敏度高、检测时间短、成本低等优点[2]，而且同时能诊断多种病原，不仅减少了检测的经济成本，而且能够缩短检测的时间，为猪场的防控争取宝贵的时间。

参考文献

[1]王东方, 崔保安, 陈红英, 等.猪圆环病毒病的PCR诊断与防制[J].中国畜牧兽医, 2008 (1) :90-91.