麻疹IgM抗体

麻疹IgM抗体（精选8篇）

麻疹IgM抗体 第1篇

关键词：麻疹,风疹,IgM抗体,上海

麻疹、风疹均是由病毒引起的急性呼吸道传染病,传染性强,易感人群多,临床症状相似,二者不易区别。为了掌握浦东新区麻疹发病情况,更好地开展麻疹监测工作和采取有效的预防措施,浦东新区疾控中心实验室对2012年收到的疑似麻疹病例血清标本全部测定麻疹Ig M和风疹Ig M抗体,现分析如下:

1 材料与方法

1.1 标本来源

标本来源于2012年浦东新区各级医疗机构送检的,临床诊断为麻疹疑似病例血清标本。

1.2 检测方法

所有送检标本均按照上海市麻疹监测方案的要求,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法。

1.3 试剂来源

由珠海经济特区海泰生物制药有限公司提供,具体操作方法均严格按照试剂说明书进行。

1.4 结果判定

以酶标仪判定,用波长450 nm测定OD值。样品OD值/阴性对照平均OD值≥2.1为麻疹Ig M抗体阳性;样品OD值≥临界对照OD均值为风疹Ig M抗体阳性。

1.5 统计方法

数据输入Excel 2003进行相关统计分析,率的比较采用χ2检验。

2 结果

2.1 麻疹疑似血清Ig M抗体检测结果

对2012年浦东新区疑似麻疹病例241例血清标本同时检测麻疹Ig M和风疹Ig M抗体。麻疹Ig M抗体阳性111例,阳性率为46.06%;风疹Ig M抗体阳性38例,阳性率为15.77%。其中有4例麻疹、风疹Ig M抗体均为阳性。全阴性92例。

2.2 不同性别分布情况

2012年共检男性疑似病例129例,麻疹Ig M抗体阳性61例,阳性率为47.29%;女性疑似病例112例,麻疹Ig M抗体阳性50例,阳性率为44.64%。不同性别人群麻疹抗体阳性率差异无统计学意义(χ2=0.22,P>0.05)。男性风疹Ig M抗体阳性27例,阳性率为20.93%,女性风疹Ig M抗体阳性11例,阳性率为9.82%,两者有显著性差异(χ2=5.57,P<0.05)。

2.3 不同时间麻疹、风疹Ig M抗体阳性分布情况

麻疹3~11月份流行,5~9月份发病99例,占全年发病总数的89.19%。风疹2~9月份流行,3~6月份发病30例,占全年发病总数的78.95%。有明显的季节性,见表1。

2.4 不同年龄麻疹、风疹Ig M抗体阳性分布情况

麻疹Ig M抗体阳性中最小3月龄,最大61岁。风疹Ig M抗体阳性中最小4岁,最大51岁,见表2。

2.5 麻疹、风疹Ig M抗体阳性接种史构成情况

无麻疹疫苗接种史或接种史不详者98例(88.29%),无风疹疫苗接种史或接种史不详者35例(92.11%)。麻疹和风疹病例均以无疫苗接种史或接种不详者占绝大多数,免疫史不详者多为未接种者,见表3。

2.6 麻疹和风疹Ig M抗体阳性率与采血时间的关系

将标本采集时间按出疹后3天与4~22天进行比较,4~22天的阳性检出率明显高于3天内(P<0.05),见表4。

3 讨论

在对241例疑似麻疹病例进行麻疹、风疹Ig M抗体检测中,麻疹Ig M抗体阳性111例,阳性率为46.06%,风疹Ig M抗体阳性38例,阳性率为15.77%。在麻疹疑似病例中风疹占一定比例。说明部分风疹病例被误诊为麻疹。同时提示我们也应密切注意风疹的流行与监测,制订预防措施,减少发病。241例麻疹疑似病例中,麻疹和风疹Ig M抗体均阴性的有92例,这其中可能有假阴性病例,也可能为其他发热出疹性疾病,需要进一步做实验研究。其中4例麻疹、风疹Ig M抗体均为阳性的标本,根据免疫史分析均系疫苗接种影响所致,与病例在近1个月内接种过麻疹疫苗有关,暂未发现双重感染。

从时间分布来看,以往麻疹、风疹一年四季均可发病,但以冬末春初为主,而本资料显示,春夏季为高峰季节。发病季节后移,有明显的季节性。111例麻疹Ig M抗体阳性主要集中在3~11月份,其中5~9月份为发病高峰,占发病数的89.19%。1月份、2月份和12月份为零病例,其他月份均为少数散发病例。风疹2~9月份流行,3~6月份发病30例,占全年发病总数的78.95%。1月份、10月份和12月份为零病例。考虑到上海地区春夏季气候、温度适宜麻疹、风疹病毒的繁殖活动有关。另外,夏季人群的流动性大、外出活动多也可能是其多发的因素之一。

从年龄结构分析看,麻疹Ig M抗体阳性人群的年龄分布较为广泛,最小的仅仅3月龄,最大61岁。麻疹的高发年龄主要分布于20~30岁年龄段和8个月~10岁以下年龄段,分别占总阳性数的36.04%和22.52%;其次是8个月以下婴儿,从本资料可以看出,8个月以下婴儿麻疹Ig M抗体阳性有14例,占总阳性数的12.61%,说明婴儿体内缺乏有效的抗体。其可能原因是母体通过胎盘传递给初生婴儿的抗体含量不高,婴儿缺乏有效的被动免疫。如果将婴儿首次麻疹免疫接种时间提早或者育龄妇女孕前再次接种麻疹疫苗,可能会减少8月龄以下婴儿的发病。8个月~10岁儿童,这部分儿童麻疹Ig M抗体阳性率高,可能与免疫空白或是接种过疫苗,但麻疹Ig G抗体水平达不到保护作用,再加上群体生活,相互之间易传染有关。这提示在儿童入学入托时应查验接种证,如有不合格的要就近补种疫苗。20~30岁成人病例增多源于体内有效麻疹抗体缺乏,其中一部分以前未接种过疫苗,一部分接种过疫苗但仍然发病,这可能与人工免疫产生的抗体相对较弱,维持时间相对较短有关[1]。因此,对这部分人群也应重视,需要监测其体内抗体水平并及时给予免疫接种。风疹Ig M抗体阳性率20~30岁组最高(47.37%),其次为30~40岁(23.68%),说明现阶段浦东新区风疹患者主要集中在青壮年。建议对这两组人群进行风疹疫苗接种,以提高体内风疹抗体水平,增强免疫力。

