急性肝损伤范文

急性肝损伤范文（精选11篇）

急性肝损伤 第1篇

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药物

降酶灵胶囊:由江西银涛药业有限公司提供, 规格:30粒/瓶, 每粒胶囊含0.15g五味子提取物, 批号:20020304。联苯双酯片:江苏黄河药业股份有限公司生产, 批号:20010923。

1.1.2 实验动物

昆明种小鼠:体质量25~28g, 60只, 雌雄各半, SD大鼠:体质量250~280g, 雄性60只, 购自上海斯莱克实验动物有限责任公司, 实验动物生产许可证号:SCXK (沪) 2003-0003, 动物合格证号:SCXK (沪) :0002755、0003108。

1.1.3 试剂

ALT、TBIL:北京中生生物工程高技术公司生产;CCl4, 上海试剂四厂生产;D-氨基半乳糖 (D-Gal) , Sigma公司生产。

1.1.4 仪器

BT-224半自动生化仪, 意大利产。

1.2 方法

1.2.1 对小鼠CCl4急性肝损伤模型的保护作用[1]

取小鼠60只, 雌雄各半, 按体质量分层随机分为6组, 每组10只, 即对照组、模型组、降酶灵胶囊0.135、0.270和0.540g/kg剂量组和联苯双酯15mg/kg组。连续7d灌胃给予相应剂量的药物, 对照组和模型组给予等体积的蒸馏水, 1次/d, 末次给药后1h, 除对照组均腹腔注射0.1%CCl4麻油混悬液10mL/kg, 然后禁食过夜, 16h后摘眼球取血, 分离血清, 检测血清ALT值。取血后处死小鼠立即剖腹, 取同一部位的肝组织, 用甲醛固定, 包埋、切片, 进行病理学观察, 病理结果观察分级[2]:汇管区肝细胞胞浆疏松, 病变为1级;点状坏死, 肝小叶结构无破坏, 病变为2级;肝实质内累及数个肝细胞坏死小灶, 病变为3级;灶性坏死, 并部分结构破坏, 病变为4级;正常则为0级, 取每组平均数作为该组动物的损伤程度, 测得数据进行组间t检验。

与模型组比较*P<0.05, **P<0.01

与模型组比较*P<0.05, **P<0.01

1.2.2 对大鼠D-Gal盐急性肝损伤模型的保护作用[2]

取雄性大鼠60只, 按体质量分层随机分为6组, 每组10只, 即对照组、模型组、降酶灵胶囊0.068、0.135、0.270g/kg剂量组和联苯双酯组7.5mg/kg。各组动物均于12h内连续灌胃给药3次, 对照组和模型组给予等体积的蒸馏水, 其他组给予相应剂量的药物, 第1次给药的同时腹腔注射D-Gal (800mg/kg) , 最后1次给药后12h, 摘眼球采血分离血清, 测血清ALT与TBIL的含量, 所测数据均进行组间t检验。

2 结果

2.1 降酶灵胶囊对CCl4致小鼠急性肝损伤的保肝作用

降酶灵胶囊组给药后均能降低由CCl4所引起的小鼠急性肝损伤血清ALT值, 与模型组比较差异有显著性和非常显著性意义 (P<0.05和P<0.01) , 在光镜下, 给药组的损伤度明显较模型组小, 见表1。

2.2 降酶灵胶囊对D-Gal致急性肝损伤大鼠模型的保护作用

降酶灵胶囊0.135、0.270g/kg均能明显降低由D-Gal所致大鼠急性肝损伤血清ALT与TBIL, 与模型组比较差异有显著性和非常显著性意义 (P<0.05和P<0.01) , 见表2。

3 讨论

CCl4和D-Gal均可造成明显的动物肝脏损伤[3,4], CCl4致肝损伤是目前普遍应用的实验肝损伤模型, 其进入体内经肝酶P450激活产生自由基和三氯甲基自由基CCl3+, CCl3+和肝细胞内质网膜上的脂质起过氧化反应, 引起细胞膜结构和功能的损伤, 而D-半乳糖胺盐酸盐是一种肝细胞磷酸尿嘧啶核苷干扰剂, 通过竞争生成二磷酸尿苷半乳糖使磷酸尿苷耗竭, 导致物质代谢障碍, 引起肝细胞变性、坏死。

实验中我们通过制备不同的动物模型, 观察降酶灵胶囊的保肝降酶作用, 结果显示, 降酶灵胶囊能够明显降低CCl4所致小鼠ALT的升高, 使肝细胞的损伤度较模型组明显减轻, 能明显降低D-半乳糖胺盐酸盐所致大鼠ALT的升高, 使肝损伤后TBIL较模型组明显降低, 结果提示降酶灵胶囊具有改善CCl4和D-Gal所致肝损伤, 具有明显的保肝降酶降低胆红素的作用。

摘要：目的 观察降酶灵胶囊保肝降酶的作用。方法 采用四氯化碳 (CCl4) 制作小鼠的急性肝损伤模型, 然后给予不同剂量降酶灵胶囊, 观察小鼠血清谷丙转氨酶 (ALT) 和肝病理学的变化;用D-氨基半乳糖对大鼠造成急性肝损伤模型, 再给予不同剂量降酶灵胶囊, 观察大鼠血清ALT和总胆红素 (TBIL) 的变化。结果 降酶灵胶囊0.135、0.270、0.540g/kg组均能明显降低由CCl4引起的小鼠急性肝损伤的ALT;降酶灵胶囊0.135、0.270g/kg组均能显著降低由D-氨基半乳糖所致大鼠急性肝损伤血清ALT与TBIL。结论 降酶灵胶囊具有保肝降酶和降低胆红素的作用。

关键词：降酶灵胶囊,急性肝损伤,四氯化碳,D-氨基半乳糖

参考文献

[1]罗先钦, 徐晓玉, 徐嘉红.净肝脂胶囊对小鼠急性肝损伤及脂肪肝的保护作用研究[J].中药药理与临床, 2007, 23 (2) :62-64.

[2]应用英.鸭乙型肝炎病毒感染的研究[J].中华病理学杂志, 1989, 18 (1) :2-5.

[3]张馨木, 贺巾超, 杨莉莉等.rhKD/APP对急性肝损伤小鼠的保护作用[J].吉林大学学报 (医学版) , 2007, 33 (1) :51-54.

肝损伤是什么原因 第2篇

本病由于遭受外界暴力而致。

肝脏遭受钝性暴力后，根据暴力的大小可引起不同类型的肝裂伤。轻者为浅表裂伤，出血量少，有些可以自行停止;重者裂伤较深，有些呈不规则星状或甚至严重碎裂，失去活力或脱落在腹腔内。这种损伤主要表现为腹腔内出血及出血性休克。血液对腹膜有一定的刺激性，可出现轻度腹膜刺激征，如合并胆管断裂，胆汁外漏则有较严重的胆汁性腹膜炎体征。若伤及肝静脉主干、下腔静脉肝后段、门静脉干支可出现持续大量出血，很快发生休克，甚至迅速死亡。失去活力或散落在腹腔的肝组织将坏死分解，连同聚积的血液和胆汁可继发细菌感染形成腹腔脓肿。肝包膜下裂伤由于包膜完整，肝实质破裂出血聚在包膜下形成血肿。轻的损伤出血少，形成的血肿小，有些可自行吸收;重伤则出血量多，可将肝包膜广泛分离形成大血肿，血肿的压迫尚可使其周围的肝细胞坏死。血肿也可继发感染形成脓肿。张力高的血肿可使包膜溃破转为真性裂伤。中央型肝裂伤主要为肝实质深部破裂，而肝包膜及浅层肝实质仍完整。这种裂伤可在肝深部形成大血肿，使肝脏体积增大，张力增高，血肿周围组织受压坏死。这种血肿可穿破入腹腔形成内出血及腹膜炎，或穿入胆管表现为胆道出血，也可继发感染形成肝脓肿。

开放性、贯穿性损伤的严重性取决于肝脏受伤的部位和致伤物的穿透速度。子弹和弹片穿透肝组织时可将能量传递至弹道周围的组织，使之破坏。伤及肝门大血管时，肝实质损害可不严重，但由于持续大量出血，仍有较高的死亡率。除损伤的种类及伤情外，合并多脏器损伤是影响肝外伤死亡率的重要因素。伤及的脏器越多，伤情越重，治疗越难，死亡率也越高。

肝损伤的临床表现

开放性损伤，可根据伤口的位置、伤道的深浅与方向，诊断肝损伤多无困难。闭合性真性肝裂伤，有明显腹腔内出血和腹膜刺激征的诊断也不难。唯对包膜下肝裂伤、包膜下血肿和中央型裂伤，症状与体征不明显时诊断肝裂伤可能有困难，必须结合伤情和临床表现作综合分析，并密切观察生命体征和腹部体征的变化。

