安琪酵母范文

安琪酵母范文（精选11篇）

安琪酵母 第1篇

关键词：安琪酵母,宜昌,区域环境

0 引言

在市场竞争日益激烈的今天,名牌的价值越来越凸显。纵观中国名牌企业的分布可知,名牌不一定出现在大城市。安徽省东南部的芜湖市,诞生了“傻子瓜子”、“奇瑞”等一些享誉海内外的知名品牌,而位于山东半岛南端的青岛市培育了“海尔”、“海信”、“青岛啤酒“、“喜盈门”等众多中国名牌,成为“中国名牌”拥有总量最多的城市之一。名牌是在一定的社会环境、经济环境、生态环境中产生并成长起来的,区域环境对培育名牌起到至关重要的作用。近几年,宜昌市涌现了一批走在全国同行业前列的知名企业,同时也成长起来一批创业精神和实干精神很强的优秀企业家,创造了值得研究的“宜昌现象”。一个什么样的区域环境更有利于品牌的打造呢?在宜昌这个生物技术并不发达的城市,竟然诞生了中国乃至亚洲目前生产规模最大、品种最多、市场占有率最高、新产品研究与推广能力最强的现代酵母研究生产高新技术企业-----安琪酵母股份有限公司(下文均简称“安琪公司”)。本文试图以安琪公司为分析对象,探析区域环境对品牌成长的价值和意义。

1 安琪酵母在宜昌的成长历程

安琪酵母股份有限公司是从事酵母及酵母衍生物产品经营的国家重点高新技术企业、上市公司。公司主导产品包括面包酵母、酿酒酵母、酵母抽提物、营养健康产品、生物饲料添加剂等。公司酵母生产规模、市场占有率均居于国内及亚洲之首,是世界五大酵母制造商之一,产品已进入全球60多个国家和地区。

建设之初,安琪虽然只有30多名员工、900多万元贷款,但他们把自己定位在一个高的起点之上。众所周知,中国传统的发面方法一是使用“老面”,二是使用化学发酵粉。两种发面方法都不卫生,对人体健康极为不利。安琪人决定从此处着手,来一场“革命”。经过三年的努力,他们采用欧洲的生物工程设备和技术,并结合国情,自行设计出年产2000吨的高活性干酵母生产线。在随后的几年里,安琪的产品销量迅速增长。

中国作为一个酿酒大国,沿袭几千年的传统发酵方法,缺陷显而易见:出酒率低,发酵周期长,易酸败,同时,由于粮食等原材料大幅度涨价,导致大量白酒企业效益低下。如果能生产一种高科技产品改造传统的发酵环节,起到节粮降耗、提高出酒率的作用,这种产品肯定畅销。他们立即组织科研攻关,并很快获得成功。他们自主开发的耐高温活性酒酵母,可以使发酵周期缩短近三分之一,提高出酒率6%到16%,几年间,包括一些知名品牌在内的大量白酒生产企业纷纷采用这一高新技术。

当西式快餐进入国内,用于西式点心制作的耐高糖酵母也相伴进入中国市场。安琪公司迅速跟进,经过几年的潜心研究,终于成功开发出了拥有自主知识产权的耐高糖酵母,填补了民族酵母工业在这一领域的空白,在烘焙业引起不小的轰动。

之后,他们又开发出生香酵母,葡萄酒、黄酒、啤酒活性干酵母等系列酒酵母产品,奠定了安琪在酿酒行业的权威地位;他们利用国家攻关项目开发的酵母抽提物,紧跟国际天然调味品的发展趋势;如今,他们又瞄上了传统燃料的替代品燃料乙醇的开发,在已经开始的新一轮能源“革命”中,安琪人已经走在了前列。

2 宜昌的市场环境分析

在中部崛起和荆楚新一轮发展热潮中,宜昌无疑是一个佼佼者和领跑者。

2.1 市场化程度高

在培育市场主体上,宜昌市注重做到了做强做大骨干企业与培育中小企业、壮大优势产业与淘汰落后产能、资产重组与联姻嫁接三个结合。重点发展宜昌高新技术开发区及一批工业园区,提高产业集中度。宜化、兴发、安琪、人福、长机科技等企业在开发区的环境中快速成长,一跃成为全国乃至世界的知名企业、行业的排头兵。

近些年来,宜昌市大力推进国有企业改革、行政管理体制改革,积极扩大对内对外开放,加快经济结构调整,为企业及企业家的成长创造了良好的体制环境。宜昌市的国企改革始终坚持以加快发展为主题,以产权制度改革为核心,通过“政府转变职能、企业转换机制、职工转变身份”,使一批企业真正成为市场竞争的主体,显示出旺盛活力和勃勃生机。通过改革改制,一批脱胎于原国有企业的本土企业,获得了快速发展。对完成改制的企业,宜昌市不是放任不管,而是采取行之有效的办法,支持其盘活存量资产,继续做大做强。通过国有企业改革,不仅使企业真正成为市场竞争主体,同时也促进了政府职能由管理型向服务型转变。

2.2 特殊的地理环境

任何企业的生产经营活动都与当地的自然地理环境息息相关。宜昌(古称夷陵)因“水至此而夷,山至此而陵”而得名。位于湖北省西南部,地处长江上游与中游的结合部、鄂西秦巴山脉和武陵山脉向江汉平原的过渡地带,地势西高东底,地貌复杂多样,境内有山区、平原、丘陵,大致构成“七山一水二分田”的格局,为鄂、渝、湘三省市交汇地。宜昌“上控巴蜀,下引荆襄”,素以“三峡门户、川鄂咽喉”著称。自古以来,宜昌就是鄂西、湘西北和川(渝)东一带重要的物资集散地和交通要冲。

宜昌境内两条东西向的汉宜高速公路、宜(昌)万(州)铁路、焦柳铁路、川江黄金水道和三峡机场所构成的现代水陆空立体交通网络在宜昌城区和周边区域形成连接点,使宜昌成为我国重要的交通枢纽城市之一,宜昌承东接西的作用将日益显现。大交通带来大物流,宜昌的物流中心功能将日益显现。交通状况的根本改观,加之宜昌居中不偏的地理位置,大公司、大集团的总部或区域性销售中心将更加看好宜昌,现代服务业将快速发展。宜昌城市的区位优势越来越明显,区域中心的地位将进一步提升。

2.3 和谐的人文环境

宜昌既是悠久而古老的历史名城,又是文明而灿烂的现代新城。几千年的文化沉淀,使宜昌拥有优秀的人文传统。近些年来宜昌市委市政府因势利导,充分发挥宜昌人兼容并蓄、和谐宽容、开明开放、追求卓越的人文优势,积极创造有利于和谐发展、有利于增强城市魅力的人文环境,为企业发展和企业家成长提供了不可或缺的土壤。

宜昌和谐的人文环境催生了一批富有创造精神的本土企业家,培养了企业家干大事创大业的胆略。宜昌市政府把企业家作为最宝贵的财富和最稀缺的资源,实现了企业经营管理人才的最佳配置和有效利用。对企业家的问题,坚持看本质,看主流,只要没有原则性问题,一般不进行调整,让市场评价企业家优劣、决定其去留。

