抗体保护范文

抗体保护范文（精选9篇）

抗体保护 第1篇

1 材料和方法

1.1 菌株和试验动物

嗜水气单胞菌HZ-07株, 浙江大学动物科学学院微生物实验室从患病棘胸蛙中分离、鉴定并保存;健康棘胸蛙, 由杭州某棘胸蛙养殖场提供, 每只约重量150 g, 室内暂养1周, 证实健康无病后再用于试验;健康蛋鸡20只, 笼养, 常规喂食, 饮水, 购自杭州市蛋鸡试验场。

1.2 嗜水气单胞菌疫苗的制备

将5μL嗜水气单胞菌HZ-07株过夜培养液接种于5 m L脑心浸液培养基 (BHI) 中, 于37℃培养24h;然后取100μL均匀涂布于BHI固体培养基上, 于37℃培养24 h;用无菌生理盐水洗下菌苔, 稀释至细菌数为1109/m L;然后加入终浓度为0.3%的甲醛溶液, 于37℃灭活48 h, 无菌检验合格。将灭活后的菌液与适量蜂胶佐剂混合乳化, 即得到嗜水气单胞菌蜂胶灭活疫苗。

1.3 蛋鸡的免疫

选择健康蛋鸡20只, 将制成的嗜水气单胞菌蜂胶灭活疫苗分3次给蛋鸡进行胸肌多点注射免疫。首免时每只蛋鸡分4点注射, 每点0.2 m L;首免后第7天进行二次免疫, 分点注射疫苗, 1.5 m L/只;5 d后进行强化免疫, 胸肌多点注射疫苗, 1.5 m L/只。

1.4 卵黄抗体的制备及效价的测定

从每天收集的蛋中随机选取1枚, 用自来水洗去表面污物, 用75%乙醇对其表面消毒后放到无菌室晾干;在无菌条件下打开蛋壳, 取出蛋黄倒入已灭菌的容器中, 搅拌均匀;采用水稀释法分离蛋黄, 将蛋黄用无菌水稀释10倍后于4℃过夜;10 000 r/min离心30 min, 所得上清液即为含特异性卵黄抗体的水溶性组分 (WSF) 。卵黄抗体的纯化采用硫酸铵沉淀法, 并采用微量凝集法测定卵黄抗体效价[6]。

1.5 人工感染保护试验

取健康棘胸蛙24只, 随机分为4组, 每组6只。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组为试验组, Ⅳ组为对照组。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别腹腔注射浓度为1.698 mg/m L的卵黄抗体0.2, 0.5, 0.8 m L, Ⅳ组 (对照组) 腹腔注射0.5 m L无菌生理盐水。

攻毒嗜水气单胞菌, 经活化后接种于固体培养基中, 30℃培养24 h;用无菌生理盐水洗下菌落, 制成悬浮液, 活菌数约为1108/m L。试验组棘胸蛙每只腹腔注射0.5 m L菌液, 对照组腹腔注射0.5 m L无菌生理盐水。通过预试验发现, 人工感染后棘胸蛙的死亡多发生于注射后1~6 d, 观察免疫7 d内各组棘胸蛙的死亡情况。

1.6 卵黄抗体的治疗试验

取健康棘胸蛙12只, 分别注射1108/m L的嗜水气单胞菌菌液0.5 m L, 待全部发病后, 每只棘胸蛙分别注射上述人工保护试验确定的最佳保护剂量的卵黄抗体, 观察7 d, 记录棘胸蛙每天的健康状况及存活情况。

2 结果

2.1 卵黄抗体效价的测定结果

采用微量凝集法测定卵黄抗体的效价, 结果见图1。

由图1可知:在二次免疫后, 抗体呈上升趋势, 在第7天达到一个小高峰, 效价达1∶32, 并且持续5 d左右;在第12天进行强化免疫时抗体效价下降至1∶16。之后, 抗体效价一直处于上升趋势, 在注射疫苗25 d后抗体效价达到高峰, 并在较长时间内维持在1∶256这个水平。

2.2 纯化卵黄抗体蛋白浓度的测定结果

应用分光光度计对经过硫酸铵沉淀法纯化的卵黄抗体蛋白进行蛋白浓度测定。经计算得到蛋白浓度为1.698 mg/m L。

2.3 人工感染保护试验结果

不同剂量卵黄抗体的保护率见表1。

由表1可知:注射0.2 m L和0.5 m L卵黄抗体后, 发病棘胸蛙保护率分别为0和33.3%;注射0.8 m L卵黄抗体的棘胸蛙全部存活。说明注射0.8 m L卵黄抗体可以较好达到防治嗜水气单胞菌的效果。

2.4 卵黄抗体的治疗试验结果

对12只健康棘胸蛙进行嗜水气单胞菌攻毒, 发病后对其注射0.8 m L卵黄抗体, 观察7 d, 棘胸蛙的健康及存活状况见表2。

12只棘胸蛙在注射0.8 m L卵黄抗体后, 有1只死亡, 其余全部存活, 治愈率达到91.67% (11/12) 。3讨论

在水产养殖方面, 致病性嗜水气单胞菌引起的危害日益突出, 寻找防治嗜水气单胞菌病的新办法已迫在眉睫。卵黄抗体被广泛应用于疾病的紧急预防和治疗, 但大多数使用的是粗制卵黄液, 其中含有大量脂类及杂蛋白, 存在注射困难、吸收不良、过敏反应、保存期短和运输不便等缺点。因此, 选择适当方法除去卵黄中的脂类, 并进行卵黄抗体纯化显得很重要。目前, 纯化抗体的方法主要有盐析法、乙醇和聚乙二醇沉淀法[7,8]、疏水层析法[9]和辛酸沉淀法[10]等, 盐析法虽然分离率不高, 但适用于大量生产, 而且价格便宜, 采用水溶法可使抗体尽可能多留在水相中, 去除沉淀后再用盐析法纯化浓缩, 最终可得到高纯度的Ig Y。本试验利用水稀释法结合硫酸铵沉淀法提纯卵黄抗体, 进行棘胸蛙红腿病的预防和治疗试验, 结果表明, 经纯化的卵黄抗体效价能够达到卵黄抗体的保护效价, 特异性卵黄抗体对嗜水气单胞菌病的预防和治疗均具有良好的效果。另外, 用以蜂胶为佐剂制备的嗜水气单胞菌灭活苗免疫蛋鸡, 在免疫后第7天卵黄抗体效价达到1∶32, 免疫后25天即达到1∶256, 并且较长时间保持此效价, 而用油乳剂制备的嗜水气单胞菌灭活苗产生抗体的时间慢, 到29天抗体效价才达到1∶16以上[11], 说明蜂胶是制备卵黄抗体的一种较好佐剂。

参考文献

[1]李贵雄.石蛙常见病害的防治方法[J].科学养鱼, 2004 (5) :45-46.

[2]王刚, 吕殿红.卵黄抗体应用研究进展[J].动物医学进展, 2000, 23 (1) :16-18.