肝损伤的临床表现主要是腹腔内出血和血液、胆汁引起的腹膜刺激征，按损伤类型和严重程度而有所差异。

(一)真性肝裂伤 轻微损伤出血量少并能自止，腹部体征也较轻。严重损伤有大量出血而致休克。病人面色苍白，手足厥冷，出冷汗，脉搏细速，继而血压下降。如合并胆管断裂，则胆汁和血液刺激腹膜，引起腹痛、腹肌紧张、压痛和反跳痛。有时胆汗刺激膈肌出现呃逆和肩部牵涉痛。

(二)肝包膜下裂伤 多数有包膜下血肿。受伤不重时临床表现不典型，仅有肝区或右上腹胀痛，右上腹压痛，肝区叩痛，有时可扪及有触痛的肝脏。无出血性休克和明显的腹膜刺激征。若继发感染则形成脓肿。由于继续出血，包膜下血肿逐渐增大，张力增高，经数小时或数日后可破裂，出现真性肝裂伤的一系列症状和体征。

急性肝损伤 第3篇

【关键词】肝脏损伤；抗结核性治疗；药物

【中图分类号】R-1 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2016）04-0146-02

肺部结核病属临床中比较典型且难治的病症之一，医生对其展开病情稳定控制时，普遍予以抗结核类药物，并能获得相应程度的用药成效[1]。然而，运用抗结核类药的全过程中，很可能继发肝部受损（或异常损伤）症状[2]。为认知抗结核药、肝脏受损间的具体关联性，本文抽选因患上肺结核病而施行相应药物治疗的119例患者，统计、整合用药后出现不良症状的有关数据，重点探讨肝部受损的具体状况，再展开综合化分析，并作以下阐述：

1.对象及方法

1.1研究对象

随机选择2015年4月-2016年4月因患上肺结核病而进入罗平县人民医院施行相应药物治疗的119例患者，上述入选病例接受过系统化的规范检查，由医师遵照肺结核病的权威诊疗标准展开相关症状判别，且已确诊并运用抗结核类药实施对症治疗。包含：65例男性、54例女性，年龄在24-83岁间，全部达到此次调查活动的具体评估要求，同时，各项基础性资料比较无显著性差异（P>0.05），可进行同期对照评估。

1.2方法

1.2.1搜集入选病例的调查数据

对全部病例各项有关肝脏受损的症状资料进行搜集、统计，同时记录每例患者的基础性信息，以求整个调查操作过程客观、可靠、真实。另外，统计病例接受抗结核性治疗的所用药物类别、使用量、给药方式、给药后反应状况等有关数据。另外，探查病人在施予有关结核药后，其机体变化状况，并记录以下病征的出现情况：体温异常变化（多数为升高）、恶心呕吐、全身性无力、皮肤瘙痒或起疹子、腹部疼痛、不喜进食、厌恶油腻及肝部发肿、按压疼痛、尿液颜色变深等，之后推算出这些病征的出现率及其有关数据。

1.2.2药物所致肝脏受损的鉴别方法

对肝脏的损伤情况及程度实施判别时，是以ALT、ULN、AST、TB等实时检测指标为评估对象，若病人血清检测鉴定结果中，ALT或者TB指标异常上升，且超出ULN最大值2倍（或更大），视为肝脏受损。另外，AST、TB指标出现同时升高的现象，当中1项超出ULN最大值2倍（或更大），视为肝脏异常受损。依循酶学检测指标对肝脏的受损类型展开分类，大致能分成肝脏细胞受损型、胆汁淤损类型、混合性肝受损型。若肝脏因运用抗结核药出现的受损有关症状后，其典型表现有：体温异常变化（多数为升高）、恶心呕吐、全身性无力、皮肤瘙痒或起疹子、腹部疼痛、不喜进食、厌恶油腻及肝部发肿、按压疼痛、尿液颜色变深等。从上述得知，每隔两周测定一次ALT（丙氨酸转氨酶）、AST（天冬氨酸转氨酶）、TB（总胆红素），并和（ULN）正常标准值比对。同时，以结核药的施药情况来鉴定所用药品和肝脏受损的因果关联性，再得出统一性评估结论。

1.3统计学研究方法

此研究中，所有相关的肝脏受损调查数据均运用SPSS21.0版统计软件予以处理，运用 2检验计数资料，运用t检验计量资料，运用（ ±s）表示计量数据；计数资料用（n/%）表示；P<0.05表明对比差异较大，具有统计学意义。

2.结果

119例患者共有42例在用药后出现肝脏损伤有关症状，占比35.29%。当中，出现恶心呕吐的病例数最多，占比71.43%（30/42），排在其后的逐次是：全身无力28.57%（12/42）、皮肤起疹26.19%（11/42）、腹部疼痛21.43%（9/42）、体温升高11.90%（5/42）、不喜进食4.76%（2/42）、肝脏受损相关症状2.38%（1/42）。

用药后出现肝脏损伤有关症状的42例中，有37例同时出现1-3种不同症状，占88.10%；其余5例同时出现了4-6种不同症状，占11.90%。

3.讨论

肝脏因药物因素而出现受损病变，其病理机制与肝脏组织中毒或过敏有关联性[3]。施予肺结核药后出现肝脏受损的英文缩写是“ATLI”，若病人血清检测的ALT或者TB指标异常上升，且超出ULN最大值2倍（或更大），视为肝脏受损。同样，AST、TB指标出现同时升高的现象，当中1项超出ULN最大值2倍（或更大），视为肝脏异常 [4]。从临床调研报道资料看出，用抗结核药后二至三个月内出现的负性反应以超敏反应居多，皮肤发痒、皮肤起疹、腹部不适、体温升高、呕吐或恶心等均属超敏反应的范畴，而施药超过三个月后出现的负性反应以中毒性反应居多[5]。

此次研究当中， 119例患者共有42例在用药后出现肝脏损伤有关症状，占比35.29%。当中，出现恶心呕吐的病例数最多，占比71.43%，排在其后的逐次是：全身无力28.57%、皮肤起疹26.19%、腹部疼痛21.43%、体温升高11.90%、不喜进食4.76%、肝脏受损相关症状2.38%。当中，有37例同时出现1-3种不同症状，占88.10%；其余5例同时出现了4-6种不同症状，占11.90%。结果显示，本次入选病例多为超敏性副反应。

综合阐述得知，肺部结核病的药物治疗期间，患者存在出现肝脏损伤有关症状的风险性因素。若给药过程中，医疗人员探查到患者出现肝脏损伤的有关症状，要慎重检测其ATLI指标值，以确认有无出现肝脏损伤。

参考文献：

[1]嵇虎，笪正，陈道文，等.常规抗结核治疗联合异烟肼鞘内注射治疗结核性脑膜炎合并结核瘤的疗效观察（附3例报告）[J].临床神经病学杂志，2014，27（5）：378-380.

[2]胡启江，徐美华，汪亮，等.替比夫定在慢性HBV感染合并肺结核患者抗结核治疗中减轻肝损害的临床观察[J].中华临床感染病杂志，2014，7（3）：235-238.

[3]惠石生，陈立章，李战战，等.拉米夫定对肺结核合并慢性乙型肝炎患者抗结核治疗肝损害干预作用的Meta分析[J].中南大学学报（医学版），2015，40（8）：912-920.

[4]施海燕，廖宝林，林思炜，等.慢性乙型肝炎病毒感染合并肺结核患者抗结核治疗中肝损伤的防治研究[J].中华临床感染病杂志，2013，6（2）：90-93.

