电脑桌面
添加盘古文库-分享文档发现价值到电脑桌面
安装后可以在桌面快捷访问

花粉培养范文

来源:文库作者:开心麻花2026-01-071

花粉培养范文(精选10篇)

花粉培养 第1篇

关键词:西府海棠,花粉活力,离体萌发,最佳培养基

花粉是种子植物特有的结构, 相当于一个小孢子和由它发育的前期雄配子体。根据花粉形状大小, 对称性和极性, 萌发孔的数目等, 可以鉴定到科和属, 甚至可以鉴定到植物的种[1]。它包含该物种的所有基因类型, 具有丰富的遗传多样性, 是种质保存和交换以及杂交育种的重要材料[2]。

花粉生活力测定可采用花粉染色测定法、花粉授粉结实检测法和花粉离体萌发测定法等[3]。花粉离体萌发一般在培养基上进行, 常用的培养基基本成分是蔗糖和硼酸。其浓度一般为蔗糖10%~20%, 硼酸0.001%~0.005%, p H 5.8~6.5, 蔗糖的作用是提供合适的渗透压和花粉管所需能量, 硼酸中的硼元素为微量元素, 能促进花粉管的萌发。不同植物花粉萌发所需的培养基种类和浓度不同, 二细胞型花粉较易萌发, 一般在培养基上培养即可, 而三细胞型花粉如菊花、水稻、甘蓝等较难萌发, 要在基本培养基的基础上添加其他促进花粉萌发的因素, 如Ca (NO3) 2, Mg SO4, PEG1261等。钙是花粉萌发所必需的, 并对花粉管生长具调节作用, 硼是调节花粉管生长的重要微量元素, 与钙的作用密切相关。

1 本研究的目的和意义

西府海棠是山荆子 (M.baccata) 和海棠花 (M.spectabilis) 的杂交种, 其树形峭立, 花大, 芽艳, 具有较高的观赏价值, 在园林中应用历史悠久, 应用范围广泛[4]。西府海棠资源丰富, 花量大, 便于大量采集。海棠的花粉可用于任何苹果品种的人工授粉, 效果与苹果混合花粉效果相当, 而且海棠开花较苹果早, 采粉主动, 因此在花粉资源不足的情况下, 可采集海棠的花粉来进行人工授粉。本研究主要针对观赏价值较高的西府海棠品种, 利用悬液萌发的方法, 研究花粉生活力同糖浓度、硼酸浓度、钙离子浓度的关系, 以“斜枝”西府海棠花粉为材料, 筛选西府海棠花粉萌发的最佳培养基。

2 材料与方法

2.1 实验材料

本试验所用花粉材料均来自植物园内生长健壮的西府海棠植株。摘取西府海棠含苞待放的花蕾, 将花蕾用保鲜袋包好带回, 用镊子取出花药放入培养皿中, 盖上滤纸后置于阴暗处阴干花药, 当花药自然裂开, 花粉自然散出后将其混匀, 将花粉收集后分成16等份放入已在高温高压下灭菌的指形管内备用。

2.2 实验方法

2.2.1 试验仪器和试剂

试验仪器:显微镜、移液枪、滴管、培养皿、指形管、试管等。

试验试剂:蔗糖、氯化钙、硼酸等。

2.2.2 试验设计

培养基选择以“斜枝”西府海棠的花粉为材料, 采用3因素4水平的正交试验设计, 所选择的因素水平见表1, 所选择的正交见表2。每处理重复3次。

注:A-蔗糖浓度 (mgL-1) ;B-硼酸浓度 (mgL-1) ;C-氯化钙浓度 (mgL-1)

2.2.3 花粉萌发方法

花粉离体萌发采用悬液萌发法。把培养基滴在凹玻片的凹槽内, 每个凹玻片内所滴的培养基的量都是相同的, 用发丝蘸取少量花粉轻轻弹入培养基表面, 将发丝和镊子用酒精消毒灭菌, 防止其他花粉的介入影响试验结果。再用发丝和镊子蘸取其他品种的花粉, 播完花粉后贴上标签并标记培养基配方号, 记录花粉接种的时间。将播有花粉的凹玻片放于有湿滤纸的培养皿中, 置于25℃人工光照培养箱中培养, 3 h后在1010倍显微镜下观察各处理的花粉萌发率情况 (以花粉管的长度大于花粉粒的直径作为萌发的标准[5]) , 隔3 h观察1次, 直至其萌发率不再有显著增长为止。每次每个处理3次重复。记录每个视野的花粉总数和萌发数。

3 结果与分析

3.1 西府海棠的最佳培养基选择

在培养3 h、6 h、9 h时, 观察“斜枝”西府海棠花粉萌发情况, 每个处理都可使花粉萌发。3 h后观察的结果显示, 16个处理的花粉萌发率增长幅度差异较大, 但是处理10的花粉萌发率是最高的, 其次是处理5和处理12的花粉萌发率;随着时间的延长每个处理的花粉萌发率都在增长, 在培养6 h时, 观察的结果表明, 处理5、处理9、处理10、处理11、处理12和处理15的花粉萌发率增长速度开始有所降低, 但其他处理的花粉萌发率还在继续增长;培养9 h时的观察结果显示, 处理10的花粉萌发率最高, 达到32.58%, 其他处理的花粉萌发率几乎达到最高, 不再有显著地增长, 而在培养过程中, 处理10的花粉萌发率一直是最高的。为分析每种因素及水平对西府海棠花粉萌发的影响, 对蔗糖浓度、硼酸浓度及氯化钙浓度3因素分别进行了方差分析和多重比较, 比较结果见表3至表5。

由表3的数据可以分析得出, 蔗糖浓度为15mgL-1时, 花粉萌发率最高, 其萌发率平均值为30.10%, 极显著高于蔗糖浓度为10 mgL-1和蔗糖浓度为20 mgL-1的花粉萌发率;蔗糖浓度为5mgL-1的花粉萌发率显著高于蔗糖浓度为10mgL-1的萌发率, 极显著高于蔗糖浓度为20mgL-1的萌发率, 但与蔗糖浓度为15 mgL-1的萌发率差异不显著。因此, “斜枝”西府海棠花粉萌发最适合的蔗糖培养基浓度为15 mgL-1和5mgL-1。

由表4的数据可以分析得出, “斜枝”西府海棠的花粉在不同硼酸浓度条件下, 虽然在硼酸浓度为1.5 mgL-1时, 其萌发率最高, 为28.00%, 但各硼酸浓度之间差异不显著, 这说明本试验所设计范围内的各硼酸浓度对西府海棠花粉萌发的效果是一致的。

由表5的数据可以分析得出, 氯化钙浓度对西府海棠花粉萌发的影响在0.01水平上差异不显著。在0.05水平上, 以氯化钙浓度110-6 mgL-1和110-3 mgL-1时花粉萌发率最高, 平均为27.9%和27.6%。氯化钙浓度为110-6 mgL-1和110-3mgL-1时, 花粉萌发率显著高于氯化钙浓度为110-5 mgL-1的萌发率, 但和110-4 mgL-1的萌发率差异不显著。当氯化钙浓度为110-3mgL-1时, 花粉的萌发率最低, 平均为24.70%。由此可以得出在一定范围内, 氯化钙浓度对西府海棠花粉萌发的影响也不是特别显著, 当氯化钙浓度为110-6 mgL-1和110-3 mgL-1时, 较适合西府海棠花粉萌发。

在选择西府海棠花粉萌发的最佳培养基时, 依照以上各单因素的分析结果, 最适合的蔗糖培养基浓度为15 mgL-1和5 mgL-1, 最适合的氯化钙浓度为110-6 mgL-1和110-3 mgL-1, 4个浓度的硼酸效果一致, 因此最终的最佳组合数为224个, 组合数较多;又因为这样的单因素分析没有考虑各因素之间是否存在互作, 为了能够筛选出适合西府海棠花粉萌发的最佳培养基, 在明确各单因素对西府海棠花粉萌发影响的前提下, 对正交试验中的所有16个组合的花粉萌发结果进行了方差分析和多重比较。在所观察的时间内9 h后各个处理的花粉萌发率不再有显著增长, 在9 h时几乎达到最高, 因此以9 h时各个处理的花粉萌发率来进行方差分析和多重比较。方差分析的结果表明蔗糖浓度、硼酸浓度和氯化钙浓度3因素存在互作, 进一步的多重比较结果见表6。

注:小写字母表示差异显著 (a=0.05) , 大写表示差异极显著 (a=0.01)

由表6可以看出, 处理10的花粉萌发率最高, 为32.58%, 显著高于处理1、5和9, 极显著高于处理7、8、13、14、15和16, 但是和处理2、3、4、6、11和12之间没有显著差异;其次是处理12的花粉萌发率为31.60%, 显著高于处理7和9, 极显著高于处理8、13、14、15和16。处理12与其余的处理均差异不显著。处理3和处理6的花粉萌发率均在30%以上, 显著高于处理7, 极显著高于处理8、13、14、15和16。虽然处理2、3、4、6、10、11和12同属于一个水平, 但是处理10的花粉萌发率最高, 且显著高于处理1、5和9。处理12的花粉萌发率次之, 且与处理1、5和9差异不显著, 经过方差分析和多重比较可知处理10为最佳培养基, 即蔗糖15 mgL-1+硼酸1.5 mgL-1+钙离子110-6 mgL-1。

考虑互作后选择出的最佳培养基是处理10, 即蔗糖15 mgL-1+硼酸1.5 mgL-1+钙离子110-6mgL-1。在单因素比较分析时, 蔗糖15 mgL-1+硼酸1.5 mgL-1+钙离子110-6 mgL-1也是最佳培养基组合之一, 二者的分析结果是一致的。因此, 确定离体培养“斜枝”西府海棠花粉的最佳培养条件为蔗糖15 mgL-1+硼酸1.5 mgL-1+钙离子110-6 mgL-1。

4 结论

通过对西府海棠花粉萌发最佳培养基的选择, 得出以下结论:西府海棠花粉萌发的最佳培养基为蔗糖15 mgL-1+硼酸1.5 mgL-1+钙离子110-6mgL-1。本试验花粉的萌发率是在离体培养条件下获得的, 其高低并不完全等同于实际授粉萌发率, 因为在自然条件下花粉的萌发率会受更多因素的影响。

参考文献

[1]李育农.苹果属植物种植资源研究[M].北京:中国农业出版社, 2001.

[2]郭翎, 沈向, 余树勋, 等.观赏海棠育种现状与育种方向[J].山东农业大学学报, 2002 (增刊) , 30-32.

[3]胡适宜.植物学实验方法—花粉生活力的测定[J].植物学通报, 1993, 10 (2) :60-62.

[4]刘武林.花粉的采集、贮藏和生活力检验[J].吉林农业科学, 1981, 6 (3) :87-94.

牛角瓜花粉萌发及花粉管生长研究 第2篇

关键词 牛角瓜 ;花粉 ;花粉管生长 ;离体萌发 ;生长条件

中图分类号 S567.19 文献标志码 A Doi:10.12008/j.issn.1009-2196.2016.05.014

Abstract Pollen germination and pollen tube growth of Calotropis gigantea was tested by using One-Way ANOVA, multiple comparison, an orthogonal experiment and range analysis The results indicated that the pollen germination and pollen tube growth would be enhanced when the concentration of borate, calcium nitrate, magnesium sulphate and sucrose of the culture medium were within a certain range. When the concentration is too high or low, the pollen germination and pollen tube growth would be inhibited. Potassium has little impact on pollen tube growth and pollen germination. Sucrose and calcium nitrate have significant effect on pollen germination, sucrose and magnesium sulphate have significant effect on pollen tube growth. The optimum culture medium and environment conditions which support the germination and growth are 15% sucrose+350 mg/L Ca(NO3)2·4H2O+60 mg/L H3BO3+150 mg/L MgSO4·7H2O. The pollen germination and the growth of pollen tube will be better under 30~35℃.

