奶牛子宫内膜炎研究

奶牛子宫内膜炎研究（精选10篇）

奶牛子宫内膜炎研究 第1篇

1 病因

导致奶牛子宫内膜炎的直接病因是细菌、真菌、支原体、霉形体、病毒、寄生虫等病原微生物的感染[3], 而细菌是引起奶牛子宫内膜炎的主要病原微生物。

陈雪龙等[4]对大庆地区周边6个奶牛场56头子宫内膜炎患牛的子宫内容物进行细菌的分离鉴定, 分离到的142株细菌中, 52.6%的菌株对实验动物具有致病性, 主要有大肠杆菌、葡萄球菌及链球菌, 且多为混合感染。凌丁等[5]在南宁市周边地区2头患子宫内膜炎奶牛的子宫分泌物中分离出5类细菌共30个菌株, 主要有葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、蜡样芽孢杆菌、酵母样真菌等。陈星等[6]从4份奶牛子宫内膜炎病料中检出细菌47株, 主要为链球菌 (占61.7%) 、葡萄球菌 (占29.8%) 、大肠杆菌 (占8.5%) 等。张银亮等[7]从75头子宫内膜炎患牛的子宫炎性分泌物中分离鉴定出细菌189株, 主要为金黄色葡萄球菌 (56株, 占29.62%) 、大肠埃希氏菌 (52株, 占27.51%) 、铜绿假单胞菌 (25株, 占13.23%) 、蜡样芽孢杆菌 (22株, 占11.64%) 及无乳链球菌 (17株, 占8.99%) 。陈强等[8]采取锦州地区子宫内膜炎患牛子宫分泌物47份, 从样品中共分离鉴定到52个菌株, 其中链球菌占56.4%、葡萄球菌占27.3%、大肠杆菌占l6.3%。

不同地区引起奶牛子宫内膜炎的病原菌的组成及主要病原菌的种类有所不同[9]。同时研究显示, 营养不良、维生素缺乏、内分泌失调、激素等均是奶牛子宫内膜炎的主要诱因。

2 奶牛子宫内膜炎的治疗

2.1 抗生素治疗

治疗奶牛子宫内膜炎常用的抗菌药有青霉素、链霉素、先锋霉素、土霉素、磺胺类药物、阿莫西林、卡那霉素、庆大霉素、四环素等[10]。凌丁等[5]通过药敏试验发现, 呋喃妥因和替加环素对链球菌抑菌作用最强;万古霉素、呋喃妥因和替加环素对葡萄球菌抑菌作用最强, 同时没有发现耐药现象;替加环素对大肠杆菌抑菌作用最强, 也没出现耐药现象;白色念珠菌对包括两性霉素B、伊曲康唑在内的5种抗真菌药物敏感。陈星等[6]药敏试验显示, 多数病原菌对青霉素G、链霉素、氧氟沙星、红霉素敏感, 而对阿米卡星、环丙沙星的耐药性较高。陈强等[8]通过药敏试验发现, 菌必治、先锋必和链霉素对链球菌抑菌作用最强, 其次为红霉素、青霉素和卡那霉素, 而阿米卡星、氨苄青霉素、环丙沙星作用不明显;菌必治、先锋必和链霉素对葡萄球菌抑菌作用最强, 而氨苄青霉素和卡那霉素作用不明显;阿米卡星、菌必治、先锋必和环丙沙星对大肠杆菌抑菌作用最强, 其次为链霉素, 红霉素、氨苄青霉素、卡那霉素的作用不明显。

抗生素在奶牛子宫内膜炎的治疗中具有抗菌谱广、见效快等特点, 但易在乳产品中残留, 且细菌易对抗生素产生耐药性[11]。

2.2 中药治疗

中药在本病的治疗中, 以其较低毒性、无残留、不易产生耐药性等优点而得到广泛应用。经长期的临床实践, 形成了益母生化散、补中益气汤、六味地黄汤、清带汤、贯众散、温经汤等古方, 并在奶牛子宫内膜炎的治疗中获得了很好的疗效[12]。何光中等[13]研究报道, 复方中草药“宫舒康”在治疗轻、中度子宫内膜炎时疗效明显好于对照组 (长效盐酸土霉素) , 证明具有抗菌消炎、诱导发情和提高受胎率的作用。严作廷等[14]将确诊为子宫内膜炎的奶牛80头, 随机分为“清宫助孕液”治疗组和西药对照组, 分别进行子宫灌注, 结果表明:试验组和对照组总有效率分别为95.0%和90.0%;试验组和对照组3个情期受胎率分别为86.67%和75.0%, 从而证明“清宫助孕液”在治疗奶牛子宫内膜炎中具有较好疗效。用双黄连注射液 (由金银花、连翘及黄芩按一定比例组成) 和青链霉素进行的奶牛子宫内膜炎治疗对照试验中, 双黄连注射液高剂量组的治愈率和中剂量组的治愈率皆高于青链霉素对照组的治愈率, 差异均显著 (P<0.05) [15]。

2.3 中西结合治疗

中西医结合在奶牛子宫内膜炎的治疗中也具有很好的疗效。高生强等[16]研究报道, 盐酸四环素配合“清宫液”可作为治疗化脓性子宫内膜炎的首选药物。张宾等[17]用“清宫促孕宝”配合土霉素, 采用子宫灌注法治疗该病时, 有效率达89.74%, 治愈率达86.0%, 获得较好疗效。严光文等[11]分别采用中药、西药、中西结合的方式治疗患病奶牛100余头, 结果表明:西药对化脓性子宫内膜炎具有较好疗效, 中药具有活血化淤、增强机体防御能力的功效, 中西医结合在非化脓性子宫内膜炎具有良好的治疗效果。

2.4 生物治疗

利用微生物细胞酶、免疫凋节剂或表面活性剂等研制出的多种生物制剂可刺激奶牛机体自身免疫防御系统功能, 通过机体自身免疫防御系统清除病原, 从而可达到较好的预防或治疗该病的功效[18]。溶葡萄球菌酶在较低的药物浓度下能迅速地裂解葡萄球菌等细菌细胞壁肽聚糖中的甘氨酸五肽键桥, 从而破坏细胞壁的完整性并使菌体溶解, 抗菌作用快、杀菌活性强、不易诱导耐药菌株, 且能有效促进生鲜乳的优质、安全。范洪斌等[19]进行了溶葡萄球菌酶和抗生素在奶牛子宫内膜炎治疗中的对比试验, 在普通疗程的治疗中, 溶葡萄球菌酶的治愈率 (75%) 比抗生素组治愈率 (70%) 高5个百分点;通过2次追加用药后, 溶葡萄球菌酶治愈率 (90%) 比抗生素组治愈率 (75%) 高出了15个百分点。章伟建等[20]试验证明溶菌酶对奶牛子宫内膜炎的主要致病菌 (金黄色葡萄球菌和链球菌) 具有良好的抗菌活性, 对化脓棒状杆菌具有一定的抑杀作用, 并对氨苄西林和头孢唑啉耐药菌株具有较好的抑杀效果。

3 奶牛子宫内膜炎的预防

奶牛子宫内膜炎及腹膜炎的防治 第2篇

关键词：奶牛；宫内膜炎；腹膜炎

中图分类号： S858.23 文献标识码： A 文章编号： 1674-0432（2014）-15-56-1

1子宫内膜炎的防治措施

奶牛子宫内膜炎能直接导致奶牛的不孕。据相关数据统计，我国的奶牛不孕症中，因子宫内膜炎而导致的疾病占近1/5左右，可见其比例之高。所以对于奶牛子宫内膜炎要采取有效办法进行预防。重点在于预防，以防为主，以治为辅，从改善环境条件、加强饲养管理，保证充足营养等几方面入手，努力保证奶牛的自身代谢平稳，提高自身的抵抗力，减少子宫内膜炎的发病机率。

1.1加强饲养管理

在畜禽养殖中，加强饲养管理是提高动物自身抗病力的重要手段，动物的抗病力与其自身的生长状态有直接的关系，饲养管理到位，动物生长营养充足，自然身强体壮，抗病力就强。采取科学合理的饲草、饲料供应，提高营养水平，是保证奶牛正常的生长代谢所需，是强身壮体的有效措施，对于预防奶牛子宫内膜炎效果明显。另外也要密切观察奶牛的生长情况，早发现、早诊断，对于奶牛子宫内膜炎的发生在最佳的时机进行治疗。

1.2搞好牛场环境卫生

奶牛的生存环境对于奶牛的健康成长十分重要，要特别注意场地的卫生情况。牛床、牛舍、运动场应保持干燥，做好定期消毒工作，最低要一个月进行一次，如果环境保持不是很理想，就要一个月进行两次消毒。对于牛舍及运动场中的粪便、积水、污水及其他垃圾物，要及时清理，时刻保持牛体的清洁、干燥，让奶牛在良好的环境中生长。