千世杨对小鼠急性肝损伤的保护试验 第4篇

关键词：千世杨,四氯化碳,肝保护

千世杨是由姬松茸多糖、鱼腥草、茶多酚等中药经过提取而成的, 是传统人用抗癌中药组方, 具有显著的抗癌疗效。肝损伤是多种严重肝脏疾病发生、发展及最终走向肝功能衰竭的始动环节和共同途径。各种有害因素所致的肝损伤可表现为肝坏死、脂肪肝、胆汁淤积、肝纤维化、肝硬化及肝癌等[1]。四氯化碳 (CCl4) 是经典的化学性肝损伤毒物[2], 试验研究了千世杨对CCl4诱导的肝损伤小鼠的保护作用, 为更好地开发和利用千世杨药物提供试验依据。

1 材料

1.1 试验药物

千世杨, 由天津济世生物科技有限公司提供, 常温保存。

1.2 试验动物

昆明种小鼠50只, 雌雄兼用, 体重为18～22 g, 由北京军事医学院试验动物中心提供, 动物许可证号为SCXK- (军) 2007-004。

1.3 试剂

橄榄油 (分析纯) , 购自上海索莱宝生物科技有限公司;CCl4 (分析纯, 生产许可证号为津临许化-0489) , 购自天津市北方化玻购销中心。

丙氨酸氨基转移酶 (ALT) 、天门冬氨酸氨基转移酶 (AST) 、总蛋白 (TP) 、白蛋白 (ALB) 、葡萄糖 (GLU) 、碱性磷酸酶 (ALP) 测定试剂盒, 均购自中生北控生物科技股份有限公司;丙二醛 (MDA) 、谷胱甘肽-S转移酶 (GSH-ST) 试剂盒, 均购自南京建成生物工程研究所。

1.4 仪器

752分光光度计, 上海菁华科技仪器有限公司生产;5810R冷冻型台式大容量高速离心机, 德国Eppendokf公司生产;XMT-DA数显调节仪 (浙制02810169) , 余姚市亚星仪器有限公司生产;microlab 300半自动生化分析仪, 合普机电工程 (天津) 有限公司生产。

2 方法

2.1 模型的制备及给药

将50只小鼠随机分成5组, 每组10只。给药组每天灌胃给药1次, 连续给药7 d。空白对照组和模型组给予等体积的生理盐水。末次给药1 h后模型组和给药组按体重10 mL/kg腹腔注射0.2% CCl4植物油[3]。禁食24 h后摘眼球采血, 分别放入抗凝及促凝管中, 备用。快速处死小鼠, 取肝脏, 并在肝左叶相同部位取约 0.3 g组织, 放入冰冷的生理盐水中漂洗, 用滤纸拭干, 用组织匀浆器制成10%肝组织匀浆, 备用。

2.2 生化指标的检测

血清ALT、AST、TP、ALB、GLU、ALP和肝组织MDA、GSH-ST指标的测定均按试剂盒要求进行。

2.3 数据的统计学处理

应用SPSS11.0统计软件进行处理, 试验数据以平均数±标准差表示, 组间比较采用单因素方差分析。

3 结果与分析

3.1 千世杨对急性肝损伤小鼠血清ALT和AST活性的影响 (结果见表1)

由表1可知, 腹腔注射CCl4可引起小鼠急性肝损伤, 模型组血清ALT、AST活性明显升高 (P<0.05) , 表明造模成功, 高剂量组的千世杨可抑制CCl4造成的ALT活性升高 (P<0.05) , 中、高剂量组的千世杨可抑制CCl4造成的AST活性升高 (P<0.05) 。提示中、高剂量千世杨对CCl4引起的小鼠急性肝损伤有保护作用。

注:同列数据肩标含相同字母表示差异不显著 (P>0.05) , 字母完全不同表示差异显著 (P<0.05) 。

3.2 千世杨对急性肝损伤小鼠血清TP和ALB水平的影响 (结果见表2)

注:同列数据肩标含相同字母表示差异不显著 (P>0.05) , 字母完全不同表示差异显著 (P<0.05) 。

由表2可知, 模型组小鼠血清TP和ALB水平与空白对照组相比都有所降低, 但是差异不显著 (P>0.05) 。低剂量的千世杨给药组与模型组相比TP含量有所升高但是差异不显著 (P>0.05) 。给药组ALB水平与模型组相比有所升高, 其中高剂量组达到显著水平 (P<0.05) 。

3.3 千世杨对急性肝损伤小鼠血清GLU和ALP活性的影响 (结果见表3)

注:同列数据肩标含相同字母表示差异不显著 (P>0.05) , 字母完全不同表示差异显著 (P<0.05) 。

由表3可知, 模型组与空白对照组相比GLU含量和ALP的活性均差异不显著 (P>0.05) 。

3.4 千世杨对急性肝损伤小鼠肝组织中MDA含量和GSH-ST活性的影响

注:同列数据肩标含相同字母表示差异不显著 (P>0.05) , 字母完全不同表示差异显著 (P<0.05) 。

由表4可知, 腹腔注射CCl4可引起小鼠急性肝损伤, 模型组小鼠的肝组织GSH-ST活性明显低于空白对照组 (P<0.05) , 表明肝损伤模型成立。而低、中剂量千世杨给药组使损伤小鼠的肝组织GSH-ST活性升高, 但2组间差异不显著 (P>0.05) 。模型组与空白对照组比较, MDA含量差异不显著 (P>0.05) 。

4 讨论

CCl4是典型的用于建立动物化学性肝损伤的亲肝性毒物, 其在肝脏经细胞色素 P450激活引起膜的脂质过氧化, 其脂质过氧化物在肝细胞的病变过程中发挥重要作用[4,5,6]。

AST和 ALT是肝损伤的标志酶, 在正常条件下, 这些酶存在于细胞质中, 当细胞膜受到损伤时就会释放出来, 在体液中流通, 故血清中 AST和 ALT活性的升高能够反映细胞膜结构的损伤[7]。试验结果表明, 灌胃千世杨能够抑制肝损伤小鼠血清 AST和 ALT活性的升高, 说明千世杨具有较为明显的改善肝脏功能的作用。

TP、ALB这2个指标反映了肝脏蛋白质合成及代谢的能力。如果蛋白质含量降低就表示肝脏合成功能受到损害, 其降低程度与肝损伤的严重程度成正比。在临床上, TP、ALB常用来作为肝脏疾病的诊断指标[8]。在试验中, 模型组与空白对照组相比小鼠ALB和TP含量都有所降低但差异不显著 (P>0.05) , 高剂量组ALB水平与模型组相比达到显著水平 (P<0.05) , 说明千世杨具有一定的肝保护作用。

ALP是肝脏细胞内的酶, 一般情况下肝内酶的活性比血清高1 000～5 000倍。CCl4代谢产生的自由基首先使肝细胞膜出现不同程度的损伤, 造成细胞内液外流, 由CCl4中毒引起动物ALP水平升高[9]。在试验中, 模型组和给药组ALP水平出现显著升高的趋势, 但差异不明显。模型组和给药组血糖含量也都高于空白对照组, 但各组差异也不显著。

脂质过氧化程度可以通过脂质过氧化产物MDA含量来间接评价[10]。MDA含量高低间接反映机体组织或细胞受自由基攻击和损伤的严重程度[11]。试验造模并未引起小鼠肝组织中MDA含量升高, 说明MDA损伤不明显, 试验未能考察出千世杨对MDA含量的影响。

GSH-ST具有清除过氧化物和解毒等多种功能, 可作为肝脏损伤的敏感指标, 当肝细胞受损害时, 肝细胞合成的GSH-ST明显减少, 肝组织活性降低[12]。在试验中, 模型组GSH-ST活性明显低于空白对照组, 而给药组GSH-ST活性有所升高, 说明了千世杨的肝保护作用。

参考文献

[1]彭维兵, 李国强, 孙伟之, 等.2种新型18β-甘草次酸修饰物对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用[J].中国海洋大学学报, 2011, 41 (1/2) :133-136.

[2]张红梅, 王立林, 赵杰, 等.不同给药途径的云芝多糖抗小鼠CCl4肝损伤的试验研究[J].现代预防医学, 2009, 36 (17) :3332-3334.

[3]许青松, 宫德正, 谭成玉, 等.壳寡糖对四氯化碳致急性肝损伤小鼠的保护作用[J].中国海洋药物杂志, 2006, 25 (5) :31-33.

[4]茹仁萍, 尤琳雅, 陈晓瑾.18α、18β-甘草酸及其不同配比物对CCl4肝损伤大鼠的影响[J].中华中医药学刊, 2011, 29 (2) :355-358.

[5]LESAGE G D, BENEDETTI A G, LASER S, et al.A cute carbontetrachloride feeding selectively damages large, but not small cholan-giocytes from normal rat liver[J].Hepatology, 1999, 29 (2) :307-319.

[6]杨小林, 陈平.竹节参多糖、总皂苷对小鼠急性肝损伤保护作用的研究[J].中国中医基础医学杂志, 2011, 11 (1) :65-66.

[7]YANG Y, WANSHUN L, BAOQIN H, et al.Protective effects of chi-tosan oligosaccharide and its derivatives against carbon tetrachloride-induced liver damage in mice[J].Hepatol Res, 2006, 35 (3) :178-184.

[8]齐艳萍.鹿茸对小鼠急性肝损伤的修复作用及相关机理研究[D].哈尔滨:东北林业大学, 2008.

[9]张国蓉, 王燕, 刘安军.富硒酵母对CCl4肝损伤小鼠保护作用的研究[J].食品科技, 2009, 34 (3) :118-125.

[10]GIROTTI A W.Lipid hydroperoxide generation, turnover, and effectoraction in biological systems[J].J Lip Res, 1998, 39 (8) :1529-1542.