原来只是一个小型科研单位的安琪公司,早些年鲜为人知。公司董事长俞学锋用了整整20年,凝聚了他和一批又一批创业者的心血,把企业推上了发展的巅峰。作为安琪的创业者,他一直是把个人的前途与企业的命运紧密联系在一起的。1986年安琪初创时俞学锋从市委机关最年轻的副县级干部来到安琪担任领导职务,受命于企业的危难之时,从副职到主职,一干就是21年,其间有几次回机关和调职的机会,他都主动放弃了,立志要打造国际化、专业化的酵母大公司。正是靠着对事业坚定的信念和顽强的决心以及面对困境百折不回的精神,他为企业的发展壮大呕心沥血,不遗余力,在做大做强企业中实现自我价值。

2.4 开明的政策环境

宜昌市政府以开明开放的姿态,支持企业“走出去”。近些年来,宜昌市的一些企业因资源、市场的问题,需要走出去发展。企业走出去发展,在一定程度上意味着本地资本和税收的外流。宜昌领导人没有囿于眼前的利益,而是以开明开放的姿态,支持企业走出去发展,既使企业扩大了产能,利用了资源,开拓了市场,又推动了宜昌企业文化向外传播,同时增强宜昌城市的影响力。安琪公司逐步将生产基地向原料基地、市场基地扩张,确定并实施了“东西南北中”兴建基地扩大生产的战略,将宜昌的生产线扩建到2.5万吨后,先后在内蒙、新疆、河南、山东、广西等地,通过收购、扩建和新建的方式建立了六条酵母生产线,成为亚洲最大的酵母生产企业。在市委市政府的支持下,安琪集团开始走出国门,到海外承包工程、投资办厂,开展国际经济技术合作。

宜昌市政府以包容宽容的精神,支持企业和企业家大胆探索。政府允许安琪集团的管理层和技术骨干参股子公司,使这些人的利益与公司利益绑在一起,既有利于留住人才,又激发了人才的创造力。对企业和企业家在探索过程中出现的一些失误,宜昌市领导没有横加指责,而是帮助总结教训,让企业纠正失误。

3 总结

“宜昌现象”是在完善社会主义市场经济体制的过程中形成的,既是市场引导的结果,也是政府推动的结果。政府应最大限度地释放企业家能量,将管理寓于服务、寓于保护中,为企业家创造一心一意干事业的好环境,对企业家真诚信任和真情爱护,在企业发展的关键环节上给予支持,并建立开明的政策环境。近些年来,宜昌市委市政府以开明的姿态、开放的胸怀、开拓进取的精神,为本土企业及企业家成长创造了良好的发展环境、体制环境和人文环境。正是在这样的“优质土壤”里,宜昌企业和品牌迅速壮大成名。

参考文献

[1]省政府发展研究中心调研组.可贵的宜昌现象之二[EB].http://www.whjx.gov.cn.

[2]李成群,钟华林.安琪酵母:小产品做出大事业[N].经济日报,2005,(1).

[3]刘国芳,李清理.安琪酵母实现新跨越[J].中外食品工业信息,2000,(4).

安琪酵母投资分析报告1（精选） 第2篇

一、公司简介

安琪酵母（600298）是一家从事酵母及酵母衍生物产品生产、经营、技术服务的专业化公司，是国家重点高新技术企业。总股本：32963.24万股，流通A股：27140万股。主要股东为湖北安琪集团有限公司，于1998年3月25日联合宜昌先锋科技发展有限公司、宜昌西陵酒业有限公司、贵州润丰实业有限公司、宜昌溢美堂调味品有限公司，以发起方式设立安琪酵母股份有限公司。公司设立时总股本为10,070万股。2007年8月8日，经公司2007年第一次临时股东大会议通过以2007年中期总股本13,570万股为基数，以资本公积向全体股东每10股转增10股，共转增13,570万股，转增后公司总股本为27,140万股。

公司的主要产品有高活性干酵母系列(包括面用和酿酒用)、酵母抽提物(味素)、药用酵母、饲料酵母系列。公司自从上市以来，销售收入一直以超过25％的复合增长率增长，公司效益也保持着连年递增的态势。在企业销售收入中，酵母类产品占80％左右，是公司主要的盈利来源。酵母相关产品、酵母抽提物和生物饲料等新业务也在为公司贡献越来越多利润。

一、宏观经济与产业分析

在全球经济不景气，以及国内政府采取了一系列紧缩性政策的背景下，国内投资、净出口和消费为表现的总需求收缩的趋势已逐步显现出来。从日本1956-2000年的经济数据看来，食品行业利润增速与国家GDP增长相关性较小。在细分食品饮料行业中尤其像酵母这种下游需求主要是面食、西点等日常必需消费品行业，受国内宏观经济影响较小。公司所处行业的市场结构

酵母产业在国际市场上属于成熟产业，全球年产酵母约350万吨，其中活性干酵母超过120万吨。世界人均酵母消费量达0.2公斤，而欧美发达国家的人均消费量已接近1.5公斤。国际市场上酵母的生产呈现高度的集中化和专业化的特点，主要生产厂家有法国乐斯福公司、英国联合食品集团(ABF)、荷兰的吉斯特(Gist-Brocades)和加拿大雷蒙德公司等。

国内酵母行业，随着酵母的应用范围越来越广，其需求量亦逐渐增加，国内酵母产销量有10%以上的增长。安琪酵母在我国酵母行业的龙头垄断地位为公司经营规模和盈利水平持续多年稳定增长奠定了基础。目前安琪酵母在国内酵母市场占有率在50%以上,由于竞争对手马利、乐斯福在国内扩产进度缓慢,且小酵母厂面临环保核查压力,安琪酵母的产能随公司市场的扩张份额将继续提升。行业发展趋势

酵母是目前世界上唯一年产量超过百万吨的微生物，被广泛应用于酿酒、医药、饮料、饲料、化妆品等领域，属于生物技术产业。该产业已被列入国家重点扶持的十大高新技术产业之一，发展前景十分广阔，有望成为二十一世纪经济增长的主导行业之一。酵母工业，特别是高活性干酵母工业是当代生物工程高新技术产业化最成功的范例之一。在欧美发达国家，高活性干酵母的产业化生产是七十年代初逐步发展起来的。近年来，国际上在酵母工业方面，取得了一系列技术突破和科研成果。欧美发达国家通过酵母培养富含叶酸酵母和利用酵母提取谷胱甘肽、海藻糖等，并已实现产业化。在中国，作为高新技术的现代酵母工业是从八十年代中后期开始发展的，随着宜昌活性干酵母工业性试验基地的建成和广东等地合资项目的引入为标志而形成。无论在世界范围还是在中国，现代酵母工业仅仅走过不长的历史，属高新技术朝阳产业，前途充满光明。

全世界酵母生产厂家约300家，1998年，全球高活性酵母产品产量约100万吨。世界大酵母生产企业大部分集中在欧洲和美洲，其他地区分布较少。发达国家特别是欧美各国的酵母市场已比较成熟，酵母需求量约为每人每年1公斤。在广大的发展中国家，酵母市场拥有更广泛的发展空间。

行业投资风险 行业依赖风险：占该公司销售收入89.10％的高活性干酵母中，近30％主要应用于食品加工行业，因而存在着一定的行业依赖性。环保风险：酵母生产会产生废水、废渣，对周围环境造成一定程度的污染。