1.3控制产前、产后感染

1.3.1分娩管理 对于待产的奶牛，要设立独立的产房，让奶牛在安静、清洁、温度适合的环境中分娩，对独立产房要定期进行消毒，避免分娩时感染。在即将分娩时，要对奶牛外阴及分娩环境再次进行消毒，对于助产者手臂及器械也要做好严格的消毒。一般以自然分娩为主，让母牛独立生产，尽量不要对母牛分娩产生干扰，不要过早进行助产，只有在难产时才进行适当助产，助产操作要规范，防止产道损伤及感染。在母牛分娩时，要注意观察胎衣的下落情况以及产道的损伤情况，如有胎衣不下、产道损伤及产后恶露异常等情况，一定要及时采取有效措施进行治疗。

1.3.2加强营养 奶牛的产前产后都要保证营养的充足供应，要注意营养的均衡，特别是一些维生素及微量元素的比例搭配要科学合理，满足奶牛的营养需要。一般在临产前2周应转入产房实行单独饲养，并进行健康检查。奶牛产后，身体比较虚弱，要尽快帮助奶牛恢复体力，增强奶牛的抗病力，可以进行静脉注射葡萄糖或葡萄糖酸钙。可肌肉注射催产素防止胎衣不下，在产后24～48小时，应向子宫内灌注抗菌素1次，以防产后子宫感染。如果奶牛产后12小时胎衣仍然不下，此时应采取药物注射等措施防止子宫感染。

1.3.3保持环境卫生 环境卫生对于产后的奶牛来说十分重要，卫生条件不好，细菌容易滋生，增大感染的机会，产后七天内，要特别注意产床、母牛外阴及后续卫生。产后一个月内，除了注意卫生之外，营养也是十分重要的方面，保证充足营养，预防产后瘫痪、乳房炎、酮病发生，牛舍、产房要常保持干燥，夏季加强通风，冬季注意保暖，器具定期进行消毒。

1.4避免配种污染

在配种时，要对器材、人员、母牛都做好严格的消毒工作，避免感染奶牛的生殖器官，精液的稀释液、稀释器具、输精枪应严格消毒，操作在无菌条件下进行，输精器要保持清洁，输精动作要缓慢，避免损伤子宫或粘膜而引起感染。

2牛腹膜炎的防治措施

2.1症状

此病是腹膜壁层和脏层各种炎症的统称，以腹壁疼痛和腹腔有炎性渗出物为特征的一种疾病。主要表现为奶牛出现腹痛、腹部膨大、产生腹液。急性表现为精神沉郁，体温升高，眼窝凹陷，四肢集于腹下，拱背而立，强迫行走，步态小心，有时表现疼痛，呻吟。有的奶牛染病后食欲会产生减退现象，瘤胃蠕动没有声间，伴有轻度气臌，同时有便秘产生。腹部出现明显膨大，穿刺后取液明显浑浊，混有纤维蛋白絮片、红细胞或脏器内容物。直肠检查发现在直肠中宿粪较多，腹壁紧张。慢性型表现症状稍轻，但会出现慢慢变瘦的情况。

2.2发病原因

可分为原发性和继发性两种情况。原发性的主要原因是因为奶牛运动过量或其他因素，造成奶牛的自身防卫机能降低，抵抗力减弱，一些病菌如大肠杆菌、链球菌和葡萄球菌感染了机体；继发性的主要原因是发于胃肠及其他肝脏破裂、穿孔或腹壁创伤、腹腔穿刺或手术感染，腹腔脏器炎症的蔓延、出血性败血症、肠结核等过程中。

2.3治疗和预防

治疗原则为抗菌消炎，制止渗出，增强病畜抵抗力。腹壁穿孔或腹腔内脏器破裂时，应立即实施手术。一方面进行消炎止痛。用青霉素钠、普魯卡因注射液、氯化钠等进行腹腔注射。另一方面是增强机体低抗力，通过注射氯化钙、乌洛托品、葡萄糖、生理盐水等注射液来进行。本病的预防，主要在于平时应避免各种不良因素的刺激和影响，特别注意防止腹腔及骨盆腔脏器的破裂和穿孔。直肠检查、清洗子宫等都要小心进行，以免引起穿孔。腹腔穿刺以及腹壁手术均应按照操作规程进行防止腹腔感染。母畜分娩子宫整复、难产手术以及子宫内膜炎的治疗都要谨慎地进行操作。

奶牛子宫内膜炎的研究进展 第3篇

1 子宫内膜炎的病因

引起子宫内膜炎的主要原因为病原微生物的入侵感染,包括细菌、真菌、病毒及寄生虫等。国内外的研究均表明,细菌在奶牛子宫内膜炎的发生中起着重要作用[3]。从患病牛子宫中分离到的细菌主要有大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、布鲁氏菌、嗜血杆菌、假单胞杆菌、绿脓杆菌和坏死杆菌等[4];真菌主要有酵母菌、毛霉菌、放线菌和念珠菌;病毒主要有病毒性腹泻病毒、传染性支气管炎病毒及副流感病毒;寄生虫主要为胎毛滴虫[5]。不同地区和不同情况下分离得到的细菌种类及其所占比例不同,这可能与饲养管理、环境、牛的品种、应用抗生素情况和试验方法等有关。

另外,体外授精时,输精工具粗糙和使用不当及过度增加授精次数,均可造成生殖道、子宫颈黏膜和子宫黏膜受损,为病原微生物入侵繁殖提供了便利条件,可引发子宫内膜炎[6]。研究表明,奶牛的品种、年龄,饲料营养欠缺,特别是缺乏维生素、微量元素及矿物质缺乏或比例失调,饲养管理不佳等外在条件都容易诱发奶牛感染子宫内膜炎;而内分泌失调、机体代谢紊乱及自身免疫水平低下的奶牛更易发生感染[7]。

2 子宫内膜炎的诊断

2.1 临床症状

急性子宫内膜炎一般都有明显的全身性症状,有怒责、弓背,呈排尿状,体温高于39.5℃,且阴道内流出大量的脓性、黏性分泌物,根据黏液性质和发情周期的变化,可以初步建立临床诊断。

慢性子宫内膜炎的全身性症状并不明显,但在分娩后20个泌乳期内,子宫颈异常增大,且从阴道内排出脓性黏液分泌物,即可确诊为慢性子宫内膜炎[8]。

隐性子宫内膜炎一般出现在分娩30 d以后,患牛通常无明显的临床症状,发情周期和性活动正常,但患牛主要表现为屡配不孕或配种后习惯性流产[9];且病牛多出现间断性排出透明或混浊黏液,特别是发情时黏液增多。

2.2 实验室检查

2.2.1 硝酸银诊断法

取被检母牛尿液2 m L,加5%硝酸银1 m L,加热煮沸2 min,若出现黑色沉淀则可判断为阳性,若沉淀为褐色或淡褐色则为阴性,其原理是病牛子宫角壁内的肥大细胞数明显增多,可产生大量的组织胺,组织胺可与硝酸银水溶液发生沉淀反应。该方法简单易行,适用于大量动物的子宫内膜炎病例检测。

2.2.2 Na OH煮沸法

取4%Na OH溶液2 m L,加入2 m L被检母牛的子宫黏液,混合,然后加热至沸腾,自然冷却后,若为无色则说明为阴性,若出现柠檬黄色可判断为阳性。

2.2.3 含硫氨基酸诊断方法

向4 m L 0.5%醋酸铅溶液中加入1.0~1.5 m L子宫分泌物和14滴20%Na OH溶液,加热3 min,若出现褐色或黑色则说明呈阳性。

2.2.4 分泌物生物学检查

在2个加热至37℃的载玻片上分别滴加2滴精液,其中1滴中加1滴被检分泌物,另外1滴作对照。用显微镜观察精子的活力,如果精子很快凝集或死亡,则说明患有子宫内膜炎。

2.2.5 细菌学检查

无菌条件下取少量子宫分泌物,接种到培养基中,分离培养细菌鉴定病原体进行确诊。

2.2.6 子宫回流液检查

冲洗子宫,镜检子宫回流液,可见白细胞、脱落的子宫内膜上皮细胞或脓球。对子宫回流液的检查对诊断奶牛隐性子宫内膜炎有决定性意义。因此,可将首次未见异常的回流液静置放置后检查,未发现有沉淀,或偶尔见到蛋白样或絮状浮游物即可诊断。

3 子宫内膜炎的治疗

2002年,国家明令限制或禁止一些包括磺胺类在内的抗菌类药物的使用[10]。因此,寻找广谱、高效、低毒、低残留或无残留且药源广的药物,成为防治奶牛子宫内膜炎亟待解决的问题。临床实践结果表明,多种西药和中药对奶牛子宫内膜炎皆具有一定防治作用,且各具特点,西药见效快,抗菌谱广,但毒副作用大,易在牛奶和乳制品中残留;而中药的成分复杂,功效多样,且重点在于对机体整体机能的调节,毒副作用小,无残留,但见效慢,用量大[11]。目前,临床常用的治疗奶牛子宫内膜炎的方法主要包括子宫冲洗法、抗生素疗法、激素疗法、全身疗法及中药治疗等。