从性别方面来看,男性麻疹抗体阳性率为47.29%,女性为44.64%,男女麻疹抗体阳性性别差异无显著性。男性风疹抗体阳性率为20.93%,女性风疹抗体阳性率为9.82%,男性风疹抗体阳性率高于女性的原因有待进一步研究。

从麻疹、风疹免疫史分析,2012年浦东新区麻疹、风疹Ig M抗体阳性病例主要集中在麻疹、风疹无免疫史或是免疫不详人群中,说明应进一步加强麻疹、风疹查漏补种工作,提高易感人群麻疹、风疹免疫水平,形成群体性免疫屏障,阻断麻疹、风疹在人群中的传播。

麻疹、风疹Ig M抗体阳性率与采血时间密切相关,出疹4天后采集的血标本Ig M抗体阳性率(麻疹为49.75%、风疹为18.21%)明显高于3天内采集的血标本(麻疹为29.55%、风疹为4.55%),由于3天内采集的血标本测定结果未达到Ig M抗体滴度分布高峰,造成检测阳性率比较低,从而出现假阴性。故对出诊3天内采集的血标本,同时麻疹Ig M抗体、风疹Ig M抗体阴性的疑似病例,应在4~22天内重新采集第2份标本重复检测,以排除第1份标本存在的假阴性的可能,以保证结果的准确性。伍雅梅等[2]曾报道过,发病后4~21天Ig M抗体阳性率最高,因此,建议今后对麻疹疑似病例应采集双份血清,第1份在出疹后4~8天采集,第2份在出疹后9~21天采集最佳。

参考文献

[1]蔡平,张晓春,王玉芹,等.成都市正常人群麻疹抗体水平调查[J].现代预防医学,2005,32(9):1113.

麻疹IgM抗体 第2篇

【摘要】目的：分析近年来商城县麻疹的流行情况。 方法 ：对2004年至2008年商城县麻疹疑似病例的流行病学调查和血清学检测结果进行回顾性分析。结果 ：（1）五年商城县共报告180例麻疹疑似病例。实验室检测91例，检测率50.56%，麻疹IgM 抗体阳性66例，阳性率为72.53%。（2）≤15岁年龄组发病较多，占91%，且≤8月龄组的年龄组发病率较高。而≥15岁组发病率较低。（3）不同免疫史间IgM 抗体阳性率不同，有免疫史的阳性率低于无免疫史及免疫史不详组。 结论 ： 继续做好麻疹疫苗的常规免疫和强化免疫工作，仍然是控制麻疹病例的发生有效措施。

【关键词】麻疹；IgM抗体；诊断；流行病学调查

【中图分类号】R511.1

【文献标识码】B

【文章编号】1007-8231（2011）10-1832-01商城县近年来本县麻疹确诊病例发病率一直控制在 1/10万以下，但是由于近年来人口流动加大和新的免疫空白产生导致商城县从2006年起麻疹发病率上升显著，2007年本縣人口麻疹发病率达到10.03/10万，麻疹的控制与消除仍存在一定难度［3］。实验室检测是确诊麻疹病例的重要手段，2004-2008年商城县共接到本地疑似麻疹病例报告180 例, 采集病例血清91 例，对这180 例麻疹疑似病例分析如下:

1材料与方法

资料来源中国免疫规划检测信息管理系统中的麻疹监测系统,户籍在商城县的本县人口和现住址在商城县的外来人口麻疹疑似病例均属于商城县病例， 麻疹血清学检测由信阳市CDC完成并由市进行质量控制,风疹血清学检测由市CDC完成。

1.2 方法 ： 麻疹血清抗体检测采用酶联免疫吸附试验，麻疹检测试剂由中国CDC国家麻疹实验室统一提供,病例诊断与分类标准依据《河南省麻疹监测方案》。

1.3 统计分析 ： 将麻疹监测系统中的个案调查表导出为Excel 数据库进行统计分析。

2 结果

2.1麻疹病例分布情况 ：2004年-2008年五年共报告本地麻疹疑似病例180例（其中临床诊断175例，临床疑似2例，临床排除3例）。男性120 例，女性60例;≥15岁组发病率较低，≤15岁年龄组发病较高⑵。最小28天龄，最大54岁;冬春季发病较高，夏秋季发病较低;发病呈年度上升趋势。余集镇发病最高，苏仙石最低。

2.2麻疹抗体检测情况 ：报告本地麻疹疑似病例180例，实验室检测91例，检测率50.56%，≤8月龄组检测率较低。麻疹IgM 抗体阳性66例，阴性25例，阳性率为72.53%。1-2岁阳性率较高。

2.3免疫史情况分析 ：无免疫史和免疫史不详的病例发病比例和阳性率都较高，不同免疫史间IgM 抗体阳性率差异也有显著的统计学意义，有免疫史的阳性率低于无免疫史及免疫史不详组［1］。