产品结构相对集中的风险：安琪公司的利润主要来源于高活性干酵母，产品结构相对集中。

三、公司分析

安琪酵母是国内酵母行业的绝对龙头，酵母产量居世界第三位，国内第一，占国内市场份额超过50%，具备较强的规模优势，同时在国内市场上拥有一定的定价权。

产业化优势：产业链一体化，走向终端消费品牌

安琪从酵母品牌优势起步，产业链一体化程度不断加深，进入上游制糖和下游生物饲料，打造复合调味品和生物保健品品牌，公司驱动力十足，将持续快速发展。近几年公司增长主要还是面用酵母，人口红利和经济发展，驱动公司面用酵母快速增长。但是随着持续不断的市场培育，以及收入的提高，酵母衍生产品的性价比优势将逐渐提升，成为公司的后续增长动力，而酶制剂等领域有望不断挑战传统的国际巨头。

营销优势：营销网络成熟，市场占有率第一 对于酵母这种快速消费品，产品由厂家到消费者手中的分销过程对企业产品的销售越来越重要。判断一个企业营销网络健康与否，第一要看是否有掌握在企业自己手中销售网络，第二看这个销售网络有没有足够的覆盖率。安琪酵母在全国设有24个办事处，1000多家经销商，销售人员占到公司员工总数的31%，遍布全国各地的办事处和销售人员能够及时为客户提供酵母使用上的技术指导和相关服务；而且在小包装酵母销售上，公司通过在乡镇、村一级市场的销售网络实地推广，建立了被行业内推崇的“酵母下乡”的营销模式，成功地打开了农村市场，特别是在北方市场呈现出“小包装进农村、大包装在城镇”的态势。及时的专业技术推广和售后服务，良好的销售网络保证了公司产品的占有率。市场优势：国内市场竞争优势明显

公司在国内市场占有率50%以上，地方小型酵母厂对公司没有威胁。公司依托酵母技术研究推广中心，90 年代起迅速发展，尤其是上市后，进入快车道。在公司技术、资金、营销、规模、低成本产能布局的优势下，小型酵母厂的生存空间严重萎缩，甚至沦为并购对象。曾经国际巨头忽视、不擅长的领域，公司以高活性干酵母迅速起家。相对于国内市场的快速增长来说，国际酵母巨头在华表现逊色许多，尤其是公司在国内市场超过50%的占有率使国际巨头在华发展举步维艰。

四、财务分析 2011年1-9月份,公司实现营业收入17.93亿元,同比增长19.4%;归属母公司股东净利润2.48亿元,同比增长20.2%;每股收益0.80元。其中,三季度营业收入5.67亿元,同比增长10.1%;归属母公司股东净利润7382万元,同比增长7.4%。

主要财务指标如下:

指标/日期

11-09-30

10-12-31 28499.60 35.58 19.70 47.25 122.40

09-12-31 21019.20 101.14 20.20 48.86 118.32

08-12-31 10449.53 15.25 12.07 51.41 267.83 净利润（万元）24754.27 净利润增长率（%）

20.15 净资产收益率（%）10.16 资产负债比率（%）净利润现金含量（%）

36.66-8.64 由上表看出，净资产收益率：高/低表明公司盈利能力强/弱。该指标的最近一期行业平均值：5.99% 净利润增长率：高/低表明公司增长能力强/弱，前景好/差。该指标的最近一期行业平均值：165.73% 资产负债比率：高/低表明公司负债多/少，偿债压力大/小。该指标的最近一期行业平均值：40.55% 净利润现金含量：高/低表明公司收益质量良好/差，现金流动性强/弱。

该指标的最近一期行业平均值：-132.11%

从盈利能力、成长能力、运营能力三方面进行分析： 盈利能力

从09年起公司随整个行业的整体提升保持较好的盈利能力，11年由于蜜糖成本增长的压力有所回落，但是基于糖蜜成本压力减缓,酵母毛利率有望回升。糖蜜占到酵母生产成本的45-50%,10/11制糖期糖蜜价格上涨20%一方面是减产所致,另一方面资金炒作也是关键因素之一,预计11/12榨季糖蜜价格将有所回落,目前糖蜜价格在1100元/吨,已较此前回落10%以上。此外,如果糖蜜价格未如期回落,预计公司将进口东南亚低价糖蜜(到岸价约900元/吨,公司已申请到10万吨进口配额,占糖蜜使用量的20%)或在明年择机提价的方式消化成本压力,预计2012年酵母毛利率将有所回升。成长能力

公司酵母产能持续扩张,国内市场份额有望继续提升，大大增强企业的成长能力。公司现有干酵母产能10.7万吨左右,未来新增产能包括埃及项目1.5万吨(2012年1Q 投产)、广西柳州项目2万吨(2012年6-7月投产)、云南德宏项目2万吨(2012年底投产),此外预计公司13-14年会择机在海外和国内各新建一个新酵母厂,2015年酵母总产能20万吨。运营能力

食品行业共46家上市公司，安琪酵母排名第9位。酵母衍生品销量快速增长。随着酵母味素的推广，双汇、统一等大企业纷纷跟公司订货，公司味素销量快速增长。随着09年伊犁酵母味素8000吨新产能的建成投产，味素销量将会有一个跳跃式的增长。同时，公司定向增发项目进展顺利,预计新产品酶制剂于2012年7月投产,酶制剂技术门槛较高,如卤醇脱卤酶在国内仅有五家企业能够生产,核酸酶P1和腺苷脱氨酶只有日本一家企业可以生产,酶制剂产品售价最低3-4万元/吨,最高7-8万元/吨,毛利率在80%以上。明年若项目如期投产将有望成为公司新增长点。

五、投资估值与建议

安琪酵母按照行业划分，归属食品制造业中调味料子行业。但从这几年公司情况看，公司产品线已经远远超越酵母单一品种，发展到食品（蛋糕粉、）营养保健品，进入消费终端。而在酵母源生物饲料领域、在酵母保健品以及YE 复合调味料领域，安琪都占有特别是进入酶制剂领域，公司的生物技术属性将逐步提升。从公司技术研发情况看，也具备生物技术公司的特质。

安琪酵母 第3篇

二级市场上，安琪酵母保持稳健上行态势，其股价虽在此前6月份的整体下跌中有较大跌幅，但随着中报的披露，目前已收复大部分失地，且技术形态仍保持上攻态势，可积极参与。

招商证券认为，人民币贬值对安琪酵母出口业务带来实质利好，全球市场份额有望进一步提升。安琪酵母目前海外业务占比约1/3，且增速已恢复至17%以上——预计随着人民币贬值将在利润率和业务量两方面对安琪酵母海外业务带来利好影响。从产品价格方面来看，人民币的贬值将进一步增强安琪产品在国际市场中的价格优势，带来海外需求的增长，出口业务有望持续增长，扩大收入。此外，出口业务获得提振促进公司进一步扩大在全球市场的份额，公司产能利用率有望获得快速提升，降低费用率。