[11]许金鹏, 张慧慧, 李朝品, 等.原卟啉钠对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用及其机制[J].中国试验方剂学杂志, 2011, 17 (5) :168-172.

急性肝损伤 第5篇

化学性肝损伤，是指由化学性肝毒性物质所造成的肝损伤。化学性物质主要来自于工作生活环境、食物、药品及大量饮酒等，作为人体的重要解毒器官的肝脏，具有肝动脉和肝静脉双重血液供应。这些化学物质可通过胃肠道或体循环进入肝脏进行转化，因此肝脏容易受到化学物中的毒性物质损害，造成化学性肝损伤，肝内的物质代谢发生严重障碍，最直接的后果是引发肝损伤，做好个人防护迫在眉睫！

化学性肝损伤，主动防护是关键

大自然和工业生产过程中均存在一些对肝脏有毒性的物质，称为“亲肝毒物”，这些毒物在人群中普遍易感，潜伏期短，病变的过程与感染的剂量直接相关，可引起不同程度的肝细胞坏死、脂肪变形、肝炎、肝硬化，甚至肝癌。

面对恶劣的环境污染，每个人生活中或多或少已经接触到污染或正在接受污染中，正因为如此，不能轻视对肝脏的养护，肝脏受损百病生，健康大厦顷刻坍塌。肝脏养护专家指出，提前预防控制化学性肝损伤的唯一出路，肝损伤一旦发生，很难逆转。预防化学性肝损伤的保健食品应该及早补充！

康尔健——护肝“急先锋”

在环境污染的重压之下，康尔健当仁不让成为健康护肝的急先锋。为什么康尔健能够在污染环境下备受推崇？

抗突变之王——硒酸酯多糖 硒的传奇从著名的“迈阿密抑瘤试验”，成为人们抗癌的首选，而无机硒有一定毒性，人体吸收也有障碍，经过中科院专家的研究，最新一代的硒酸酯多糖依靠稳定性和功效性都使之成为当仁不让的安全抗癌物质。

生命之源——姬松茸 姬松茸（又名巴西蘑菇），日本东京大学医学部、国立肿瘤研究所单位的临床试验表明其有3大作用：1.抗肿瘤；2.抑制四氯化碳所诱发的肝脏障凝；3.强化免疫，诱发干扰素的产生。

护肝天使——五味子 五味子，《新修本草》载“五味皮肉甘酸，核中辛苦，都有咸味”，故有五味子之名。古医书称它荎蕏、玄及、会及，最早载于《神农本草经》，列为上品，现代研究证实其有滋补强壮、护肝解毒作用，药用价值极高，一般搭配硒制作养肝片，有保肝护肝功能。

外源性自由基的克星——茶多酚 研究表明，茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用，能有效地阻止放射性物质侵入骨髓，并可使锶90和钴60等物质迅速排出体外，被医学界誉为“辐射克星”。

既然没有办法改变现状，那就想办法保护自己，生活在当代社会的重压之下，选取对自己健康有帮助的好产品来阻击环境污染，才是健康长寿的前提。

急性肝损伤 第6篇

1 材料与方法

1.1 实验材料

实验动物:40只SD雄性小鼠,体重18~22 g,购自三峡大学实验动物中心。主要试剂:银杏内酯购自宜昌康正药业有限公司(规格:2 ml/支,批号:1408143),酒精度42%(V/V)稻花香白酒,湖北稻花香酒业股份有限公司,ALT、AST检测试剂盒,MDA、SOD试剂盒购自上海科华生物工程股份有限公司,全自动生化分析仪(迈瑞BS-350,中国迈瑞公司),离心机(TG16-WS,上海卢湘仪公司)。

1.2 方法

1.2.1 动物分组

将40只SD雄性小鼠按体重随机分为五组:空白组、模型组、银杏内酯低、中、高剂量组,每组8只。

1.2.2 给药方法

空白组、模型组用生理盐水灌胃10 d,银杏内酯低、中、高剂量组小鼠分别采用银杏内酯0.4、0.8、1.6 g/kg灌胃,连续10 d,第11天隔夜禁食后,模型组和银杏内酯各组小鼠白酒灌胃0.016 L/kg(6.72 g/kg),空白组灌胃相同剂量的蒸馏水,3 h后处死。

1.2.3 血清AST、ALT及肝脏MDA、SOD测定

小鼠断头处死后,迅速心脏采血与分离肝脏,-80℃保存备用。心脏采血后,13 000 r/min,离心15 min,取血清,在全自动生化分析仪上检测ALT、AST。取肝组织0.3 g,观察其病理变化,将剪碎的肝组织在玻璃匀浆管中匀浆,再将匀浆液离心13 000 r/min,离心10 min取上清液,分装待用,分别按MDA、SOD试剂盒说明书操作,采用考马斯亮蓝法测定肝组织蛋白含量,通过计算可求出样品中的MDA的含量及SOD的活力。

1.3 统计学处理

所得实验数据采用SSPS 11.0进行分析,计量资料用(±s)表示,多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 小鼠血清AST、ALT水平比较

模型组血清ALT及AST水平高于空白组,差异均有统计学意义(P<0.01),说明动物模型复制成功。银杏内酯各组小鼠血清中ALT和AST水平均低于模型组,随银杏内酯剂量增加,小鼠ALT、AST水平降低。银杏内酯中、高剂量组AST、ALT水平低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),见表1。

2.2 各组肝组织MDA、SOD水平比较

模型组肝组织MDA明显高于空白组,SOD明显低于空白组,差异均有统计学意义(P<0.01);银杏内酯中、高剂量组肝组织MDA均低于模型组,SOD均高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),见表2。

2.3 肝组织病理学观察

光镜观察空白组肝组织形态学正常;而模型组可见紊乱的肝细胞索,肝细胞肿胀变性,胞质疏松,胞质内可见大小不一的脂肪空泡和水样变性,小叶内片状坏死,毛细血管及汇管区内胆管胆汁淤积,汇管区大量炎细胞浸润,以中性粒细胞和淋巴细胞为主,门管区有不同程度的小胆管增生,与正常组有明显差异;银杏内酯低剂量组与模型组无明显差异,而银杏内酯中、高剂量组表现为肝细胞点状或灶状坏死,甚至有的仅有肝细胞变性和点状坏死,肝小叶结构基本正常,与模型组比较有明显差异。

3 讨论

肝脏是酒精吸收后的主要代谢场所,对酒精发生生物转化作用。正常情况下,机体内存在活性氧和自由基清除抗氧化系统,自由基清除剂对维持机体的正常生命活动起着重要的作用。乙醇导致肝细胞损伤的机制较复杂,普遍认为抗氧化损伤、脂质过氧化损伤及免疫损伤等起主要作用[3]。乙醇作为一种强烈的氧化应激源,在代谢过程中诱生出大量的自由基,许多疾病的发生都与自由基的氧化破坏有关,是造成多器官、多系统损伤的重要机制之一[4,5]。过量饮酒,当超过机体抗氧化系统的清除能力时,氧化损伤难以避免,其中以肝脏的损伤最为严重[6]。

本研究采用酒精急性肝损伤模型,一次大剂量酒精冲击(42%V/V,0.016 L/kg)和禁食联合造模,其机制除与乙醇早期干扰肝脂质代谢外,还与禁食引起肝脂肪动员有关,引起糖原含量降低,加速糖异生合成脂肪[7,8]。ALT与AST主要分布在肝脏的肝细胞内,其升高的程度与肝细胞受损的程度相一致,在一定程度上可以反映肝细胞的损伤程度。本研究发现,预先给予银杏内酯进行干预,银杏内酯中、高剂量组和模型组比较,血清ALT和AST水平明显降低,可见银杏内酯对急性酒精性肝氧化损伤具有较强的保护作用。MDA是脂质过氧化反应的主要产物之一,MDA也是反映肝损伤程度的有效指标,其含量越高说明肝细胞膜脂质过氧化越强,受损越严重[9]。SOD为自由基清除剂,是生物体内清除自由基的首要物质,减弱机体的氧化应激状态。本研究预先给予银杏内酯进行干预,银杏内酯中、高剂量组和模型组比较,肝组织MDA明显较低,肝组织SOD明显较高,说明银杏内酯可提高肝组织SOD水平,降低MDA水平,从而有防治酒精性肝损伤的作用。

综上所述,不同剂量的银杏内酯可以降低小鼠血清中ALT、AST和肝组织MDA水平,并能提高SOD水平,结合光镜观察结果,说明银杏内酯起到抗脂质过氧化作用,对小鼠酒精性肝损伤有保护作用,为临床上银杏内酯用于防治酒精性肝细胞氧化损伤提供科学依据。

摘要：目的:探讨银杏内酯对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法:将40只SD小鼠随机分为五组,分别为空白组、模型组及银杏内酯低、中、高剂量组。采用一次大剂量酒精灌胃制作小鼠肝损伤模型。检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)来评估银杏内酯对小鼠肝脏的作用。结果:模型组血清ALT及AST水平高于空白组,差异均有统计学意义(P<0.01),说明动物模型复制成功。银杏内酯中、高剂量组AST、ALT水平低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);模型组肝组织MDA明显高于空白组,SOD明显低于空白组,差异均有统计学意义(P<0.01);银杏内酯中、高剂量组肝组织MDA均低于模型组,SOD均高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:银杏内酯对小鼠急性酒精性肝脏氧化损伤有保护作用。

关键词：银杏内酯,酒精,氧化损伤,保护作用

参考文献

[1]杨鹏飞,陈卫东.银杏内酯B的药理作用研究进展[J].安徽中医学院学报,2012,31(5):121-123.