3.1 抗生素疗法

常见的用于治疗奶牛子宫内膜炎的抗生素有土霉素、新霉素、四环素、红霉素、青霉素等。乳酸环丙沙星对隐性子宫内膜炎、慢性卡他性脓性子宫内膜炎和慢性卡他性子宫内膜炎进行治疗时,治愈率分别为71.7%、72.7%和79.2%[12]。I.M.Sheldon等[13]通过药敏试验得出,头孢菌素和恩氟沙星对临床分离得到的大肠埃希菌的MIC<0.06 mg/m L,头孢菌素对化脓性棒状杆菌和坏死梭杆菌的MIC≤0.06 mg/m L。但长期使用抗生素容易产生耐药性,且药效下降。近年来很多具体的治疗方案都是选择几种抗生素搭配使用,如土霉素与新霉素联合、土霉素与红霉素联合等都可达到较好治疗效果[14]。但大量使用会造成奶牛乳汁中抗生素的残留,给广大消费者身体健康带来极大的潜在危害。

3.2 激素疗法

目前,用的较多的激素是前列腺素及其类似物。张彦明报道,对黄体存在的患子宫内膜炎的奶牛,一次性肌肉注射0.75 mg前列腺素类似物或0.5 mg氯前列烯醇,治愈率为75%~90%。前列腺素及其类似物不仅对有黄体存在的子宫积脓和慢性子宫内膜炎有很好的治疗效果,而且对没有黄体存在的慢性子宫内膜炎也有较好疗效[15]。催产素可刺激子宫收缩,促进子宫内炎性分泌物的排出,产后轻度至中度的子宫内膜炎病例均可使用此方法进行治疗,但最好在使用催产素48 h前用雌激素处理,以增加子宫对催产素的敏感性。但近年雌激素已很少使用,主要是因为市场上雌激素类化合物已非常少见,且雌激素在食品中的残留会对人类健康构成威胁。

3.3 中药疗法

由于抗生素容易造成乳制品的药物残留和耐药菌株的出现,近年来越来越多的研究者将目光聚焦在中药疗法上。现代药理研究证明,中药具有显著的抑菌抗炎、改善血液循环、增强免疫力和促进子宫收缩等作用[16]。应用清宫消炎混悬剂(主要由黄柏、冰片、元明粉、青黛等组成)对1 307头奶牛子宫内膜炎病例进行治疗后,其有效率达95.0%,治愈后发情期配种受胎率达90.8%,分别较西药对照组提高8.5%和10.4%。应用清宫液(由红花、益母草、桃仁等制成的中药灌注液)治疗86例奶牛子宫内膜炎病牛,其有效率为100%,治愈后3个发情期受胎率为85.0%。应用“清宫药”(主要成分为桃仁、熟地、红花、当归、赤芍、川芎、益母草、黄芩、生蒲黄、栀子)治疗256头子宫内膜炎奶牛,其有效率和受孕率分别为89.7%和71.2%,与抗生素组65.0%和50.0%相比,分别提高24.7%和21.2%,效果显著。应用“速效宫必治”(由苦参、黄连、黄柏、红花、益母草等10余味中药加工成稀流浸膏)灌注(15 m L)子宫内膜炎病牛子宫,每4~5 d用药1次,其总有效率为95.3%,妊娠率为86.0%。郭世宁[17]选取中药进行体外抑菌试验,结果表明,黄芩、连翘和硼砂对大肠埃希菌的抑菌效果较好,红花、连翘、丹参、淫羊藿、栀子、紫草、黄芩、硼砂和蛇床子对金黄色葡萄球菌的抑菌效果较明显,连翘、丹参、蛇床子和硼砂对链球菌的抑菌效果较好。此外,国内众多专家研究表明,由青黛、黄柏等制成的清宫消炎混悬剂、益母生化散、金乳康、新促孕液、加味益母生化栓及中药子宫灌注液等中药制剂在防治奶牛子宫内膜炎上均取得理想效果[18]。

3.4 子宫冲洗法

子宫冲洗法是治疗奶牛急、慢性子宫内膜炎的常用方法之一,其机制在于加速子宫内炎性分泌物的排出,减少其对子宫的侵蚀,净化子宫,使灌注的药物更快、更好地发挥功效。一般在子宫颈松弛张开后冲洗子宫。常见的子宫冲洗液有0.1%高锰酸钾、3%~10%氯化钠、0.05%洗必太、0.1%雷夫奴尔、0.02%呋喃西林或0.05%新洁尔灭等溶液,使用前需将子宫冲洗液加热到40℃,冲洗液用量需根据炎症程度及子宫体积大小而定,一般使用量为200~300 m L。彭焕忠等人用0.1%高锰酸钾溶液冲洗奶牛子宫内膜炎患牛的子宫,试验组46头奶牛的治愈率为96%,治疗后发情期受胎率为61%,同对照组治愈率80%、发情期受胎率50%相比分别提高16%和11%,差异显著(P<0.05)。靳光秀等人用洁尔阴洗液冲洗子宫,治疗24头奶牛子宫内膜炎,结果痊愈20头,治愈率为83%。

3.5 全身疗法

当病畜出现全身症状时,除局部治疗外,还应进行全身治疗,包括补盐、补糖和肌肉注射或静脉注射抗菌药物等。对机体衰弱的患牛可以静脉注射复合维生素、钙剂以刺激肌肉和神经的兴奋,增强子宫收缩性[19]。全身应用抗生素时,最好先进行致病菌的药敏试验,使用对致病菌最敏感的抗生素进行治疗,从而确保疗效。

4 小结

母猪子宫内膜炎的防治 第4篇

一、临床症状

1. 急性子宫内膜炎。母猪产后或流产后数天发病,体温升高、精神沉郁、食欲减退或废绝,常卧地、频尿,从阴门排出大量灰红色或黄白色有腥臭味的黏液性或脓性分泌物,重症者分泌物呈污红色或棕色。母猪奶水不足,造成仔猪腹泻死亡。

2. 慢性子宫内膜炎。母猪配种数天后发病或由急性子宫内膜炎转变而来,母猪发情不正常,每到发情时就会从阴门排出脓性分泌物,在阴户和尾根周围常见分泌物的干结痂,猪栏地面常见到白色似石灰渣样粉末,往往无明显全身症状,部分猪仍可定期发情,但屡配不孕。若不及时治疗,可发展为化脓性子宫内膜炎、子宫积脓等。

二、发病原因

1. 母猪发生难产、胎衣不下、分娩时间太长等,易引发急性子宫内膜炎。

2. 母猪患蓝耳病、细小病毒病、伪狂犬病、猪乙型脑炎等,造成死胎、木乃伊胎、流产、早产引起胎盘坏死、子宫损伤,继而引发急性子宫内膜炎。

3. 母猪产房环境卫生差,如夏季产房气温高、产床清洗消毒不彻底、粪便没及时清扫冲洗、蚊蝇较多等,也易引发子宫内膜炎。

4. 母猪配种时消毒不严、方法不当,易引起慢性子宫内膜炎。

三、预防措施

1. 注意栏舍环境卫生,保持栏舍清洁、通风,及时清理积粪,特别在母猪转入产房前要对产床、用具、保温箱、料槽等彻底清洗消毒,不留卫生死角。

2. 母猪产前1周可用四川华神公司生产的猪用型病菌净拌料(每500千克饲料添加1千克),临产母猪转入分娩栏时要对其全身进行刷洗,并驱虫、消毒。

3. 助产消毒不彻底和动作粗鲁造成的产道损伤,是造成母猪子宫内膜炎的另一原因。接产时要严格执行卫生操作规程,用0.1%高锰酸钾溶液将母猪臀部、阴户及乳房擦洗干净,用1∶300的消毒灵溶液消毒产床。助产者不能留长指甲,手臂要消毒并用肥皂润滑。

4. 分娩过程中可使用前列腺素控制产仔时间,避免使用过多催产药,即使要用催产素也要在母猪产下第一个仔猪后适量使用,以防胎儿阻塞,造成子宫痉挛损伤。分娩完毕后留意胎衣是否排出,并用复方氨基比林注射液20毫升、青霉素960万单位、链霉素200万单位,在母猪尾根交巢穴注射,可预防产后感染。

5. 配种前要用0.1%高锰酸钾溶液把母猪阴户擦干净,方法是把毛巾放在0.1%高锰酸钾溶液中浸泡一下,然后拿出来拧一拧,折叠好,每擦一次折叠一次,直到把母猪阴户擦干净。自然交配时,应避免公、母猪体重相差太大,并须人工协助,挤掉公猪包皮内积液,使其阴茎尽快进入母猪阴道;人工授精时,器具要严格消毒,最好采用一次性无菌输精管,严格遵守操作规程,禁止粗暴输精。