安琪酵母的中报透露了公司经营的最新信息，这些信息值得投资者认真把握。首先，公司上半年酵母及酵母抽提物等产品实现收入17.06亿元，占比83.10%，毛利占比超过90%，酵母及其深加工产品仍较为突出，并且保持稳定增长趋势，上半年收入增速为18.01%。受益于糖价上涨，公司上半年糖业务收入显著提升，并扭亏为盈，在目前糖价仍然保持相对高位的情况下，预计下半年糖业务同比仍有较大增幅。上半年公司国内外业务收入分别为13.77和6.62亿元，分别同比增长18.18%和17.27%，保持稳定增速，且未来在人民币汇率贬值的背景下，海外业务增速有望提升。

值得一提的是，安琪酵母今年上半年的费用控制效果显著，从而使得盈利能力大幅提升。公司上半年销售费用2.26亿元，财务费用5704万元，在收入同比增长18%的同时，消费费用仅同比增长6.65%，财务费用更是同比下降了14.33%，销售费用率和财务费用率同比分别下降1.17%和1.05%，公司费用控制效果显著。公司今年采取员工奖金季度均摊费用的方式计提，导致本期管理费用同比增长21.39%，但从全年来看，下半年此项费用则将有较大改善空间，预计公司下半年业绩将会逐季向好，盈利能力将会不断提升。

业绩支持方面，投资者可以把握的是，公司上半年实现主营业务收入20.53亿元，营业利润1.80亿元，净利润1.40亿元，同比分别增长18.04%、57.14%、62.41%，上半年EPS0.425元。其中Q2收入和利润分别为10.72亿元和9102万元，分别同比增长13.85%和81.60%。上半年经营现金流量为9806万元，同比增长13.97%，销售回款21.58亿元，与收入基本持平，整体现金流结构较为稳定。

安琪酵母 第4篇

关键词：酿酒酵母,脂肪酶,基因克隆,毕赤酵母,表达

生物柴油是新兴的“绿色能源”,大力发展生物柴油对经济可持续发展,推进能源替代,减轻环境压力,控制城市大气污染具有重要的战略意义。由于用化学方法生产生物柴油过程中的废碱(酸)液排放容易对环境造成二次污染等[5],人们开始研究用生物酶法合成生物柴油。酶法合成生物柴油具有条件温和、醇用量小、无污染排放、环境友好性等优点,并且酶催化转化的产物纯度高,易与副产物甘油分离,所以用酶法转化生物柴油越来越受到关注[6],对脂肪酶的研究也越来越广泛。

脂肪酶基因TGL3是酿酒酵母体内起主要作用的脂肪酶[7],本实验意在通过克隆表达提高其活力,并且是国内首次对酿酒酵母脂肪酶基因的克隆和重组表达进行研究。重组表达的脂肪酶单位酶活力是原菌株的10倍,该酶不受众金属离子的影响,研究初步表明该酶具有一定的应用潜力。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 菌种和质粒

Saccharomyces cerevisiae、E.coli JM109、Pichia pastoris GS115和表达载体p PIC9K均为作者实验室保存。

1.1.2 试剂

LA Taq DNA聚合酶,限制性内切酶,T4DNA连接酶均购自MBI,p-NPP购自Sigma公司,其它试剂均为国产分析纯。

1.1.3 培养基

LB、YPD培养基参见《分子克隆》,MD、MM、BMGY、BM-MY培养基参考Invitrogen公司的毕赤酵母表达手册。

1.2 方法

1.2.1 酿酒酵母TGL3基因的克隆

以酿酒酵母总DNA为模板,P1、P2为引物进行PCR,上下游引物中分别加入AvrⅡ和NotⅠ限制性内切酶酶切位点:

PCR反应条件为:95℃5min,94℃45s,53℃45s,72℃2min,30个循环后72℃延伸10min。

1.2.2 重组表达载体的构建、转化、筛选和验证

PCR产物和p PIC9K分别进行双酶切后连接转化E.coli JM109,菌体电泳筛选阳性克隆。质粒酶切验证后,用SacⅠ单酶切重组质粒使其线性化,后电转化至Pichia pastoris GS115,涂布到MD平板上,30℃培养2~3d,把MD平板上的菌落用灭菌牙签分别点种到MD和MM平板上,筛选Mut+表型,2~3d后,把在MM平板上生长良好的菌落分别点种到含有不同浓度G418的YPD平板上,筛选多拷贝重组子并进行PCR验证。

1.2.3 重组菌的诱导表达和表达产物的SDS-PAGE分析

对在较高浓度的G418平板上生长良好验证正确的重组子进行摇瓶发酵,筛选表达量高的菌株。先用BMGY培养基培养至OD600=2~6,4℃、3 000g离心5min收集菌体,再用BMMY培养基悬浮菌体使OD600值约为1,30℃、250r/min摇床培养,每24h取样测定酶活并补加终浓度为0.5%的甲醇。将发酵后的发酵液离心收集上清,进行SDS-PAGE凝胶电泳,分析目的蛋白的大小和表达情况。

1.2.4 酶学性质的测定

1.2.4. 1 最适p H和p H稳定性的测定

在p H为6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10.0的条件下测定酶活性,确定其最适p H值。将酶液按1∶1比例分别在p H为6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10.0的缓冲液中30℃保温30min,测剩余酶活,确定该酶的p H稳定性。

1.2.4. 2 最适温度和热稳定性的测定

分别在15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃和65℃的条件下测定酶活,以确定其最适作用温度。分别把相同浓度的酶液在15℃、25℃、30℃、40℃、50℃、60℃下放置30min,测定剩余酶活,以确定其热稳定性。

1.2.4. 3 金属离子对酶的影响

向相同体积的酶液中分别加入不同的金属盐离子(Ca2+、Mg2+、Zn2+、Cu2+、Fe2+、Fe3+、Mn2+、Al3+、Ni+、Sr2+),使盐最终浓度为5mmol/L,同时以不加金属离子的酶液作为对照,测定各金属离子对酶的影响。

2 结果和分析

2.1 酿酒酵母脂肪酶基因的克隆

以酿酒酵母的DNA为模板,PCR扩增得到大小约2kb的目的片段,测序结果表明:序列与Gen Bank中TGL3基因(登录号为NC_001145)的序列同源性高达99.8%,氨基酸序列同源性达99.7%。该脂肪酶片段长1 929bp,是一个完整的读码框,编码643个氨基酸,编码的氨基酸中有脂肪酶的保守序列GXSXG,位于235~239位。

2.2 毕赤酵母表达载体的构建

载体p PIC9K和PCR产物分别双酶切后连接转化E.coli JM109,菌体电泳筛选阳性克隆,提取质粒,用AvrⅡ和NotⅠ进行双酶切验证,酶切结果显示,两条带分别与载体和目的片段大小相符,表明载体p PIC9K-TGL3构建成功。

2.3 重组毕赤酵母的筛选和验证

经过MD、MM和不同浓度G418平板的筛选及PCR验证,最终得到9个高拷贝的阳性转化子。分别对这9个重组子进行摇瓶发酵,得到1株表达量最高的重组子G6。PCR验证结果如图1所示。

M:DNA Marker DL2000;1:PCR product of p PIC9K;2:PCR product of recombinant.