[2]吴碧莲,陈玲珑,郑鸣.银杏内酯对CCl4诱导的小鼠肝损伤的作用研究展[J].中国当代医药,2014,21(5):11-14.

[3]黄庆科,林菊生,陈必成.血红素加氧酶1对大鼠急性酒精性肝损害保护作用的实验研究[J].中华消化杂志,2007,27(7):490-491.

[4]Loguereil C,Federieo A.Oxidative stress in viral and alcoholic hepatitis[J].Free Radic Biol Med,2003,34(1):1-10.

[5]Reinke L A.Spin trapping evidence for alcohol-associated oxidativestress[J].Free Radic Biol Med,2002,33(10):953-957.

[6]粱相珍.大蒜多糖对慢性酒精中毒小鼠肝损伤的保护作用[D].广州:暨南大学,2010.

[7]邱萍,刘平平,孔德松,等.复方银杏制剂对急性酒精性肝损伤小鼠的防护作用及其机制[J].中国药理学与毒理学杂志,2014,28(3):373-379.

[8]Zhao M,Huang J M,Yang X F,et al.Compare the two models of carbon tetrachlorideliver injury and alcoholic liver injury[J].Chin J Public Health,2004,20(11):1343-1345.

急性肝损伤 第7篇

关键词：壳寡糖,酒精性肝损伤,保护作用

饮酒是人类社会酒文化的一部分,有着根深蒂固的历史。现代社会随着物质文化生活的改善,成年人和未成年人饮酒现状不容乐观[1]。由饮酒引起的酒精性疾病尤其是酒精性肝病日益增多。人们在天然产物中寻找防治酒精性肝损伤的药物,例如:露笋对酒精性肝损伤大鼠有保护作用,它可降低酒精性肝损伤大鼠肝细胞脂质过氧化,提高肝细胞线粒体抗毒酶活性[2];中药健脾理气活血方对抗大鼠酒精性肝损伤、降低血浆内毒素和TNF-α蛋白表达[3];葛根素通过抑制β-EP、自由基的释放,抑制血小板积聚,对急性酒精中毒及急性肝损伤起保护作用[4]。

壳寡糖是天然多糖壳聚糖经酶降解后得到的低分子量产物,具有水溶性好、易被动物体吸收和增强免疫功能等特点,已经广泛地应用于食品之中[5]。本文研究壳寡糖对急性酒精性肝损伤的保护作用。

1 材料与方法

1.1 试剂与动物

壳寡糖,分子量为2300,本实验室用半纤维素酶降解壳聚糖制备[6],用蒸馏水稀释成0.67 g/m L壳寡糖溶液。47.5%酒精由湖北斯布道化工有限公司提供的95%的医用级酒精用蒸溜水稀释而成。ALT、AST和GGT试剂盒,购于北京利德曼生化技术有限公司;TUNEL试剂盒,由德国罗氏公司生产,按说明书操作。Wistar雌性大鼠由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供,体重为105~135 g。

1.2 仪器设备

离心机,KDC-40型,科大创新股份有限公司中佳分公司。全自动生化分析仪,美国Backman CX-9型。

1.3 方法

1.3.1 动物分组造模

30只雌性大鼠随机分成对照组10只,酒精组10只,壳寡糖组10只。对照组大鼠按体重15 g/kg生理盐水一次性灌胃。酒精组大鼠按体重15 g/kg 47.5%酒精一次性灌胃。壳寡糖组大鼠按体重0.01 m L/g壳寡糖溶液灌胃后0.5 h再按体重15 g/kg 47.5%酒精一次性灌胃。灌胃后48 h取血清检测相关酶学变化,取肝组织检测病变。

1.3.2 血清肝相关酶学检测

取出的血液于4 000r/min离心5 min分离血清后,用全自动生化分析仪测定ALT、AST和GGT。

1.3.3 光学显微镜检查

取出的一部分大鼠肝组织在经过固定、脱水、浸蜡、包埋、切片、HE染色等步骤制片后在光镜下观察肝细胞病理变化;取出的另一部分大鼠肝组织在经过固定、脱水、浸蜡、包埋、切片、脱蜡、晾干、TUNEL试剂显色等步骤制片后在光镜下观察凋亡细胞,并计算5个高倍视野中阳性肝凋亡细胞核数占该视野肝细胞核总数的比例,求平均数。

2 结果

2.1 血清肝相关酶学变化

通过对各组所测ALT、AST、GGT相关数据用SPSS16.0进行方差分析,并用最小二乘法进行多重比较,酒精组和壳寡糖组的酶学检测数值均极显著高于对照组,P<0.01;壳寡糖组ALT、AST较酒精组极显著降低,P<0.01;壳寡糖组GGT较酒精组显著降低,P<0.05,见表1。

注:1)与对照组比较,P<0.01;2)与酒精组比较,P<0.01;3)与酒精组比较,P<0.05

2.2 肝组织病理变化

肝组织HE染色切片显示,酒精组大鼠肝小叶结构紊乱不清,肝门管区炎性渗出,肝组织炎细胞浸润。肝细胞脂肪变性,肝细胞内脂肪空泡形成;广泛水变性,细胞及细胞核肿大淡染;较多的肝细胞点状、片状坏死,单个或几个或成片的肝细胞核浓缩、核碎裂、核溶解等。壳寡糖组肝小叶结构清楚,未见肝细胞脂肪变性和肝细胞片状坏死,但肝门管区有炎性渗出,肝组织有炎细胞浸润,有少许肝细胞水肿和点状坏死,见图1。对照组未见肝细胞病理改变。

肝组织TUNEL染色显示正常肝细胞核呈蓝色、绿色,而凋亡肝细胞核呈棕黄色、棕褐色。酒精组和壳寡糖组大鼠均出现肝细胞凋亡,但酒精组凋亡肝细胞核数占肝细胞核总数的48.2%,壳寡糖组凋亡肝细胞核数占肝细胞核总数的26.7%,壳寡糖组的凋亡肝细胞核数与肝细胞核总数之比极显著低于酒精组,P<0.01,见图2和表2。对照组仅4例有个别视野近肝小叶中央静脉处见1、2个凋亡细胞。

3 讨论

酒精在肝内代谢过程中可使NADH/NAD比值增高,从而抑制肝细胞线粒体三羧酸循环,乳酸增多,耗氧量增加,出现肝细胞变性、坏死、纤维化。酒精代谢产生的乙醛对肝细胞有很强的毒性作用。BARDAG-GORCE等[7]在观察血酒精浓度与肝损伤关系时发现肝组织缺氧后NADH/NAD比值改变,且含氧量低的肝细胞损伤发生在血液酒精浓度的峰值段。补体和巨噬细胞与酒精性肝病也有一定的关系[8]。酒精在肝细胞内还抑制了肝杀菌肽的表达,从而影响铁的动态平衡[9]。肝脏铁负荷增加,可催化自由基的生成,并增强肝细胞的氧化应激反应。

在酒精性肝病的防治方面,QING等[10]研究认为乳酸菌通过增加胃肝首过代谢降低血液中的酒精浓度而有效地保护酒精性胃肝损伤。乳酸菌GG[11]、枸杞多糖[12]都有防治大鼠酒精性肝病过氧化作用。大鼠酒精性肝病时TGF-β1和α-SMA升高,葛根素对TGF-β1和α-SMA的表达有调节作用[13]。XU等[14]研究显示细胞调节抗氧化应激反应的转录因子NF-E2-related factor 2(Nrf2)有助于预防和改善酒精等毒物引起的肝损伤和肝纤维化。