Keywords Calotropis gigantea. ; pollen ; pollen tube ; germination in vitro ; growth conditions

牛角瓜(Calotropis gigantea)属萝藦科牛角瓜属植物,又名断肠草、五狗卧花。牛角瓜属植物有6种,广泛分布于亚洲和非洲的热带、亚热带地区[1]。中国有1种,生于低海拔向阳坡及空旷地,主要分布于四川、广西、广东、海南及云南等地[2]。牛角瓜作为一种传统的药用植物,其根、茎、叶和果等均可药用,具有消炎、抗菌、化痰和解毒抗癌等作用[3-4]。同时其乳汁具有强心保肝[5-6]、镇痛消炎[7-8]等疗效,树皮可治癫癣。牛角瓜纤维是种子附属物,近年来有研究发现,由于其具有纤维细长、中空度大、能抑菌、纤维表面有光泽等显著特点,可作为一种新型的植物纤维开发利用[9-10]。目前,对牛角瓜纤维的研究主要集中在栽培种植管理上[11-12],而对牛角瓜育种及花粉块萌发的相关研究未见报道。本试验以牛角瓜为研究材料,探究其花粉块的离体萌发及花粉管生长条件,为牛角瓜花粉保存和优良品种选育提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 材料

牛角瓜花采集于广西大学农学院试验地,取盛开的牛角瓜花药中成熟的花粉块供实验用。

1.2 方法

采用液体培养法,参照B-K[13]试液[10%蔗糖,100 mg/L H3BO3,300 mg/L Ca(NO3)2·4H2O,200 mg/L MgSO4·7H2O,100 mg/L KNO3],将试验培养液倒入培养皿中,花粉块从花药中取出置于培养基上,放入33℃人工气候箱中培养,观察并记录结果。

1.2.1 培养条件

用B-K试液进行培养时间、温度梯度对牛角瓜花粉块离体培养条件影响的试验。培养时间设为2、4、6、8 h;温度设为5、10、15、20、25、30、35、40℃。

1.2.2 培养基单组分筛选

试验参照B-K试液中的5个组分,单一组分浓度改变,其余4组分参照B-K试液浓度。分别设置以下处理:蔗糖浓度梯度分别为 0、5%、10%、15%、20%、30%;H3BO3浓度梯度分别为0、20、40、60、80、100、120、150 mg/L;Ca(NO3)2·4H2O浓度梯度分别为0、100、200、300、400 mg/L;MgSO4·7H2O浓度梯度分别为0、50、100、150、200、250、300 mg/L;KNO3浓度梯度分别为0、40、80、120、150 mg/L。

nlc202309091009

1.2.3最佳培养基的选择

根据单组分筛选结果,选择对牛角瓜花粉块离体培养影响显著的因子,并根据所选因子的最佳浓度水平的前后2个浓度(单因素试验中的浓度)来确定该影响因子的浓度,设计正交实验,统计各个正交实验的花粉块萌发率和花粉管长度,并对实验结果进行统计分析,选择最佳牛角瓜花粉块离体培养基。

2 结果与分析

2.1 培养条件对花粉离体培养的影响

2.1.1 培养时间

牛角瓜花粉粒聚集形成花粉块,人为破损单散出来的花粉粒不萌发,自然条件下以花粉块为单位萌发。培养时间不同,花粉萌发率和花粉管长度有差异,随着培养时间延长,花粉块萌发率增大,花粉管长度增加(图1-A,1-B)。培养6 h后,花粉块萌发率可达84.43%,方差分析结果显示,培养6与8 h萌发率无显著差异(p>0.05);花粉管依然在生长,且花粉管会出现胼胝质塞。

2.1.2 温度

温度影响花粉块萌发率及花粉管生长,如(图2-A、2-B)。温度在10℃以下,花粉不萌发。到达35℃时,花粉块萌发率达到最大值97.78%,此时花粉管长度也达到最大值1.06 cm。40℃后,萌发率降到24.4%,花粉管长度仅0.08 cm。方差分析结果表明:萌发率和花粉管长度在30和35℃时无显著差异(p>0.05),因此,最适培养温度在30~35℃。

2.2 不同培养基组分对花粉块离体培养的影响

2.2.1 蔗糖

从(图3-A、3-B)可知,随着培养基内蔗糖浓度增加,花粉块萌发率逐渐增大。当浓度达到15%时,花粉块萌发率达到最大值93.33%;但浓度超过30%时,对花粉块的萌发有抑制作用。蔗糖能促进花粉管生长,蔗糖浓度达到5%时,花粉管长度达到0.96 cm,是对照(培养基内不加蔗糖)的19.2倍,方差分析结果表明:萌发率在15%浓度下与对照、5%、10%、30%的浓度存在显著差异(p<0.05),花粉管在15%蔗糖浓度下,除与对照有显著差异外,与其他浓度均无显著差异(p<0.05)。综合分析蔗糖的最适浓度为15%。

2.2.2 硼酸

在一定浓度范围内,花粉块萌发率随培养基内H3BO3浓度的增加而增加,但超过一定浓度时,H3BO3对牛角瓜花粉块萌发率和花粉管生长有抑制作用。花粉块萌发率最高的H3BO3浓度为80 mg/L,萌发率达到93.33%(图4-A)。低浓度H3BO3对牛角瓜花粉管长度影响不大,但浓度超过150 mg/L时会抑制花粉管生长(图4-B)。方差分析结果表明,H3BO3浓度在80和100 mg/L时,萌发率无显著差异(p>0.05),而花粉管长度在80和100 mg/L浓度时长势较好。因此,H3BO3的最佳浓度为80~100 mg/L。

2.2.3 钙

在一定浓度范围内,随钙浓度的增加,花粉萌发率增大,超过一定浓度后,萌发率下降(图5-A)。钙离子浓度为300 mg/L,花粉块萌发率最大为95.57%;钙离子浓度达到一定值时能促进花粉管的生长(图5-B)。方差分析结果表明:在钙离子浓度为300 mg/L时,花粉萌发率与其他浓度的有显著差异(p<0.05);钙离子浓度在300 mg/L时,与对照和钙离子浓度为100 mg/L有显著差异,而与200、400 mg/L无显著差异。因此,选择最佳钙离子浓度为300 mg/L。

2.2.4 镁

镁对花粉块萌发的影响与硼酸具有相同的趋势。在一定浓度范围内,随着镁浓度的增加,花粉块萌发率增大,超过一定浓度后,萌发率下降(图6-A);镁离子浓度为200 mg/L,花粉块萌发率最大,为91.10%。镁离子浓度达到250 mg/L后会抑制花粉管伸长(图6-B)。方差分析结果表明:在镁离子浓度为200 mg/L时,花粉块萌发率和花粉管长度与其他浓度有显著差异(p<0.05)。因此,镁的最佳浓度为200 mg/L。

2.2.5 钾

钾在浓度梯度实验中并未表现出促进和抑制花粉块萌发率的状况(图7-A、7-B),因此,钾对牛角瓜花粉块萌发影响不显著。

2.3 牛角瓜花粉块正交试验结果分析

根据单因素试验结果分析可知,最佳蔗糖浓度为15%,钙离子的最适浓度为300 mg/L,镁离子的最适浓度为200 mg/L,硼的最适浓度是80 mg/L,钾离子对花粉萌发无显著影响,因此选定前4个作为影响因子,并根据各因子的最佳浓度左右的2个浓度(单因素试验中设定的浓度),各个因素设定3个浓度水平,即蔗糖浓度选择了10%、15%、20%;Ca(NO3)2·4H2O浓度250、300、350 mg/L;MgSO4·7H20浓度150、200、250 mg/L;H3BO3浓度60、80、100 mg/ L;用SPSS18设计L9(34)的正交试验(表1)。

根据影响花粉萌发率的正交试验极差分析与方差分析,结果显示(表2):蔗糖浓度的第一个水平浓度K1 的萌发率98.67%大于第二个水平浓度K2的萌发率93.47%大于第三个水平浓度K3萌发率 89.98%,同样,钙离子3个浓度水平对萌发率影响结果顺序为K3(97.75%)>K1(93.52%)>K2(90.89%);3个浓度水平的镁离子对萌发率影响结果为K1(96.67%)>K2(94.29%)>K3(91.16%);硼酸对萌发率影响结果为K3(94.58%)>K2(94.27%)>K1(93.26%)。在K1~K3浓度区间内,蔗糖和钙离子较镁与硼酸影响差异显著,4个因素对萌发率的影响,极差分析与方差分析结果相同,即钙离子>蔗糖>镁离子>硼酸,此时,培养基的最优组合为钙离子K3+蔗糖K1+镁离子K1+硼酸K3,即350 mg/L Ca(NO3)2·4H2O+10%蔗糖+150 mg/L MgSO4·7H20+100 mg/L H3BO3。

nlc202309091009

同理,影响花粉管生长的正交试验极差分析与方差分析结果(表3)显示:蔗糖3个浓度水平对花粉管生长影响顺序为K3(0.93 cm)>K2(0.90 cm)>K1(0.69 cm);钙离子为K3(0.88 cm)>K1(0.85 cm)>K2(0.79 cm);镁离子为K1(0.96 cm)>K2(0.80 cm)>K3(0.76 cm);硼酸为K1(0.85 cm)=K2(0.85 cm)>K3(0.82 cm)。且在K1~K3浓度区间内,蔗糖和镁较钙离子与硼酸影响差异显著,4个因素对花粉管生长影响顺序为蔗糖>镁>钙>硼酸;各因素的最佳组合为钙K3+蔗糖K3+镁K1+硼酸K1,即350 mg/L Ca(NO3)2·4H2O+20%蔗糖+150 mg/L MgSO4·7H20+60 mg/L H3BO3。

综合4个因素的正交试验对花粉萌发与花粉管的生长,钙离子选择浓度水平K3;镁离子浓度水平选定为K1;硼酸浓度在K1~K3对花粉萌发率影响不显著。因此,选择的浓度水平为K1;蔗糖浓度对花粉萌发率与花粉管生长的影响综合分析,选定浓度为K2。因此,培养基的最优组合为:15%蔗糖+350 mg/L Ca(NO3)2·4H2O+150 mg/L MgSO4·7H20+60 mg/L H3BO3。

3 讨论

3.1 培养条件对花粉萌发的影响

培养基条件对花粉萌发和花粉管生长有显著的影响。温度过低或过高时也对花粉萌发和花粉管生长起抑制作用,甚至不萌发。牛角瓜花粉离体培养的最适温度在30℃~35℃。牛角瓜花期全年,但盛果期为7~8月。由此可以推测,温度是影响其结实率的重要因素之一。

牛角瓜花粉块在离体培养条件下,培养6 h后,花粉管末端膨大,开始出现胼胝质塞,这可能与离体培养无法完成授精而停止生长,以减少物质能量的耗损有关[14]。

3.2 培养基成分对花粉萌发的影响

蔗糖作为碳源,能为花粉萌发和花粉管的生长提供营养,并能维持外界环境的渗透压,是许多植物花粉离体培养所必需的重要成分[15]。不同植物花粉离体培养基所需的蔗糖浓度不同,如桃[16]、高丛越橘[17]花粉离体培养基蔗糖的最适浓度为10%,黄连木[18]花粉离体培养基蔗糖的最适浓度为15%,薄壳山[19]核桃花粉离体培养基蔗糖的最适浓度为20%。本研究牛角瓜花粉离体培养基蔗糖最适浓度为15%。

一般情况下,花粉自身所含的硼和钙是不足的,自然条件下由柱头和花柱内的硼和钙来补偿[20]。硼酸是通过与花粉管膜中果胶物质作用改变细胞壁的结构和性质来调节花粉管的生长[20-22]。百合[23]花粉离体培养中,硼酸的最适浓度为1 mmol/L,腊梅[24]花粉萌发的最适硼酸浓度是50 mg/L。本研究中,牛角瓜花粉萌发硼酸最适浓度为80 mg/L;硼酸对牛角瓜花粉萌发率有促进作用,但对花粉管生长影响不显著,这个结论与杜纪红[16]等对桃花花粉萌发研究结果一致。

钙是花粉萌发与花粉管生长最重要的信号,一般认为,胞外钙离子通过质膜钙通道进入花粉内起作用,影响花粉萌发与花粉管生长[26]。梨花[25]花粉离体培养的最适钙质量浓度为15% CaCl2,核桃[27]花粉萌发的最适钙离子浓度为40 mg/L CaCl2,本研究牛角瓜花粉萌发的最适钙浓度为350 mg/L Ca(NO3)2·4H2O。

本研究钾对牛角瓜花粉萌发没有显著影响,此结论与吴开志[27]等研究钾对核桃花粉萌发影响以及权秋梅等对淫羊藿[28]花粉萌发的结论一致。

在花粉离体培养中,培养基不同组分对花粉萌发与花粉生长的影响是不同的,硼酸淫羊藿[28]对花粉萌发有显著影响,钙则在蔗糖与硼酸主导下起辅助作用,镁对其花粉萌发无影响。本试验培养组分中蔗糖和钙对牛角瓜花粉萌发和花粉管的生长有显著影响,硼与镁在蔗糖和钙的主导作用下起辅助作用。牛角瓜花粉离体培养的最佳液体培养基为:15%蔗糖+350 mg/L Ca(NO3)2·4H2O+80 mg/L H3BO3+150 mg/L MgSO4·7H20。

参考文献

[1] 戴好富,王茂媛,梅文莉,等. 牛角瓜属植物化学成分与药理活性研究进展[J]. 河南大学学报(医学版),2009,28(1):1-7.