3 讨论

近年来商城县麻疹发病率升高可能与多种因素有关。≤15岁以下儿童发病率较高和免疫史不同阳性率不同说明麻疹发病率升高可能与免疫接种率下降有关；近年来发病率变化趋势图说明也可能麻疹的发病与其发病周期性有关；≤8月龄组的发病率较高，说明麻疹发病呈小月龄趋势。2006年伏山乡发生了一起麻疹暴发、2007年余集镇发生了一起麻疹暴发。2006年和2007年发病率较高，与这两起爆发有关。

为做好麻疹的控制和消除工作，建议继续做好麻疹疫苗的常规免疫工作，提高免疫覆盖率，在15岁以下儿童进行麻疹疫苗的强化免疫，控制麻疹病例的发生⑵⑷。做好麻疹实验室监测工作，及时采样并注意麻疹疑似病例的采样时间，提高监测的敏感性、准确性和及时性［1］。

参考文献

［1］庞红，刘红脸，吴美华.上海市长宁区156例麻疹疑似病例血清IgM抗体检测结果分析 (j) 疾病监测，2007，22（3）：184-186.

［2]吴美忠，吴爱兰，陈茂芳.2005-2007年浙江省东阳市麻疹流行病学特征及防控策略探讨（J）疾病监测 2008,23（8）:499-500.

［3]徐英，2001-2007年江苏省无锡市锡山区麻疹流行病学分析（J）疾病监测 2008 23（11）:705-706.

隐性梅毒特异性IgM抗体检测分析 第3篇

1 资料与方法

1.1 临床资料

42例均为我院及惠州市第一人民医院2011年1月～2012年6月门诊初次诊断为隐性梅毒者。已治或经治后复查者除外。所有患者均知情同意后纳入研究行列。其中资料完整的有42例, 其中男18例, 女24例;年龄17～48 (28.6±9.87) 岁。滴度1:2～1:16。

1.2 治疗方法

苄星青霉素G240万U, 皮试阴性后分两侧臀部肌肉注射, 1次/w, 共3次 (青霉素过敏者除外) 。

1.3 随访复查

分别于治疗后3个月、6个月行TRUST、TP￣IgM￣WB检测。

1.4 试剂与方法

静脉血, 收集血清标本进行TRUST、Ig￣TPHA和TP￣IgM￣WB检测。均在24h内完成。RUST试剂盒由上海荣盛生物技术有限公司生产;PHA试剂为日本富士生物制品公司产品;P￣Ig M￣WB试剂由德国欧蒙试验免疫制品有限公司生产。操作均严格按照各试剂说明书要求进行, 试剂均在有效期内使用。

1.5 统计学方法

使用SPSS 16.0软件, 阴性率之间作计数资料的χ2检验。

2 结果

42例中TRUST、TPHA均阳性, 仅36例TP￣IgM￣WB阳性。治疗3、6个月后TRUST+TP￣IgM￣WB随访复查结果见附表。治疗后3、6个月TP￣IgM￣WB阴转率均较TRUST高。

3 讨论

近年来, 梅毒发病有逐年上升的趋势, 尤其是隐性梅毒。隐性梅毒因其无任何临床症状, 常被忽视, 其传染性更具隐匿性, 社会危害更大。病程1年内为早期隐性梅毒, 其治疗方法同一期梅毒;病程超过1年或病程不明的隐性梅毒, 则应按晚期梅毒处理。但因无临床症状, 难于确定病程和治疗方案, 而仅凭非螺旋体抗原试验测定抗体滴度鉴别早期梅毒与晚期梅毒并不可靠, 且部分呈假阳性, 尤其是肿瘤、类风湿性、自身免疫性疾病和老年人, 易造成医疗纠纷。

螺旋体进人机体后, 机体产生IgM抗体, 然后才是IgG抗体, 而且只要机体内有活梅毒螺旋体的抗原不断刺激, 梅毒螺旋体IgM抗体就会一直存在并且维持一定的水平, 是梅毒早期感染并活动的标志, 因此TP￣IgM的检测早期确诊隐性梅毒具有重要的意义[1]。但对于晚期隐性梅毒则意义不大, 因为随着时间的推移TP￣IgM不易检出。本文研究中有6例初诊患者Tp￣IgM阴性, 排除实验误差外, 患者可能处于晚期隐性梅毒阶段。因此, 理论上对于主要检测IgG抗体的初筛试验和确证试验均阴性的早期梅毒患者, IgM抗体检测具有有更重要意义。

梅毒螺旋体免疫印迹试验是20世纪80年代发展起来的一种检测技术, 使用血清蛋白印迹试验检测梅毒特异性IgM或IgG抗体, 其敏感性和特异性都很高。Marangoni等[2]研究发现, WB的敏感性、特异性均为99%, 高于FTA￣ABS (敏感性90%, 特异性89%) 。Dettori等[3]认为免疫印记法用于梅毒诊断优于FTA￣ABS和TPHA方法, 对Ⅱ期梅毒或早期隐性梅毒、神经梅毒的阳性率均为100%。本研究结果表明, 经正规驱梅治疗后3、6个月TP￣IgM￣WB阴转率均较TRUST低, IgM抗体水平逐渐下降, 传染性降低, 尚未发现复发、及再感染。Byrne等[4]报道免疫印记法对于非螺旋体标本 (包括正常标本、生物学假阳性标本以及γ球蛋白增高或抗核抗体的标本) 检测没有假阳性或可疑反应。临床可以避免漏诊和误诊。本研究结果初步表明, TP￣IgM￣WB检测有助于早期隐性梅毒的诊断和治疗后随访, 为血清学治愈提供有力的证据。由于未能完成至少2年的随访, 有待进一步研究。