急性肝损伤 第8篇

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2012—2015年莱州市人民医院收治的急性药物性肝损伤患者40例。纳入标准:具备以下第1条再加上2~7条中任何2条[1]:(1)用药后1~4周内出现肝损害;(2)初发症状可有过敏现象,如发热、皮疹、瘙痒等;(3)末梢血中嗜酸粒细胞比例>6%;(4)有肝细胞损害或肝内胆汁淤积的病理改变和临床表现;(5)药物淋巴细胞转化试验或巨噬细胞移动抑制试验阳性;(6)病毒性肝炎血清标志物均为阴性;(7)以往有药物性肝损害史,再次应用相同的药物可诱发。随机将患者分成试验组与对照组,各20例。两组患者在年龄、性别、体质指数、肝功能指标〔总胆红素(TBi L)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)〕比较,差异无统计学意义(P>0.05,见表1),具有可比性。

1.2 治疗方法

对照组患者给予5%葡萄糖溶液500ml+门冬氨酸钾镁(齐鲁制药有限公司,国药准字H37022281)20ml静脉滴注,1次/d,疗程为4周。试验组患者在对照组基础上加用5%葡萄糖溶液250ml+腺苷蛋氨酸(注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸,浙江海正药业股份有限公司,国药准字H20100034)1000mg静脉滴注,1次/d,疗程为4周。

1.3 观察指标与疗效判定标准

比较两组患者治疗前及治疗2、4周临床疗效、肝功能改善情况及不良反应发生情况。临床疗效判定标准:显效:治疗后患者临床症状完全消失,ALT、AST、TBi L、ALP较治疗前下降≥75%;有效:治疗后患者临床症状改善,ALT、AST、TBi L、ALP较治疗前下降50%~74%;无效:治疗后患者临床症状无好转,ALT、AST、TBi L、ALP较治疗前下降<50%。总有效率=(显效例数+有效例数)/总例数×100%。不良反应观察两组患者治疗后心悸、胸闷、水肿等症状发生情况,并查血常规、尿常规、尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)、12导联心电图。

1.4 统计学方法

采用SPSS 13.0统计软件进行数据处理,计量资料以±s表示,采用t检验;计数资料采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 肝功能改善情况

治疗2、4周试验组患者肝功能改善总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05,见表2)。

2.2 不良反应

治疗后两组患者均未发生心悸、胸闷、水肿等症状,且治疗前后两组患者血常规、尿常规、尿素氮、肌酐、12导联心电图等检查均无明显变化,未发现明确不良反应。

3 讨论

腺苷蛋氨酸是一种存在于人体组织和体液中的生理活性物质,参与体内许多重要的生化反应,其重要作用在于在体内促使细胞质膜磷脂甲基化起到调节肝脏细胞膜流动性的作用;通过转巯基反应起到促进解毒过程硫化产物合成的作用;抗氧化性能改善肝功能,可应用于急、慢性肝病引起的胆汁淤积[2]。

肝脏是腺苷蛋氨酸合成、代谢的主要场所。腺苷蛋氨酸的合成是肝脏蛋氨酸代谢的开始,在这一反应中,甲基由ATP向蛋氨酸转移,腺苷蛋氨酸合成酶起催化作用。肝毒性药物可导致肝细胞坏死、肝细胞膜通透性增加,或肝细胞水平的胆汁生成和排泄障碍,从而导致血清酶的活性增高和/或肝内胆汁淤积,这一过程产生大量的自由基(NO和OH·),与腺苷蛋氨酸合成酶相互作用,可使后者失活,导致由蛋氨酸向腺苷蛋氨酸的转化减少,肝内的谷胱甘肽水平下降,可使肝细胞对自由基及其他内外源物质的抵御作用减弱,氧化作用及由此生成的自由基将导致各种形式的肝脏损伤和坏死[3],从而有更多的自由基生成,形成了恶性循环,防止胆汁淤积的正常生理过程被削弱。此时胆汁分泌减少,经胆汁排泄的物质,尤其是胆红素、胆盐及酶类在血中积聚起来,临床上就会出现一系列的综合征和肝功能损害。因此补充外源性的腺苷蛋氨酸有助于恢复肝细胞功能,促进黄疸消退[4,5,6]。

[例(%)]

注:与对照组比较,*P<0.05

本研究结果显示,肝功能改善总有效率高于对照组,有统计学差异,两组患者均未发生严重不良反应。表明腺苷蛋氨酸治疗急性药物性肝损伤的临床疗效确切,可有效改善患者肝功能,且不良反应少。

参考文献

[1]杨冰华,张轶停,张春艳.药物性肝损害[J].临床和实验医学杂志,2003,2(1):62-64.

[2]文传芳.腺苷蛋氨酸联合熊去氧胆酸治疗妊娠期胆汁淤积的临床疗效[J].中国医药指南,2015,13(29):62-63.

[3]赵黎东.腺苷蛋氨酸联合糖皮质激素治疗药物性胆汁淤积性肝病疗效[J].中国卫生产业,2014,12(24):76-77.

[4]刘凯芹.腺苷蛋氨酸联合糖皮质激素治疗药物性胆汁淤积性肝病的临床价值[J].医学信息,2015,29(44):55-56.

[5]舒雪保.丁二磺酸腺苷蛋氨酸治疗淤胆型病毒性肝炎的临床研究[J].当代医学,2014,21(18):130-131.

急性肝损伤 第9篇

1 材料与方法

1.1动物健康C57BL/6小鼠,雄性,清洁级,体重18~22 g,由北大医学部实验动物中心提供,动物许可证号:SYXK(京)2002-0002。适应性饲养3 d,动物室和实验室温度均为(23±2)℃,自动通风,明暗周期12 h/12 h,自由摄食饮水,SPF级动物饲料。

1.2药品与试剂DMF由比利时ACROS公司提供,批号A018522301。甲醛由北京化学试剂公司提供,批号为040322,甲醛50 ml,加PBS至500 ml,配成10%(即3.7%)的福尔马林。95%乙醇由国药基团化学试剂有限公司提供,批号为100099292。二甲苯由北京长海化工厂提供,批号为20080530。SDS,Serva进口分装,由上海化学试剂厂提供,批号为920805。TBA由北京红星生化技术公司提供。

1.3仪器与设备电子精密天平(110 g/mg和1 100g/mg):美国奥豪斯集团。HITACHI-7170A型全自动生化分析仪:Hitachi公司。显微镜:日本Nikon公司,E400显微镜系统,DXM1200F型摄像系统。722型可见分光光度计:上海第三分析仪器厂。XHF-1内切式匀浆器:宁波新芝科技研究所。TGL-16G和TDL-5台式离心机:上海亭科学仪器厂。

1.4 DMF的配制精确称量1.0,2.0和3.0 g的DMF,用0.9% NS溶解,配制成10 ml的各浓度的DMF溶液,以每克体重0.01 ml给药。

1.5分组、造模[7,8,9,10]及给药取C57BL/6小鼠64只,随机分为8组,每组8只,分组及给药剂量见表1。各组于每天上午9:00~10:00称取体重。阴性对照组和DMF模型组给予腹腔给药(ig)20 ml/kg NS(葡萄糖)1次/d,连续3 d;乙醇+DMF模型组和乙醇对照组给予ig 20ml/kg乙醇,1次/d,连续3 d;实验第4天,阴性对照组和乙醇对照组口服(ip)给予NS 20 ml/kg,DMF模型组分别给予1.0,2.0和3.0 g/kg DMF,乙醇+DMF组给予ig 20 ml/kg乙醇30 min后,分别给予ip 1.0、2.0和3.0g/kg DMF。

1.6检测指标给予DMF 48 h后,所有小鼠内眦静脉取血,制备血清,使用7170A自动分析仪测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)的活力;颈椎脱臼处死小鼠,解剖取肝脏,生理盐水洗净,吸干称重,肉眼观察肝脏大体变化;取肝左叶于10%福尔马林溶液中固定,常规病理切片,HE染色,于光学显微镜下镜检。另取部分左叶肝组织制备匀浆,用改良Hission方法[11]分析肝组织中还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)的含量,并计算GSH/GSSG;用硫代巴比妥酸(TAB)反应法[12]测定肝中丙二醛(MDA)含量。

1.7统计学分析实验数据以±s表示,用SPSS 15.0软件,单因素ANVON进行各组间分析,LSD法进行组间两两比较。

2 结 果

2.1对小鼠一般体征的影响正常对照组小鼠皮毛干爽光滑,精神状态良好,喜动而不喜卧。DMF模型组小鼠皮毛汗湿竖立紊乱,精神委靡、行动迟缓、弓背萎缩,发绀、呼吸急促、四肢抽搐、喜挤卧而不喜动。乙醇对照组小鼠在给予20%乙醇后,出现不同程度的耸毛以及奔跑、跳跃、撕咬等兴奋性活动,随后步履不稳,继而转为沉睡状态,此状态持续15 min左右;乙醇联合DMF模型组给药后,起初小鼠也出现类似的乙醇兴奋症状,但表现较轻,且随着DMF剂量的增大,乙醇中毒症状逐渐减轻,持续时间也越短,而DMF中毒症状逐渐加重,且表现较模型组更严重。