[2] 高 柱,王小玲. 牛角瓜开发价值及栽培技术研究[J]. 北方园艺,2011(18):202-206.

[3] 王茂媛,王建荣,张新蕊,等. 牛角瓜花脂溶性成分及其抗菌活性研究[J]. 中药材,2013,36(3):404-407.

[4] Kiuchi F, Fukao Y, Maruyama T, et al. Cytotoxic principles of a Bangladeshi crude drug, akond mul (roots of Calotropis gigantea L.)[J]. Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 1998, 46(3): 528-530.

[5] 国家中医药管理局《中华本草》编委会. 中华本草[M]. 上海:上海科学技术出版社. 1998:25-326.

[6] 邓士贤,王懋德,王德成. 牛角瓜甙的强心作用及其生物效价[J]. 药学学报,1962,9(11):667-670.

[7] Dewan S, Sangruala H, Kumar V L. Preliminary studies on the analgesicactivity of latex of Calotropris procera[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2000, 73(2): 307-311.

nlc202309091009

[8] Basu A, Nag Chaudhari A K. Preliminary studies on the antiinflammatory and analgesic activities of Calotropis procera root extract[J]. Journal of Ethnopharmacology, 1991, 31(3): 319-324.

[9] 费魏鹤,胡惠民,李 璇,等. 牛角瓜纤维的结构与性能研究[J]. 中国纤检,2011(4):80-83.

[10] 方国平,胡惠民. 牛角瓜纤维及其在针织领域应用初探[J]. 针织工业,2014(5):26-30.

[11] 魏 静,赵元藩,张燕平. 牛角瓜的栽培管理技术及应用前景[J]. 林业调查规划,2013,38(4):112-115.

[12] 高 柱,付锦楠,王小玲,等. 干热河谷牛角瓜人工栽培技术研究[J]. 北方园艺,2014(16):27-30.

[13] Brewbaker J L, Kwack B H. The Essential Role of Calcium Ion in Pollen Germination and Pollen Tube Growth[J]. American Journal of Botany, 1963, 50(9): 859-865.

[14] 金 飚,李 娜,贾 妮,等. 琼花生殖器官结构及传粉昆虫的观察[J]. 植物分类学报,2007,45(6):753-768.

[15] 姚成义,赵 洁. 钙和硼对蓝猪耳花粉萌发及花粉管生长的影响[J]. 武汉植物学研究, 2004,22(1):1-7.

[16] 杜纪红,叶正文,苏明申,等. 桃花粉离体萌发和花粉管生长特性研究[J]. 西北植物学报,2011,31(1):64-71.

[17] 杨夫臣,秦仲麒,李先明,等. 培养基组分及pH值对高丛越橘花粉萌发的影响[J]. 经济林研究,2015,33(3):122-125.

[18] 李旭新,张艳青,冯献宾,等. 不同培养条件对黄连木花粉萌发和花粉管生长的影响[J].西北植物学报,2009,29(5):951-956.

[19] 张 瑞,李 洋,梁有旺,等. 薄壳山核桃花粉离体萌发和花粉管生长特性研究[J]. 西北植物学报,2013,33(9):1 916-1 922.

[20] 胡适宜. 被子植物胚胎学[M]. 北京:高等教育出版,1982:103-136.

[21] Blevins D G, Lukaszewski K M. Boron in plant structure and function[J]. Brain Research Reviews, 1998, 49(1): 481-500.

[22] Li Y Q, Chen F, Linskens H F, et al. Distribution of unesterified and esterified pectins in cell walls of pollen tubes of flowering plants[J]. Sexual Plant Reproduction, 1994, 7(3): 145-152.

[23] 杨 瑞,高 赛,王金金,等. 外源硼和钙对“索邦”百合花粉萌发与花粉管生长的影响[J].电 子 显 微 学 报,2014,33(4):368-371.

[24] 龚双姣,马陶武,刘 强. 培养基组分及培养条件对蜡梅花粉萌发及花粉管生长的影响[J]. 西北植物学报,2012,32(6):1 254-1 260.

[25] 张绍铃,陈迪新,康 琅,等. 植物生长调节物质对丰水梨花粉萌发和花粉管生长的研究[J]. 西北植物学报,2005,25(2):225-230.

[26] 孙 颖,孙大业. 花粉萌发和花粉管生长发育的信号传导[J]. 植物学报,2001,43(12):1 211-1 217.

[27] 吴开志,肖千文,廖运洪,等. 核桃花粉离体萌发的培养基研究[J]. 果树学报,2008(6):941-945.

[28] 权秋梅,黎云祥,吴春梅,等. 淫羊藿花粉萌发及花粉管生长研究[J]. 西北植物学报,2007,32(10):2 001-2 008.

小果短柱茶花粉离体培养系统的研究 第3篇

关键词:小果短柱茶,花粉萌发,花粉管生长,pH,温度

短柱茶组隶属于山茶科山茶属,全世界共l6种1变种,我国产13种1变种。该组中有一些种类,如小果短柱茶(Camellia confusa Chang 1941)作为优良的种质资源而受到关注[1]。花粉萌发、花粉管生长是高等植物有性生殖过程中的一个重要环节。花粉是受精中的关键环节[2]。研究影响短柱茶组花粉萌发和花粉管生长的因素能为人工授粉和进行相关试验研究时提供依据。

花粉萌发率是研究花粉生活力的一项重要指标,花粉萌发培养基主要成分是蔗糖和硼酸。蔗糖的作用是提供合适的渗透压和花粉管形成所需能量,硼酸的作用是促进花粉管的萌发[3,4]。不同植物花粉萌发所需要的培养基种类和浓度不同。基本培养基的基础上应添加其他促进花粉萌发的物质,如Ca(NO3)2、MgSO4、KH2PO3、VB1、PEG(聚乙二醇)等[5,6]。

花粉萌发和花粉管生长与萌发时的环境条件密切相关。温度在花粉萌发过程中起着重要的作用。拟南芥花粉萌发的最适温度范围是18℃~24℃[7]. 温度过高可降低花粉的萌发率[8,11]。花粉具有调节培养基pH到最适合其萌发的能力[9],但培养基的pH超出花粉的调节范围,花粉萌发就会受抑制。不同植物最佳萌发、生长pH不尽相同[9,10,11]。确定花粉萌发的最适温度和最适pH值对花粉离体萌发系统的建立有重要意义。

本研究以小果短柱茶(Camellia confusa Chang 1941)为材料,建立了短柱茶组适合的花粉离体萌发培养体系,为该茶组的生殖生物学研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 实验材料

小果短柱茶采自金华市下张家村国际山茶园种植基地(Camellia confusa Chang 1941)。植株均为健康、无病虫害。

1.2 花粉的采集

实验材料的采集一般在早上9点左右,此时花粉数量最多。

每次实验均采集当天开裂但尚未散粉的新鲜花药,放入装有硅胶的硫酸纸小袋中;再迅速带回实验室,放入液体培养基,置于25℃恒温培养箱中恒温培养。

1.3 花粉的离体萌发测定

本实验采用液体培养基,以蔗糖、硼酸、氯化钙、PEG-4000为培养基组分[12,13,14]。经过预实验最终确定液体培养基的组分为蔗糖、硼酸、氯化钙、PEG-6000(表1)。在配置培养基时,因为硼酸比较难溶以及硼酸和氯化钙的浓度很小,所以首先分别配置0.1%的硼酸母液和氯化钙母液。

培养花粉时,用洗净的镊子夹住带有花粉的花药,在盛有液体培养基的塑料培养皿中来回搅拌数次,将花粉洗入液体培养基中,最后放入培养箱恒温培养,一定时间后取出来观察。将培养一定时间的花粉每隔1 h置于显微镜下观察,物镜放大倍数为5倍,观察花粉的萌发情况。每个装片随机选取5个视野(每个视野花粉不少于30粒)进行观察,统计每个视野的萌发花粉数量和花粉粒总数(以花粉管长度大于花粉半径为萌发花粉),并计算萌发率。

1.4 花粉活力测定

将当天采集到的小果短柱茶花粉放入现配的液体培养基中,以1个花药:1mL液体培养液的比例在25℃的生化培养箱中培养2 h。从早上9点开始培养花粉,每隔2 h培养一批,直到晚上7点为止。每隔1 h要观察一次并统计每个视野的萌发花粉数量和花粉粒总数,计算萌发率。

1.5 花粉离体萌发的最适培养温度

将当天采集到的小果短柱茶花粉放入现配的液体培养基中,以1个花药:1mL液体培养液的比例在生化培养箱中培养3 h。培养温度设了5个梯度,分别为5℃、10℃、15℃、20℃、25℃。每隔1 h要观察一次并统计每个视野的萌发花粉数量和花粉粒总数,计算萌发率。显微镜下拍照,测量花粉管的长度,统计不同温度下花粉管生长的平均长度。采用Image J测定花粉管长度,在EXCEL软件中统计分析并作图。

1.6 花粉离体萌发的最适pH

将当天采集到的小果短柱茶花粉放入现配的不同pH(见表2)的液体培养基中,以1个花药:1mL液体培养液的比例在20℃生化培养箱中培养3 h。每隔1 h要在5倍显微镜下拍照,测量花粉管的长度,统计不同pH下花粉管生长的平均长度。3 h后,用pH计测量含有花粉的液体培养基的pH值。用0.1%氢氧化钠调碱,用0.1%盐酸调酸。

2 结果与分析

2.1 温度对花粉离体萌发的影响

在5℃、10℃、15℃、20℃和25℃这5个温度梯度下离体培养小果短柱茶花粉的实验,发现花粉离体萌发的萌发率受温度影响极大。如图1、图2所示。

单一的观察图1可以发现随着培养时间的延长,花粉萌发率提高,3 h之后花粉萌发率均达到80%以上,特别是在15℃、20℃、25℃的温度下恒温培养1 h便可达到80%的萌发率。再结合图2可以发现,培养时间达到3 h时,5℃和10℃条件下的花粉管平均长度分别只有134.8 μm和399.1 μm,可以说生长相当缓慢,而其他培养温度下的花粉管平均长度都较长,在20℃和25℃的花粉管平均长度都已超过了1500 μm.因此,温度对花粉萌发的影响可总结为:小果短柱茶花粉萌发的适宜温度在15℃~25℃之间,它既保证了花粉离体萌发的萌发率,又保证了花粉管的生长速度.

2.2 pH对花粉离体萌发的影响

通过测量现配的液体培养基的pH值发现,液体培养基的pH在6.50左右。用0.1%氢氧化钠和0.1%盐酸调节酸碱性,使液体培养基达到实验所需的pH范围内。通过实验发现,花粉萌发一段时间后,培养基的pH值发生变化,有成弱酸性中性的趋势。如表2、图3.