6. 要搞好引起繁殖障碍性传染病的免疫预防,如猪乙型脑炎、细小病毒病、蓝耳病、伪狂犬病等,防止因流产、木乃伊胎、死胎浸润诱发本病。

7. 产后及时护理子宫,用250毫升生理盐水加青霉素1600万单位、链霉素200万单位灌入母猪子宫,可起到抗菌消炎、增强子宫活性、促进子宫内容物排出的作用。

四、治疗

1. 急性子宫内膜炎的治疗。应先清除子宫内的炎性分泌物,可用1%温生理盐水或0.02%新洁尔灭溶液、0.1%高锰酸钾溶液、1%～2%碳酸氢钠溶液等2000毫升冲洗子宫。方法是用消毒过的输精管或胃导管输注冲洗,输精管从阴门朝阴道前上方插入,插入5厘米左右然后转向平插25～35厘米,此时会遇到子宫颈口阻挡,要耐心地慢慢刺激子宫颈口,一般在2分钟后子宫颈口可开张,输精管即可顺利插入。根据母猪个体不同可以插入30～40厘米。用大注射器把冲洗液缓慢注入子宫,与此同时,一些脓汁或坏死组织被冲洗液带出体外。冲洗后再注射前列腺素制剂,促进子宫颈扩张,并驱赶母猪活动,将残存的液体尽量排出。最后在250毫升生理盐水加入青霉素2400万单位、链霉素300万单位输进母猪子宫内,同时肌注或静注抗菌药物等。对有严重全身症状的病猪,可使用抗生素或磺胺类药物进行肌肉注射,配合使用退烧、强心补液、助消化和缓泻作用的药物,对症治疗。

2. 慢性子宫内膜炎的治疗。母猪慢性子宫内膜炎较难治愈,因多数病例在母猪发情配种时才能发现。在这种情况下,可用5%～10%盐水冲洗子宫,冲洗干净后,再用青霉素1600万～2400万单位、链霉素300万单位等药物输入子宫,同时可皮下或肌肉注射缩宫素10～20单位,每天1次,连续3天,促进子宫蠕动,以利炎性分泌物排出;或取甲硝唑葡萄糖溶液(甲硝唑0.5克、葡萄糖125克)50毫升加15支80万单位的青霉素,待母猪发情稳定后输入子宫内,每天1次,连续3天,可有效治疗子宫内膜炎;也可用1600万～2400万单位青霉素加300万单位链霉素,混于高压灭菌的20毫升植物油中注入子宫内,每天1次或隔天1次,一般可以治愈。对于久治不愈者,应予以淘汰。

3. 产死胎或干尸的母猪的治疗。先将全部死胎排出,结合全身抗生素治疗。为增强子宫收缩力、促进液体排出,可肌肉注射催产素10～20单位。对于有全身症状、体温升高的病猪,静脉或肌肉注射抗生素,另外肌肉注射10～25毫升氨基比林,每天2次,连用3天。治疗的同时应加强饲养管理。

奶牛子宫内膜炎研究 第5篇

1 材料与方法

1. 1 药品

复方牛至油制剂( 淡黄色透明液体,100 m L/瓶,牛至油含量为6. 5% ,醋酸洗必泰含量为2. 5% ) ,咸阳职业技术学院畜牧兽医研究所研制。

青链霉素溶液的配制: 取2 瓶注射用青霉素钠( 400 万单位/瓶,批号为兽药字( 2011) 030202659,华北制药集团动物保健品有限责任公司生产) ,将其用100 m L纯化水充分溶解,再用8 瓶注射用硫酸链霉素( 1 g /瓶,批号为兽药字( 2012) 030011515,河北远征药业有限公司生产) ,将其充分溶解于青霉素溶液中,得试验用青链霉素溶液,此溶液现配现用。

醋酸洗必泰溶液的配制: 将2 枚醋酸洗必泰栓( 20 mg /枚,批号为国药准字H21020749,锦州九泰药业有限责任公司生产) 溶于100 m L纯化水中,即得醋酸洗必泰溶液。

1. 2 试验动物及分组

于2014 年3—12 月份选取陕西省咸阳市泾阳县某奶牛场患临床型子宫内膜炎的奶牛70 头,试验前奶牛均未给予任何药物。对试验奶牛逐一进行临床检查,包括体温、脉搏、呼吸及营养状况等,并对其胎次、病程和治疗次数进行统计。将奶牛随机分为5 组,每组14 头,即1 组( 高剂量组) 、2 组( 中剂量组) 、3 组( 低剂量组) 、4 组( 对照1 组) 、5 组( 对照2 组) 。

1. 3 试验设计

将药液温浴至接近体温,通过直肠把握法用输精器将药液注入奶牛子宫[3],1 组( 高剂量组) 注入复方牛至油原液100 m L,2 组( 中剂量组) 注入复方牛至油5 倍稀释液100 m L,3 组( 低剂量组) 注入复方牛至油10 倍稀释液100 m L,4 组( 对照1 组) 注入青链霉素溶液100 m L,5 组( 对照2 组) 注入醋酸洗必泰溶液100 m L,隔天1 次,3 次为1 个疗程,给药3 次未治愈者改用其他药物治疗。

1. 4 疗效判定

于最后1 次用药后第10 天依据疗效判定标准进行疗效判定。

治愈: 阴门无黏性或脓性分泌物排出,用开腟器打开阴道检查阴道、子宫颈口处均无炎性分泌物,非发情时子宫颈口关闭,呈粉红色( 无充血) ; 直肠检查子宫的收缩、大小及质地恢复正常; 停止治疗后30 d内恢复正常发情,且黏液正常,各项实验室检查均无异常,可进行人工授精。

显效: 阴门无黏性或脓性分泌物排出,用开腟器打开阴道检查阴道、子宫颈口处均无炎性分泌物,非发情时子宫颈口关闭,呈粉红色( 无充血) ; 直肠检查子宫的收缩、大小及质地基本恢复正常; 停止治疗后30 d内未恢复正常发情,或虽然恢复发情但黏液仍不正常( 混有脓絮、不够清亮、韧性差) ,实验室检查各项指标接近正常,不能进行人工授精。

有效: 临床症状明显改善,阴门仍有炎性分泌物排出,但排出量明显减少,且脓性分泌物比例降低。用开腟器打开阴道检查阴道、子宫颈口仍可见少量炎性分泌物,非发情时子宫颈口仍开张且充血; 直肠检查子宫的收缩反应增加,子宫体和子宫角变小,质地改善,实验室检查大多数指标接近正常。

无效: 各项检查及临床症状未见好转或有所加重,实验室检查各项指标无明显变化。

2 结果与分析

见表1。

注: 治愈率栏同列数据肩标字母不同表示差异显著( P < 0. 05) ,字母相同表示差异不显著( P > 0. 05) 。

由表1 可见,1 组、2 组奶牛子宫内膜炎治愈率显著高于3 组、4 组、5 组( P < 0. 05) ,1 组、2 组之间差异不显著( P > 0. 05) 。

3 讨论与结论

子宫内膜炎是奶牛产后多发的繁殖障碍性疾病,世界各国的发病率都很高。引起该病的主要原因是病原微生物的感染,其中以葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌等最常见[4]。牛至油是从天然植物“牛至”中提取的一种挥发性香精油[5]。牛至油中的香芹酚等酚类化合物有较强的抗菌活性,能迅速穿透病原微生物的细胞膜,改变其结构,破坏其正常代谢机能,并能有效阻止线粒体内的呼吸氧化过程,使病原微生物丧失能量而死亡,具有较强的抑制和杀灭多种病原微生物的功能,并且不会产生耐药性,曾被取名为“植物抗生素”“绿色抗生素”。据报道,牛至油对8 种革兰氏阴性菌具有高度活性,即使在稀释4 000 ~ 5 000 倍时仍可显著抑制菌株的生长。醋酸洗必泰又名醋酸氯已定,由对氯苯胺经重氮化- 缩合- 消除脱氮- 缩合- 中和成盐制得,是一种白色或类白色结晶粉末,微溶于水,易溶于乙醇,为动物性食品允许使用,但不需要制定残留限量的药物。本课题组利用纳米技术,将牛至油和醋酸洗必泰两种药物进行复方研制,是无抗、无残留的绿色药物。通过临床药效研究,发现该药物能有效治疗奶牛子宫内膜炎,提高养殖经济效益。

摘要：为了考察复方牛至油对奶牛子宫内膜炎的临床治疗效果,试验选择陕西省咸阳市泾阳县某奶牛场患临床型子宫内膜炎的奶牛70头,随机分为5组,每组14头,即1组(高剂量组)、2组(中剂量组)、3组(低剂量组)、4组(对照1组)、5组(对照2组),分别在奶牛子宫内注入复方牛至油原液、复方牛至油5倍稀释液、复方牛至油10倍稀释液、青链霉素溶液、醋酸洗必泰溶液100 mL。结果表明:1组、2组奶牛子宫内膜炎治愈率显著高于3组、4组、5组(P<0.05),1组、2组之间差异不显著(P>0.05)。说明复方牛至油对奶牛急性子宫内膜炎具有明显的治疗效果,推荐临床使用复方牛至油5倍稀释液,剂量为100 mL/次,隔天1次,连用3次。

关键词：牛至油,醋酸洗必泰,奶牛,子宫内膜炎,治疗

参考文献

[1]靳智勇.荷斯坦奶牛子宫内膜炎的综合性防治[J].青海畜牧兽医杂志,2008,38(2):57.