摘要：42例隐性梅毒患者血清分别行甲苯胺红不加热血清反应素试验 (TRUST) 、梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA) 和梅毒特异性IgM抗体蛋白免疫印迹实验 (TP￣IgM￣WB) 。42例初诊隐性梅毒患者血清中, 36例TP￣IgM￣WB阳性。正规驱毒治疗后3、6个月复查:TRUST阴转率分别为7.14%、26.19%;TP￣IgM￣WB阴转率分别为33.33%、59.52%。在随访中, TP￣IgM￣WB阴转率均高于TRUST。抗梅毒螺旋体IgM抗体是梅毒感染最早期产生的抗体, 可初步推断隐性梅毒患者的病程并判断其传染性, 有助于隐性梅毒患者的血清学随访。

关键词：隐性梅毒,特异性,IgM抗体,检测

参考文献

[1]施辛, 石怡珍, 杨辰, 等.早期梅毒规范驱梅治疗后梅毒螺旋体IgM抗体的变化[J].苏州医学院学报, 2001, 21 (4) :442-443.

[2]Marangoni A, Sambri V, Stomi E, et a1.Treponema pallidum surface immunofluorescence assay for serologic diagnosis of syphilis[J].Clin Diagn Lab Immunol, 2000, 7 (3) :417-421.

[3]Dettori G, Grillo R.Evaluation of Western immunoblotting technique in the serological diagnosis of human syphilis infections[J].Bur J Epidemiol, 1989, 5 (1) :22.

麻疹IgM抗体 第4篇

1 材料与方法

1.1 材料

(1) IgA类单抗试剂:抗A单抗为杂交瘤2H10-E11株纯培养上清液, 抗B单抗为杂交瘤6-1-G11株纯培养上清液, 均为转瓶生产工艺生产。 (2) IgM类血型定型试剂:为国家定点生产单位生产的产品, 批号为050601。 (3) 红细胞:来自大庆市中心血站。 (4) 待定型血液样本:来自大庆市油田总医院、大庆市中西医结合医院等医院的门诊患者和住院患者, 共计507 114例。

1.2 方法

(1) 实验室主要指标检测:效价测定、亲和力测定、特异性检测、冷凝集素和不规则抗体检测均按文献[4]进行。 (2) 凝集抑制试验:分别将分泌型A型和B型人唾液提取物与倍比稀释的相应抗体混合, 室温孵育30min后观察混合前后抗体效价的变化。 (3) 吸收放散试验:分别取A型、B型和O型各3份红细胞, 以及A1型、A2型、Ax型、B型、B3型和Bx型红细胞, 经盐水洗涤3次后, 压积红细胞与抗体按1∶ 1混合, 4℃孵育1～2h, 离心取上清液测抗体效价, 即吸收试验;将沉淀红细胞用生理盐水洗涤3次, 配成50%红细胞悬液, 56℃孵育8～10min, 期间不断轻轻摇动, 离心取上清液测抗体效价, 即放散试验。 (4) 稳定性:将待检品置于4℃, 每2个月取出部分, 按方法 (1) 检测各项指标。 (5) 血型定型:检测方法按文献[3], 所有507 114份样本用IgA类血型定型试剂检测, 同时做正反定型验证。其中6 510份标本, 同时用IgA类和IgM类血型定型试剂检测, 再用正反定型验证。

2 结 果

2.1 效价

IgA类试剂抗A的效价为1∶ 512, 抗B的效价为1∶ 256, 而IgM类试剂抗A和抗B的效价均为1∶ 128。

2.2 亲和力

IgA类抗A试剂出现凝集时间为10s, 90s内凝集块达1mm2; 抗B试剂出现凝集时间为10s, 2min内凝集块达1mm2;IgM类抗A试剂出现凝集时间为4s, 50s内凝集块达1mm2;抗B试剂出现凝集时间为5s, 1min内凝集块达1mm2。

2.3 特异性

IgA类和IgM类抗A试剂与A型和A2型红细胞凝集, 与B型、O型、Ax型、B3型和Bx 红细胞均不凝集;IgA类和IgM类抗B试剂与B型和B3型红细胞凝集, 与A型、O型、A2型和Ax型均不凝集。

2.4 冷凝集素和不规则抗体

所有试剂均没出现凝集反应, 也未出现溶血、红细胞钱串以及冷凝集等现象。

2.5 凝集抑制试验

IgA类和IgM类抗A试剂与A型人唾液提取物反应后, 其抗体效价为0, 对照试剂与A型红细胞呈强阳性反应;IgA类和IgM类抗B试剂与B型人唾液提取物反应后, 其抗体效价为0, 对照试剂与B型红细胞呈强阳性反应。

2.6 吸收放散试验

IgA类和IgM类抗A试剂与对A1型和A2型吸收能力强而放散能力差, 对Ax型吸收能力差而放散能力强;IgA类和IgM类抗B试剂对B1和B3型吸收能力强而放散能力差, 对Bx型吸收能力差而放散能力强。

2.7 稳定性

IgA类抗A和抗B的效价1年内均为1∶ 256, 其他指标均达到或超过国家标准;IgM类抗A和抗B试剂第10个月时降到1∶ 64, 其他指标均达国家标准。

2.8 临床血型定型结果比较

用IgM类试剂检测507 114份样本, 其中包括中国人常见的和稀有亚型, 定型结果和正反定型结果一致。6 510份血样同时用IgA类和IgM类血型定型试剂检测, 再用正反定型验证, 所有血样血型均正确, 2类试剂的定型结果完全一致。

2.9 现场血型定型效果

虽然IgA类试剂血型定型的准确性和IgM类试剂一样, 但IgA类试剂出现凝集的时间较迟, 凝集块较小、易碎。

3 讨 论

实验检测的IgA类和IgM类试剂的特异性、冷凝集素和不规则抗体等指标均符合《中国生物制品规程》 (2000年版) 的要求, 凝集抑制试验和吸收放散试验也无明显差异。经对6510份样本血型定型结果比较, 2类试剂的血型定型准确率和对我国常见和不常见ABO血型亚型的检出率都是一致的。