从表2中可以发现:将pH值从6.73、6.67、6.51、6.53分别调为5.63、6.67、7.14、8.07后培养小果短柱花粉3 h后,培养基的pH值分别变为6.45、6.69、6.73、6.85,即回归到弱酸性。则可推断,小果短柱茶花粉在萌发的过程中会释放出某种物质来调节pH值最终达到最适的pH生长值;一旦液体培养基的pH值超过了花粉的自我调节能力,花粉便会不萌发或者在花粉管的末端出现胼胝质导致生长停止。

从图3也可以看出,当液体培养基的pH值达到5.63(即A)时,小果短柱茶花粉管的生长受到抑制,3 h后花粉管的平均长度只有313.0 μm,只能抵得上另外三个pH值(即B、C、D)下生长1 h的长度。而且编号B、C和D内的花粉在培养3 h后花粉管长度均超过1400 μm。综合表2和图3可知,编号A的花粉虽然在3 h之内将pH调回至6.45,但由于长时间的处在酸性条件下花粉管生长受到影响,甚至停止生长,最终平均长度只有313.0μm。因此,我们的结论为使用培养基本身的pH(即6.5左右),最适合短柱茶组的花粉管生长。

2.3 花粉离体培养的最适培养基

结合山茶组其他离体萌发系统(数据未显示),本次试验调整不同硼酸浓度,建立小果短柱茶的花粉离体萌发系统。如表3所示。

由表3可以发现,当硼酸浓度是在0.003%时花粉的萌发率最高,高达93%以上。因此花粉离体萌发的最适培养基比例为5%蔗糖+0.003%硼酸+0.005%氯化钙+12%PEG-6000。

本次实验所采用的液体培养基的配方为5%的蔗糖、0.003%的硼酸,0.005%的氯化钙和12%的PEG-6000,培养温度在20℃左右,培养基的pH值为6.5。

2.4 常温保存的花粉实验时间的影响

在早中晚不同时间取常温保存的花粉,在离体萌发培养基中培养,分别计算培养1 h和2 h的萌发率。从图4中可以观察到,不论是早上、中午还是晚上培养小果短柱茶花粉,其萌发率均达到80%以上,并且彼此之间对花粉最终的萌发率都不会有太大的影响,可以说明小果短柱茶花粉的活力在早上下午晚上均很强,试验可在任意时间点开始。但因为花粉的保存会对花粉的萌发率产生影响,所以实验一般都在花粉采集回到实验室就开始花粉相关特性的研究,以减少外因对实验现象及实验结果的影响。

3 讨论

伴随着新技术的出现,花粉管的研究由早期通过改变培养基的组成,测量花粉的萌发率和花粉管的生长速率演变为目前的用荧光标记、显微观察等试验监测方法观测花粉管动态的变化。但是,受各种因素的限制,在柱头、花柱上研究花粉管的萌发与生长较为困难,本实验室通过测量花粉的萌发率和花粉管的长度来反映温度、pH值与花粉活力及花粉管生长速度之间存在的相关性,但是花粉离体萌发能否真实的反应花粉在自然条件下的特点,还需要进一步验证。

忽略其他因素,单一改变温度来研究温度对花粉离体萌发的影响,能够准确的反映温度与花粉萌发之间的高度相关性,为以后研究花粉萌发提供参考资料。

花粉交流区 第4篇

2、在这个世界上秋天深了,得到的尚未得到,该丧失的早已丧失。(四川达州 彭艳)

3、《一见你就笑》的剧情歌好好听!当即我就参加翻唱的活动了!求各位编编眼熟我,让我拿个奖吧!(新浪微博:青春不易老)

4、我必须是你近旁的一株木棉,作为树的形象和你站在一起。——舒婷《致橡树》(江苏盐城 殷翔宇)

5、我要改变,现在让一切都一笑而过。(百度贴吧 九晴穗雨)

6、《花家喜事2》真的要上市了吗?等了好久!等得好焦心!(新浪微博:最爱大将军)

7、最悲哀的不是你不爱我,而是这一路走来,我为了你变成了我曾经最讨厌的人。(湖南湘西州 方笛)

8、我的好菇凉,你要自由自在,勇敢无畏,并且一路狂奔。(百度贴吧 月满轩尼侍)

9、许多良辰美景,要和你一个一个去耽误。(广西贵港市 少年不戴花)

10、岁月不堪数,故人不知处,最是人间留不住。(百度贴吧 沐烟)

11、爱情里面最让人伤心的是错过,先遇见你的那人怎知一定会是良人。(新浪微博:-李LRong )

12、据说《小狮很忙·十年荣光2》晒书有奖品,我也要参加,可是书还没到,激动不已啦!(百度贴吧 煮酒论英雄)

13、这世上任何一种坚强,都是柔软生的茧。(江苏南京 南郡)

14、那一年,我们对着彼此说声再见,就真的再也没有相见。(百度贴吧 缘圆了谁的愿)

15、《瞎眼录》秦千千的姨妈团也是强大啊,上到皇家公主下到武林各派,但是男主究竟是谁啊?乐棠吗?还是人妻月檀?不会是丑男齐鹭吧?求不要!(新浪微博:就是喜欢剧透君)

16、我只是去怀念曾经,却忘记了我们都已不再是曾经的自己。(新浪微博:夏@小沫)

17、每个人都有她的情之所钟,唯有你是我的妙手惊鸿。(百度贴吧 九月清淮)

18、以后妈妈再说我懒,我就要她去看《老婆大人很威武》,看看人家陈可心,懒成了人生大赢家!人生简直开挂好吗?(山东 王鑫)

19、我曾以为,会有大把大把的时间用来挽回和原谅。(百度贴吧 碎碎念勿围观)

20、愿你能把世间所有的好,都送赠我解咒。(广西阳朔 飘柔姐)

21、整理书籍时,发现了我青春的记忆,从小学五年级到初二,感谢《花火》的一路陪伴。(新浪微博:熹冉 )

22、在贴吧超荣幸地跟嫣然姐姐近距离接触,现在坐等《时光走了你还在》!(百度贴吧 喵喵喵)

23、原谅我不再送花,伤口应要结疤。(百度贴吧 深深深入戏)

24、待到风平浪静,阳光迎你回家可好?晚安。(新浪微博:与我无关-Autism孤独症 )

25、《淘婚》好好笑哦,为什么只有成都才办签售啊?不能全国签售吗?我可是要买十本签名本送人的啊,这要怎么破(浙江杭州 青青草)

26、我谁也不依靠,孤独或快乐都是我自己的命。(安徽黄山 韶君)

27、其实,我们喜欢上学,只是不喜欢上课,怀念那些曾经一起闹,一起笑的时光。(广东广州 阿音)

28、《主编驾到》夜祺终于要爆照了,看到微信平台的连载,文也不错。“夜祺垫下”您辛苦啦!(新浪微博:卡卡餮)

29、如果你再走近一些,我就不会再让你走了。(百度贴吧 夕阳落幕了彼岸)

30、我所不期而遇的,你所求之不得的,在交会一刹,成全了最美的邂逅。(百度贴吧 等到烟火清凉)

31、最近新入手了一本萌文,《兄长》非常好看,有虐有萌,很合我的胃口。(新浪微博:颜眸)

32、大概从来都没有过什么安全感 ,所谓的踏实并不是心被填上,而是被彻底挖空。(百度贴吧 5_9_6 )

33、炒鸡喜欢E大啊!EDIQ大人我最喜欢了……听说《三生不幸爱上你》会送他的签名,还有他作的序……我一定要买买买!(新浪微博:疯狂的小斯)

34、很多人不需要再见,因为只是路过而已。(贵州贵阳 木木)

35、我拒绝了所有人的青睐,等你一个不确定的未来。(浙江湖州 云烟)

36、一只会煮鸡蛋的蠢萌小宫女误打误撞误入太傅府,竟然变成了一个大厨!好好笑哦!超爱《妃要煮蛋》这个萌文!(新浪微博: 丝瓜同学)

37、我回来了,一身风雨一身尘。(新疆库尔勒 念念不忘)

38、多少艰辛不可告人,多少光阴都因为等。(湖南衡阳 初阳)

39、我才不会说看完《轻易靠近》这本书以后,一没事我就默默替许南征写情书,谁让他男主当得这么……呃,深沉……(新浪微博:句号)

40、我没有为你伤春悲秋不配有憾事,你没有共我踏过万里不够剧情延续故事。(百度贴吧 奕奕清芳)

41、《至此终年》写尽了柔情无限。假如,生命中能有顾平生这样的一个人,任何一个女生都会没有遗憾啊。童言也正是因为有了顾平生,生命里所有的不幸都变成了“幸”。(新浪微博:小果丸子)

42、你那么平凡的名字,却影响我那么多的情绪。(百度贴吧 不见茶花好多年)

43、一直想在火车站旁边,开一个回收公交卡的摊子,听人们讲一讲他离开前的故事。(上海 Haruko-)

44、兜兜转还是选择你,你一出现,其他人都是陪衬!(百度贴吧 无人伴你左右)

45、如果你不快乐,那就出去走走,世界很大。风景很美,机会很多,人生很短,不要蜷缩在一处阴影中。(四川南充 萌萌哒)

46、别那么累,你并没有那么多观众。(百度贴吧 我只有我自己)

nlc202309041931

47、 “当你十六岁的时候,你有没有遇见过一个男孩,第一眼便觉心疼。”被《你是我最倔强的决定》封面上的这句话击中了,说出了我现在的心声,好想知道最后谢小北是否幸福。(新浪微博:阿呜)

48、我们不可能做到尽善尽美,但至少要让自己开心。(河南南阳 宁宁)

49、很多我们以为一辈子都不会忘掉的事情,就在我们念念不忘的日子里,被我们遗忘了。(百度贴吧 SULIANG苏凉)

50、无论过去发生过什么,你要相信,最好的尚未到来。(新浪微博:咫尺遥)

51、有一些人活在记忆里,永远走不开;有一些人活在身边,却很遥远。(重庆 诗诗小尾巴)

52、戏里一打马就是一千里, 两相思就是整十年。(百度贴吧 痞子的马子)

53、这个世界就这么不完美,你想得到些什么就不得不失去些什么。(新浪微博:Lee)

54、.很多人不快乐,因为总觉得过去太美好,现在太糟糕,将来又太缥缈。(广东汕头 小丸子)

55、最近迷上了一本新文《那些年我们错过的勇气》,很喜欢,既浪漫又带着虐。让我想起了自己年少时暗恋的那个人,如果当初有勇气表白,结局也许不是现在这个样子吧!(百度贴吧 小七)

56、这个世界上最不开心的,是那些懂得太多和想得太多的人。(云南邵通 雨辰)

57、妙笔难书一纸愁肠,苍白的誓言,终究抵不过岁月的遗忘。(百度贴吧 妙音)

58、所谓成长,就是逼着你一个人,踉踉跄跄地受伤,跌跌撞撞地坚强。(新浪微博:未晚)

59、最近在攒钱买《当这星球没有花》,同学知道后,竟然把欠我的钱还给我了,棒棒哒!(湖南长沙 庭树)

60、一切都会过去,一切都会变好,刚过完生日的自己要学着改变!(百度贴吧 小雨依淅)

61、有些人就是看不惯别人的好,而你要做的就是活得更好!(百度贴吧 女人不狠地位不稳)

62、世间问题不过是一懒,二贪,三无知。(百度贴吧 言希家的阿衡)

63、世界那么大,我们固守一方!(湖南浏阳 苏婉)

64、表面镇定其实是我的保护色,越平静内心却越汹涌!(新浪微博:碧空深处的宁静)

65、《你是我最倔强的决定》好久没有看到这么小清新小文艺的文字了。喜欢谢小北的倔强和坚持,喜欢所有暗恋里女孩的小心翼翼,执着,矜持,而又奋不顾身。(新浪微博:六月)

66、你流过多少泪,就有多少笑容在等待你。(百度贴吧 追忆似水年华)

67、世间好物不坚牢,彩云易散琉璃脆。(广西柳州 梦璃)

68、路过的都是缘,擦肩而过的都是客。(新浪微博:缘悭)

69、今天成昨天,昨天成过去,我们在时光隧道中前行。(百度贴吧 大雄和静香)

70、说好永远的,不知怎么就散了。(百度贴吧 哆啦A梦的口袋)

71、最近看了《闪婚,行不行》,男主霸道又温柔,腹黑加深情,真是我的爱啊。(百度贴吧 爱神1997)

72、人生如梦,纵然大醒,何不饮酒三千杯,醉他万万年。(百度贴吧 少年心事当拿云)

73、除了努力,我别无选择。(湖北黄冈 礼杰)

74、有朝一日,左手牵着你,夏夜露宿海边,带上烟花和啤酒。早晨叫醒你,看日出的轮廓,你坚持说那是夕阳。(百度贴吧 春暖花开)

75、越来越喜欢韩十三了,码字界速度最快的奶爸,坐等《微光森林》上市!(新浪微博:拉萨乱雪)