2.4 重组毕赤酵母的诱导表达和SDS-PAGE电泳

以终浓度为0.5%的甲醇诱导表达G6重组子,每24h取样用p-NPP法测定发酵液中分泌表达的脂肪酶活力。发现脂肪酶的活力在诱导发酵120h后达到高峰,最高酶活力达60U/m L。SDS-PAGE电泳结果表明目的蛋白的大小约为70kDa(图2),与预测值相符。

2.5 酶学性质的测定结果

2.5.1 重组脂肪酶最适p H和p H稳定性

在不同p H的缓冲液体系中37℃测定重组脂肪酶的活性,发现在p H8.5的缓冲液中酶活最大。

将酶液与p H6.0~10.0的不同p H的缓冲液1∶1混合30℃保温30min后,在p H6.5~9.0之间酶液能保持50%以上的酶活力。

2.5.2 重组脂肪酶最适温度和热稳定性

在最适p H的缓冲液体系下,将酶与底物在不同温度下反应测定其作用的最适温度,测得该重组脂肪酶的最适作用温度为40℃,在25℃~40℃之间都可保持较高的活性。

将酶液在不同的温度下保温30min后在最适p H、最适温度下测其活性,结果显示该重组脂肪酶在40℃下保温30min后仍可保持60%以上的酶活力。

M:Unstained Protein Moleclar Marker;1:GS115 cells harboring p PIC9Konly;2:GS115 transformants harboring G6.

2.5.3 金属离子对重组酶的影响

除Al3+和Fe2+对酶有明显抑制作用,Ca2+、Mg2+、Zn2+、Cu2+、Fe3+、Mn2+、Ni+、Sr2+等金属离子对该重组酶均无明显抑制作用,该重组酶有很广的金属耐受性。

3 讨论

对酿酒酵母脂肪酶的研究,国外曾通过基因敲除的手段证实了在酿酒酵母中脂肪酶的存在[7,8,9],最近两年的研究则集中在酿酒酵母中脂类合成、储存、分解的途径和调控及对整个细胞代谢的作用,以及在这个过程中起关键作用的脂肪酶的作用和作用机制,研究方向偏向于机体健康和医药应用方面。Tibor Czabany等[10]通过TM(triple mutants)方法研究酿酒酵母体中脂质体的结构,为解释脂肪酶的作用机制提供了依据;Christoph F.Kurat等[11]也利用基因敲除的方法研究证明了Tgl3和Tgl4是酵母细胞生长初期水解TG的主要用酶,对细胞的生长有很大的影响。国内对产脂肪酶的酵母菌的研究目前主要集中在南极假丝酵母和粗壮假丝酵母,对酿酒酵母脂肪酶基因的研究尚未见报道。朱艳飞等[12]通过将人工合成的由毕赤酵母偏爱密码子组成的南极假丝酵母脂肪酶基因在Pichia pastoris GS115中表达,最高酶活力为14.5U/m L;熊杰等[13]对产脂肪酶的粗壮假丝酵母进行发酵条件优化,优化后酶活力可达6.2U/m L,可见酵母菌类产脂肪酶酶活力普遍较低。本实验的结果不仅为国内脂肪酶的研究增添了新的内容,也为以后对酿酒酵母脂肪酶更深入的研究做了铺垫。在以后的工作中,可以通过条件优化和分子改造等方法进一步对提高该酶的表达量,优化其酶学性质进行研究,力求使其适用于生物柴油的工业催化。

安琪海（下） 第5篇

城堡金碧辉煌，说不出的大，说不出的豪华，说不出的气势。城堡里面人山人海，保镖告诉我,这些都是我的大臣。大臣们看见我来了，都跪在地上向我请安：“欢迎贝贝公主回城！”声音震耳欲聋。我想如果天天这样，总有一天我会聋的。

“你们起来呀！”我急了，这样多不好啊，可是我的声音显得微不足道，没有人能听见。他们这么有钱，为什么不安装个话筒呢？

其中一个大臣，好像是所有大臣的头，因为人名太难记，所以我就称他头头。头头说：“贝贝公主，您要不要把案犯安琪公主带上宫殿审讯她？”

“不用了，我呆会儿自会抽时间和她聊聊的。”其实我还是蛮有气势的嘛！

一个人走在牢狱走廊里，我不知道呆会儿如何面对安琪。我心里嘀咕，不可以让安琪知道我们的事，她是很情绪化的。可是那又该怎么办呢？当我鼓足勇气决定跟安琪坦白，告诉她我们曾是敌人时，牢狱里响起了冰冷刺骨的声音：

“亲爱的贝贝公主，在外面会着凉的，现在您可是公主了，要注意身体，您有什么话就说吧！”这是安琪的声音。

我推开牢房的门。这么冷的天，安琪竟只穿了一件单衣，头发很零乱，手脚都是通红通红的。我脱下自己的大衣，轻轻地盖在安琪的身上，没想到她竟猛地用手一推，大衣掉在了地上。

安琪冷笑道： “呵呵，我是囚犯，怎么敢穿公主的衣服？”

“原来你都知道了！”

“这样大的事情有谁不知道？我不是傻瓜！”

“安琪，不要这样，你知不知道我千辛万苦地来救你？虽然我承认我们的地位不同了，但这并不会影响我们的友谊啊！”我这些话都是肺腑之言。

安琪转过头，说：“十几年前，是我酿成了这场悲剧，我也知道你不会抛弃这段友谊，可是我无法面对我和你的感情，我拿什么来拥有呢？”

我扑上前去，紧紧地抱住了安琪: “不要再说了，安琪，这并不是你的错。我们还是最好的朋友，我们会一起回到地球的！”

祭天大典

昨晚我没有睡好 ，因为今天要举行祭天大典。我曾问过那些大臣能不能放了安琪，可是他们竟然和我提出了条件，而且很离谱，让我无法答应。他们要我永远留在西亚星球！这不可能，我不可能答应他们，我知道我是热爱自由的人……

可是，我又发现自己无从选择，我好像在做人生最大的难题：在友情和自由面前我选择什么，又该丢弃什么呢？难道我真的为了自由，就不管安琪的死活了吗？这样的我实在是太自私了。可是，如果安琪获救了，我就再也不能回地球了！

我曾经来过硬的，可是没想到，那些官员并不怕死。我也曾来过软的，可是他们非但不听我的恳求，还和我讲了一大堆的道理。

早晨，天刚蒙蒙亮，我就起来了。我知道今天是决定我和安琪命运的一天，也是我选择人生道路的一天。我真的好怕面对安琪。我还是很犹豫，自由和友情，在我生命中最重要的两样东西，我该选择什么呢？有谁能够告诉我？

中午，祭天大典开始。我还是想找个借口，于是问保镖：“我不是没死吗？为什么还要拿安琪祭天？”没想到保镖还真有一套，他说：“虽然贝贝公主您回来了，但安琪公主还是要为您这十几年的流浪付出相应的代价！”

我没话说了。

安琪被许多士兵押着出来了。她向我凄凉地笑了一下，我也勉强朝着她咧了咧嘴。

时间到了。安琪无奈地向我挥了挥手，我哭了，大声地哭了。显然，在场的人都被我的这个举动吓了一跳。我哭着说：“放……了她……”现场出现一阵小小的骚动，那些大臣开始窃窃私语。头头站了出来，说：“贝贝公主，放了安琪公主并不是难事，只要您答应我们的条件！”