[3]朱香萍, 张再生, 刘宗柱.对虾鳗弧菌卵黄抗体 (IgY) 的制备及其对人工感染的保护研究[J].海洋科学, 2008, 32 (2) :26-28.

[4]ARASTEH N, AMINIRSSEHEI A H, YOUSIF A N.et al.Passive immunization of rainbow trout (oncorhynchus mykiss) with chicken egg yolk immunoglobulins (IgY) [J].Aquacuhure, 2004, 231:23-36.

[5]GUTIERREZ M A, MIYAZKI T, HAITRA H, et al.Protective properties of egg yolk lgY containing anti-edwardsiella tarta antibody against paracoln disease in the japanese eel, Anguilla japonica Temminc schlegel[J].J Fish Dis, 1993, 16 (2) :113-122.

[6]曹澍泽, 郭玉璞, 董国雄, 等.兽医微生物学及免疫学技术[M].北京:北京农业大学出版社, 1992.

[7]HATTA H, SIM J S, NAKAI S.Separation of phospholipids from egg yolk and recovery of water-soluble proteins[J].J Food Sci, 1988, 53 (2) :425-427.

[8]POISON A, COETZER T, KRUGER J, et al.Improvements in the isolation of IgY from the yolks of eggs laid by immunized hens[J].Immunol Invest, 1985, 14 (4) :323-327.

[9]HANSEN P, SCOBLE J A, HANSON B, et al.Isolation and purification of immunoglobulins from chicken egs using thiophilic interaction chromatography[J].J Immunol Met, 1998, 215 (1/2) :1-7.

[10]MCLAREN R D, PROSSER C G, GRIEVE R C, et al.The use of caprylic acid for the extraction of the immunoglobulin fraction from egg yolk of chickens immunised with ovine alpha-lactalbumind[J].J Immunol Met, 1994, 177 (1/2) :175-184.

“神探”抗核抗体 第2篇

小刘禁不住问：“我已化验了血，而且有两项异常，怎么还查不出什么病？”医生向她解释道：“血沉与C反应蛋白的异常可由多种疾病引起，要明确是哪一种疾病引起，还要做其他检查。”焦急万分的小刘终于来到上海某大医院求医，医生根据她的病史和症状，又给她作了抗核抗体的血液检查，结果有几项抗体呈阳性。经过分析，医生最后确诊小刘患的是硬皮病。

那么，什么是抗核抗体呢？研究发现，在一些自身免疫性疾病中（包括硬皮病、系统性红斑狼疮、混合性结缔组织病、干燥综合征、类风湿性关节炎、多发性肌炎和皮肌炎等），由于某种原因，患者体内细胞的细胞核极易被自身免疫系统误认为是“异己”物质而遭到攻击，结果就产生了针对细胞核成分（也称核抗原）的抗体。由于细胞核成分多而复杂，现已发现有20余种针对不同核抗原的抗体，这些抗体就统称为抗核抗体。

各种抗核抗体在不同自身免疫性疾病中会呈现不同的特点或组合。其中有的抗核抗体仅见于某一种疾病，医学上把具有这种性质的抗体叫作血清标记抗体。这种抗体一旦被检出，常对诊断起关键作用。有的抗核抗体虽可见于多种疾病，但在不同疾病中，或是其阳性率存在显著差异，或是抗体滴度高低悬殊，故这种抗体的检测对鉴别不同疾病也有重要价值。另外，如果有几种抗核抗体只在某一种疾病中同时存在（形成了特定的组合），这种抗体组合也叫抗核抗体谱，这种特定的组合也是诊断这种疾病的依据之一。

目前，最常用于检测抗核抗体的方法当属免疫荧光抗核抗体检测（IFANA）。这种方法检测的抗核抗体比较全面，可用于多种疾病的诊断。化验结果通常有以下几种情况：①阴性：未发现抗核抗体。②周边型阳性：常见于系统性红斑狼疮。③均质型阳性：主要见于系统性红斑狼疮，偶尔也可见于药物性狼疮、幼年型类风湿性关节炎等。④颗粒型阳性：可见于多种结缔组织病，包括系统性红斑狼疮、混合性结缔组织病、硬皮病、干燥综合征、多发性肌炎及皮肌炎等。⑤核仁型阳性：多见于硬皮病。⑥着丝点型阳性：仅见于硬皮病。

免疫荧光检测法对发现结缔组织病有较高的敏感性，但缺点是除个别几种病外，它不能“认出”究竟是哪一种结缔组织病。80年代，又出现了应用免疫印迹技术，能在一次化验检查中，同时完成对7种以上抗核抗体的检测和识别，而这些抗体大多是各种疾病的血清标记抗体，对疾病的诊断和鉴别诊断具有重要参考价值，常起到一锤定音的作用。

抗体保护 第3篇

1 材料和方法

1.1 材料

健康高产蛋鸡50只, 观察1周, 无发病及细菌感染。Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒强毒株和新型鸭病毒性肝炎病毒强毒株由山东鲁北兽医诊断中心实验室分离保存。DVH弱毒株属血清Ⅰ型, 为适应于鸡胚的符合疫苗标准的弱毒株;1日龄清洁鸭选自不含鸭肝炎母源抗体的鸭群。

1.2 DVH组织灭活疫苗的制备

取DVH弱毒株100倍稀释接种10日龄SPF鸡胚, 48 h死胚弃去, 观察6 d, 收集死胚及尿囊液, 用搅拌器做组织匀浆, 1∶3加入灭菌生理盐水, 无菌纱布过滤, 加入0.4%甲醛放37℃灭活24 h后在组织匀浆中按3∶2比例加白油, 混合均匀, 4℃保存待用。

1.3 DVH卵黄抗体的制备

1.3.1 高产鸡免疫

第1, 7, 14天免疫蛋鸡3次, 采用肌肉注射鸭肝炎病毒组织灭活疫苗, 1 m L/只。

1.3.2 卵黄抗体制备

第3次免疫1周后收集高免鸡蛋, 用自来水清洗干净后用0.05%绿毒杀浸泡消毒5 min, 用纱布擦干, 再用75%酒精喷洒, 凉干。在无菌条件下取高免卵黄, 弃去蛋清, 把高免蛋黄搅拌成匀浆, 加等量灭菌生理盐水, 按1 000 U/mL比例加青、链霉素, 分装于灭菌玻璃瓶中, 4℃冷藏备用。

1.4 安全检验

取雏鸭10只, 皮下接种高免卵黄抗体2 m L/只, 观察14 d, 记录雏鸭的发病、死亡情况。

1.5 免疫攻毒保护试验

1.5.1 试验分组

试验分4组, 免疫2组, 空白对照2组, 每组10只雏鸭。

1.5.2 免疫及攻毒保护

免疫组雏鸭皮下接种鸭肝炎卵黄抗体0.5 m L/只, 24 h后免疫1组和对照1组同时攻Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒强毒 (皮下注射, 1 m L/只) , 免疫2组和对照2组同时攻新型鸭病毒性肝炎病毒强毒 (皮下注射, 1 m L/只) 。隔离饲养, 观察14 d, 每天记录雏鸭发病、死亡情况。