IgA类的效价高于IgM类试剂, 分析并不是试剂本身的抗体类型所致, 而是因为获得高效价杂交瘤细胞株存在偶然性。国内的 IgM类试剂都是直接用红细胞免疫小鼠, 获得的阳性克隆有限, 筛选余地较小。笔者用纯化的血型物质免疫小鼠, 获得的阳性克隆较多, 筛选余地大, 获得几株高效价的单抗[1,2]。另外, 细胞株的稳定性也可能有一定影响, 因为用于生产的种子细胞经过长期克隆和传代, 其稳定性对能否稳定分泌高效价单抗至关重要。

IgA类试剂稳定性较好, 可能与试剂自身的抗体类型有关, 但更可能与IgA类试剂是纯细胞培养上清液配制, 而IgM类试剂一般在细胞培养上清液中添加一定的同型小鼠腹腔积液有关。虽然IgM类试剂的效价和稳定性都低于IgA类试剂, 但亲和力却高于IgA类试剂。不仅如此, 肉眼下凝集块的性状也明显不同。IgM类试剂加入红细胞后, 几秒钟就见明显凝集, 且均匀分布整个试管中, 不宜碎。而IgA类试剂加入红细胞后出现凝集较慢, 且凝集的红细胞只沉于管底, 易碎。

此外, 国内IgM类血型定型试剂因其纯细胞培养上清液效价等指标达不到国家标准, 添加了一定的同型小鼠腹腔积液, 有的单位将培养上清液经过浓缩等处理, 而我科生产的IgA类试剂是纯细胞培养上清液, 这可能也是出现不同亲和力和凝集效果的原因。

在血型定型工作中, 在准确率相同的基础上, 尽可能更快速、方便地判读结果相当重要, 尤其在血站对大量献血员的现场筛选时更为重要, 有时甚至是操作人员选择试剂的惟一标准。虽然IgA类试剂效价高、稳定性好, 但这些方面不占优势, 应该设法加以改进。

关键词：单克隆抗体,血型定型试剂

参考文献

[1]徐镜, 熊江霞, 王晓琴, 等.IgA类鼠抗人血型单抗的研制和临床应用[J].安徽医科大学学报, 1997, 31 (4) :297-299.

[2]薛绍礼, 刘敬苓, 宗琴珍.单克隆抗体血型定型试剂转瓶培养生产工艺[J].生物学杂志, 2003, 20 (4) :14-16.

麻疹IgM抗体 第5篇

临床上通过检测孕妇血清中风疹病毒Ig M抗体, 以确定新近感染或急性感染。目前人体血清中风疹病毒Ig M抗体的检测主要有酶联免疫法、化学发光法、 胶体金法和时间分辨免疫荧光法,前两种方法试剂盒为主流产品。风疹病毒Ig M抗体检测试剂盒生产企业众多,在试剂原材料选择和参考品制备方面存在差异,导致质量参差不齐,因此为了加强对风疹病毒Ig M抗体检测试剂盒的监督管理,规范市场秩序,保障产品使用安全有效,2014年6月中国食品药品检定研究院起草了《风疹病毒Ig M抗体检测试剂盒抽验方案》,并于2014年10月中旬前完成检验检测工作,现将抽验情况及结果汇报如下。

1仪器与试剂

仪器酶标仪(型号:MULTISKAN MK3,美国热电公司);全自动化学发光免疫分析仪(型号: Liaison XL型,Dia Sorin S.p.A公司);化学发光免疫分析仪(型号:MP280,北京泰格科信生物科技有限公司),化学发光仪(型号:Maglumi 2000,深圳市新产业生物医学工程股份有限公司);化学发光微粒子免疫分析仪(型号:ARCHITECT i2000,Abbott Ireland Diagnostics Division公司)。

参考品风疹病毒Ig M抗体国家参考品:批号: 360006-201101,由19份样品组成,包含5份阳性参考品、10份阴性参考品、1份重复性参考品和3份最低检测限参考品,均由中国食品药品检定研究院提供;企业参考品均由各企业提供。

样品本次抽验共收到来自14家生产企业的17批次试剂,其中酶联免疫类试剂13批次,化学发光类试剂4批次。样品中,国产试剂15批次,进口试剂2批次;主要抽自生产企业15批次,仅2批次抽自使用单位(临床医院)。

2检验依据和方法

法定检验按照企业产品注册标准,采用企业参考品,对各试剂进行检测,检验项目包括阳性符合率、阴性符合率、重复性和检测限。各项目要求参见各标准。试验中操作步骤严格按照各自说明书进行。

探索性试验按照风疹病毒Ig M抗体检测试剂盒行业标准,采用风疹病毒Ig M抗体国家参考盘,对各试剂进行检测,检验项目同法定检验。各项目要求分别如下: 5份RV Ig M抗体阳性参考品,应不得出现假阴性(阳性符合率); 10份RV Ig M抗体阴性参考品,应不得出现假阳性(阴性符合率);重复性参考品应检测为阳性,且批内精密度变异系数(CV%)应不大于15.0%(精密度); 3份最低检测限参考品,L1和L2应能检出(检测限)。试验中操作步骤严格按照各自说明书进行。

3检验结果

除1批次试剂盒因企业不提供参考品,无法进行检验予以退检,其余16批试剂结果如下:

法定检验按照企业产品注册标准和企业参考品进行检验,16批次中15批次试剂的阴、阳性符合率、 检测限均满足要求,合格率为93.8%。批内精密度变异系数在1.6%~7.3%范围内,均小于10.0%。1批次试剂部分阴性样本出现阳性结果,阴性符合率不符合规定,判为不合格。