天然食品瑰宝——蜂花粉 第5篇

一、种类

我国粉源植物种类繁多, 但多数在开花时, 蜜蜂所采集的花粉仅够蜜蜂本身繁殖需要, 不能提供为商品性的花粉, 只有少数在开花时, 蜜蜂能采集到大量花粉, 养蜂者才能收取到蜂花粉。最常见的蜂花粉 (蜂花粉食品) 有十几种, 一是油菜花粉, 除西藏外, 全国各地都有生产。油菜花粉是我国最大宗的蜂花粉, 有特殊的青腥味, 香味很浓郁。二是玉米花粉, 主产地为华中、华东、华北、东北和西北等地。花粉团颗粒较小, 微带胶状物质, 味道较谈。三是茶花粉, 主产地为华东和云南等地, 气味清香, 微甜可口。此外还有向日葵花粉、养麦花粉、芝麻花粉、瓜花粉、荷花粉、五倍子花粉和党参花粉等, 其中味道较好的有茶花粉、荷花粉和五倍子花粉等。

由于粉源植物种类或采集季节不同, 各种蜂花粉 (蜂花粉食品) 的颜色也不同, 如紫穗槐、七叶树的呈鲜红色;紫云英、向日葵、金樱子、水稻、野菊、茶树的呈橘红色;油 (油食品) 菜、芸芥、柳树、棉花的呈金黄色;乌桕、盐肤木、蒲公英的呈深黄色;大豆、高梁、板栗、草木樨、黄瓜、桉树、白车轴草、党参、苹果 (苹果食品) 的呈浅黄色;玉米、枇杷、艾、蒿、松的呈米黄色;芝麻、女贞、益母草的呈粉白色;苕子、野桂花的呈白色;李、椴树的呈淡绿色;蓝桉、泡桐的呈灰色;荆条、荞麦的呈灰绿色;蚕豆的呈紫色;虞美人的呈黑色。

二、营养物质及含量

营养分析表明, 花粉含有多种营养物质, 其中包括22种氨基酸、14种维生素和30多种微量元素以及大量的活性蛋白酶、核酸、黄酮类化合物及其它活性物质。花粉富含的蛋白质多以游离氨基酸形式存在, 含量超过牛奶、鸡蛋的5~7倍;维生素C含量高于新鲜水果和蔬菜, 特别是B族维生素的含量极为丰富, 比蜂蜜高百倍。每100克花粉含硫胺素600微克, 核黄素1670微克, 吡哆醇900微克, 泛酸2700微克, 烟酸10000微克。它还含有多种矿物质, 其中钾2 0%~40%、镁1%~20%、钙1%~15%、铁1%~12%、硅2%~10%、磷1%~20%。

三、保健作用

花粉不是药物, 也不能代替药物, 但花粉可增强身体的自然抵抗力, 来抵抗和预防细菌或病毒的侵犯, 使患者尽早复愈。其保健作用有:

1. 增强人体综合免疫功能

花粉多糖能激活巨噬细胞的吞噬活动, 提高人体抗病能力, 具有明显的防癌功效。

2. 防衰老、美容作用

蜂花粉属营养性的美容化妆品, 花粉中的维生素E、超氧化歧化酶 (SOD) 、硒等成分能滋润营养肌肤, 恢复皮肤弹性和光洁。花粉中的肌醇可使白发变黑, 脱发渐生, 保持头发乌黑亮丽。

3. 防治脑心血管疾病

花粉中的黄酮类化合物能有效清除血管壁上脂肪的沉积, 从而起软化血管和降血脂的作用。

4. 减肥

服用蜂花粉可吸收足够营养, 造成饱食感。同时, 花粉中的卵磷脂可燃烧过剩脂肪, 达到减肥目的。

5. 调节肠胃功能

花粉有许多杀菌成分, 能杀灭大肠杆菌等, 并能防治便秘。

6. 保肝护肝

花粉中的黄酮类化合物同样可防止脂肪在肝上的沉积。

7. 辅助治疗其他疾病

花粉对贫血、糖尿病、改善记忆力、更年期障碍等有较好效果, 还可调节神经系统, 促进睡眠。

四、食用方法

蜂花粉是一种天然营养保健品, 不经加工可直接入口食用, 防止某些营养成分在加工过程中造成人工损失。新购进的纯净蜂花粉, 经过消毒灭菌 (家庭可用酒精) 后存入冰箱中贮存, 平时根据需要按量取用。食用时将花粉与蜂蜜以1∶4比例加入水中, 调和成花粉蜜水当饮料饮用, 一般在早晚空腹时服用最佳, 也可入口细细咀嚼。若饭前服用后胃不舒服, 则可改在饭后半小时内服用。也可将蜂花粉磨细成粉末, 用时按量以水冲服。蜂花粉的服用量应根据服用者体质状况及服用目的而异。正常情况下, 成年人以保健或美容为目的, 一般每日可服用5~10克;强体力劳动者以增强体质为目的 (如运动员) 或用作治疗疾病 (如前列腺炎等) , 每日用量增加到20~30克;3~5岁儿童每日用量5~8克;6~10岁儿童每天用量8~12克为宜。

五、注意事项

花粉的营养及保健功能 第6篇

日本岩波洋造博士在《植物的性》一书中指出:“花粉几乎含有自然界全部营养素”。根据《本草纲目》记载, 植物花粉性多平而无毒, 集天地、雨露、阳光、花木之灵气。蜂蜜花粉主要归脾和肾经, 具有重要的强身健体作用, 是古代炼轻工和避谷术的主要食品, 用作食疗在我国也有悠久的历史。

1 花粉中的营养成分

花粉中富含蛋白质、氨基酸、碳水化合物、维生素、脂类等多种营养成分以及酶、辅酶、激素、黄酮、多肽、微量元素等生物活性物质, 因此有“微型营养库”之美誉[2]。

1.1 花粉中的蛋白质含量

花粉中蛋白质含量一般为7%~40%。种类不同, 蛋白质含量不同。即使是同种花粉, 不同人测定或不同采集地点也会有所变化。

1.2 花粉中的必需氨基酸含量

不同花粉中人体必需氨基酸的总氨基酸含量在7.41g/100g~30.44g/100g之间, 约为牛肉和鸡蛋的5~7倍。除人体必需氨基酸外, 研究人员还从花粉中提取出一种具有显著生理活性的氨基酸牛黄酸[3,4]。牛黄酸是一种含硫氨基酸, 人体自身合成牛磺酸的能力有限, 所需的牛磺酸多来自于膳食供应。它是婴儿正常生长发育所必需的, 并能促进大脑发育、增强视力、调节神经传导、促进消化吸收等作用, 对成年人的心血管系统也有独到的效果, 还具有显著的抗氧化、抗疲劳和抗衰老等作用。

1.3 花粉中矿物元素的存在状态及含量

不同的花粉中, 各种元素的含量差别较大, 而且存在状态也随着花粉种类的改变而改变。如含钾较高的花粉有薛荔、茶花花粉等, 含量均在500mg/100g以上;含锌较高的花粉有萝卜、番薯花粉;含铁较高的花粉有萝卜、荷花、龙眼和玉米花粉等。由于花粉中有相当一部分矿物元素是以结合态存在的, 不同花粉中的结合物质以及存在状态也存在着很大的差别。矿物元素己经得到测定的结合方式有脂肪结合态、蛋白质结合态以及可溶性糖结合态。如玉米花粉中, 铁元素和锰元素以蛋白质结合态为主, 锌元素以蛋白质和可溶性糖结合态为主, 铜元素的3种结合态含量相当。

1.4 花粉中的维生素

花粉中含有丰富的维生素, 是一种天然维生素浓缩物。其中, 以B族维生素较为丰富, 包括B1、B2、B3、B5、B6、B12、Bc以及胆碱、叶酸和肌醇, 此外还有VA、Vc、VE、Vp、Vk、VD以及胡箩卜素、类胡萝卜素等。各种维生素在人体内起着不同的生理作用, 如VA的主要功能是维持正常视力, 防止夜盲症和眼干症;VD能促进机体对钙和磷在肠道中的吸收;VE生理功能广泛, 能维持正常生殖机能和防止肌肉萎缩, 临床用于治疗流产和肌肉萎缩等。

1.5 花粉中脂类物质的组成

脂类物质是构成细胞组织的重要成分, 能为人体提供能量, 维持体温, 同时补充人体必需脂肪酸, 促进脂溶性维生素的吸收。脂类基本形式包括油类、脂肪类和类脂3种。花粉中脂类含量占花粉干重的1%~20%, 主要以不饱和脂肪酸和类脂的形式存在, 不饱和脂肪酸占脂类物质的60%~91%。花粉中的不饱和脂肪酸主要包括棕榈酸、油酸、硬脂酸、月桂酸、花生四烯酸及亚油酸等, 其中亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸为人体必需脂肪酸。类脂主要包括磷脂、糖脂、固醇和固醇脂等。

1.6 有机酸

目前已经从花粉中分离鉴定出多种有机酸, 常见的有甲酸、乙酸、丙酸、丙酮酸、乳酸、苹果酸、琥珀酸、柠檬酸和α-酮戊二酸等。此外, 羟基苯甲酸、原儿茶酸、没食子酸、香英兰酸、阿魏酸等有机酸也被分离鉴定出来。研究证明, 花粉中还含有绿原酸和三萜烯酸, 且含量较高。绿原酸不仅有强壮毛细血管和抗炎作用, 而且在合成胆酸、影响肾功能及通过垂体调节甲状腺功能方面有重要作用。花粉的抗炎、促进创伤愈合、强心和抗动脉粥样硬化作用则与三萜烯酸有关。

1.7 其它活性成分

花粉同时还含有膳食纤维[5]、核酸类物质、多种激素、黄酮类化合物和酶类等营养成分。

2 花粉的保健功能

花粉对皮肤、胃肠、肝脏、心脑血管和前列腺具有保健功能, 且能抗疲劳、抗衰老、美容养颜、美发、减肥、抗糖尿病、抗癌, 调节神经系统、增强免疫功能, 有利于睡眠[6]。

2.1 对皮肤的保健功能

花粉, 尤其是松花粉, 已载入《中国药典》。在中医治疗中就有松花粉可燥湿收敛止血的报道, 因此, 它可以治疗湿疹、黄水疮、皮肤糜烂、外伤出血, 此外, 还可治疗尿布性皮炎, 保护婴儿幼嫩皮肤。花粉中的维生素和微量元素能增强老年人本已减弱的皮肤代谢, 所以能治疗老年人的皮肤瘙痒症。对青年人在青春期易发生的青春痘即痤疮, 花粉也有特殊疗效:花粉中的活性物质VA可滋养毛孔;VB有改善毛细血管的功能, 促使血液将营养送到皮肤层, 改善皮肤品质;核黄素能促进饱和脂肪酸的代谢, 使皮肤不再油腻, 减少青春痘的发病率。

2.2 抗疲劳作用[7]

服用花粉1周的小鼠, 其负重游泳的时间显著长于不吃花粉的小鼠, 说明花粉有明显的抗疲劳作用, 能增强动物的耐力。连续服用花粉10d的小鼠完全禁食、禁水后, 可以存活80h;而不服用花粉的小鼠禁食、禁水后, 只能存活60h。由于花粉曾经中国奥林匹克兴奋剂检测中心检测, 不含任何严禁成分, 因此也可作为运动员的保健食品。

2.3 抗衰老作用[8,9]

实验显示, 小鼠在连续服用花粉1个月后, 肝脏中的超氧化物歧化酶活性明显高于对照组, 小鼠的大脑、心脏、肝脏中的脂褐素含量又明显低于对照组。人体在呼吸代谢、消耗氧过程中产生的自由基, 可以加速脂肪和蛋白质的氧化, 这样会产生一种名为脂褐素的物质。这一物质如在表层皮肤则形成老年斑, 同时脂褐素也会沉积于大脑、心脏和肝脏等器官组织中, 加速组织细胞老化, 降低人体免疫力, 从而使人衰老。若超氧化物歧化酶活性增强, 也增强了清除体内自由基的能力, 从而防止细胞衰老, 也防止了脂褐素的产生。花粉中的其它成分如VE、胡萝卜素、硒等, 也有清除自由基和抗氧化能力, 它们能抑制体内氧化反应的速度, 有抗衰老作用。

目前认为人体内超氧化物歧化酶 (SOD) 活性的提高、过氧化脂质 (LPO) 及脂褐质含量的降低, 有助于延缓机体的衰老。蜂花粉由于其所含的营养成分有助于提高SOD的活性, 并降低LPO和脂褐质的含量, 从而有增强体质和延缓衰老的作用。