2 结果

2.1 安全检验

10只雏鸭全部健活, 无发病和死亡。

2.2 卵黄抗体攻毒保护

免疫1组全部存活, 免疫2组存活1只, 死亡9只, 对照组全部死亡 (见表1) 。

3讨论

自然情况下鸭病毒性肝炎主要引起6周龄以内的雏鸭发病和死亡。成年鸭呈隐性感染, 不影响产蛋率, 但能排毒。该病主要经消化道和呼吸道途径感染, 具有极强的传染性, 病鸭、感染的成年鸭和康复鸭主要通过粪便排毒, 造成本病在鸭群中的迅速传播, 另外棕色大鼠等也可作为病毒的贮存宿主。病毒常因从发病场或有发病史的鸭场购入带毒雏鸭而传入一个新的鸭场中, 另外也可通过外来参观人员、饲养人员的串舍以及污染的用具和车辆等进行传播。

目前, 预防和控制鸭病毒性肝炎主要有3种方法: (1) 注射免疫血清或高免卵黄抗体, 使雏鸭获得人工被动免疫; (2) 免疫种鸭, 以保证其后代雏鸭得到高水平的天然被动免疫; (3) 直接用DHV-Ⅰ活毒株免疫雏鸭, 使其获得人工主动免疫。由于病毒提纯困难, 难以获得高浓度高纯度的抗原, 因此对该病的防治目前仍以鸡胚化弱毒疫苗、灭活苗、高免血清和高免卵黄抗体为主。鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体是鸭病毒性肝炎病毒预防和治疗最常用的生物制品, 主要采用被动免疫使雏鸭获得坚实的免疫。采用鸭病毒性肝炎抗原, 免疫母鸭制成的高免卵黄抗体, 是一种较简易、经济、安全、有效的方法。鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体, 是目前防治雏鸭病毒性肝炎较好的生物制品, 但随着新型鸭病毒性肝炎的出现, 现有的鸭肝炎病毒卵黄抗体一般是由传统毒株制备的, 往往对新流行毒株没有保护作用, 所以目前要加强新型鸭肝炎病毒的相关研究, 制备相应的卵黄抗体及疫苗。卵黄抗体在使用过程中注意不要与疫苗同时接种, 避免因抗原、抗体中和而导致免疫失败。

单克隆抗体真题研析 第4篇

由单个效应B细胞进行无性繁殖，形成细胞群（称为克隆），由这样的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的抗体称单克隆抗体。注意关键词：单个效应B细胞、克隆、化学性质单一、特异性强等。

二、将骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞时为何用免疫过的B淋巴细胞？

B淋巴细胞需要经过免疫过程，接触抗原，增殖分化为特异性免疫功能的效应B细胞，才能产生出相应的抗体，所以，与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞实际上是效应B细胞。

三、为何制备单克隆抗体要将单个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合？

体内的B淋巴细胞数目很多，可以产生多达百万种以上的抗体，这些抗体主要分布在动物血清中，也存在于组织液及外分泌液中。如果从动物血清中分离出所需要的抗体，不仅获得的抗体产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不灵敏。如果利用单个B淋巴细胞通过无性繁殖，就可产生大量单一抗体，但B淋巴细胞不能在体外无限增殖。这就需要利用肿瘤细胞无限增殖的特点，将单个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，可以使杂种细胞具有两个亲本的遗传性，也就是既具有无性增殖的特点，又能产生单一抗体。

四、制备过程为何须经两次筛选？

第一次筛选是在B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合之后，因为有三种融合情况：B淋巴细胞与B淋巴细胞融合，骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合，B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。此外，还有未曾融合的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞，而只有B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞才是需要的杂种细胞，第一次筛选即是选出此种细胞。由于每个杂交瘤细胞所产生的抗体各具特异性，第二次筛选是在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞，具体筛选时，可在选择培养基中加入特定抗原以便选出能产生对应于该特定抗原的特定抗体，进而能够存在下来的细胞。

五、真题研析

1．（07·天津卷·5题）利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单x克隆抗体。下列相关叙述正确的是( )

A.用纯化的核衣蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体

B.体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体

C.将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞

D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者

【评析】本题主要考查单克隆抗体的概念、制备过程及应用，命题者的立意在于要求考生能够理解单克隆抗体制备各步骤的目的和结果，是对教材内容的合理延伸。

单克隆抗体是指由免疫过的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂交瘤细胞进行无性繁殖产生的化学性质单一、特异性强的抗体。由于效应B细胞是高度分化的细胞，不能在体外无限增殖，因此不能通过体外培养效应B细胞获得单克隆抗体。当效应B细胞和骨髓瘤细胞混合时，经PEG诱导可发生融合，但由于细胞融合是随机的，即不一定融合的细胞都是杂交瘤细胞，特别是能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。答案为D。

2．（07·上海生物卷·39题A）下图表示用生物工程制备人抗A抗体的过程。请回答下列问题：

（1）人的红细胞膜表面有被称为凝集原的特异_________：从免疫学角度看，这种凝集原是__________。

（2）图中细胞中1是小鼠体内注入人A型血红细胞后而获得的_________细胞，这种细胞具有产生_________的特点，但难以在体外培养。甲培养皿中培养的细胞2，是从患骨髓瘤的小鼠体内获取的骨髓瘤细胞，这种细胞在体外培养时能__________，但不会产生抗体。

（3）为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点，经特殊处理，在促细胞融合因子的作用下，使两种细胞发生融合，形成图中的细胞3，这种细胞称为___________。把它在乙培养皿中进行培养，则能产生大量的细胞群，这种方法称为__________。

（4）过程①的主要目的__________。通过过程②或⑧的培养方法能产生大量____________抗体。

【评析】本题是对单克隆抗体制备步骤更具体的考查。

⑴根据对细胞膜组成成分分析，膜上具有特异性的物质是糖蛋白或蛋白质，而红细胞表面的凝集原具有细胞识别功能、位于细胞膜外表面，因此推测凝集原最可能是一种糖蛋白，这种特异糖蛋白，在免疫学上称为抗原。⑵依据单克隆抗体制备过程分析，图中1应代表从经使用人A型血红细胞免疫的小鼠体内获得能产生抗A抗体的效应B细胞（或称免疫B细胞），由于效应B细胞是高度分化的细胞，不能分裂。图中2代表骨髓瘤细胞，它具有在体外无限增殖的特点。图中3代表两类细胞融合形成的杂交瘤细胞。细胞通过增殖产生大量子细胞群过程称为克隆。⑶由于融合得到的不一定是能产生抗A抗体的杂交瘤细胞，因此细胞融合后，还要经过筛选，将筛选获得的杂交瘤细胞经体内或体外培养，最终可以大量产生抗A抗体。