[2]段洪峰,冯小花,高帅,等.土霉素、宫得康和聚维酮碘液联合治疗奶牛子宫内膜炎的对比试验[J].湖南畜牧兽医,2014(5):24-26.

[3]魏守梅.宫乳康治疗奶牛子宫内膜炎的对比试验[J].中国畜禽种业,2014,10(6):59-60.

[4]赵兴绪.兽医产科学[M].3版.北京:中国农业出版社,2002.

奶牛子宫内膜炎研究 第6篇

1 子宫局部免疫

局部免疫系统是哺乳动物防御病原体侵袭的重要防线, 在抑制粘膜表面感染和激发全身免疫反应方面起着关键的作用。子宫内膜MC是子宫重要的免疫职能细胞, MC数量随生理周期变化而发生周期性改变, MC数量的变化直接影响子宫内膜结构和功能的改变, Atsushi K (1997) 研究发现, 子宫MC可能与子宫内膜血管和组织重建有关。在胚泡着床前后, MC可能通过抑制其它免疫细胞的功能, 使子宫的免疫水平暂时低下, 从而使具有来自父方抗原特征的胚泡不被排斥。Majeed IR (1995) 研究发现, MC释放的组胺、白三烯B4、白三烯C4、类胰蛋白酶-p I、巨噬细胞炎症蛋白、IL-1和IL-8等, 可使中性粒细胞和酸性粒细胞更快聚集, 从而提高机体抗感染的能力。MC受到不同病原菌刺激, 可使MC释放不同的介质和因子, 从而调节子宫局部免疫。

2 子宫MC与子宫局部免疫

MC是子宫重要的免疫细胞, MC数量随生理周期而发生周期性改变, Atsushi K (1997) 研究发现, 子宫MC可能与子宫内膜血管和组织重建有关。楼湘莹 (2005) 研究发现, MC能分泌40余种生物活性物质或细胞因子, 其中如组胺、TNF-α、碱性成纤维细胞生长因子等, 可促进或抑制血管生成;类胰蛋白酶刺激上皮细胞DNA合成和增生, 参与上皮修复, 基质金属蛋白酶在月经周期组织重建中起重要作用。MC是一个产生多种功能细胞因子的细胞。Kobayashi H (2000) 研究发现, MC受到不同病原菌刺激, 可释放不同的介质和细胞因子, 从而在免疫反应的性质和炎症的启动、转归等发挥着重要的调节作用。MC通过其分泌的各种因子与周围组织作用, 参与各种生理和病理反应。已经证实, 激活的MC可释放40余种活性介质。浩烘龙 (2006) 研究发现, MC具有高亲和性的Fce I受体, 此受体先结合IgE抗体, 再结合抗原, 从而引起MC脱颗粒, 并且MC释放大量炎症介质, 如组胺、TNF-α、IFN等, 炎症介质可导致子宫表层上皮损伤, 使血清Ig易达到宫腔, 从而提高子宫免疫机能。

3 子宫MC介质及其作用

MC作为一种免疫细胞, 不仅直接参与免疫应答, 而且还释放介质调节免疫应答。发生子宫内膜炎时, MC受到病原菌刺激后, 会脱颗粒释放大量的炎性介质和细胞因子, 其中最主要的胺类介质是组胺, 组胺的释放可能是由于MC表面的卵磷脂酶或蛋白酶被激活以致细胞膜受损的结果。

3.1 组胺生理作用

组胺 (Histamine, HA) 是由组氨酸脱羧酶 (Histidine decarbox-ylasc, HDC) 催化L-组氨酸脱羧生成的一种重要生理活性介质, 是一种活性胺化合物, HA是炎症和免疫反应的调节物质之一, HA在体内主要储存于MC和嗜碱性粒细胞的颗粒中, 是目前唯一被认识的储藏于MC的胺类, 是MC脱颗粒的标志物。HA作为身体内的一种化学传导物质, 在宿主对病原微生物的防御反应以及免疫调节方面起着重要的作用, 可以使微血管壁通透性增高、支气管平滑肌收缩、血管平滑肌弛缓、腺体分泌亢进。HA是引起炎症反应和局部血液循环障碍的介质之一。

3.2 组胺受体

组胺在体内的作用是通过和靶细胞上特异的组胺受体结合, 改变细胞的兴奋性, 从而发挥广泛的生理作用, 参与许多炎症以及神经系统疾病和免疫反应等的病理过程HRH1和HRH2分布在中枢组胺神经元中及外周的子宫、胃肠、血管平滑肌等组织。正常情况下, 子宫内膜HRH1和HRH2功能处于平衡状态, 当HRH2含量高于HRH1含量时, 机体免疫力增强, 抑制炎症发展, 反之, 机体免疫力减弱, 促进炎症的发展。HRH3受体可能通过调控细胞Ca2+流入细胞内, 使兴奋分泌偶联过程受到影响, 进而影响组胺的释放 (匡荣等, 2000) 。

3.3 MC其他介质

MC受到刺激后, 除了释放组胺, 还有5-HT、PGs产物、IL-2、IL-6、干扰素-γ (IFN-γ) 和MC蛋白酶等介质。5-HT在激发子宫肌收缩中活性更强, 5-HT和HA是引发子宫肌收缩的重要刺激原, 而PGF-2α可通过放大5-HT和HA的作用间接影响子宫收缩。IL-6是一种促炎因子, 在炎症早期产生。Isikawa H等 (2004) 研究表明, 健康奶牛产前IL-6水平显著高于产后, 在2.1±0.5~2.7±0.4ng/mL之间, 产后8d左右开始急剧下降, 表明奶牛怀孕期以体液免疫为主, 产后免疫状态调整和重建, 转变为细胞免疫, 这一过程在产后1周左右完成。

综上所述, 对子宫免疫状态起决定作用的子宫内膜结构和功能, 是子宫内膜炎的发生、发展和转归过程中的关键性因素。而子宫MC在发情周期和妊娠过程中均呈规律性变化, 说明其是子宫内膜局部状态转变的重要调节因素之一, MC作为“神经-免疫-内分泌”系统中的一个重要环节, 通过释放不同的介质和细胞因子, 参与调解器官的机能和局部免疫水平, 可能在子宫内膜炎的发生中起重要作用。

参考文献

[1]曹荣峰, 等.2008.奶牛子宫组织内肥大细胞分布规律的研究[J].中国奶牛, (3) :31-33.

[2]浩烘龙, 等.2011.奶牛产后子宫感染与子宫免疫[J].中国畜牧兽医, 9:40-44.

奶牛子宫内膜炎研究 第7篇

先天免疫系统首先识别侵入机体的病原, 然后通过信号传导通路诱导相关免疫细胞的活化和细胞因子分泌, 启动获得性免疫应答, 杀灭致病菌。病原相关分子模式 (pathogen-associated molecular pattern, PAMP) 识别受体可识别入侵病原菌, 是先天免疫反应及获得性免疫反应的基础[4]。近年来的研究发现, Toll样受体 (Toll-like receptor, TLR) 就是一类PAMP识别受体。TLR4可以识别革兰阴性菌细胞壁成分, 进而激活下游分子和细胞因子的分泌[5,6]。大肠杆菌是革兰阴性菌, 主要引发临床型子宫内膜炎[7], 但其引发奶牛子宫内膜炎的机制仍不清楚。本研究以先天免疫反应中的TLR4为切入点, 研究大肠杆菌引发奶牛子宫内膜炎的致病机制, 旨在为防控及治疗奶牛子宫内膜炎提供依据。

1 材料

1.1 试验动物

雌性健康中国荷斯坦奶牛10头, 体温正常, 食欲旺盛, 直肠检查子宫角直径明显缩小, 子宫壁弹性良好, 由吉林省吉林市规范化养牛养殖场提供。

1.2 药品

丙烯酰胺、双丙烯酰胺、尿素、Tris、EDTA, 均购自Promega公司;PBS、H2SO4、冰醋酸, 购自上海化学试剂公司;甲酰胺、TEMED, 购自Sigma公司。