2.4 对心脑血管的保健作用

目前中国已和发达国家一样, 心脑血管疾病的死亡率占所有疾病死亡率的前两位。由于膳食中脂肪尤其是饱和脂肪酸含量过高, 造成血液中甘油三酯和胆固醇的含量过高。花粉中丰富的VC、VE、胡萝卜素、硒、锌和镁以及少量黄酮都能维护心、脑血管系统, 降低脂肪和胆固醇含量, 其中镁尤为重要, 镁元素可以激活300多个酶系统, 镁还可以作为营养素的载体。黄酮类物质可以明显降低血脂和血胆固醇, 有效调节内分泌, 维持正常血压。各种维生素又可以增加血管壁的弹性, 改善心脏和大脑的微循坏。

花粉中含有芸香甙和黄酮类化合物, 具有软化毛细血管、增强毛细血管强度的功能。因此, 花粉可用于防治动脉粥样硬化, 还可防止脑溢血、高血压、视网膜出血、中风后遗症、静脉曲张等老年病。

2.5 对前列腺的保健功能

蜂花粉中含有大量的脯氨酸、黄酮素、吲哚乙酸等均为前列腺病的克星。用蜂花粉治疗前列腺增生、前列腺肥大、前列腺炎等有显著疗效。在国外, 瑞典、德国和日本的临床实验证明, 花粉能防治前列腺疾病, 有效率达80%。目前我国治疗前列腺疾病的有效药物前列康就是以花粉为原料的。

2.6 调节神经系统, 有利于睡眠[10]

蜂花粉对神经系统具有积极的调节作用, 能促进脑细胞的新陈代谢, 去除代谢产物, 消除疲劳, 增强智力, 具有抗神经衰弱、消除失眠、健脑提神、保护大脑、旺盛活力的功能, 还能辅助治疗精神抑郁综合征。

2.7 增强免疫功能[11]

花粉中含有大量增强免疫功能的有效成分, 如维生素C、E、A、D, 牛磺酸、核酸、微量元素、多糖等。花粉对营养不良所致免疫功能低下的人群具有显著的促进和调整作用, 并能促进免疫器官的发育, 增强免疫细胞的活性, 提高机体的免疫功能, 对移植性肝瘤有抑制作用, 特别是能促进与肝瘤免疫密切相关的T淋巴细胞和巨噬细胞的活性, 以增强机体的抵抗作用。其中, 多糖类是特异性免疫增强剂, 能提高机体的免疫功能, 增强抗病能力。

2.8 美容养颜

日本专利报导, 用蜂花粉雪花膏6个月后, 皮肤小皱纹消退65%, 老年斑消退50%, 雀斑消退73%, 可见花粉具有美容养颜之功效。研究认为, 花粉中的多种成分对皮肤均有营养作用, 维生素A使皮肤柔润, 减少皮脂溢出;VB2消除粉刺与色斑;VB3、VE促进血液循环, 提高皮肤弹性;VC、VE是抗氧化剂, 有助于清除色斑, 保持皮肤洁白细嫩。花粉中的某些成分 (VE、VC、Se、Zn等) 可提高SOD的活性, 有助于降低过氧化脂质及脂褐素的形成, 从而促进皮肤细胞的新陈代谢, 延缓皮肤衰老, 增加皮肤弹性。

2.9 其它作用

花粉还具有抗糖尿病[12]、防止贫血, 抗辐射、营养大脑[13]、保健胃肠道和肝脏、预防便秘[14]、增强体力、抗癌[15]、雌激素样[16]、抗氧化[17]、解酒[18]、美发、减肥等保健功能。

3 讨论

花粉具有较为全面的营养成分, 为机体组织细胞的生长和修复提供了丰富的原料, 同时含有氨基酸、核酸、酶、黄酮类、微量元素等许多生物活性物质, 对机体的各种生理功能、各个器官的生理活动具有调节、增强和保护作用。

目前国内对花粉的化学成分研究数据繁多, 但由于没有固定的研究指标标准, 导致许多数据的可统计和可比较性不强。建立一个较为科学的成分研究标淮, 是研究花粉成分组成的一个比较迫切的问题。关于花粉中共有的成分研究较多, 花粉中特有的成分研究较少。利用花粉中特有的化学成分, 建立花粉的化学成分指纹图谱是花粉研究的一个方向。

综上所述, 花粉作为一种纯天然的营养保健食品, 日益受到人们的重视。花粉不仅营养物质丰富、种类齐全、配比良好, 而且其中的多种功能因子具有良好的保健作用, 是一种理想的食品添加剂。我国幅员辽阔, 花粉资源丰富, 因此, 加快对花粉资源的开发和利用, 对于增加食品的营养、提高人们的健康水平, 有着十分重要的意义。但是, 花粉在食品中应用时, 如何最大限度地保留其全面营养及功能因子的活性, 还有待于进一步研究。

摘要:花粉含有丰富的营养成分和多种生物活性物质, 对肝脏、心脑血管、前列腺等具有保健作用, 且能抗衰老、抗癌、增强免疫功能、美容美发、减肥等。现对近年来花粉的营养成分、保健功能及其应用研究进行综述。

浅析花粉的开发利用前景 第7篇

(一)花粉的营养价值

科学家们发现,每颗小小的花粉都像微型的“营养库”,几乎自然界所有的营养物质都存在于花粉之中,花粉含有200多种人体需要的营养成分,其中20多种氨基酸,3 0多种常量和微量元素,16种维生素,104种活性酶,多种碳水化合物,另外有核酸、生长素、抗生素、脂类等功能因子,此外还有35%至今未被发现的“神秘物质”。花粉中特别是核酸、黄酮类、蛋白酶含量极其丰富,氨基酸有一半以上处于游离状态,很容易被人体吸收,这是目前任何一种天然食物所不能比拟的。因此,花粉被誉为“全能的营养食品”、“最理想天然营养宝库”等。

花粉的营养价值与功效也早已被国际承认,国际上把花粉称为“完全营养品微型营养库”。在国外,特别是日本,花粉被人们视为珍品。据我国花粉开发与利用联络组组长、同济大学教授王开发对50种蜜源花粉营养成分所做的全面测试,发现花粉的每种营养成分分配均衡、全面,营养、药用成分都非常丰富。

(二)花粉的医疗保健功能

花粉除了富含极高的营养价值外,还具有医疗保健功能。1957年,法国医生雪旺在其论文《食疗药用的花粉》中,揭示了花粉的现代药用价值。我国早在《神农本草经》中就将其列为上品药,李时珍也在《本草纲目》中认为“花粉有润心肺、益气、除风、止血”的功能。近几十年来,国内外许多营养学家对花粉有益成分、药理作用和功能进行了大量研究,证实花粉对人体的许多器官有良好的治疗和保健作。科学家通过实验研究表明,蜂花粉对孕鼠营养与胎儿生长发育有直接关系,通过对照实验比较,食用花粉的孕鼠在体重增长、血红蛋白、血清铁、总蛋白、白蛋白等方面都要明显高于普通饲养的孕鼠。

二、花粉的开发现状与前景

我国是世界上开发利用花粉最早的国家,花粉资源极为丰富,蜂花粉产量约占世界总产量的14%,但是花粉资源开发程度较低,大多停留在原材料产业的状态。目前国际上也正大力开发花粉资源,广泛地用于保健食品工业、医药工业、化妆日用品工业。

(一)花粉开发的理论依据

我国自80年代以来对花粉在基础理论和应用研究上已取得显著成绩,对花粉的物质组成、营养与药用成分开展了较为系统的研究,对花粉的保健、疗效、药理亦开展了广泛的探讨,并获得了较丰硕的成果,全国出版了花粉专著20多本,发表论文400多篇,研究内容涉及花粉基础理论和应用研究的各个方面,而且是多学科配合和交叉、多领域参与,有些方面已进入国际研究的前沿,显示了我国花粉学研究的特色和强大实力,有力促进了我国花粉事业的发展。

(二)花粉的开发现状

2000年以前经卫生部正式批准的花粉保健品只有29种,其中提高免疫力功能24种、抗疲劳功能3种、调节血脂功能2种,企业22家。2002年花粉新产品仅增加4种,2004年已申报保健食品批号的花粉保健品也只有7个。如,已获国家食品药品监督管理局批准的宝鸡市慧正生物工程有限公司生产的慧正牌美乐宁花粉片,具有免疫调节、抗疲劳作用。但花粉制品在数量上仅占保健品的1.3%,与相近的如螺旋澡制品等比较数量较少,功能也窄,因此,花粉还有许多功能有待开发出来。

目前,从国内花粉原料的供应上看,药品所占比例甚大,据统计我国花粉制品被卫生部批准为准字号的花粉药品有7种。当前市场上流通的主要有,昆明保健制药厂生产的“前列康片”、浙江康恩贝公司生产的“前列康片”,这都是老年前列腺增生和前列腺炎的首选药物,另有贵阳制药二厂生产的花粉天麻片、安徽生产的“花粉片”,进口的“舍尼通”花粉片等,并且有几种花粉新药正在研制或待批中,这是我国当前花粉市场发展的特点之一,可见发展花粉药品的重要性及潜力。

吉林省农业科学院农副产品加工中心孙洪斌、马毓霞等专家认为,花粉中的氨基酸能提高受辐射动物外周血粒细胞的活力,保护骨髓、脾脏、胸腺等组织结构,增加血液中的S O D含量和活力, 降低脂质过氧化物M P A含量,加之花粉的营养性、功能性、经济性,都为开发防辐射保健食品提供了广阔前景。

(三)花粉及产品销售状况与开发前景

我国已研制开发的花粉食品有花粉精、花粉营养液、花粉胶囊、冲剂、饮品、破璧花粉、玉米花粉乳精、玉米花粉饮料、面丁、茶花粉、苜蓿花粉翡翠面条等。

随着我国经济水平的提高和食品工业的发展, 广大消费者的自我保健意识在不断提高, 对保健食品的需求越来越大, 而二十一世纪保健食品的发展趋势是天然、安全、有效, 花粉正是这种发展趋势下的必然产物, 花粉作为一种营养保健食品具有独特的食用和医疗保健价值, 并被称为21世纪最具前景的保健食品资源, 加之花粉的其他作用也正在开发利用, 因此花粉开发前景广阔。

参考文献

[1]、陆春宇.蜂花粉—自然全营养[J].中国保健营养, 2004, (03) .

[2]、谢有梅, 万宝麟等.蜂花粉对孕鼠营养状况和胚胎发育的影响[J].华西医科大学学报, 1994, (04) .