“条件，我，我，我……”我支支吾吾答不出口，我怎么变得这么懦弱，一秒钟前决心还下得好好的，现在怎么又犹豫不决了？

安琪似乎明白了什么，朝我喊着：“贝贝，不要答应他们！我不想拖累你！不要答应他们，求你了！”

“安琪，对不起，这次你的要求我无法做到！” 我走到头头面前，一字一顿地说：“我决定了，我答应你，那你也要遵守你的诺言。”

头头说：“那好，明天就送安琪公主回去，但是，我还有一件事要和公主商量，希望公主英明！”头头示意我把头靠过去。

“这样无理的要求，你打死我也不会答应的，亏你想得出来！”我生气到了极点。

“这都是为了我们星球好啊，公主，您不答应我们是不会放她走的！”头头边讲边看了安琪一眼。

安琪，我绝对不会这样做的，绝对不会……

可是，尽管我极力反对，所有西亚星球的人们还是要求我这样做，否则就不释放安琪。我又陷入了困境。

我一直都是最了解安琪的，要她失去记忆，还不如一刀杀了她！可是，难道真的要让她死吗？ 我思前想后，左右为难。

……

永远离别

安琪走的那一天，我没有去。反正都要分离了，还在乎这几分钟吗？头头跟我说，安琪离开这里后对从前的事就不再有任何记忆了。我让头头给安琪捎去了一封信，我把我们最爱的歌《雪人》的歌词写进去了。我只希望她能记得曾经的这个朋友，记得这首歌：“ 雪已经积得那么深，merry x'mas to you ，我深爱的人，好冷，整个冬天在你家门，are you my snow man ，我痴痴痴痴地等，雪一片一片一片一片，拼出你我的缘分，我的爱因你而生，你的手摸出我的心疼，一片一片一片一片，在天空静静缤纷，眼看春天就要来了，而我也将也将不再生存……”

三天以后，头头从地球上给我带来一份报纸，报纸上最醒目的地方有这样一段新闻：“昨日，轰动世界的神秘失踪案件侦破工作已有进展，失踪的两个女孩现已找到了一个……”

我哭了，我真的和安琪分开了！永远，永远……

酵母酒精发酵及产物提取 第6篇

随着分子生物学、微生物学、生化分离技术、生物技术、营养学、医学和相关学科的发展, 为酿酒的研究提供了重要的基础和前提。目前, 酵母菌是世界上公认的安全食用菌体。使用酵母菌来发酵酿酒是非常实用而普遍的实验。本论文即用酵母菌进行实验室酒精发酵。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 菌种

培养的酿酒酵母 (Saccharomyces cererisiae) 斜面菌种, 由齐齐哈尔大学生命科学与工程学院微生物学实验室保藏。

1.1.2 培养基与相关溶液[3]

斜面种子培养基 (g/L) :10葡萄糖、5Na Cl、10酵母膏、5KH2PO4、20蛋白胨、25琼脂、p H值5.8-6.0。

发酵培养液:蔗糖10g、Mg SO4.7H2O 0.5g、NH4NO3 0.5g、20%豆芽汁2m L、KH2PO4 0.5g、水100m L、p H值自然。

豆芽汁的配制:黄豆芽200g加水1000m L, 煮沸1小时, 过滤后补足水分。121℃灭菌后存放备用。

1.1.3 相关材料与用具

蒸馏水、无菌水、铝锅、电炉子、三角瓶、牛皮纸、棉花、蒸馏装置、水浴锅、震荡器、酒精比重计。

1.2 实验方法

1.2.1 斜面培养基的制备

根据配方与比例配制100m L, 分装20个洁净的试管, 每个5m L, 121℃湿热灭菌20分钟。冷却制成斜面。

1.2.2 接菌

将酿酒酵母菌种接至新配制的斜面培养基中, 分别为R12、2109两种酒精酵母。放在28℃恒温箱中培养。

1.2.3 培养液的制备

根据配方与比例配制1000m L培养基, 分装10个干净的300m L三角瓶中, 每瓶100m L, 121℃湿热灭菌20分钟。

1.2.4 接种和培养

培养24小时的酿酒酵母斜面中加入无菌水5m L, 制成菌悬液并吸取1m L, 接种至100m L培养液中, 共接8瓶, 4瓶酒精酵母R12, 其中2瓶放在30℃恒温静止培养, 另外2瓶置于30℃恒温震荡培养。

1.2.5 酵母菌数目计数

每隔24小时取样, 经10倍稀释后进行细胞计数并绘制曲线。

1.2.6 酒精蒸馏及酒精度的测定

将发酵培养3天的发酵液加至蒸馏装置的圆底烧瓶中, 在水浴锅中85-95℃蒸馏30-45分钟, 当开始流出液体时, 准确收集于量筒中, 用酒精比重计测量酒精度。

1.3 分析方法

得率=蒸馏出的液体体积/蒸馏液的总体积*100%震荡培养液中酵母菌计数曲线, 静止培养液中酵母菌计数曲线。

2 结果与讨论

2.1 得率结果

通过上面的表格不难看出本实验酵母酒精适用于静止发酵。本实验重复2次。选取所做的数据是小组认为比较好的一组。在本实验之前还做了大量的准备工作。如先做了固体发酵。培养基成分如下:高粱粉30%、稻壳15%、 (NH4) 2SO40.5%、酵母膏0.2%、蛋白胨0.5%、水分54-55%、混合均匀, 121℃湿热灭菌30分钟。经过研究发现在现有的条件和设备下许多步骤很难完成 (例如细胞计数) 。

在第一次实验时, 选用啤酒酵母216, 蒸馏酒的味道非常纯正。

在第二次实验时, 酒精的味道不是很纯正, 有一点烂苹果的味道, 但酒精味道很浓。对酵母酒精发酵培养液进行镜检, 结果显示培养液中并未染菌。怀疑是豆芽汁出了问题 (本次所使用的豆芽汁是上次用完剩下的, 虽然已经灭过菌并保藏起来了, 但有可能是哪个环节出了问题) 。具体原因有待进一步实验加以验证。

摘要：初步了解和掌握了酵母酒精发酵的实验原理及方法, 分析菌种、发酵方式等因素对酒精得率的影响.通过对菌体的存活率进行监测以及对酒精发酵产物进行蒸馏, 发现实验室酵母酒精发酵适用于静止发酵.

关键词：酵母菌,酒精,发酵,提取

参考文献

[1]周文美, 黄正.酿酒与化学[J].酿酒科技, 2006.[1]周文美, 黄正.酿酒与化学[J].酿酒科技, 2006.

[2]王晓鹤, 林雅萍, 杜繁荣等.中国药酒谱[M].北京:科学技术文献出版社, 1999.[2]王晓鹤, 林雅萍, 杜繁荣等.中国药酒谱[M].北京:科学技术文献出版社, 1999.