1.3 主要试剂

c DNA合成试剂盒、组织RNA提取试剂盒、组织蛋白提取试剂盒、ELISA检测试剂盒, 均购自宝生物工程 (大连) 有限公司;SYBR Green Premix Ex Tag试剂盒、TBST、脱脂乳, 购自Sigma公司。

1.4 主要仪器

台式高速离心机, 购自上海天美科学仪器有限公司;半干转膜仪、凝胶电泳成像系统、酶标仪, 均购自美国伯乐生物有限公司;荧光定量PCR仪, 购自ABI生物有限公司;水平电泳槽, 购自北京君意电泳仪设备厂;匀浆器、摇床, 购自上海六一仪器厂。

2 方法

2.1 动物模型的建立

选取中国荷斯坦奶牛10头, 其中2头不做处理 (A组) , 4头子宫灌注无菌的LB肉汤培养基 (B组) , 4头子宫灌注大肠杆菌菌液 (C组) 。7~10 d后, C组临床表现为:精神沉郁, 体温升高, 采食减少, 由阴门流出灰褐 (白) 色、有腐臭味的黏液, 子宫颈口周围有脓性分泌物附着, 直肠检查子宫角松软、增粗, 子宫壁增厚且弹性减弱等A、B组奶牛正常。

2.2 子宫内膜样品的采集

参照参考文献[8]中的方法利用子宫内膜活检采样器采集子宫内膜样品。首先, 将无菌采样器以直肠把握法送入子宫内, 用手经直肠将子宫壁用力按压到采样器的凹口, 闭合采样器, 切下子宫内膜组织;再取出采样器, 将子宫内膜样品放于已灭菌的小瓶中, 备用。

2.3 TNF-α、IL-1β、IL-6的检测

将子宫内膜样品组织匀浆, 离心 (12 000 r/min) 收集上清液;用ELISA板一抗包被, 4℃过夜;用洗板液清洗4次, 注入样品稀释液, 200μL/孔, 室温振荡1 h;加入待测样品100μL, 20℃振荡2 h;PBS洗板3次, 加入二抗, 洗板3次, 之后加入显色液;各孔注入2 mmol/L H2SO4100μL终止显色;用酶标仪测定OD450值, 并计算浓度。

2.4 实时荧光定量PCR分析

利用组织RNA提取试剂盒提取子宫黏膜总RNA。通过测定OD260值检测RNA浓度, 琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性。参照c DNA合成试剂盒说明书合成c DNA第一链。

将c DNA样品梯度稀释后构建标准曲线, 线性回归分析。用Real-time PCR反应的解离曲线和S动力学曲线检测方法的可靠性。使用SYBR Green Premix Ex Tag试剂盒体系进行实时荧光定量PCR (25μL) :上、下游引物 (10 pmol/μL) 各1μL, 模板c DNA 2.5μL, Rox Reference DyeⅡ1.7μL, 缓冲液11μL, 灭菌双蒸水7.8μL。反应条件:95℃35 s;95℃5 s, 60℃40 s, 60℃40 s, 共40个循环。每个样品设3个重复孔, 采用相对定量法分析结果。

2.5 Western-blot分析

将子宫黏膜组织匀浆, 加入裂解液, 置于摇床缓慢振荡5 min;然后4℃、10 000 r/min离心20 min;取上清液进行SDS-PAGE分析, 并用半干转膜仪转膜, 50 g/L脱脂乳封闭2 h;然后于4℃孵育一抗, 过夜;TBST漂洗4次, 每次5 min, 孵育二抗;化学发光显色, 观察。

3 结果与分析

3.1 炎性细胞因子分泌情况

大肠杆菌刺激后, 炎性因子均明显上升。TNF-α、IL-1β、IL-6变化明显 (P<0.05) , 分泌量增加。子宫灌注无菌的LB肉汤培养基的B组TNF-α、IL-1β、IL-6略微有所增多, 但无明显统计学意义。结果见图1。

3.2 TLR4基因及蛋白表达变化

TLR4是识别革兰阴性菌的主要受体蛋白。试验结果显示:大剂量的大肠杆菌作用于牛子宫内膜组织, TLR4 mRNA表达水平明显升高, 见图2a。说明大肠杆菌能在基因水平刺激子宫内膜TLR4的表达。进一步对TLR4蛋白表达进行分析, 与A组、B组相比, C组大肠杆菌刺激能明显增加TLR4蛋白的表达。说明大肠杆菌刺激不仅能促进TLR4 mRNA的表达, 同时也能促进TLR4蛋白的表达, 见图2b。

3.3 NF-κB信号通路的检测

NF-κB信号通路与炎症关系非常紧密, 是TLR4下游的关键调控节点。为进一步研究大肠杆菌的致炎机制, 本试验对NF-κB信号通路进行检测, 结果显示, 大肠杆菌刺激牛子宫内膜组织后, NF-κB mRNA表达水平明显升高, 见图3a, 但对其抑制蛋白I-κB mRNA表达水平也明显升高, 见图3b, 说明大肠杆菌能在基因水平刺激子宫内膜NF-κB的表达。对NF-κB蛋白分析发现, 大肠杆菌对NF-κB蛋白表达无影响, 但会促进NF-κB磷酸化, 即磷酸化NF-κB蛋白表达量增多。相对应的, 大肠杆菌刺激能明显增加I-κB磷酸化蛋白的表达 (P<0.05) , 说明大肠杆菌刺激NF-κB蛋白磷酸化, 以及I-κB与NF-κB蛋白的解离, 从而减少其抑制作用, 见图4。

注:与C组比较, *表示差异显著 (P<0.05) ;与A组比较, #表示差异显著 (P<0.05) 。

注:与C组比较, *表示差异显著 (P<0.05) ;与A组比较, #表示差异显著 (P<0.05) 。

注:与C组比较, *表示差异显著 (P<0.05) ;与A组比较, #表示差异显著 (P<0.05) 。

4 讨论

子宫内膜炎是奶牛产后常发疾病, 是造成不孕的主要原因, 引起奶牛淘汰率增加, 造成巨大的经济损失[9]。研究表明, 东北地区奶牛临床子宫内膜炎的主要致病菌为大肠杆菌, 但其引发疾病的作用机制仍不清晰。大量的研究表明, 临床型子宫内膜炎患牛子宫内常可分离出大肠杆菌, 本研究用大肠杆菌进行子宫灌注, 检测大肠杆菌是否是导致子宫内膜炎发生的主要病原。结果表明, 大肠杆菌可以引发子宫炎症, 其临床表现与急性子宫内膜炎一致。

在外界环境因子的作用下, 动物机体各种组织细胞会发生细胞内级联信号反应, 细胞内多种信号分子间通过逐级传递信息促使核转录基因启动, 引发细胞内各种生理作用[10]。

机体对大肠杆菌的识别是通过病原相关分子模式识别受体完成的, 主要是TLR4[11]。早期的研究证实, 子宫内膜组织表达TLR4及TLR2[12]。本试验结果发现:大肠杆菌刺激后, 发生子宫内膜炎病牛的子宫内膜组织TLR4基因及蛋白表达明显增多;而且促炎因子的合成和分泌也同时增多。这与其他研究结果一致, 即TLRs促进促炎因子的合成和分泌。国内外研究报道, TLRs受到病原相关分子刺激后, 会进一步激活NF-κB信号通路, 启动相关基因, 从而分泌促炎因子及炎症趋化因子[13]。为进一步研究大肠杆菌作用机制, 本研究对NF-κB信号通路关键蛋白进行分析, 结果表明, 大肠杆菌刺激后, NF-κB蛋白磷酸化增加, 促进I-κB与NF-κB蛋白的解离, 从而减少其抑制作用。NF-κB蛋白磷酸化是其入核启动相关因子转录的关键。

综上所述, 大肠杆菌引发急性子宫内膜炎与TLR4密切相关。子宫内膜组织TLR4发挥对大肠杆菌的识别作用, 大肠杆菌刺激后TLR4表达量增加。进一步激活NF-κB信号通路的NF-κB蛋白磷酸化及I-κB与NF-κB蛋白的解离, NF-κB入核启动相关因子基因, 从而导致TNF-α、IL-1β、IL-6等炎性细胞因子表达增多。由于这种刺激呈现爆发式的效果, 因此患牛在TNF-α、IL-1β、IL-6作用下表现出典型的临床症状。目前, 子宫内膜炎的发病机制一直是研究的重点, 本研究从先天免疫入手研究发病机制, 旨在为奶牛子宫内膜炎的临床治疗和预防提供帮助。