【答案】（1）糖蛋白 抗原（每空1分）（2）免疫B淋巴 单一的抗A抗体（或单一的特异性抗体）快速大量增殖（每空1分）（3）杂交瘤细胞 单克隆（每空1分）

（4）筛选出能产生单一抗A抗体的杂交瘤细胞 抗A单克隆（每空1分）

六、考向测试

1．单克隆抗体制备中，B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是（ ）

①B淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合的细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合的细胞 ⑤杂交瘤细胞

A．①②③④

B．①③⑤ C．②④

D．①③

2．单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是（ ）

A.特异性强、灵敏度高

B．由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞

C．体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体

D．与抗癌药物结合可制成“生物导弹”分泌

3．用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（）

A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞

B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞

C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合

D．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体

4．肺癌在全国的发病率居肿瘤之首，小细胞肺癌是恶性程度最高的一种，上海肿瘤研究所与分子免疫研究室在国内率先研制出一种名叫“2F7”的“靶向生物导弹”。这枚“生物导弹”是一种专门对小细胞肺癌产生定向作用的特异性单克隆抗体。静脉注射后，会直扑小细胞肺癌病灶，使其携带的化疗药物“集中火力”抑制、剿灭肿瘤细胞。这预示着化疗药物有望弥补“良莠不分”、损害全身免疫力的缺陷。

⑴制备单克隆抗体的原理是_____________。

⑵制备单克隆抗体利用的动物细胞工程技术手段有__________________等。

⑶静脉注射而不能口服单克隆抗体的原因是__________________。

⑷单克隆抗体与肿瘤细胞结合并发挥作用的过程属于_____________的____________。

⑸肿瘤细胞引起机体特异性免疫反应前，_____________（填“是”或“不是”）必须经过非特异性免疫过程。

参考答案及解析：

1．A。B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合培养并诱导融合时，培养基中含有未融合的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞、两种细胞自身融合细胞及两种细胞相互融合的细胞，此时须用选择培养基培养上述细胞，在选择培养基中，能够生存下来的只有杂交瘤细胞，其余细胞均死亡。

2．C。要想获得大量单一抗体，需要将某一种淋巴细胞大量克隆，但在体外培养的条件下，B淋巴细胞不能无限增殖，而由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞在体外培养的条件下，能无限增殖，并分泌单克隆抗体。单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，与抗癌药物结合可制成“生物导弹”，直接作用于癌细胞。

3．B。动物细胞融合因动物细胞无细胞壁而无需处理，只需加入促融剂诱导融合即可。

4．解析：单克隆抗体是利用动物细胞融合和细胞培养等手段获得的，其原理是单个效应B细胞只分泌化学性质单一、特异性强的抗体。抗体是蛋白质，若口服会被消化成氨基酸而失去抗体功能。抗体与抗原发挥作用是体液免疫的效应阶段。肿瘤细胞是抗原，所以只能通过特异性免疫将其消灭。

答案：⑴每一个效应B细胞只能分泌一种特异性的抗体 ⑵细胞培养、动物细胞融 ⑶单克隆抗体是蛋白质，若口服会被消化成氨基酸而失去抗体功能

⑷体液免疫

效应 ⑸不是

抗体保护 第5篇

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取该院门诊2014年1月～12月间接诊的30例Ⅰ型糖尿病患者(A组)和30例Ⅱ型糖尿病患者(B组)及30例健康体检者(C组),A组中男16例,女14例。年龄32～65岁,平均(40.1±5.4)岁。B组中男17例,女13例。年龄33～64岁,平均(41.3±5.7)岁。C组中男15例,女15例。年龄31～67岁,平均(42.5±5.2)岁。A、B组诊断、分型均符合WHO(1999)对糖尿病的诊断、分型标准,3组在数量、性别、年龄等基础资料方面比较,P>0.05,具有可比性。

1.2 方法

分别抽取3组受检者3 mL空腹晨静脉血,于37℃下放置30 min,以3000 r/min速度离心10 min,分离血清,放置在-20℃下保存备用。以CLIA法(化学发光免疫分析法)测定、比较3组血清内谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛细胞抗体的存在情况,以RIA法(放射免疫分析法组定、比较3组胰岛素自身抗体的存在情况。所有检测操作均严格按照说明书进行规范操作。

1.3 统计方法

数据结果采用SPSS 17.0统计学软件进行分析处理,计数资料用()表示,采用t检验,以P<0.05为具有明显差异,有统计学意义。

2 结果

共3组,每组30例,A组谷氨酸脱羧酶抗体为70%(21/30),胰岛细胞抗体40%(12/30),胰岛素自身抗体26.67%(8/30),B组谷氨酸脱羧酶抗体为6.67%(2/30),胰岛细胞抗体16.67%(5/30),胰岛素自身抗体10%(3/30),C组谷氨酸脱羧酶抗体为0%(0/30),胰岛细胞抗体3.33%(1/30),胰岛素自身抗体0%(0/30),3组血清内谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛细胞抗体和胰岛素自身抗体的存在率由高至低依次为A组>B组>C组,P<0.05具有显著性差异,有统计学意义。

3 讨论

糖尿病属于临床常见代谢性疾病,主要特征为高血糖,是有胰岛素分泌缺陷或胰岛素生物作用受损或二者同时出现而引起。临床可将糖尿病分为Ⅰ型糖尿病(胰岛素依赖型)和Ⅱ型糖尿病(非胰岛素依赖型),两者的发病机制及治疗原则存在差异。所以,对糖尿病的准确分型是预防、治疗糖尿病的最基本的前提。Ⅰ型糖尿病属于自身免疫性疾病,具有器官特异性,患者血液中存在谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛细胞抗体和胰岛素自身抗体等自身抗体(胰岛β细胞),检测上述抗体对糖尿病的鉴别分型具有重要意义。谷氨酸脱竣酶为Ⅰ型糖尿病自身抗原,能够将谷氨酸转化成对神经递质GABA (γ氨基丁酸)产生抑制性的限速酶,谷氨酸脱羧酶抗体是Ⅰ型糖尿病最早出现的一种抗体,临床症状出现前的一段较长时间即可出现,Ⅰ型糖尿病初发者血液检测的阳性率为70%～80%,而Ⅱ型糖尿病及正常人血液检测的阳性率较低或无法检出。胰岛细胞抗体属于胰岛自身细胞抗体,其与胰岛细胞表面抗原相结合发生免疫反应,将补体系统激活,导致细胞溶解、死亡而出现糖尿病[2]。Ⅰ型糖尿病初发者血液检测的阳性率为80%,临床症状出现后的6个月～3年内其逐渐减少、消失。而Ⅱ型糖尿病血液检测的阳性率为1.5%～8.3%,且有半数诊断为成人隐匿性自身免疫性糖尿病。所以检测胰岛细胞抗体有利于糖尿病分型的鉴别诊断,但胰岛细胞抗体也可同时出现在其他的自身免疫性疾病当中,所以单独检测胰岛细胞抗体对于预测糖尿病的价值有限。胰岛素自身抗体对于鉴别诊断治疗糖尿病、低血糖具有重要意义。正常人血液检出胰岛素自身抗体则提示患有Ⅰ型糖尿病的可能较大,可能是胰岛β细胞损伤产生,所以可作为自身免疫性胰岛β细胞损伤的标志物,有利于早期发现、预防Ⅰ型糖尿病。糖尿病患者血液检测谷氨酸脱羧酶抗体的存在率高于胰岛细胞抗体和胰岛素自身抗体,提示检测谷氨酸脱羧酶抗体对预测糖尿病具有较大价值。本研究显示,Ⅰ型糖尿病患者血清内谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛细胞抗体和胰岛素自身抗体的存在率明显高于Ⅱ型糖尿病患者及健康人。