番茄花粉生活力测试与分析 第8篇

1 材料与方法

1.1 试验材料

选取编号为4、7、8、9、10、13、15、16、24和71的番茄品种为试验材料, 于2014年5-9月期间在山西农业大学园艺站塑料温室大棚中进行试验。

1.2 仪器设备

镊子, 铅笔, 烧杯, 容量瓶, 载玻片, 盖玻片, 培养皿, 显微镜, 恒温培养箱, 全自动显微照相仪, 欧宝等。

1.3 试验方法

本试验花粉生活力测试方法采用人工授粉统计坐果率的方法 (以坐果率表示花粉的生活力法) 和TTC染色法。其中TTC染色法具体步骤如下:

采取番茄花粉少许置于载玻片上, 加1~2滴1%的TTC溶液, 盖上盖玻片, 置于35℃的恒温箱中暗培养15~20min, 然后置于显微镜下观察。凡是被染成红色的表示花粉活力强, 没有染色的为不具备活力的花粉或不育的花粉。统计花粉的染色率, 以染色率表示花粉的生活力[6]。

1.3.1 不同品种番茄花粉生活力的测定。

选择晴天无风的上午, 采集花药, 取花粉, 选择即将开放的顶端呈淡绿微黄的露冠花去雄, 授粉, 挂上标签, 隔天再重复授粉一次, 一个星期后统计坐果率。

具体操作是:上午8:00~9:00分别采摘10个父本的10朵盛开花, 摘去花瓣, 于通风阴凉处晾晒15min, 取花粉。在杂交工作开始时要摘除田间所有母本未授粉花朵及果实, 授粉结束后需要多次检查植株上是否出现新的花序, 一旦发现立即摘除[9]。将镊子用酒精消毒后晾干, 分别选择与父本相同品种的15朵露冠花, 去雄, 授粉, 挂上标签, 第2天再重复授粉一次, 一个星期后统计坐果率。这里我们把十个亲本分别表示为处理A4, A7, A8, A9, A10, A13, A15, A16, A24, A71。用各自的坐果率表示个亲本的花粉生活力。

1.3.2 不同温湿度条件下番茄花粉生活力的测定。

根据天气预报选择天气差异较大的十天, 于上午采集父本4的花药, 取花粉, 选择5朵露冠花去雄, 授粉, 挂上标签, 并记录当时的温度以及湿度, 第2天重复授粉, 一个星期后统计坐果率 (具体操作方法同上) 。这里将十天的温湿度条件分别表示为处理B1、B2、B3、B4、B5、B6、B7、B8、B9、B10。用坐果率表示不同的温湿度条件下的番茄花粉生活力。

1.3.3 不同干燥方式下的番茄花粉生活力的测定。

2014年8月21日上午采摘当天盛开的花, 然后分别采用室内自然阴干法和阳光暴晒法进行花粉的生活力测定, 我们把前者表示为处理C1, 后者表示为处理C2, 两个处理各4h后采用TTC染色法测定花粉的生活力。

具体操作方法:上午8:30从大棚里采20朵当天的盛开花, 平均分成两份。一份进行室内阴干干燥, 在室内将花的花瓣用镊子去掉把剩下的花药摊放在光滑干净的滤纸上, 置于通风干燥处晾干, 室温在25℃左右;另一份则放在室外阳光下晒干。两份都经过4h清理出与花药分离的花粉用TTC染色法测定这两种干燥方式下花粉的生活力。分别选取3个视野统计番茄花粉的染色情况, 用染色率表示番茄花粉的生活力。

1.3.4 不同干燥时间的番茄花粉生活力的测定。

2014年9月6日采摘当天的盛开花, 放在室内自然阴干, 分别干燥0 h、2 h、4 h、8 h, 分别表示为处理D0、D2、D4、D8, 每个时间随机取15朵花进行3次重复试验, 每次重复5朵花, 采用TTC染色法测定花粉的生活力。

具体操作步骤:早上8∶30~9∶00去大田采摘当日的盛开花, 带回室内阴干, 随机取出15朵花以每5朵为一次重复。拿出事先准备好的镊子对番茄的花进行花药的剥离, 然后用TTC染色法测定花粉的生活力, 每个时间点重复此过程。

1.3.5 不同花瓣开张角度下的番茄花粉生活力的测定。

2014年9月9日上午分别采摘不同花瓣开张角度的番茄花, 各15朵, 分别进行3次重复, 采用TTC染色法来测定花粉的生活力。这里我们取花瓣开张角度为60°、90°、180°分别把它们表示为处理E60、E90、E180 (见下表1) [3]。

1.3.6 不同采花时间段番茄花粉生活力的测定。

选取晴朗的天气, 在这一天内分别分成几个时间段采摘当天盛开的花, 剥离花药, 进行花粉的生活力测定。

具体操作步骤:9月8日选取时间段8∶30~9∶00, 10∶30~11∶00, 12∶30~13∶00, 14∶30~15∶00, 分别表示为处理F8、F10、F12、F14。在这几个时间段内去大棚采摘花, 带回试验室剥离花粉, 用TTC染色法进行染色, 测定花粉的生活力。

2 结果与分析

2.1 不同番茄品种对花粉生活力的影响

品种不同番茄的花粉生活力不同[12]。试验对10个品种的番茄花粉生活力进行测定, 结果列于表2。

由表2可知, 品种A4的花粉生活力最强为0.490, 极显著高于品种A10和A13。品种A4、A9、A16、A24的花粉生活力没有显著性差异, 但它们与品种A7、A8、A15、A71的花粉生活力有显著性差异。品种A4、A7、A8、A9、A15、A16、A24、A71的花粉生活力均极显著高于品种A10和A13。说明不同品种之间的花粉生活力差异性很大, 品种是影响番茄花粉生活力的重要因素[12]。

2.2 温湿度条件对番茄花粉生活力的影响

温、湿度, 特别是温度对花粉生活力和杂交结实率有影响很大。空气相对湿度过高过低会影响授粉。为了确定适宜的温度和湿度条件, 保证番茄的花粉生活力, 试验对于不同温湿度条件下的花粉生活力进行了研究, 结果如图1。

注:测试时间为每日的上午8点。

根据折线图可知, 在20-30℃的温度范围内, 随着湿度的增大, 花粉生活力增高。在20-30℃的范围内, 降低温度, 利于花粉提高番茄花粉的生活力。在相对湿度为60-90%的范围内, 增大湿度利于番茄花粉生活力的提高。其中, 当温度为19.48℃湿度为89.39%时番茄花粉生活力最高。因此, 在番茄制种实践过程中, 授粉时的温度不应该超过30℃, 空气相对湿度应大于60%。

2.3 干燥方式对番茄花粉生活力的影响

为了便于采集花粉进行制种我们要择优选择花粉的干燥方式。这里我们对两种干燥方式室内自然干燥法与阳光暴晒法进行比较。结果如表3。

由表可知, 处理C1的花粉生活力为0.623, 处理C2的花粉生活力为0.413, 处理C1的番茄花粉生活力极显著高于处理C2的花粉生活力。因此, 番茄杂交制种实践中花粉的干燥方法以室内自然干燥法为宜, 简单实用, 便于大面积制种应用, 最好不要采用阳光暴晒干燥法。

2.4 干燥时间对番茄花粉生活力的影响

干燥时间的长短对花粉的生活力也有一定的影响, 随着干燥时间的延长, 花粉的生活力呈明显呈下降趋势。本试验对于不同干燥时间的番茄花粉生活力的研究结果如表4。

从表4可以看出新鲜的番茄花粉的花粉生活力最高, D0、D2、D4和D8的花粉生活力均有显著性的差异。D0的花粉生活力为0.710, 极显著高于D2、D4和D8, D2的花粉生活力为0.656极显著高于D4和D8。这说明在8 h以内, 应尽可能地缩短番茄的花粉干燥时间。

2.5 花瓣开张角度因素对番茄花粉生活力的影响

番茄花粉的成熟度及其生活力受花龄的影响, 随着花蕾花瓣逐渐展开, 花粉逐渐成熟, 活力增强, 并具有授粉能力[11]。为了确定花粉生活力最强时的花瓣开张角度, 实验对3种花瓣开张角度时的花粉生活力进行了比较, 结果如表5。

表5说明不同的花瓣开张角度下番茄花粉的生活力差异性显著。E180的花粉生活力为0.727, E90的花粉生活力为0.62, E60的花粉生活力为0.4, E180的花粉生活力显著高于E60, E180跟E90的花粉生活力无显著性差异, E60跟E90的花粉生活力差异也不显著。所以, 在番茄制种试验过程中应尽量选择花瓣开张角度为180°的盛开花采集花粉[13]。

2.6 采花时间段对番茄花粉生活力的影响

为了采集花粉生活力高的番茄花我们对于采花时段也要注意, 不同采花时间段的番茄花粉生活力不同, 结果如表6。



由表6可知, 不同采花时间段的花粉生活力差异性极显著, 随着时间的推移, 番茄花粉生活力呈下降趋势。F8的花粉生活力为0.698, F10的花粉生活力为0.554, F12的花粉生活力为0.330, F14的花粉生活力为0.148, F8, F10, F12, F14相互间的花粉生活力差异性均极显著。因此, 在番茄制种实践中应选择8:30~9:00这个时间段采集花粉, 在此时间段采集的花粉生活力高。

3 讨论与结论

3.1 讨论

3.1.1 番茄花瓣开张角度。

在测定不同花瓣角度花粉的生活力的结果中花瓣角度为180°的花粉生活力极显著高于其它两个处理这与王艳芳等[9]得出的最后结论相一致, 但是花瓣开张角度为90°的花粉本试验测得的花粉生活力为62%明显高于王艳芳等[10]测出的结果34.9%, 应该与品种不同有关系, 这种可能有待进一步研究品种间花粉生活力的差异。

3.1.2 不同的染色法测定。

在染色法的测定上本试验使用的是TTC染色法测定, 简单、迅速, 能够在一定程度上直接反映花粉的代谢情况或营养含量, 适合测定番茄花粉的生活力, 与闫立英等[8]用红墨水染色法测定得出的结论在干燥时间上所得的结论有差异。本试验得出的结论为干燥时间以8h内尽量缩短干燥时间为宜, 与闫立英等[3]得出的以8h内为宜有差别, 测定的方法不一样, 对于番茄来说比起红墨水染色法TTC染色法比较适合测定番茄花粉的生活力。

3.2 结论

1.番茄制种中花药的最佳干燥方式是室内自然阴干。

2.在干燥时间为8h以内时, 应尽可能地缩短番茄的花粉干燥时间, 能筛出花粉即可。

3.一天之中采集花粉在早上8∶30~9∶00为宜, 这个段时间的花粉生活力高, 在65%~70%之间。

4.采花的适宜花瓣开张角度是当花瓣展开180°时的生活力为72.7%, 也就是盛花期, 这时的花粉最适宜授粉。

5.不同品种的番茄花粉生活力差异显著, 在番茄制种实践过程中应慎重选择番茄品种。给番茄授粉时的温度不应该超过30℃, 空气相对湿度应大于60%。

参考文献

[1]王海延, 王鸣, 李长年.番茄育种[M].上海科学技术出版社, 1988, 14-27.

[2]罗素兰, 符列, 符传秀, 等.6种番茄种质花粉活力的鉴定[J].海南大学学报自然科学版, 2002, (9) :243-246.

[3]闫立英, 冯志红, 张慎好, 等.番茄花粉生活力研究[J].种子, 2005, (6) :23-26.

[4]林志成.两个番茄品种花粉萌发的研究[J].中国蔬菜, 1983, (3) :32-34.

[5]陈竹君.番茄远缘杂交F及其双亲花粉萌发力的研究[J].中国蔬菜, 1988, (1) :12-13.

[6]王钦丽, 熊涛.花粉生活力的测定[J].植物学通报, 2005, (02) :28-29.

[7]王艳芳, 温祥珍.高温条件下空气湿度对番茄花粉生活力的影响[N].华北农学报, 2006, (21) :74-77.

[8]王钦丽, 熊涛.花粉生活力的测定[N].植物学通报, 2005, (02) :28-29.

[9]李正德.茄果类蔬菜杂交制种技术[M].北京:农业出版社, 1998.41-45.