摘要：为了探讨大肠杆菌引发的奶牛子宫内膜炎的致病机制, 试验采用子宫灌注大肠杆菌菌液的方法引发典型的临床型子宫内膜炎, 建立奶牛疾病模型;采用ELISA方法检测子宫内膜组织炎性因子的变化情况;应用qPCR和Western-blot技术从基因和蛋白水平分析TLR4及下游核转录因子的表达情况。结果表明:大肠杆菌刺激奶牛子宫可引发炎症, 表现典型的临床症状;炎性因子水平明显升高, 子宫内膜组织TLR4表达增多;TLR4下游NF-κB信号通路关键蛋白磷酸化表达增多。说明大肠杆菌可以引发临床型子宫内膜炎;机体通过TLR4对大肠杆菌进行识别, 进一步激活NF-κB信号通路, 从而导致TNF-α、IL-1β、IL-6等炎性细胞因子表达增多。

奶牛子宫内膜炎研究 第8篇

1 材料与方法

1.1 试验动物与分组

于烟台市蓬莱北沟镇奶牛场选取确诊为奶牛子宫内膜炎的奶牛14头, 随机分为2组, Ⅰ组为病理对照组, 7头;Ⅱ组为龙胆燥湿栓治疗组, 7头。另外选取健康奶牛7头, 作为健康对照组 (Ⅲ组) 。各组奶牛饲养条件相同。

1.2 试剂与仪器

一氧化氮 (NO) 测试盒、一氧化氮合成酶 (NOS) 测试盒、超氧化物歧化酶 (SOD) 测试盒、丙二醛 (MDA) 测试盒购于南京建成生物工程研究所。RT-6000酶标分析仪, 深圳雷杜。

1.3 临床试验与测定

1.3.1 采血

每天10:00采血, 采血后将血液静置1h, 放于4℃过夜, 1500r/min离心30min, 分离血清。

1.3.2 给药

按龙胆燥湿栓使用方法, 每日下午16:00给药, 连续使用7d。

1.3.3 测定

用药前1d采血1次, 用药后1、3、5、7d各采血1次, 以一氧化氮 (NO) 测试盒、丙二醛 (MDA) 测试盒测定NO、MDA含量。以一氧化氮合成酶 (NOS) 测试盒、超氧化物歧化酶 (SOD) 测试盒测定NOS、SOD活性。

1.4 数据分析

采用SPSS 16.0软件进行统计, 对测量数值进行t检验。数据以均值±标准差表示, P>0.05为差异不显著, P<0.05为差异显著, P<0.01为差异极显著。

2 结果

各组不同采血次数奶牛血清中的NO、MDA含量以及NOS、SOD活性测定结果见表1~4。

2.1 奶牛血清中NO含量的变化

由表1中数据可见, 用药后治疗组奶牛血清中NO含量逐渐下降, 第7d恢复到正常水平, 与健康对照组差异不显著 (P>0.05) , 而病理对照组奶牛血清中NO含量无明显变化, 与健康对照组比较差异极显著 (P<0.01) 。

2.2 奶牛血清中MDA含量的变化

由表2中数据可见, 用药后治疗组奶牛血清中MDA含量下降, 到第7d恢复到正常水平, 与健康对照组差异不显著 (P>0.05) , 而病理对照组奶牛血清中MDA含量无明显变化, 与健康对照组比较差异极显著 (P<0.01) 。

2.3 奶牛血清中NOS活性的变化

由表3中数据可见, 用药后治疗组奶牛血清中NOS活性均逐渐下降, 第7d恢复到正常水平, 与健康对照组差异不显著 (P>0.05) , 而病理对照组奶牛血清中NOS活性无明显变化, 与健康对照组比较差异极显著 (P<0.01) 。

2.4 奶牛血清中SOD活性的变化

由表4中数据可见, 用药后治疗组奶牛血清中SOD活性升高, 到第7d恢复到正常水平, 与健康对照组差异不显著 (P>0.05) , 而病理对照组奶牛血清中SOD活性无明显变化, 与健康对照组比较差异极显著 (P<0.01) 。

3 讨论

(1) NO具有细胞毒作用, 能够造成细胞损伤, 使机体免疫力下降。试验结果表明, 用药前NO含量较高, 用药后NO含量明显降低, 到第7d恢复正常水平, 说明龙胆燥湿栓能够调节体内NO含量, 降低其细胞毒性, 使NO发挥正常功能, 从而提高机体免疫力。

(2) MDA是氧自由基代谢过程中脂质过氧化反应的稳定产物。MDA含量高低间接反映出机体细胞受氧自由基攻击的严重程度, 试验过程表明, 龙胆燥湿栓可有效降低血清中MDA含量。

(3) 治疗前, NOS活性升高, 造成NO含量超过正常水平而产生细胞毒性;用药后, 血清中NOS活性降低, 第7d恢复正常, 说明龙胆燥湿栓能通过降低血清中NOS活性减轻炎症, 但具体作用机理有待进一步研究。

(4) SOD活性的高低间接反映机体清除氧自由基的能力, 试验结果表明, 龙胆燥湿栓可提高血清中SOD活性, 从而维持机体内环境的相对稳定和生理功能正常。

4 结论

牛子宫内膜炎及腹膜炎的防治措施 第9篇

摘要：子宫内膜炎及腹膜炎是牛的常见病，作者根据多年工作经验，对两种病的防治提出相应措施，仅供参考。

关键词：牛；子宫内膜炎；腹膜炎；防治措施

中图分类号：S858.23 文献标识码： A DOI编号： 10.14025/j.cnki.jlny.2014.22.0051

1 子宫内膜炎的防治措施

牛子宫内膜炎能直接导致牛的不孕。据相关数据统计，我国牛的不孕症中，因子宫内膜炎而导致的占近1/5左右，可见其比例之高，所以对于牛子宫内膜炎要采取有效办法进行预防。重点以预防为主，以治为辅，从改善环境条件，加强饲养管理，保证充足营养等几方面入手，努力保证牛的自身代谢平衡，提高自身的抵抗力，减少子宫内膜炎的发病几率。

1.1 加强饲养管理

在畜牧养殖中，加强饲养管理是提高动物自身抗病力的重要手段。动物的抗病力与其自身的生长状态有直接关系，饲养管理到位，动物生长营养充足，自然身强体壮，抗病力就强。采取科学合理的饲草、饲料供应，提高营养水平是保证牛正常的生长代谢所需，是强身体壮的有效措施，对于预防牛子宫内膜炎效果明显。另外也要密切观察牛的生长情况，早发现，早诊断，在最佳时机进行治疗。

1.2 搞好牛场环境卫生

牛的生存环境对于牛的健康成长十分重要。要特别注意场地的卫生情况，牛床、牛舍、运动场应保持干燥，做好定期消毒工作，至少要一个月进行一次，如果环境保持不是很理想，就要一个月进行2次消毒。对于牛舍及运动场中的粪便、积水、污水及其他垃圾物要及时清理，时刻保持牛体的清洁、干燥，让牛在良好的环境中成长。

1.3 控制产前、产后感染

1.3.1分娩管理 对于待产的牛要设立独立产房，让牛在安静、清洁、温度适合的环境中分娩，对独立产房要定期进行消毒，避免分娩感染。在即将分娩时，要对牛外阴及分娩环境再次进行消毒，对于助产者手臂及器械也要做好严格的消毒。一般以自然分娩为主，让母牛独立生产，尽量不要对母牛分娩产生干扰，不要过早进行助产，只有在难产时才进行适当助产，助产操作要规范，防止产道损伤及感染。在母牛分娩时，要注意观察胎衣的下落情况以及产道的损伤情况，如有胎衣不下、产道损伤及产后恶露异常等情况，一定要及时采取有效措施进行治疗。

1.3.2 加强营养 牛的产前、产后都要保证营养的充足供应，要注意营养均衡，特别是一些维生素及微量元素的比例搭配要科学合理，满足牛的营养需要。一般在临床前2周应转入产房实行单独饲养，并进行健康检查。牛产后身体比较虚弱，要尽快帮助牛恢复体力，增强牛的抗病力，可以进行静脉注射葡萄糖或葡萄糖酸钙。可肌肉注射催产素防止胎衣不下，在产后24～28小时，应向子宫内灌注抗菌素一次，以防产后子宫感染。如果牛产后12小时胎衣仍然不下，此时应采取药物注射等措施防止子宫感染。

1.3.3 保持环境卫生 环境卫生对于产后的牛来说十分重要，卫生条件不好，细菌容易滋生，增大感染机率。产后7天内，要特别注意产床、母牛外阴及后续卫生。产后一个月内，除了注意卫生之外，营养也十分重要，要保证充足营养，预防产后瘫痪、乳房炎、酮病发生。牛舍、产房要经常保持干燥，夏季加强通风，冬季注意保暖，器具定期进行消毒。

1.4 避免配种感染

在配种时，要对器材、人员、母牛都做好严格消毒工作，避免感染牛的生殖器，精液的稀释液、稀释器具、输精枪应严格消毒，操作在无菌条件下进行，输精器要保持清洁，输精动作要缓慢，避免伤害子宫或内膜而引起感染。