综上所述,提示糖尿病检测谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛细胞抗体和胰岛素自身抗体,对糖尿病分型、选择用药具有重要临床意义。

摘要：目的 探讨分析尿病检测谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛细胞抗体和胰岛素自身抗体的临床意义。方法 选取该院门诊2014年1月12月间接诊的30例Ⅰ型糖尿病患者(A组)和30例Ⅱ型糖尿病患者(B组)及30例健康体检者(C组),以CLIA法、RIA法测定、比较3组血清内谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛细胞抗体和胰岛素自身抗体的存在情况。结果 3组血清内谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛细胞抗体和胰岛素自身抗体的存在率由高至低依次为A组>B组>C组,P<0.05具有显著性差异,有统计学意义。结论 糖尿病检测谷氨酸脱羧酶抗体、胰岛细胞抗体和胰岛素自身抗体,对糖尿病分型、选择用药具有重要临床意义。

关键词：糖尿病,谷氨酸脱羧酶抗体,胰岛细胞抗体,胰岛素自身抗体

参考文献

[1]姜燕,谭立明,王外梅,等.谷氩酸脱羧酶抗体及胰岛细胞抗体对诊断糖尿病的临床意义[J].实验与检验医学,2009,27(6):634.

抗体保护 第6篇

1 资料与方法

1.1 试剂及仪器

1251例血液标本均选自我院体检中心。化学发光法中HIV-1/HIV-2抗体检查试剂盒、梅毒抗体检查试剂盒、丙肝抗体检查试剂盒均购自, 美国雅培上海科华生物有限公司。ELISA法中HIV-1/HIV-2抗体检查试剂盒、梅毒抗体检查试剂盒、丙肝抗体检查试剂盒均购自上海科华生物有限公司。检测仪器采用雅培全自动免疫分析仪及MK3型酶标仪。

1.2 检查方法

于清晨采集体检人员静脉血3ml, 血液标本经高速离心后取上层清夜置于无内毒素试管中。标本收集后按一次使用量分装, 避免反复低温冷冻。ELISA检查方法及注意事项严格按照试剂盒说明书执行, 化学发光法严格按照雅培全自动免疫分析仪相关操作及注意事项执行。

2 结果

2.1 ELISA法和化学发光法阳性检出结果比较

使用ELISA法和化学发光法对我院体检中心的1251例血液标本进行梅毒抗体、HIV-1/HIV-2抗体、丙肝抗体的阳性检测, 结果显示使用化学发光法检测出为阴性的血液标本, ELISA法同样检测出为阴性。而化学发光法检查出为阳性的血液标本, ELISA法显示并不是所有的样本为阳性, 详见表1。

2.2 检出结果其他辅助方法诊断

经其他辅助方法诊断检查疑似携带梅毒抗体的3号体检人员确诊携带梅毒抗体, 疑似携带丙肝抗体的1号体检人员确诊携带丙肝抗体, 其结果与化学发光发的检查结果相符。

3 讨论

目前临床中用于病毒血清学的诊断方法较多, 如中和试验、酶免疫试验、血凝抑制试验及光化学实验等。中ELISA法是基于抗原或抗体与某种酶相结合形成酶标抗原或酶标抗体, 这种物质不仅可以保留抗体原有的免疫活性, 还具有酶的生物活性, 测量的精度较高[2]。但其缺点也很明显, 由于没有进行全自动操作, 在检测时需要人工手动操作, 耗费时间较长并且重复性较差。有研究显示, 采用ELISA法的假阳性率变化较大, 主要是由于操作方法及试剂本身的缺点所致[3]。化学发光法灵敏度高及特异性高等优势, 在临床中广泛使用, 并且采用全自动分析仪大大简化的操作, 节约了检查成本, 并且可重复检查。

在本次研究中, 采用ELISA法和化学发光法使用ELISA法和化学发光法对血液标本进行梅毒抗体、HIV-1/HIV-2抗体、丙肝抗体的阳性检测, 结果显示使用化学发光法检测出为阴性的血液标本, ELISA法同样检测出为阴性。而化学发光法检查出为阳性的血液标本, ELISA法显示并不是所有的样本为阳性, 并经其他辅助方法诊断结果与化学发光发的检查结果相符。以上结果表明化学发光法与ELISA法相比具有更高的敏感度。这与之前的报道相符, 该报道显示, 化学发光法抗干扰能力较强, 对于长时间放置的样本, 溶血的样本及黄疸等几乎不会影响检测结果, 因此在临床中的使用度更为广泛[4]。本次研究中ELISA法中出现了假阴性情况, 提示在临床工作中, 应对试剂及检测操作章程进行严格的把控, 降低假阳性及假阴性率, 减少误诊、漏诊的情况。

综上所述, 在梅毒抗体、HIV-1/HIV-2抗体、丙肝抗体的检测中, 化学发光法的敏感性较高, 检查结果较为准确, 值得推广。

参考文献

[1]扶昭富, 李攻科, 胡玉斐等.基于AgⅢ配合物的流动注射-化学发光法快速测定血清中的氢化可的松[J].分析化学, 2015, 12 (9) :1322-1328

[2]李德英, 孙芳, 邱建丁等.溶胶凝胶固定化酶流动注射化学发光法测定人体血清中的胆固醇[J].分析化学, 2010, 38 (2) :187-191.