探索性试验采用行业标准和国家参考品进行检验,16批次中仅11批次试剂合格,合格率为68.8%, 5批次不合格试剂主要不符合项及表现分别为:重复性参考品检测结果为阴性(5批次);检测限参考品L1~L3均为阴性或者L2~L3均为阴性(3批次);阳性参考品P1~P5均为阴性(1批次)。

4讨论

国家食品药品监督管理总局网站上的信息统计结果显示,截止至2015年1月,风疹病毒Ig M抗体检测试剂盒国产注册证28个,进口注册证14个。主要为酶联免疫法试剂盒,其次为化学发光法试剂盒。国产生产企业为24家,主要集中北京和广东省,其余散布于浙江、河南、福建和山东。进口代理企业有12家,分布于上海、北京和广东省。此次监督抽样仅抽取了来自5个省市的生产企业或使用单位的试剂,共计14家企业的17批产品,抽样生产或代理企业仅占38.9%。 建议今后加大抽验力度,完善和优化抽样模式,使抽验产品可以反映该类产品的真实情况,抽验结果可以成为有效的参考数据。

法定检验中,依据企业注册标准和企业参考品进行检测,1批次试剂不合格,阴性参考品检测结果为阳性,其产生的主要原因可能是:1阴性参考品在分装的时候被污染了;2与同种属病毒发生交叉反应; 3与其他抗体类型如Ig G等发生交叉反应;4阴性参考品在分装的时候被污染,或者分装错误。

风疹病毒Ig M抗体已有国家参考品和行业标准 (YY/T 1235—2014),故本次监督抽验中还开展了探索性实验,参照行业标准要求,以国家参考品为样本进行检测。在探索性研究实验中,不合格批次上升至5批次,合格率下降至68.8%。主要体现为假阴性表现,其产生的主要原因可能是:1企业选择的风疹病毒Ig M抗体的配对抗原或抗抗体,亲和力不足,在识别风疹病毒Ig M抗体的时候,识别效率低;2包被的抗原或抗抗体浓度较低;3企业检测限或灵敏度参考品设置不合理,导致试剂盒质量无法保证。

通过对此次监督抽验结果的分析,我们认为, 由企业提供企业参考品进行注册检验,在判定产品合格方面存在着一定的风险。因为检验机构无法有效确认企业参考品信息的真实性,难以进行合理的监督和管理。建议今后检验机构采用国家参考品进行注册检验,企业则尽量采用国家参考品或经国家参考品标化的企业参考品,用于试剂的质量控制。因为国家参考品来源信息清楚,多种方法确认并经协作标定,质量可靠,判断标准客观公正。

同时,我们发现企业注册标准也存在以下问题: 12家企业产品注册标准中缺少关键性条款——检测限而检测限是反映试剂可检测的最低样本浓度,是判断试剂敏感性、关系产品质量的重要指标之一,不应省略,故建议在延续注册时,补充该条款。2标准中条款内容措辞不严谨或不完整如“生产企业最低检测限参考品应不低于1:800倍稀释”,这句话从字面的理解,只是描述了最低检测限参考品的情况,并没有说明对检测限项目的要求,此即措词不严谨,应有明确的限定:“生产企业最低检测限参考品1:800倍稀释后,应能检出”。又比如下面这项对最低检出限的描述:“系列稀释度参考品S1~S5(系列稀释度从1:2~1:32):S1~S3须检测为阳性,S4可检测为阴性或阳性”,缺少S5的检测结果。此即措词不完整, 应增加:“S5检测应为阴性”。以上问题虽非原则性问题,但企业在制定标准时,应遵循科学、严谨、 准确、完整的基本原则。3标准项目表述不一本次抽验检测4个项目,各项目表述五花八门,如阳/阴性参考品符合率、阳/阴性符合率、阳/阴性样本符合率等;而对于检测限,也有灵敏度、最低检出限、最低检出量等多种表述;同样,精密度、精密性、重复性、批内不精密性、批内精密度、分析内精密度。虽然这些表述都无原则性错误,但建议今后的企业标准项目的书写应参考行标表述,规范用词。

麻疹IgM抗体 第6篇

1 临床资料

病例1:男, 89岁, 主诉:反复咳嗽, 咳痰40年, 心累、气紧2个月, 加重3 d, 既往50年前患肺结核, 治愈。查体:T:36.6℃, P:70次/min, R:20次/min, BP:123/62 mm Hg。数字X线 (DR) :双肺慢性支气管炎, 肺气肿样X线改变伴双肺感染, 双侧胸膜局部不规则肥厚。检验结果:RF:1.3, Ig G:9, Ig A:5.1, Ig M:1.7, C3:1.49, C4:0.16, 抗核抗体 (ANA) 、抗ENA抗体谱 (包括抗UIRNP/抗Sm、抗Sm、抗SSA、抗SSB、抗Scl-70、抗JO-1、抗核糖体P蛋白) :阴性。诊断:慢性阻塞性肺疾病急性期 (二重感染) , 慢性肺源性心脏病。

病例2:女, 64岁, 主诉:咳嗽、咳痰10 d, 气紧1周, 既往10年前诊断为肺结核, 治愈。查体:T:36.5℃, P:59次/min, R:19次/min, BP:167/80 mm Hg。DR:右肺下野炎性变, 右肺上部及左肺中部纤维硬结节灶。CT:右上胸膜粘连, 胸廓塌陷, 右肺散在粟粒、斑片及条索状病灶, 目前以纤维硬结节灶为主。检验结果:RF:6.0, Ig G:12.96, Ig A:2.39, Ig M:2.14, C3:1.11, C4:0.29, 抗核抗体 (ANA) 、抗ENA抗体谱 (包括抗UIRNP/抗Sm、抗Sm、抗SSA、抗SSB、抗Scl-70、抗JO-1、抗核糖体P蛋白) :阴性。诊断:肺炎, 肺结核复发。