2 牛腹膜炎的防治措施

2.1 症状

此病是腹膜壁层和脏层各种炎症的统称，以腹壁疼痛和腹腔有炎性渗出物为特征的一种疾病。主要表现为牛出现腹痛，腹部膨大、产生腹液。急性表现为精神沉郁，体温升高，眼窝凹陷，四肢集于腹下，拱背而立，强迫行走，步态小心，有时表现疼痛，呻吟。有的牛染病后食欲会减退，瘤胃蠕动没有声音，伴有轻度气鼓，同时有便秘产生。腹部出现明显膨大，穿刺后取液明显浑浊，混有纤维蛋白絮片、红细胞或脏器内容物。直肠检查发现在直肠中宿粪较多，腹壁紧张。慢性型表现症状稍轻，但会产生慢慢变瘦的情况。

2.2 发病原因

可分为原发性和继发性两种。原发性的主要原因是因为牛运动量大或其他因素，造成牛的自身防卫机能降低，抵抗力减弱，一些病菌如大肠杆菌、链球菌和葡萄球菌感染了机体；继发性的主要原因是发于胃肠及其他肝脏破裂、穿孔或腹壁创伤、腹腔穿刺或手术感染，腹腔脏器炎症的蔓延、出血性败血症、肠结核等。

2.3 治疗预防

治疗原则为抗菌消炎，制止渗出，增强病畜抵抗力。腹壁穿孔或腹腔内脏器破裂时，应立即实施手术。一方面进行消炎止痛，可用青霉素钠、普鲁卡因注射液、氯化钠等进行腹腔注射。另一方面是增强机体抵抗力，通过注射氯化钙、乌洛托品、葡萄糖、生理盐水等注射液来进行。本病的预防主要在于平时应避免各种不良因素的刺激和影响，特别注意防止腹腔及骨盆腔脏器的破裂和穿孔。直肠检查、子宫清洗等都要小心进行，以免引起穿孔。腹腔穿刺以及腹壁手术均应按照操作规程进行，防止腹腔感染。母畜分娩子宫整复、难产手术以及子宫内膜炎的治疗都要谨慎地进行操作。

奶牛子宫内膜炎的防治 第10篇

1 临床症状

1.1 慢性型发病较长, 无全身性反应, 从阴门外流出脓性或粘性液体, 发情周期、发性、排卵均正常, 但屡配不孕, 配后流产, 阴道内有少量浑浊液体或发情时从子宫内流出粘液。直肠触诊:子宫角增粗, 子宫壁变厚, 子宫颈比正常时要粗。

1.2 慢性卡他性型病牛发病周期、发性、排卵均正常, 但是屡配不孕, 或配后流产。阴道内有少量浑浊的液体, 或发情时从子宫内流出粘液, 子宫角增粗, 子宫壁变厚, 变硬, 弹性降低。

1.3 慢性化脓性型病牛发情周期不规律, 甚至不发情, 食欲明显减退, 精神沉郁, 弓背举尾, 阴道内有淡黄色或黄褐色的粘液, 直肠检查子宫体明显增长, 有波动感, 压迫可流出大量恶臭脓液。

1.4急性型发病较急, 伴有全身性症状, 表现为体温升高, 食欲减退, 精神沉郁。从阴道内流出私液和粘液或血液, 含有坏死组织的分泌物, 有腥臭。直肠检查:子宫壁厚, 子宫角也增厚, 手压有痛感。常伴发坏血病, 易造成淘汰或死亡。

1.5 急性粘性脓性型多发于产后5～15 d, 恶露排除时间延长, 转为粘性脓性分泌物, 臭味不显著。阴道视诊:子宫口开张, 粘膜潮红, 有炎性分泌物。直肠触诊:子宫角复旧差, 收缩反应弱, 子宫壁增厚, 蓄积液增多时有波动感。全身症状轻微, 食欲减弱, 泌乳量减少。

2 病因分析

奶牛子宫内膜炎主要由自然环境中存在的非特异性细菌引起, 奶牛子宫内膜炎的病原微生物比较复杂, 国内外报道引起奶牛子宫内膜炎的病原微生物的种类和出现频率均不一致, 其中以链球菌、大肠杆菌、葡萄球菌和绿脓杆菌感染引起的报道最为常见, 其次还有放线杆菌、变形杆菌、克雷伯氏杆菌等;此外, 某些特异性病原微生物如结核杆菌、布氏杆菌、沙门氏菌、胎儿弧菌、牛鼻气管炎病毒、牛腹泻病毒等;牛体和畜舍环境卫生不良;人工授精、分娩、助产、阴道检查时消毒不严格, 感染病原微生物, 或操作不当, 损伤子宫内膜, 子宫弛缓、流产、胎衣不下, 恶露蓄积, 子宫脱出等均可引发子宫内膜炎。

3 诊断

当发生子宫内膜炎时, 如果病变轻微, 一般很难确诊, 尤其在患隐性子宫内膜炎时更是如此。一般情况下, 产后子宫内膜炎, 根据临床症状及阴门排出的分泌物即可做出临床诊断。慢性子宫内膜炎, 可以根据临床症状、发情时分泌物的性状、阴道检查、直肠检查和实验室检查进行诊断。

4 预防措施

4.1 加强饲养管理

按奶牛的不同生长阶段制定合理的日粮配方。尤其应重视处在干乳期和怀孕后期奶牛的日粮平衡, 尤其要加强维生素以及Se、等微量元素的量和Ca、P等矿物质的供给。

搞好环境卫生, 提供良好的饲养条件, 牛舍, 产房应经常清扫和消毒, 保持清洁, 干燥的环境, 夏季加强通风, 冬季注意保暖, 用具应定期严格消毒。

4.2 规范人工授精操作规程

人工授精要严格遵守兽医卫生规程, 对输精用的输精器、手套等物品要严格进行消毒, 彻底消毒母牛外阴部, 避免生殖器官感染。输精时, 动作要轻柔和规范, 避免损伤子宫或阴道。

4.3 加强围产期管理与保健

围产期奶牛应注意营养的平衡与供应, 临产前2周奶牛应转入产房单独饲养, 并进行健康检查, 产房、产床应清洁卫生, 严格消毒。在奶牛临产时要注意严格消毒, 并做好接产的准备工作, 难产奶牛助产时操作应规范, , 防止产道损伤和感染。产后奶牛应加强护理与保健, 以尽快恢复体力。要注意观察奶牛健康状况。根据身体情况制定相关的保健措施。

4.4 定期检查、及早治疗

产后奶牛常发生温和子宫内膜炎, 大多数奶牛能清除病原微生物, 但免疫水平低下的奶牛易患子宫内膜炎, 多在产后2周内发生, 且多为急性病例, 如患牛不能及时得到治疗, 则易造成炎症的扩散, 从而引发多种炎症或转化为慢性炎症, 此外, 随着子宫颈口的收缩等产后生殖器官及其功能的恢复, 也会给炎症的治疗增加难度, 因此, 产后奶牛必须密切观察子宫的发展状况, 本着做到早发现, 早治疗的原则, 以避免错过理想的治疗时机。

5 治疗措施

5.1 西药疗法

当子宫炎无全身症状时, 一般采用子宫局部用药。通常用下列药物中的一种:土霉素粉2 g;四环素粉2 g;金霉素1 g, 青霉素80～100万U;青霉素100万U和链霉素0.5～1 g, 溶于蒸馏水100～200 mL, 一次注入子宫。每日或隔日1次, 直至排出的分泌物量变少而洁净清亮为止。

对慢性及其含有脓性分泌物的病牛, 可用卢格氏液, 或0.1%高锰酸钾液, 或0.05%呋喃西林液, 或3～5%氯化钠液, 冲洗子宫。卢格氏液配制方法:碘25 g、碘化钾25 g, 加蒸馏水50 m L溶解后, 再加蒸馏水到500 mL, , 配成5%碘溶液备用。用时取5%碘溶液20mL, 加蒸馏水500 m L, 一次灌人子宫。碘溶液具有很强的杀菌力, 用时由于碘的刺激性, 可促脑子宫的慢性炎症转为急性过程, 因而可使子宫粘膜充血, 炎症渗出增加, 加速子宫的净化过程, 促使子宫早日康复。

对于子宫蓄脓症的治疗, 可用前列腺素及其类似物, 一次向子宫腔内注射2～6 mg, 能获得良好效果。

对纤维蛋白性子宫内膜炎, 禁止冲洗之宫、以防炎症扩散。为了消除子宫内渗出物, 可用药物促使子宫收缩, 并向子宫腔内投入土霉素胶囊。

5.2 中药疗法

5.2.1 蒲公英30 g、银花藤20 g、益母草50 g、当归20 g、川芎l0 g、草血竭20 g、土人参30 g、萆薢20 g、香附l5 g、黄柏l0 g、车前草30 g、夏枯草40 g、大红袍20 g、下奶果20 g、甘草l0 g, 汤剂服用。