[3]王菊英, 李锋, 周立荣等.非综合征型唇腭裂患儿血清抗-HCV化学发光法出现假阳性的原因分析[J].中国免疫学杂志, 2015, 11 (6) :795-797, 802

抗体保护 第7篇

关键词：癫痫,抗核抗体,抗细胞浆抗体,自身免疫

癫痫 (epilepsy, EP) 是一种慢性的脑功能紊乱, 其特征为间歇性的、不可预测性的发作, 其发病机制目前还不十分清楚。自1969年Walter首次提出免疫参与EP的发病机制以来, 国内外许多学者通过实验对此进行了大量的研究, 最近有越来越多的研究结果表明自身抗体可能参与了某些类型EP的发病机制[1,2,3]。 本文通过测定患者血清中抗核抗体 (ANA) 和抗细胞浆抗体 (ACYA) 的阳性率, 旨在研究抗核抗体及抗细胞浆抗体 (ACYA) 与EP发病的关系。

1材料与方法

1.1 试剂

ANA、ACYA试剂盒购自欧蒙 (杭州) 医学实验诊断有限公司, 荧光显微镜 (Olympus BX51TR-32FB3E01) 。

1.2 方法

1.2.1 标本采集:

病例组及对照组均晨起采集静脉血, 离心取血清, 置-20℃冻存。

1.2.2 标本测定:

采用间接免疫荧光法, 严格按照说明书操作。抗原片基质以HEp-2与猴肝冰冻组织切片制成, 用PBS-Tween 1:5稀释血清后滴加25μl于样板反应区, 室温孵育30min, PBS-Tween冲洗, 滴加20μl荧光素标记的羊抗人IgG (二抗) , 室温孵育30min, PBS-Tween冲洗, 甘油封片, 荧光显微镜观察。

1.3 统计学处理

两组间阳性率差异比较采用χ2检验。

2结果

共检测45例EP患者血清, 13例ANA阳性, 占29%;10例ACYA 阳性, 占22%;检测60例正常人血清, ANA、ACYA均无阳性。病例组与正常对照组ANA阳性率比较, P<0.01, 具有显著性差异。病例组与正常对照组ACYA阳性率比较, P<0.01, 具有显著性差异。结果见表1。

3讨论

EP的发病机制至今未完全明了, 近年来有研究表明, 大约10%～20%的系统性红斑狼疮 (SLE) 病人在疾病的某一阶段出现癫痫性抽搐, 5%～10%的患者在临床SLE发病几年前就开始有抽搐病史[4]。 通过大量的研究人们推测EP可能与自身免疫有关, 即在EP病人的血清中可以检出1种或多种自身抗体。长期的癫痫发作可破坏血脑屏障 (BBB) , 使中枢神经系统 (CNS) 组织或成分暴露在机体的免疫系统中即可成为异种抗原而启动免疫反应产生自身抗体[5]。ACYA是一种自身抗体, ACYA的出现代表体内存在一种由ACYA介导的自身免疫反应过程。ANA是以细胞核成分为靶抗原的自身抗体的总称, 是一种常见的自身抗体, 可广泛地存在于自身免疫性疾病中, 是自身免疫病的重要标志。主要是IgG, 也有IgM和IgA, 甚至IgD和IgE。由于细胞内各分子理化特性和分布部位不同, 将ANA分为:抗核蛋白抗体、抗DNA抗体、抗核仁抗体。本文对45例癫痫患者血清进行ANA与ACYA的检测, ANA的阳性检出率为29%, ACYA的阳性检出率为22%, 而60例对照组血清中ANA与ACYA阳性检出率均为0, 癫痫患者ANA的阳性检出率明显高于正常对照组, 差异显著 (P<0.01) , 癫痫患者AYCA的阳性检出率亦明显高于正常对照组, 具有显著性差异 (P<0.01) , 这一结果提示了EP与自身免疫有关。目前, ACYA的相关报道较少, 我们仍在研究中。Verrot等非选择性地研究了163例EP, 其中25%患者有ANA 存在, 它与癫痫的类型、抗癫痫药物的种类、患者的年龄、性别无关[3];Peltoly等研究了152例EP, 发现ANA在病人血清中明显升高, 并与使用抗癫痫药物有相关性。本研究结果显示病例组的阳性率为29%, 与Verrot和Peltoly的报道接近。

参考文献

[1] Eriksson K, peltola J, Keranen T, et al.High prevaience of an-tiphospholipid antibodies in children with epilepsy:a controlledstudy of 50 cases (J) .Epilepsy res, 2001, 46 (2) :129-137.

[2] Mantegazza R, Bemasoni P, Baggi F, et al.Antibodies againstGluR3 peptides are not specific for rasmussen’s encephalitis butare also present in epilepsy patients with severe, early onset dis-ease and intractable seizures (J) .J Neuroimmunol, 2002, 131 (1-2) :179-185.

[3] Verrot D, San-Marco M, Dravet C, et al.Prevalence and significa-tion of antinuclear and anticardiolipin antibodies in patients withepilepsy (J.) Am J Med, 1997, 103 (1) :33-37.

[4]曾常茜.自身抗体与癫痫发病机制 (J) .中国行为医学科学, 2006, 15 (2) :184-185.

抗体保护 第8篇

1 临床资料

1.1 一般资料

MG患者:共41例,男21例,女20例,平均年龄42.1岁。病程3 d~384个月(平均77.9个月)。诊断根据部分或全身骨骼肌易疲劳,波动性肌无力,活动后加重、休息后减轻和晨轻暮重等临床特点,以及新斯的明试验、低频重复电刺激波幅递减、胆碱酯酶抑制剂治疗有效等标准。所有MG患者均行胸部CT检查,部分患者行胸腺摘除术:伴胸腺增生6例(男5例,女1例),平均年龄51.7岁;伴胸腺瘤18例(男7例,女11例),平均年龄45.6岁。所选MG患者均在采血前6个月内未服用任何免疫抑制剂,当时按照改良的Osserman分型。其中Ⅰ型17例(包括6例胸腺瘤,1例胸腺增生),Ⅱa型12例(包括5例胸腺瘤,2例胸腺增生),Ⅱb型7例(包括3例胸腺瘤,2例胸腺增生),Ⅲ型1例(包括1例胸腺瘤),Ⅳ型4例(包括3例胸腺瘤,1例胸腺增生)。

其他神经系统疾病(other neurological diseases,OND)组:共21例,其中男11例,女10例,平均年龄53.2岁,包括多发性硬化、运动神经元病、周围神经病、脑梗死等。

健康对照组(health control,HC)组:共26例,其中男10例,女16例,平均年龄33.6岁,均为排除自身免疫疾病及神经系统疾病的健康献血员。

1.2 方法

1.2.1 Ach R-Ab及Titin-Ab检测

无菌取健康献血员、其他神经系统疾病及MG患者外周静脉血3m L,分离血清,-80℃保存备用。用上海亚培生物有限公司提供的人Ach R-Ab试剂盒及人Titin-Ab试剂盒,按照说明书采用间接ELISA法进行检测。分别加入稀释好后的标准品50μL、待测样品50μL于反应孔内,于37℃恒温箱中温育60 min。经3次洗涤后向每孔加入80μL的亲和链霉素-HRP,于37℃恒温箱中温育30 min.洗涤后加入底物A、B各50μL,避光温育10 min,取出酶标板后迅速加入50μL终止液。在450 nm处读出吸光度OD值。以HC平均值+标准差95%的允许区间单侧上限为界限,大于者为阳性。