病例3:男, 60岁, 主诉:咳嗽、咳痰、气紧10 d。查体:T:36.3℃, P:77次/min, R:21次/min, BP:107/61 mm Hg。DR:双肺感染性改变, 较前有所吸收, 双侧胸膜积液, 左侧肺门上方似见团片影。患者3年前开始出现心累气紧, 活动后为甚, 2年前入院行心脏彩色多普勒超声示先天性心脏病, 房间隔缺损。检验结果:RF:2.9, Ig G:9.85, Ig A:2.39, Ig M:3.01, C3:1.54, C4:0.44, 抗核抗体 (ANA) 、抗ENA抗体谱 (包括抗UIRNP/抗Sm、抗Sm、抗SSA、抗SSB、抗Scl-70、抗JO-1、抗核糖体P蛋白) :阴性。诊断:肺部感染, 老年性肺气肿, 先天性心脏病, 房间隔缺损。

2 讨论

Ig M是近期感染的一个有效标志物, 一般情况下仅在感染2个月~3个月存在于血清中, 主要用于疾病的早期诊断。文献表明, 九项呼吸道病原体Ig M抗体检测试剂是一种可靠的检测多种呼吸道病毒和非典型病原体的方法[4], 相对于传统的微生物培养方法而言, 其具有特异性和灵敏度高、简便快捷、价格低廉等优点。该试剂采用的是免疫间接荧光法, 检测的非典型病原体包括:嗜肺军团菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、Q热立克次体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒1, 2, 3型。在此法中, 须保证质控孔阴性。在上述的3例患者中, 出现了质控孔阳性, 同时肺炎支原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒1, 2, 3型均阳性的现象, 更换试剂批号重复检测一次, 所得结果一致。因此得到的检测结果是不可信的。

在九项呼吸道非典型病原体Ig M的检测中, 资料显示, 类风湿因子会对结果产生干扰, 此外患有自身免疫性疾病的患者, 也会在细胞上发生非特异性反应, 质控孔出现阳性[5]。但上述3例患者资料显示, 其RF、Ig G、Ig M、Ig A、C3、C4正常及抗核抗体 (ANA) 、抗ENA抗体谱均阴性, 排除二者的影响。患者均系老年人, 病例1, 2中, 都曾患有肺结核, 肺结核是由结核分枝杆菌引起的一种严重的呼吸道传染性疾病, 具有传染性强、疗程长、难治愈、危害大的特点, 现已成为全球性的严峻公共卫生问题[6]。在结核病患者中, 不同年龄机体的免疫状态是不同的, 研究表明, 老年肺结核患者的CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞计数明显降低, CD4+T细胞的比率降低更明显, 而抗结核抗体的水平变化不明显, 提示老年结核患者的免疫功能下降, 主要以细胞免疫下降为主[7]。此2例老年患者都有肺结核病史, 并有1例复发, 有可能造成患者的免疫功能下降;再者肺结核的治疗主要是采用抗生素, 长期使用抗生素及免疫抑制剂会对肝、肾功能甚至机体产生不良影响, 这一系列原因都有可能导致患者免疫系统紊乱, 导致九项呼吸道病原体Ig M抗体检测的质控孔出现阳性。病例1, 3分别患有获得性的和先天性心脏病, 心肌都有一定的损伤甚至坏死, 坏死的心肌可导致抗心肌自身抗体形成, 此抗体虽无致病作用, 但同属一种继发性免疫反应。由此我们推断, 心肌损伤导致的继发性免疫反应可能会使自身免疫系统紊乱甚至自身免疫性疾病的发生, 从而使九项呼吸道病原体Ig M抗体检测的质控孔出现阳性。

综上所述, 本文对九项呼吸道病原体Ig M抗体检测的临床干扰因素提出了几点推测, 如年龄、肺结核及心脏损伤都有可能导致机体免疫系统出现紊乱, 从而使九项呼吸道病原体Ig M抗体检测质控孔出现阳性。在临床工作中, 无法得到准确的检测结果时, 可以采用其他检测方法加以分析验证, 如细菌病原体的分离培养和病毒的组织细胞培养、分子学方法等, 同时医生需结合患者临床症状综合分析后再进行诊疗。

参考文献

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麻疹IgM抗体 第7篇

1 临床资料

1.1 病例资料

患者, 女, 25岁, 汉族, 正常妊娠, 临床诊断为G1P0 41+1周宫内妊娠。孕妇入院常规检查血型。

1.2 试剂及方法

微柱凝胶血型卡及Coomb卡由Dianna公司提供;抗-A、抗-B反定型试剂, Rh血型试剂, 谱细胞, 红细胞血型抗体筛选细胞, 2-Me应用液均由上海血液生物医药有限公司提供。

2 结果

2.1 正定型“B”型, Rh血型CCDee。反定型与A细胞、B细胞出现凝集 (3+) , 与O细胞出现凝集 (2+) , 自身细胞不凝集。正反不符。O细胞出现凝集提示血清中存在不规则抗体。

2.2 直接抗人球蛋白试验阴性。

2.3 抗体筛选及抗体鉴定:见表1、表2。从表1可见患者血清于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号抗体筛选细胞反应为++-预示有特异性血型抗体。进一步用谱细胞进行鉴定, 结果见表2。从表2的反应格局可以看出患者血清中可以检测出盐水介质的抗-M。依照产前检查方法用2-Me应用液破坏IgM型抗-M后, 重新进行检测。患者血清与抗体筛选细胞及谱细胞在抗人球蛋白介质中有反应, 说明患者血清中同时含有IgG型抗-M抗体。