利用啤酒酵母诱变改进发酵工艺 第7篇

关键词：啤酒酵母,定向诱变,双乙酰

1 酵母的诱变及扩大培养

啤酒酵母在无菌室扩培过程中, 利用特定剂量的紫外线进行定向诱变, 操作简单, 诱变后的酵母不用筛选, 可直接用于大生产。

1.1 酵母诱变

将紫外灯安装在操作台上方50cm处。

将用于扩培的酵母菌株放在紫外灯下, 定时定量照射, 进行诱变。

诱变之前的酵母发酵液外观发酵度达到70%时, 双乙酰峰值高达0.35m g/L, 一周后, 双乙酰还原到0.10m g/L。诱变之后的酵母发酵液外观发酵度达到70%时, 双乙酰峰值0.25m g/L, 双乙酰还原3d, 低于0.07m g/L。

1.2 酵母扩培

1.2.1 无菌室环境设施的一般要求

酵母的初期扩培在无菌室进行。无菌室要求墙壁、地面洁净光滑, 内设超净台, 外设缓冲间, 用紫外灯灭菌。

1.2.2 培养基的制作

取糖化过滤后的麦芽汁, 调整浓度10±1°P, 温度35℃~40℃, 加蛋清搅拌均匀后加热至沸, 30m in后过滤、分装、灭菌备用。

1.2.3 无菌室扩培流程

斜面菌种液体试管活化 (25℃24h) 100 m L三角瓶 (23℃24h) 500m L三角瓶 (21℃24h) 2 000m L三角瓶 (19℃24h) 3 000m L卡氏罐 (17℃40~48h) 使用诱变酵母菌种进行扩培, 每次接种2个样品进行平行培养。扩培中用显微镜检查酵母生长状态及发酵液有无污染杂菌等情况。

2 酵母菌种的扩大培养

2.1 封闭式扩培系统

酵母扩大培养设备由以下几部分组成:种子罐, 有效容量0.5t;一扩罐, 有效容量5t;二扩罐, 有效容量20t;三扩罐, 有效容量50t, 扩培罐内均设有升温功能。

2.2 扩培设备进行CIP清洗与杀菌

每天对刷罐所用的清洗剂溶液浓度进行测定, 确保合格。酵母扩培系统所用的空气过滤器, 每个使用周期灭菌一次。

2.3 麦芽汁准备

从沉淀槽接入85℃以上10°P麦汁进入扩培罐, 在罐内保温30m in, 然后降温到0℃~4℃贮存备用。一扩罐接入2t, 二扩罐接入18t, 三扩罐接入30t麦汁。

2.4 扩培工艺控制

A.种子罐。种子罐接入卡氏罐酵母扩培液后, 分2次添加麦汁。第一次添加150L, 麦汁以超出取样器和温度测定点为准。温度15℃发酵24h;第二次添加麦汁满罐, 温度15℃发酵24h。从种子罐倒入一扩培罐后静止30m in, 倒回种子罐150L。种子罐降温到2℃~4℃保种贮存, 罐压0.02M Pa。待再扩培前, 关冷升温, 添加麦芽汁, 按种子罐第一次添加麦汁工艺执行。在酵母发酵液倒出前和添加麦汁后, 用无菌空气从罐底通入种子罐、扩培罐, 搅拌5m in, 搅起沉淀的酵母, 以保证发酵液的均匀。

B.一扩罐内麦汁升温到14℃后接入种子罐酵母液进行发酵, 压力0.02M Pa, 时间24h。第二次添加麦汁3t, 温度13℃, 时间24h。

C.二扩罐内麦汁升温, 一扩罐内酵母发酵液全部倒入。温度控制12℃, 压力0.02M Pa, 时间24h。

D.三扩罐内麦汁升温, 二扩罐全部倒入。温度11℃, 压力0.02M Pa, 24h后倒入四扩锥型罐。

3 四扩锥型罐

选容量200t的锥型罐为四扩罐。将三扩50t酵母发酵液倒入四扩罐, 添加10°P麦汁150t, 11℃发酵, 24h后按生产需要倒出50t发酵液分罐进入其他锥型罐。四扩罐余下约150t发酵液, 添加麦汁后按上述工艺发酵、倒罐。

4 锥型罐发酵控制

酵母菌的生长分为五个阶段, 即延滞期、对数生长期、减速期、稳定期和死亡期。其中对数生长期是酵母生长最旺盛时期, 此阶段细胞以最快的速度生长、繁殖, 使用低代数对数期的酵母, 酯类产物明显提高, 高级醇含量降低, 从而优化了啤酒的口味。

A.锥型发酵罐接入冷却麦汁, 满罐温度11℃, 溶解氧15m g/L。添加酵母后进罐发酵, 酵母细胞数控制在 (1~1.5) 107个/m L。满罐24h后排放罐底沉淀物。

B.控制12℃恒温发酵3d左右, 外观发酵度达到70%, 封罐升压达到0.10M Pa, 进入双乙酰还原阶段, 经过紫外线定向诱变的酵母, 双乙酰还原3d左右, 即可降到0.06m g/L。

C.双乙酰还原达标后, 开始降温。降温分两步:第一步, 由于锥型罐内发酵液与冷媒比温差大, 冷媒温度在-6℃±l℃, 降温顺利, 达到0.2℃/h。温度降到3℃~5℃, 停止降温, 24h后回收酵母。第二步降温到0℃~1℃, 降温速度控制在0.2℃/h。

锥型罐底部发酵液密度加大, 酵母将麦汁中营养耗尽, 进入生长后期, 沉积下来。

5 后期贮酒

当锥型罐内温度降到0℃~1℃时, 进入后期贮酒阶段。分几天排净发酵罐内底部沉淀酵母。贮酒期开冷保温, 温度控制平稳, 不能忽高忽低。罐内压力0.05M Pa, 15d后酒液成熟。

6 结论

用上述方法进行的啤酒酵母扩培诱变, 成品啤酒风味和理化指标并没有改变, 但降低了双乙酰的生成量, 缩短了酿造周期, 进而降低了a-乙酰乳酸脱羧酶的添加量, 使每t啤酒生产成本可减少4~5元。按照年产20万t的产量, 一年可节约资金近百万元。

鸡粪便生产酵母蛋白试验研究 第8篇

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 样本。

在府城镇散养户鸡舍随机采集的鸡粪、麦草及一些腐殖质等。

1.1.2 培养基组成。

初筛培养基1:NaNO32.5 g, KH2PO41 g, CaCl26H2O 0.1 g, MgSO40.3 g, NaCl 0.1 g, FeCl30.01 g, 滤纸条10 g, 蒸馏水1 000 mL, pH值自然, 温度121℃, 灭菌20 min。初筛培养基2:NaNO30.5 g, KCl 0.5 g, KH2PO41.0 g, Fe2 (SO4) 37H2O (痕量) , CaCl2 (痕量) , CuSO4 (痕量) , MgSO47H2O 0.5 g, 蒸馏水1 000 mL, 琼脂20.0 g, pH值自然, 以滤纸作为唯一碳源, 温度121℃, 灭菌30 min。复筛培养基[2]:羧甲基纤维素钠15g, NH4NO31 g, MgSO47H2O 0.5 g, KH2PO41 g, H2O 1 000 mL, 琼脂2%, pH值自然。改良培养基:按PDA培养基的方法, 按体积添加不同比例 (50%、75%、85%、95%) 鸡粪液代替一部分土豆制成一种改良型培养基。