[10]陈新伟.番茄花粉活力及坐果率对环境温度变化的反应[N].园艺学报, 1996, 23 (4) :392-394

花粉交流区 第9篇

世上道路何其多,可我无论怎么走,都走不成与你殊途同归。(百度贴吧 无情不娇)

《花火》的活动太难为住宿的孩子了,所谓学校与《花火》不可兼得!(天津 于欣)

高三了,一直想在距离文字很近的地方工作,我会拼命,熬夜熬到两三点也在所不惜,在魅丽等我,小狮!(新浪微博:左耳里的青春)

时光许下地老不散,我却在秋天里祈盼天荒寥黯。(百度贴吧 那年的我在北纬)

一直在等《流年静好,你未老》上市,终于被我等到了,很感慨。向来缘浅,终是路人!遇见了就要好好珍惜,失去了就要学会删除记忆,这辈子遇见的人别指望下辈子一定能遇到……(湖南长沙 川木之息)

#时光走了你还在#苗以瑄是幸福的,因为她有一直对她不离不弃的刘靖初;她是幸运的,因为遇见了曾温柔待她的姜城远。不管是爱是恨,最终故事都会结尾……(新浪微博:朴葛格家的洛宝贝)

将你锁在梦土上,经书日月,粉黛春秋。(百度贴吧 背后的伪善)

我希望,下一个十年,再下一个十年,那些陪伴我们走过青春的人,我们永远都不会忘记。(新浪微博:乐橙-南澄)

上帝之所以创造指纹,是因为,他想让人们知道,其实每个人都有伤痕。 眼泪的存在,是为了证明悲伤不是一场幻觉。(百度贴吧 就像蓝鲸忘了h)

快递叔叔给我打电话的时候,我正在外面逛街,知道是《当这星球没有花》到了,立马就抛下好友去取快递了,好嗨森!(湖北黄冈 橙子)

听朋友说长沙的天气真是让她醉了,早上大衣,中午衬衫,晚上棉袄。 超慢的物流也让我醉了,书终于到了……小狮要多多注意身体,晚安啦!(新浪微博:叶吉w)

无从谈起,无非太多想说却闭口不提。(百度贴吧 岁月偏轻情偏重)

我爱你,从来不是单恋,只是,你可能永远也不会知道!(百度贴吧 思远我宣你)

同桌问我能不能对她好点,我说不能,任性!(新浪微博:蘑菇泡泡-)

《寻味与初见》天啊,要我这种吃货看了怎么活!(山西侯马 安宁)

他呀,在一个我没去过的地方,喝着我从没喝过的酒,过着我从未有过的生活,我确实挂念他。(百度贴吧 木槿花长裙)

谢谢眸眸 ,她教会了我,失去比从不拥有要幸福。朋友们,看开一点吧。每天多笑一点,会幸福很多,也会拥有很多,至少,比曾经的你拥有的更多。(新浪微博:沿星星嘀嗒成天空)

道路阻且长,世世念君好。(百度贴吧 空梦42)

爱上一个人,爱上一本书,爱上了十里菱歌,爱上了她的《喜劫良缘》。(广西柳州 轻水)

#《主编驾到》,夜祺到我碗里来#这个签名不是很那个什么,so,应该不是夜祺手抽筋时签的吧……还有还有我同桌竟然犯花痴了,小狮大大的俊美侧颜可都没有这功力,so,对比一下。(新浪微博:anvsMsxsk)

我并不是无坚不催,只是你是软肋,不会让你看到我的难过。(百度贴吧 芊陌无双)

听说《你是我最倔强的决定》上市啦?最喜欢这种两小无猜的感情了。“我站在你的左侧,却像隔着银河。”(广东广州 陈小宁 )

想了好久的书今天终于到了,心情真是无比高兴!可惜的是没有签名,好希望小狮和大熊欧巴给我签一个!(新浪微博:鹿北宸i)

喜欢你,是我今生最幸运的事情之一。而其他的,你都不曾参与。(百度贴吧 兮曈霂霂)

待我四年之后,学会美化出好看的图片,写出优美的语句,开始绾上飘逸的长发,学会穿长裙,然后一定赴长沙。(新浪微博:Seven_pansy )

内心的孤独是可以征服的,不得不看这本《落笔浮生》。 (浙江杭州 黄色小方块)

昙花虽美,终究只是一现。(百度贴吧 同在明月下)

去文具店两三次,终于买到《花火》了。 每个月最期待《花火》了,同桌追《桃之夭夭》,我追《花火》。(新浪微博:三只微笑才最重要)

大熊大熊我爱你,就像老鼠爱大米。(河南伊川 刘亚倩)

应该感谢那些在你生命里突然又适时出现的人,就像下午三点在闷热街边等车的每个乘客都应该感谢风。(百度贴吧 璃鱼ly)

因为有《花火》的陪伴,我度过了愉快的生活,愿《花火》红红火火。(福建漳州 柳佳)

喜欢看《兄长》,买回家后,来来回回看了十遍,还参加了微博晒书的活动,听说在写《兄长2》,表示很期待哦。(新浪微博:云歌舞)

我曾梦见一场旅行,最美的不是朝阳,不是落日,不是海风呼啸,不是巴山夜雨,而是你。(百度贴吧 夏阿默961215)

凭直觉编辑部都是男神女神聚集的地方吧,嫉妒啊!(北京 杨雨萱)

整整箱子,翻翻柜子,终于看到了《花火》,原来还以为丢了呢。(新浪微博:珂珂LJK)

如果我再也遇不到你, 那么,早安,午安,晚安。(百度贴吧 期待DS)

哈哈哈,《主编驾到》终于到了!夜祺帅得让我好想捏一把!信写得很感动!殿下使劲抽我吧!来吧,你个磨人的小妖精!(新浪微博:请叫我夜祺妃)

这么多年才知道原来对我不离不弃、一直陪着我的人竟然是他,可终究还是错过。(四川自贡 孔茉涵)

时间太短,我太笨!(百度贴吧 龙书齐)

《淘婚》的男主好喜欢哦,以前就还蛮喜欢部队生活的,觉得他们是真汉子,女主的个性跟我很像,所以让我看完后浮想连连。好有爱啊!(新浪微博:木木酱)

并非你爱的人也会爱你,你要学会释然。(广西南宁 木凉)

待我长发齐腰,定要走进花火。(新浪微博:他是大熊我是小熊)

最近喜欢上了一本书叫作《那些年我们错过的勇气》,深深地被里面的男二号吸引,暗恋了女主那么多年,为她倾尽一切,最终却只是我情你不愿……(百度贴吧:念念 )

nlc202309031237

这辈子最幸运的事情就是遇见了你们,虽然如今我们分隔两地,但我坚信我们能再见。(广东梅州 橙子)

要开心开心再开心!《花火》也要一直好下去!(新浪微博:Keroro夏美)

没有谁的幸福是非谁不可。(百度贴吧 林跃中韩)

愿时光与我同眠。(广西南宁 程乐洋)

努力是奇迹的另一个名字。( 新浪微博:梓初_非语)

人生就是这样,迷茫中看到了方向,却又开始迷茫了。(百度贴吧 沐瑾993)

喜欢上你是我这一生最大的幸运。(湖南郴州 朱雨昕)

希望有一个人能逗我开心,又不嫌弃我这个不会讲话的人,跟我交朋友。(新浪微博:信你是狗i)

时光不会倒着走, 我也不会再回头。(百度贴吧 吃过糖就不苦啦)

天下花粉一家亲。(新浪微博:啦啦啦啦娄京盈)

神会安排好一切,你要等。(广东雷州 宋晓利)

容易失去的不是羁绊,而是紧系着这段羁绊的时光。(百度贴吧 情深似海似姨妈)

希望男神权志龙身体健康。(新浪微博:龙哥萌哒哒)

“青春正能量系列”真的好好看哦,我已经买了一本了,剩下的我会补上的。(陕西安康 赖昕琳)

站在马路中间,看到两旁白色或是浅黄的线条延续,总会想世界上的城市终是连通的,一盏路灯接连下一盏 ,一个车站接连下一个,没再见到你,或许是道路太拥挤,不怪你。(百度贴吧 阿庙i)

愿同远方的你,执手高考,走向成功。让我知道我不是一个人在奋斗。(新浪微博:雪若年华xu)

To:wjy 生日快乐,希望你喜欢我织了两个月的大红色围巾!十四岁生日快乐!(湖北安陆 闻雨霏)

他说他找不到能爱的人,所以宁愿居无定所地过一生。(百度贴吧 纯白小衬衫777)

水母问它的好朋友小丑鱼:“你为什么不开心啊?”小丑鱼说:“我想像小鸟一样飞上天。”水母想了想,立即绕着它转起来:“快看,我是云,我是一朵云。” (新浪微博:班漆园 )

如今我正在人生的第一个转折点,只想好好学习考上高中。(广西钦州 农积霞)

最心塞的不过就是他和别人牵手而过,你却只能一笑而过。(百度贴吧 我忌讳从前)

如果生命中曾有那个人出现,其他人就会变成将就,我不愿将就。(新浪微博:李晏瓷)

《跨越时光的告别》图文大赞,好喜欢早安夏天的文笔啊,支持你!(福建福州 倾听书语)

今日所有的痛苦我独自吞下,愿日后你一生长安。(百度贴吧 爱风伶爱仙钰)

海阔天空,做最好的自己。(新浪微博:Jane的Jane)

希望能陪《花火》走过下一个十年,我愿化作那清晨叫醒你的阳光。(湖北潜江 彭安琪)

怨只怨,人在风中聚散不由我。(百度贴吧 硪的所有)

买到了《微光森林》,好想求十三妹的签名啊!(四川自贡 涵涵)

有些人突然闯入你的生命,你会厌烦他的不请自来,甚至有时恨不得把他的头拧下来。但当他真正消失后,你又会若有所失,感到怅然。(百度贴吧 _特有傻瓜范er)

你人缘太多,多我一个不多,少我一个不少。(百度贴吧 闭眼不闻世事)

彼年豆蔻,谁许谁地老天荒。(百度贴吧 YOUR宝贝3334)

核桃花粉化学成分的初步研究 第10篇

植物生物活性物质在维持人体健康、预防慢性病方面具有举足轻重的作用[3]。花粉作为全天然、全营养、全功能的保健食品,已引起研究者们的兴趣,生物活性物质研究也是其热点之一。目前对于花粉功能性成分研究多集中于黄酮、多糖、多肽、多酚类[4~6]。针对的花粉种类多为油菜花粉、松花粉、玉米花粉、银杏花粉。

目前国内外对核桃化学成分的研究暂处于初始研究阶段,为了更好地了解该花粉,实验首次对核桃花粉的化学成分进行了预试验,以明确其中可能含有的化学成分,为以后的研究和开发利用提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 植物原料

核桃花粉,2014年采自河南郑州荥阳。

1.1.2 主要试剂

95%乙醇、95%石油醚、甲醇(均为分析纯)、a-萘酚,氯化钠、明胶、三氯化铁、碘化汞钾、碘化铋钾、硅钨酸、盐酸、三氯化铝、醋酸镁、镁粉、盐酸羟胺、醋酸铅、浓硫酸等。

1.1.3 主要仪器

K-1001N旋转蒸发器,郑州长城科工贸有限公司;FAll04型电子天平,上海天平仪器厂制造;XMTB型数显水浴锅,北京市长风仪器公司;KQ-300TDE数控超声波清洗器,昆山市超声仪器有限公司生产。

1.2 试验方法[7]

1.2.1 提取液制备

水提取液:取待试花粉2 g,加入20 m L水,室温浸泡过夜,在超声波条件下,在超声波条件下粗提2次,每次10 m L,振荡0.5 h获取冷水提取液。于50~60℃水浴中温浸2 h,过滤,即得热水提取液。

乙醇提取液:取花粉5 g,加95%乙醇约50 m L,水浴上回流15 min,过滤,滤液浓缩至25 m L。

酸性乙醇提取液:将12 m L乙醇提取液浓缩至糖浆状物,用浓度2%的盐酸10 m L溶解成酸液。

甲醇提取液:乙醚处理过的材料,用甲醇20 m L水浴回流10 min,趁热过滤。

乙醚提取液:取花粉5 g,加乙醚50 m L,水浴回流20 min,过滤,滤液浓缩至5 m L。

1.2.2 化学成分预试实验

冷水提取液在试管中做蛋白质、氨基酸、有机酸、皂甙;热水提取液做糖、多糖、鞣质、皂苷等试验。乙醇提取液、酸性乙醇提取液、甲醇提取液在试管中进行香豆素、内酯、黄酮、苷、萜类、强心苷、蒽醌、酚等的试验。石油醚提取液在滤纸上作挥发油和油脂试验。

1.2.3 专项试验

对生物碱、黄酮、香豆素专项试验。

2 结果与分析

2.1 预试结果

系统进行预试结果见表1。由表1可以看出,核桃花粉实验结果:糖、多糖及苷类、蛋白质、氨基酸、酚性成分、生物碱、甾体、黄酮类化合物、强心苷、内酯、香豆素及苷类、挥发油为阳性;皂甙、有机酸、鞣质、蒽醌及苷类的实验结果为阴性。

2.2 生物碱、黄酮、香豆素试验

由于生物碱、萜类、内酯、香豆素及苷类在花粉中的成分报道不常见,为了去除伪阳性,提高检测的灵敏度,做了专项试验。黄酮是花粉中重要成分,做了对黄酮专项试验,为后续工作提供铺垫。专项试验结果见表2。结果表明,生物碱、香豆素、黄酮的所有试验项目均呈阳性反应。

注:+表示阳性。-表示阴性。

3 结论

花粉培养范文

花粉培养范文(精选10篇)花粉培养 第1篇关键词:西府海棠,花粉活力,离体萌发,最佳培养基花粉是种子植物特有的结构, 相当于一个小孢子和...
点击下载文档文档内容为doc格式

声明:除非特别标注,否则均为本站原创文章,转载时请以链接形式注明文章出处。如若本站内容侵犯了原著者的合法权益,可联系本站删除。

确认删除?
回到顶部