2.4 反定型细胞的制备:用抗-M单克隆血清选出无M抗原 (NN) 型的A、B、O献血员红细胞各3份, 分别混合后洗涤3次, 制成3%的标准红细胞备用。用制备好的细胞重新做ABO血型鉴定, 显示正反一致。

2.5 用该患者红细胞与抗-M及抗-N反应, 结果与抗-M未发生凝集, 与抗-N凝集强度为4+。

综上所述, 该患者为“B”型。体内含IgM、IgG型抗-M抗体。

3 讨论

抗-M是MN血型系统常见抗体, 分为天然抗体和免疫性抗体。大多数为IgM类性质, 偶见IgG类, 多为输血或妊娠刺激产生, 可以产生严重的输血反应。IgG型抗-M亦可通过胎盘, 引起新生儿溶血病的发生。抗-M在室温鉴定血型时常发现盐水凝集, 使正反定型出现不符。因此必须进一步检查以得到明确结果。本文患者无输血史, 头胎妊娠, 在孕41周检出高效价抗-M抗体, 并且是IgG和IgM混合抗-M抗体, 可能是因为母体孕期免疫活跃, 孕妇在怀孕过程中胎儿红细胞免疫产生的。高效价的抗-M严重干扰了血型鉴定。因此对于待产的孕妇建议常规检查ABO正反定型、不完全抗体的筛查, 以确保孕妇和胎儿安全。

麻疹IgM抗体 第8篇

1 资料与方法

1.1 资料:选取2011年2月至2013年3月在桂林医学院第二附属医院收治的27例带状疱疹患者, 所有患者都经过门诊确诊。27例带状疱疹患者, 其中男性患者15例, 女性患者12例。年龄在19~79岁, 平均年龄41.4岁。同期选取健康志愿者27例, 其中男性患者16例, 女性患者1例。年龄在20~81岁, 平均年龄43.7岁。两组患者治疗前年龄、性别等一般临床资料比较无显著性差异, 具有可比性。所有患者及健康志愿者均之情同意参与本研究, 并签署知情同意书。

1.2 方法:由护士抽取5 m L左右带状疱疹患者和健康志愿者静脉血, 经离心后分离出血清, 待备用;按照ELISA试剂盒相关操作和试剂进行血清孵育, 经显示反应后, 通过在酶标仪上检测结果, 具体操作遵从说明书操作要求[2]。

1.3 统计学处理:采用统计学软件SPSS 17.0进行数据分析, 组间对比进行χ2检验, 以P<0.05表示具有显著性差异, 有明显的统计学意义。

2 结果

带状疱疹患者和健康志愿者三种不同抗体检测结果:由表1得知, 带状疱疹患者和健康志愿者三种不同抗体检测结果, 带状疱疹患者Ig A、Ig G和Ig M抗体检测分别有7、21、1例呈阳性, 健康志愿者Ig A、Ig G和Ig M抗体检测分别有0、19、0例呈阳性。Ig A体内抗体在带状疱疹患者与健康志愿者之间比较有统计学意义 (P<0.05) ;而Ig G和Ig M在两组无比较无统计学差异 (P >0.05) 。

3 讨论

水痘-带状疱疹病毒引起带状疱疹, 疱疹病毒的核衣壳蛋白和糖蛋白有可能诱导机体产生抗体与病毒结合, 起到防御作用病情的严重程度影响中和反应的强度, 具体机制尚且不清楚[3]。首次感染水痘-带状疱疹病毒诱导机体产生Ig A、Ig G和Ig M抗体, 再次感染时机体会及时产生免疫应答, 感染水痘-带状疱疹病毒后短时间内会产生Ig G和Ig M抗体, 但是Ig M抗体随着时间的推移滴度降低, Ig G抗体持续时间比较久, 可能长达多年[4]。研究者证明带状疱疹和水痘发病时Ig A均成阳性, 不能作为指标进行区分[5,6,7]。酶联免疫吸附剂测定在对抗体的测定方面有着广泛运用的方法, 基本原理为首先使抗体或抗原在一种载体表面结合成固相, 同时没有失掉免疫活性;然后将抗体或抗原和特定的酶连接, 形成酶标抗体或抗原, 这种特殊的抗体或抗原, 由于和酶连接, 所以既保留酶的活性, 同时没有失去免疫活性, 检测时, 把检测样品和酶标抗体或抗原按一定的步骤操作然后产生显色反应[8,9]。ELISA试剂盒相关试剂和血清孵育, 经过显示反应, 在酶标仪上测定, 具体操作遵从说明书操作。本次研究为更好的区分带状疱疹与其他容易混淆疾病, 建立带状疱疹实验室检测指标和标准, 尝试建立三种抗体水平和带状疱疹相关关系, 为带状疱疹检测提供依据, 对我院7例带状疱疹患者Ig A、Ig G和Ig M抗体进行测定, 带状疱疹患者和健康志愿者三种不同抗体检测结果, 带状疱疹患者Ig A、Ig G和Ig M抗体检测分别有7、21、1例呈阳性, 健康志愿者Ig A、Ig G和Ig M抗体检测分别有0、19、0例呈阳性。Ig A两组有统计学差异, Ig G和Ig M两组无统计学差异。Ig G和Ig M抗体指标, 带状疱疹患者和健康志愿者没有显著性差异, 所以其不能被用于判别带状疱疹的指标, Ig A抗体两组测定对象显示显著性的差异, 有可能作为带状疱疹患者病毒检测指标。

综上所述, Ig M和Ig G抗体不能作为带状疱疹患者病毒检测指标, Ig A抗体有可能作为带状疱疹患者病毒检测指标, 但是需要更多样本和相关研究进一步进行验证。

参考文献

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