2.2各组小鼠体重、肝重和肝体比的变化与正常对照组比较,DMF模型各剂量组、乙醇+DMF组、乙醇对照组的小鼠体重、肝重和肝体比差异均无统计学意义(均P>0.05),见表1。

2.3对小鼠血清转氨酶的影响与正常对照组相比,DMF模型组小鼠血清中ALT、AST和LDH水平均明显升高(P<0.01),且随着DMF剂量的增加呈现剂量依赖关系。预先给予20 ml/kg乙醇后,DMF模型各剂量组ALT,AST和LDH较未给予乙醇各剂量组显著升高,呈明显的剂量依赖关系;联合应用乙醇后,DMF剂量低至1.0 g/kg(P<0.05),所测指标已超过DMF 2.0 g/kg组;单用20%的乙醇不引起肝损伤(P>0.05),说明乙醇可加重DMF的肝毒性,见表2。

注:DMF—二甲基甲酰胺。各组与正常对照组比较,体重、肝重、肝体比均无统计学意义,均P>0.05。

2.4对小鼠肝组织中MDA、GSH、GSSG和GSH/GSSG的影响与正常对照组相比,模型各剂量组小鼠肝组织中MDA含量升高,且随着剂量的增大而增加,差异显著 (P<0.01);GSH含量及GSH/GSSG的比值明显降低,呈现剂量依赖关系(P<0.01);乙醇联合DMF各剂量组MDA升高及GSH降低的程度较DMF各剂量组明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);乙醇联合中等剂量DMF即可表现出高剂量DMF毒性,而单用20%乙醇无任何毒性表现(P>0.05)。见表3。

注:DMF—二甲基甲酸胺;ALF—丙氨酸氨基转移酶;AST—天冬氨酸氨基转移酶;LDH—乳酸脱氢酶。与正常对照组比较,aP<0.05,bP<0.01;与DMF模型剂量组比较,cP<0.05,dP<0.01。

注:DMF—二甲基甲酸胺;MDA—丙二醛;GSH—还原型谷胱甘肽;GSSG—氧化型谷胱甘肽。与正常对照组比较:aP<0.05,bP<0.01;与DMF模型剂量组比较,cP<0.05dP<0.01。

2.5对小鼠肝脏组织病理的影响大体观察:正常对照组小鼠肝脏颜色暗红,被膜光滑,有光泽,富有弹性。模型组肝脏颜色略黄,出现灰黄色点状坏死灶,分布尚均匀,无光泽,质地较脆。随着DMF剂量的增加,肝脏出现大面积的片状淤血;乙醇联合DMF各剂量组,肝脏的的病理损伤程度,较同剂量DMF组更为严重,是因为乙醇与DMF的相加作用导致肝损伤作用增强;20%乙醇对照组肝脏大体病变和对照组无明显差异。

组织学观察:正常对照组(图1A);肝小叶结构清晰,核大而清晰,胞质丰富,含有团块嗜碱质,肝细胞无变性、坏死,无炎症细胞浸润;肝细胞索围绕中央静脉呈放射状 排列整齐 ,肝血窦正 常。DMF模型组(图1B~D),肝脏小叶中央静脉周围的肝细胞不同程度的变性与坏死,坏死呈凝固性,胞核固缩或已溶解破碎,伴中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞等炎性浸润;肝细胞索正常形态破坏;中间带可见细胞空泡样变。乙醇加DMF模型组(图1E~G),肝脏小叶中央静脉周围的干细胞变性与坏死的程度较DMF模型剂量组更严重。而单独乙醇对照组(图1H),肝小叶结构清晰,核大而清晰,胞质丰富,肝细胞索围绕中央静脉呈放射状排列,肝血窦正常,与正常对照组接近。

注 :DMF—二 甲 基 甲 酸 胺 。 A—正 常 对 照 组 ;B—DMF 1.0 g/kg;C—DMF 2.0 g/kg;D—DMF 3.0 g/kg;E—乙醇 20 ml/kg+DMF (1.0 g/kg);F—乙醇 20 ml/kg +DMF(2.0 g/kg);G—乙醇 20 ml/kg +DMF(3.0 g/kg);H—20%乙醇对照组

3 讨 论

血清中的ALT、AST、LDH是用于诊断肝实质损害的主要酶学指标。本实验DMF可致小鼠体重和肝重明显下降,血清3种酶含量均显著升高,并随着DMF染毒剂量的增加,呈现剂量-反应关系,同时肝组织损伤的病理变化也支持该结果。表明DMF所致小鼠急性肝损伤模型成功。DMF确切的中毒机制尚未完全阐明,但有报道称,DMF主要在肝脏内质网中由细胞色素加单氧化酶P450或肝微粒体混合功能氧化酶的催化下进行脱甲基化作用,生成的亲电中间体异氰酸甲酯(NMF)有关[11],当NMF大量生成时,一部分与肝细胞大分子结合,破坏其结构功能,造成肝细胞损伤;还可与GSH结合生成S-(N-甲基氨甲酰)谷胱甘肽(SMG),最后再转化为巯基尿酸(AMCC)而排出体外。急性DMF中毒还与体内的氧化/抗氧化酶系的平衡状态[12]、钙超载引起的线粒体损伤[13]以及这些过程中产生过多活性氧有关。

在本实验中,20%对照组小鼠的体重和肝重有明显下降,但肝体比却无明显变化,这是因为乙醇具有一定的刺激性,影响小鼠生长的缘故。在造模DMF剂量下,加用20%乙醇,可加强小鼠肝损伤作用,且具有剂量依赖关系,与DMF和乙醇的急性肝毒性联合作用有关:即相加作用或协同作用。乙醇的急性肝毒性机制是抑制GSH的合成;代谢产物乙醛的直接肝细胞毒性作用;乙醇氧化过程中产生大量的氧自由基,致使肝细胞脂质过氧化增强,体内GSH进一步耗竭,损伤肝细胞等[14,15]。

鉴于DMF和乙醇的肝毒性作用,尤其是其联合毒性,应积极开发拮抗DMF肝毒性的药。本实验室先后报道过二甲基酰胺(DBM)[13],大蒜素[14]、Zn Cl2[15]、地塞米松[7]等可以有效预防DMF所致的急性肝损伤,具有良好的保肝作用。因此,在现代工业生产中,尤其是从事纤维、皮革、有机合成等的工作人员,建议做到:1工作期间不饮酒,饮酒之后不工作。2在膳食中添加锌等具有预防DMF中毒的微量元素;3多食大蒜、韭菜、大葱等含有大蒜素的蔬菜;4对于接触DMF剂量比较大的易感人群,可以预防性使用地塞米松、肾上腺糖皮质激素、甘草等药物,有效防止肝损伤。

使用降脂药物：防范肝损伤三措施 第10篇

张先生今年70岁，患高脂血症和冠状动脉粥样硬化性心脏病多年。为了改善血脂紊乱，在医生建议下，张先生一年前开始服用降胆固醇药物辛伐他汀，并且定期接受肝肾功能检查，未发觉有任何不适。随着年龄的增大，张先生相继又出现了轻微的脑梗死、高血压及脂肪肝等多种疾病，以至于现在每天需要联合使用多种药物。在最近的一次肝功能检查中，他的血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）升高到了70U/L（正常范围小于40U/L）。考虑到患者为需要降脂治疗且目前并无肝炎症象，医生建议张先生继续使用辛伐他汀并加用保肝药物……

使用降脂药物：防范肝损伤三措施

上海交通大学医学院附属新华医院消化内科 沈 峰 范建高（教授）

高脂血症一般是指血液中的总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇升高，是冠心病发病与死亡的重要危险因素，而早期应用降脂药物可以纠正血脂紊乱，防治冠心病。然而，随着降脂药物在临床上大量应用，其相关的安全性问题也备受关注。

老年患者更易发生肝脏损伤

同降压药、降糖药一样，降脂药物的治疗也需要一个长期的过程。由于肝脏有丰富的血流和药物代谢酶系，大部分药物在肝脏内进行转化，而肝细胞本身对化学物质也特别敏感，长期使用降脂药物，很容易出现肝功能损伤，尤其是老年患者，一方面常常并存有多种疾病需要联合使用多种药物，另一方面肝肾等内脏器官功能减退，对药物的耐受性下降。与此同时，老年患者还存在胃肠道血流量降低、胃肠蠕动减慢、药物在体内滞留时间延长等原因，更易出现肝脏不良反应。