1.2.2 统计学分析

数据用SPSS13.0软件包进行Pearsonχ2检验、直线相关分析。P<0.05为差异有显著性。

2 结果

2.1 两抗体阳性者性别组成

Ach R-Ab和Titin-Ab阳性的男女构成差异均无显著性(χ2=0.2415、0.0283,P>0.05)。

2.2 3组血清Ach R-Ab和Titin-Ab的检测结果

注:覮HC组、OND组、HC与OND合并组分别与MG组比较;MGT组与NTMG组比较

表中显示HC组、OND组、HC与OND合并组分别与MG组血清Ach R-Ab、Titin-Ab阳性率比较差异均有显著性(P<0.01),提示Ach R-Ab和Titin-Ab检测对MG具有特异性。其中MGT组与NTMG组之间Ach R-Ab和Titin-Ab阳性率比较差异也有显著性(P<0.01)。OND组2例Titin-Ab阳性中1例为运动神经元病(72岁,男性),1例为脑梗死(70岁,女性)。在NTMG中患者有3例Titin-Ab阳性,病理结果证实1例是纵隔支气管源性囊肿,1例为真性胸腺增生,提示血清Ach R-Ab和Titin-Ab在MGT中的阳性检出率高。

2.3 MG患者不同分型间的Ach R-Ab和Titin-Ab的检测结果

全身型(Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型)两抗体总的阳性率分别为58.3%、50.0%,与眼肌型(Ⅰ型)比较阳性率差异也有显著性(P<0.05)。提示病情越重,两抗体阳性率越高,见表2。

2.4 MGT患者血清Ach R-Ab和Titin-Ab水平间的关系

注:覮两亚型间的比较,P<0.05

经直线相关分析,MGT患者Ach R-Ab和Titin-Ab间有直线相关性(r=0.587,P<0.05)。

3 讨论

正常疲劳是肌肉连续收缩释放出乙酰胆碱(Ach)数量减少,而MG的肌无力或肌肉病态疲劳是神经肌肉接头(NMJ)处的Ach R减少导致传递障碍。Ach和Ach R结合后产生足以使肌纤维收缩的终板电位,MG的NMJ由于Ach R数目减少及抗体竞争作用,使终板电位不能有效地扩大为肌纤维动作电位,运动终板传递受阻使肌肉收缩力减弱,此变化首先反映在运动频率最高、Ach R数目最少的眼肌和脑神经支配肌肉。FAMBROUGH等[3]证实MG基本缺陷是NMJ突触后膜上Ach R明显缺乏,并在动物模型实验性自身免疫性重症肌无力动物血清中检出Ach R-Ab,用免疫荧光法可在突触后膜发现Ach R与Ach R-Ab及补体的免疫复合物沉积。MG患者肌肉活检片也发现Ach R明显减少,从而确定Ach R-Ab的致病性,为MG自身免疫学说提供有力证据。VIN-CENT等[4,5]发现全身型MG患者血清中Ach R-Ab阳性率为85.0%~90.0%,合并胸腺瘤的MG患者血清中Ach R-Ab阳性率几乎100.0%,而单纯眼肌型MG患者Ach R-Ab阳性率仅为50.0%。本组全身型MG患者血清中Ach R-Ab阳性率为58.3%,尽管较既往报道低,但全身型MG与眼肌型MG患者Ach R-Ab阳性率差异有显著性(P<0.05),提示全身型MG患者Ach R-Ab阳性率较眼肌型阳性率高;由此可知检测MG患者血清中Ach R-Ab对临床诊断具有重要意义,但也有少数患者血清中检测不到Ach R-Ab,国内外文献[6]已有许多报道,具体机制需更深入的研究。

MG的血清中除能检测到Ach R-Ab外,还有多种自身抗体如连接素抗体(Titin-ab)也逐渐成为研究的重点,尤其对伴有胸腺瘤的MG患者诊断意义更大。FRIDRIK等[7]曾用免疫组化方法研究发现,除髓质、血管周围间隙、肌样细胞、树突状细胞外,正常胸腺组织Titin、Ry R抗体着色均非常浅淡,而在胸腺瘤组织中却明显深染。胸腺瘤有Titin、Ry R表位和协同刺激因子的过度表达,从而导致自身致敏T细胞对Titin、Ry R表位产生免疫反应。在正常胸腺组织,自身致敏的T细胞其功能受抑制或呈无反应性。而在MGT患者,变化的微环境或许导致自身致敏的T淋巴细胞的选择性活化,从而导致免疫调节异常,产生肌肉自身抗体。国内外研究[8]显示39.0%的MG患者血清中可以检测到Titin-ab,而在MGT患者中Titin-ab阳性率则高达95.0%,在年龄>60岁的迟发型MG患者中Titin-ab阳性率也高于90.0%。本试验结果显示MGT组阳性率为88.9%,NTMG组阳性率为13.0%,OND组阳性率为9.5%,HC组阳性率为0.0%,后3组分别与MGT组比较差异均有显著性(P<0.01)。胸腺萎缩其中有1例胸腺CT提示胸腺增生,Titin-Ab结果显示阳性,病理结果为胸腺瘤;有2例CT提示胸腺瘤,Titin-Ab结果显示阴性。

本实验对Ach R-Ab与Titin-Ab之间相关性的研究表明,在MGT患者这两者具有明显的相关性(P<0.05),提示在MGT患者中两抗体可能具有共同自身免疫机制。实验结果显示总MG组中这两种抗体间也有较显著的相关性,而陈向军等[9]试验结果则显示总MG组两种抗体间相关性不明显,可能和本组胸腺萎缩患者缺少的原因。既往研究表明,MGT患者胸腺瘤上皮细胞存在Ach R和Titin表位m RNA的转录以及蛋白的过度表达;MG患者胸腺瘤上皮细胞具有将抗原多肽呈递给T淋巴细胞的功能,而MG患者外周血T淋巴细胞亦能与含有的Titin-MIR表位起反应,故胸腺瘤形成过程中针对Ach R和Titin的反应性T淋巴细胞的共同病态阳性选择可能启动了MGT自身免疫反应。本实验结果显示MGT与NTMG患者之间血清中Ach R-Ab、Titin-Ab阳性率差异均有显著性(P<0.01),且MGT组两抗体阳性率与胸腺增生组(两抗体阳性率均33.3%)比较差异均有显著性(P<0.01),说明伴有胸腺瘤的MG患者两抗体阳性率较非胸腺瘤者阳性率高。值得注意的是本组实验中出现MGT患者Ach R-Ab和Titin-Ab阴性,以及LORENZO等[10]报道2例MGT患者体Ach R-Ab和Titin-Ab的缺乏,推测可能是此类患者体内不同的免疫遗传因素、不同的免疫发病机制以及不同的胸腺病理类型有关。本组结果表明Ⅲ和Ⅳ两型MG患者两种抗体血清阳性率均明显高于其他各型,此两型多为Ⅱa和Ⅱb型转换而来,病情较重且常常合并胸腺瘤,说明抗体阳性患者其病情迁延,预后不良,对判定预后有一定帮助。另外本组发现:MG患者中Ach R-Ab呈现阳性的男女之比为0.8∶1,Titin-Ab呈现阳性的男女之比为0.9∶1,差异均无显著性(P>0.05),提示此两种抗体在男性和女性中均有机会出现。

综上所述,Ach R-Ab和Titin-Ab在重症肌无力发病中起重要作用,其检测对重症肌无力尤其合并胸腺瘤的重症肌无力患者可能具有辅助诊断意义,临床上应充分利用其特点提高重症肌无力的诊断率。

参考文献

[1]NAMBA T,BRUUNER NG,GROB D.Myasthenia gravis in pa-tients with thymoma with particular reference to onset after thymectomy[J].Medicine,1978,57(5):411-433.