研究表明，在常用降脂药物中，氯贝丁酯导致血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）升高者占10%。非诺贝特引起血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）升高的高达20%，少数表现为胆汁淤积性肝炎和慢性肝炎。他汀类药物是当前最重要的调脂药物，该类药物最常见的异常也是转氨酶增高且呈剂量依赖性，但是通常并无肝炎症状且不伴有明显的肝脏损伤，这与其他药物导致转氨酶增高略有不同。

防范肝损害三措施

1. 不擅自加大剂量。一般认为，药物剂量与降脂作用成正比。但随着剂量增大，药物所导致的不良反应或毒副作用也会增加。因此，患者不宜片面追求疗效而过度增大剂量。老年患者用药后血脂水平的目标值或理想水平与年轻人是不同的，降血脂不宜过度。为此，老年人的降脂治疗需小心、谨慎，遵循安全、有效、适度、经济的原则，以减少药物不良反应发生。

2. 定期检测肝功能。临床常用降脂药物均有肝毒性，最主要的表现是无症状性血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）升高，肝酶升高通常发生在用药16周内。因此，患者在使用降脂药物前、治疗4周、治疗12周或增加药物剂量后均应进行肝功能检测，以便早期发现肝功能异常，并由医生根据病情明确肝损害性质，找出肝损害原因，合理处理，这是防治老年人降脂药物肝脏不良反应的关键措施。

3. 酌情加用保肝药物。与中青年人相同，老年人使用常规剂量他汀类药物时，较少发生肝损伤。因此，他汀类药物治疗中出现无症状性、孤立性血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）轻度增高者，无需中断药物治疗，医生会酌情考虑加用一些保肝药物。若血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）明显增高（超过3倍正常值上限），半月内复查仍明显增高者，且无其他原因可供解释，医生会建议减量或停用降脂药物。

急性肝损伤 第11篇

1 实验材料

1. 1 实验动物雄性SD大鼠80 只, 8 周龄, 清洁级, 体重 ( 200 ± 20) g, 饲养于浙江中医药大学动物实验研究中心。

1. 2 实验仪器与试剂

7020 全自动生化分析仪: 日立公司; STP120 型旋转式组织处理机: Microm公司; AP280 - 2 型石蜡包埋机: Microm公司; Bx51 正置显微镜: Olympus公司; LPS: Sigma公司; D - 氨基半乳糖: D - Gal N, Sigma公司; 显色基质鲎试剂盒: 厦门市鲎试剂实验厂有限公司, 批号: 120402。

1. 3 实验药品

复方乌金汤: 乌脚枪、金钱草、凤尾草、茵陈、虎杖、荷包草 ( 6∶ 3∶ 3∶ 2∶ 2∶ 3) , 乌脚枪由本院提供, 其余药材购自浙江中医药大学第二门诊部。取上述中药适量, 煎煮2 次, 第1次加10 倍量水, 浸泡1 小时, 煎煮1 小时, 过滤, 第2 次加5倍量水, 煎煮30 分钟, 合并滤液, 浓缩至每毫升含0. 95g生药。水飞蓟素胶囊: 德国马博士大药厂, 批号: B1101614: 加蒸馏水调制成3. 5g/ml混悬液, 备用。

2 实验方法

2. 1 模型制备与给药

80 只SD大鼠预养7 天, 按随机数字表法分为正常组 ( 8只) 、模型组 ( 24 只) 、水飞蓟素组 ( 24 只) 、中药组 ( 24 只) 。正常组腹腔注射生理盐水1ml, 其余各组以30μg/kg LPS +200mg / kg D - Gal N用1ml生理盐水溶解后腹腔注射, 制备ALI模型。水飞蓟素组造模前1 小时予以35mg / kg灌胃, 每日2 次。中药组以复方乌金汤9. 5g/kg灌胃, 每日2 次, 各组分别于造模后6、24、48 小时随机取6 只大鼠 ( ALI模型制备过程出现大鼠死亡, 因此除正常组外, 各组均为6 只) , 用0. 3% 戊巴比妥腹腔注射麻醉, 腹主动脉取血, 分别离心取血清、血浆, 分装保存于- 80℃ 待检。取肝左叶小块组织, 固定于10% 中性甲醛中, 待检。

2. 2 观察指标检测

采用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸转氨酶 ( ALT) 和天冬氨酸转氨酶 ( AST) ; 采用鲎试剂反应动态比浊法检测血浆内毒素水平。取中性甲醛水溶液固定的肝组织进行常规石蜡包埋、切片, 苏木素- 伊红 ( HE) 染色, 光镜下进行组织病理学观察。

2. 3 统计学处理

数据用均数 ± 标准差 (  ± s) 表示, 用SPSS16. 0 统计软件处理。多组数据统计采用单因素方差分析。组间两两比较, 方差齐性时用LSD检验, 方差不齐时用Dunnett’s T3检验。P < 0. 05 作为差异具有统计学意义。

3 结果

3. 1 肝脏大体观察

正常组大鼠肝脏表面光滑, 色泽红润, 边缘整齐, 未见坏死小点。模型组大鼠肝脏表面粗糙, 色泽暗红或偏黄, 肝脏肿大, 可见黄色坏死小点, 以24 小时后处死的大鼠肝脏病变更严重。水飞蓟素组和中药组大鼠肝脏大体形态介于上述两者之间, 可见少量坏死小点。

3. 2 肝脏病理学变化观察

正常组大鼠肝组织肝小叶排列整齐, 肝细胞形态正常, 肝血窦清晰。模型组大鼠肝小叶结构紊乱, 汇管区和中央静脉区可见大量炎性细胞浸润, 肝细胞坏死, 其中以24 小时后炎症及坏死最明显。水飞蓟素组和复方乌金汤组大鼠肝脏炎性细胞浸润和肝细胞坏死较模型组轻, 以48 小时肝损伤程度下降明显。

3. 3 各组大鼠肝功能检测结果见表1。

与模型组比较*P<0.05, **P<0.01

3. 4 各组大鼠血浆内毒素含量测定结果见表2。

与模型组比较*P<0.05, **P<0.01

4 讨论

目前研究认为, 肠源性内毒素在ALI的发展过程中具有重要作用。内毒素是革兰阴性细菌细胞壁外层成分, 其主要毒性的化学成分是脂多糖 ( LPS) , 在休克、缺血再灌注胃肠衰竭、肝硬化、创伤和严重烧伤等重症患者, 胃肠黏膜屏障功能显著降低、肠黏膜吸收的LPS明显增多, 同时肝内单核吞噬细胞系统特别是枯否细胞功能严重障碍, 进入肝内的内毒素得不到及时处理和清除, 引起体内内毒素蓄积, 进入体循环而形成肠源性内毒素血症［1 － 2］, 而内毒素极易损伤肝脏, 破坏肝细胞, 损伤肝血窦, 进一步加重肝脏损伤［3］, 引起肝脏和肝外脏器损伤性反应。本实验结果表明, LPS联合D -Gal N腹腔注射后, 大鼠血清ALT和AST升高, 肝脏结构出现损伤, 血浆内毒素水平升高, 表明LPS联合D - Gal N能引起肝脏损伤和内毒素血症, 符合急性肝损伤的特点。

由乌脚枪、金钱草、凤尾草、茵陈、虎杖、荷包草组成的复方乌金汤, 具有清利湿热、利胆退黄的作用, 用于急性无黄疸型肝炎、急性黄疸型肝炎、慢性肝炎高胆红素血症、瘀胆型肝炎等疾病。本实验研究显示, 复方乌金汤能降低急性肝损伤大鼠血清ALT和AST水平, 改善大鼠肝脏病理, 减少血浆内毒素含量, 表明复方乌金汤对LPS诱导的急性肝损伤具有较好的肝脏保护作用。

摘要：目的:观察复方乌金汤对急性肝损伤大鼠肝脏的保护作用。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、水飞蓟素组和复方乌金汤治疗组, 采用内毒素联合D-氨基半乳糖腹腔注射诱导急性肝损伤大鼠模型, 分别于造模后6、24、48小时处死大鼠, 全自动生化仪检测其血清ALT、AST水平, 鲎试剂反应动态比浊法检测血浆内毒素含量, 观察各组大鼠肝脏病理学变化。结果:复方乌金汤能降低急性肝损伤大鼠血清ALT和AST水平, 改善大鼠肝脏病理学变化, 减少血浆内毒素含量。结论:复方乌金汤对急性肝损伤具有较好的保护作用。

关键词：急性肝损伤,@复方乌金汤,肝脏保护,大鼠

参考文献

[1]刘彦双, 朱淑霞, 王永利.急性肝损伤模型的研究进展.河北医药, 2007, 29 (6) :316.

[2]刘亮明, 邓欢, 张吉翔, 等.内毒素性急性肝损伤实验动物模型的建立.世界华人消化杂志, 2006, 14 (1) :12.