[2]LANSKA DJ,Diagnosis of thymoma in myasthenics using an-ti-striated muscle antibodies:predictive value and gain in diag-nostic certainty[J].Neurology,1991,41(4):520-524.

[3]FAMBROUGH DM,DRACHMAN DB,SATYAMURTI S.Neuro-muscular junction in myasthenia graivs:decreased acetylcholine receptor[J].Science,1973,182(109):293-295.

[4]VINCENT A,BOWEN J,NEWSOM-DAVIS J,McCoville J.Seronegative generalized myasthenia gravis:clinical features,anti-bodies,and their targets[J].Lancet Neurol,2003,2:99-106.

[5]ZIMMERMANN CW,EBLEN F.Repertoires of autoantibodies against homologous eye muscle in ocular and generalized myas-thenia gravis differ[J].Clin.Invest,1993,71(6):445-451.

[6]FARRUGIA ME,KENNETT RP,NEWS-DAVIS J,et al.Sin-gle-fiber electromyography in limb and facial muscles in mus-cle-specific kinase antibody and acetylcholine receptor antibody myasthenia gravis[J].Muscle Nerve,2006,33(4):568-570.

[7]FREDRIK R,LARS B,GEIR,et al.Titin and ryanodine receptor epitopes are expressed in cortical thymoma along with costimula-tory molecules[J].Neuroimmunology,2002,128(1-2):82-89.

[8]ROMI F,SKEIE GO,AARLI JA,et al.Muscle antibodies in subgroups of myasthenia gravis patient[J].Neurol,2000,247(3):269-276.

[9]陈向军,乔健,吕传真.重症肌无力患者血清连接素抗体的检测及其意义[J].中华神经科杂志,2000,33(6):335-338.[9]CHEN XJ,QIAO J,LV CZ.The antibody in myasthenia gravis and its clinical significance[J].Chin J Neurol,2000,33(6):335-338.Chinese

抗体保护 第9篇

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院不孕专科门诊和妇产门诊科的60例患者的临床资料, 年龄20~44岁, 不孕不育时间2~21年。所有病例资料符合不孕不育的诊断标准, 诊断标准参照《妇产科学》第5版[3], 排除生殖器畸形、内分泌疾病及其他病变, 排除常见病毒感染。另外选取60例有正常生育史的健康女性为对照组。所有患者均为首次检测血清抗精子抗体和抗心磷脂抗体者。

1.2 检测方法

抽取每例病例静脉血3~5ml, 不做抗凝处理, 1 000rpm离心10min, 离心后分离出血清, 置于-20℃冰箱保存, 测定前血清经解冻并平衡至室温。采用酶联免疫吸附 (ELISA) 法测定ACA与AsAb, ACA检测IgG、IgM及IgA三种抗体, AsAb检测总抗体及IgM。ELISA试剂盒由深圳市安群生物工程有限公司提供, 酶标仪采用美国BIO-RAD xmark型全波长自动酶标仪, 操作和结果判断均按试剂盒说明书进行[4]。

1.3 统计学方法

所有检测数据采用SPSS16.0统计学软件进行处理分析, 组间数据比较采用χ2检验, P<0.05, 具有显著性差异。

2 结果

2.1 两组血清AsAb的测定结果

采用酶联免疫吸附法检测两组病例AsAb总抗体及IgM, 结果:不孕不育组患者血清中AsAb阳性16例, 占26.7%, 正常对照组中AsAb阳性5例, 占8.3%, 两组间检测结果具有显著差异性。不孕不育组患者血清中AsAb-IgM阳性27例, 占45.0%, 正常对照组中无AsAb-IgM阳性, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。

2.2 两组血清ACA测定结果

采用酶联免疫吸附法检测两组病例ACA-IgA、ACA-IgG、ACA-IgM, 结果:不孕不育组患者血清中ACA-IgA阳性4例, ACA-IgG阳性5例, ACA-IgM阳性8例, 总阳性率28.3%, 正常对照组中ACA-IgA阳性0例, ACA-IgG阳性1例, ACA-IgM阳性1例, 总阳性率3.3%, 两组间检测结果具有显著差异性 (P<0.05) 。

3 讨论

自身免疫抗体与不孕不育症的关系是目前免疫学研究的焦点, 免疫因素是造成不孕不育的重要因素之一, 免疫性不孕不育的检查已引起临床研究的重视, 女性生殖道具有酶免疫系统, 在正常情况下, 能降解进入的精子抗原, 使其不能到达免疫系统。AsAb是机体产生的与精子表面抗原特异性结合的抗体, 研究发现10%~30%的女性不孕不育症可能由AsAb所致, 已被列入人类不孕不育的确定指标之一[5], AsAb能够抑制精子穿透宫颈黏液, 抑制精子活性, 降低精子存活率, 阻止精卵结合, 从而降低受孕率。本文不孕不育患者血清中AsAb阳性16例, 占26.7%%, AsAb-IgM阳性27例, 占45.0%, 与对照组具有显著差异性, 说明了AsAb在不孕不育患者中的阳性率较高, 与文献报道一致。ACA是一种能够与磷脂结合的自身免疫性抗体, 争夺胎盘血管的磷脂受体, 导致胎盘血管形成血栓, 与流产、胎盘早剥、不孕不育的生殖疾病密切相关, ACA结合精子的磷脂部分, 使精子失去活性, 不能穿透入卵, 引起不孕。本文不孕不育组患者血清中ACA总阳性率28.3%, 正常对照组中总阳性率3.3%, 两组间检测结果具有显著差异性 (P<0.05) 。因此, AsAb和ACA检测对临床诊断与治疗不孕不育患者有重要的应用价值, 对其诊断、治疗具有重要意义。

参考文献

[1]徐淑琴, 黄吉.免疫性抗体对女性不孕不育检测的临床意义[J].实用预防医学, 2010, 9 (17) :1866.

[2]顾英, 陆启滨.抗心磷脂抗体与不孕不育关系的研究进展[J].河南中医学院学报, 2008, 23 (2) :84-85.

[3]乐杰.妇产科学[M].第5版.北京:人民卫生出版社, 2000:416-420.

[4]师萍, 杨万浩, 周艳.不孕不育妇女血清中抗心磷脂抗体、抗β2糖蛋白1抗体和抗精子抗体的检测价值[J].吉林医学, 2013, 34 (26) :5320-5322.