1.2 菌种的筛选

1.2.1 酵母菌的分离和纯化。

把样本用生理盐水稀释在溶液中。采用平板涂抹法将样本液涂抹在PDA平板培养基上, 分别置于37℃恒温箱内培养。24 h后, 将平板中的单个菌落移接到含50%鸡粪的PDA平板培养基上, 等菌落长出后做切片观察, 将含鸡粪液50%培养基中酵母菌的单个菌落进一步接种到含鸡粪液75%、85%、95%的PDA培养基中分离纯化, 直到添加到含95%鸡粪的PDA平板培养基上[3,4]。如此反复筛选得到7株酵母菌, 保存备用。

1.2.2 纤维素菌的分离和纯化。

取18个样本溶液, 采用平板涂抹法将鸡粪液分别涂抹在初筛培养基1上, 37℃培养4 d出现黄色斑点, 7 d滤纸出现小块的分解。再将被分解的滤纸块取少量溶解到无菌水中, 逐步稀释。将稀释倍数为10-6, 10-7、10-8菌落接种到复筛培养基, 经过6～7 d出现透明圈, 再将菌落接种到液体培养基中, 选用的培养基是初筛培养基2 (不加琼脂) , 摇床培养 (150 r/min, 37℃) , 富集培养10d, 用于细菌的增值[5,6]。另外按体积加入10%的鸡粪液, 再按原条件培养48 h, 开始出现部分滤纸分解, 72 h几乎全部分解, 溶液中仅有少量的滤纸片, 液体澄清。共筛选到5株分解滤纸效果比较好的纤维素分解菌, 留种备用。

2 结果与分析

2.1 发酵菌种的选择

2.1.1 酵母菌的选择。

经过反复初筛和复筛, 获得7株酵母菌, 将改良培养基经过10 000 r/min, 15 min离心取清液。每组100 mL, 共8组 (表1) , 接种量相等。通过37℃150 r/min摇床培养72 h后, 每组取8 mL, 4 000 r/min, 10 min离心后, 除去清液, 将固体通过冷冻干燥24 h称重, 各重复称重3次。

2.1.2 酵母菌产量的比较和分析。

由表1可知, B1、X1、C1平均重量极显著或显著高于Y1、A4、E1、M1和对照组。E1、M1和对照组差不显著, 故可以取B1、X1、C1 3株酵母菌, 但因C1的胞体比X1大, 所以选择产量最高的B1和胞体最大的C1作为后面发酵的菌种。

2.1.3 纤维素分解菌的选择。

将粪渣通过100目筛清洗至水的颜色为正常透明为止。经过105℃24 h烘干备用。用小烧杯各称取15 g干燥的鸡粪, 把分解滤纸较好的5株纤维素分解菌接种到鸡粪中, 将小烧杯盖上2层的纱布放置在恒温培养箱中, 在37℃条件下通过4～6 d的发酵。筛选到2株分解鸡粪中纤维素能力比较强的纤维素分解菌。分别是命名为W和G的2个菌种。

注:LSD0.05=0.002 7, LSD0.01=0.003 7。

2.2 鸡粪的发酵

将收集来的鸡粪晒干至含水量为12%～13%, 取1 kg经过121℃, 30 min灭菌。先接种纤维素分解菌 (W和G各加1 000 mL) 在37℃常温下发酵, 经过24 h后加入酵母菌 (B1和C1各500 mL) 。为保证含水量在60%～70%, 可在发酵鸡粪中加入适量麸皮 (105℃干燥4～5 h) 。通过联合发酵6 d以后, 将发酵鸡粪倒入托盘中放置在70℃烘箱中干燥24 h。

3 结论

从采集的样品中筛选到特别适合在鸡粪中生长并且具有较高产量优势的酵母菌2株;筛选到有较强分解纤维素能力的纤维素分解菌2株。后将收集的鸡粪经过除渣、晒干、高温灭菌 (121℃, 30 min) 等预处理, 按先接种纤维素分解菌, 24 h后再接种酵母菌的方法, 经过37℃6 d的联合发酵。待晾干后制成颗粒饲料。通过这种方法发酵的鸡粪, 既减少了对环境的污染和疫病的传播, 还可促进养殖业的良性循环。这种方法生产的酵母蛋白具有原料来源广、生产成本低、菌种适应性强的优点, 该试验处理鸡粪的经济效益和社会效益有待于进一步研究。

摘要：利用鸡粪进行酵母蛋白生产, 结果筛选到特别适合在鸡粪中生长的并且具有较高产量优势的酵母菌2株;筛选到有较强分解纤维素能力的纤维素分解菌2株。后将收集的鸡粪经过除渣、晒干、高温灭菌 (121℃, 30min) 等预处理, 按先接种纤维素分解菌, 24h后再接种酵母菌的方法, 经过37℃6d的联合发酵, 待晾干后可制成颗粒饲料。

关键词：畜禽粪便,酵母菌,纤维素分解菌

参考文献

[1]江波涛, 罗新义, 郭春晖.集约化养殖场鸡粪无害化与资源化处理技术方法[J].中国畜禽种业, 2008, 4 (22) :64.

[2]邱成书, 郭亚力, 李河.高温纤维素分解菌的初步分离筛选[J].食品科技, 2009, 34 (5) :25-27.

[3]林立, 丁俊华, 王家林, 等.开发鸡粪再生饲料, 实现养殖业的良性循环[J].饲料工业, 1996 (1) :42-44.

[4]赵小明, 龚月生.畜禽粪便再生饲料的营养价值及加工处理[J].畜牧兽医杂志, 1999 (4) :20-21.

[5]马学良, 方宪法, 陈开化.我国近期鸡粪处理若干方式及其市场前景分析[J].饲料博览, 1995 (5) :20-22.

富锌酵母的研究进展 第9篇

1 富锌酵母的研究

1. 1 酵母菌株的驯化选育研究

随着分子生物学、微核细胞学的发展, 利用酵母菌株获得锌成为可能。目前, 锌制剂研制与开发的主流产品是富锌酵母产品, 其具体过程是: 通过紫外诱变方法获得富锌能力强的酵母菌株, 并在设定的条件下对筛选出的酵母进行研究和一系列的培养, 之后在培养基中加入锌元素以获得富锌酵母。要注意的是: 在正常的培养基中, 如果添加的锌元素因浓度过高而导致细胞失水, 就会使酵母生长受到抑制或死亡; 而锌的浓度过低导致锌含量较低, 又会令研究失去价值。因此, 通常会采用紫外诱变或者超高压诱变方法改变酵母的遗传性状及代谢规律, 以获得富锌能力强的酵母菌株。实际上, 酵母菌与锌的结合并不是人工添加锌元素的简单结合, 它是通过生物发酵技术, 人为地促使酵母细胞在增殖过程中大量吸收锌元素, 同时锌与细胞内的有机组分结合, 由此得到细胞内富锌的微量元素载体酵母。Wen等[2]认为, 由于高压可以用于抑制食品中微生物的生长, 但是不同的微生物存在不同的生理特性, 并且不同的微生物抗压力的特性也不同。增加压力会对微生物产生不同程度的影响, 50 MPa的压力能够抑制微生物蛋白合成, 降低核糖体数量; 100 MPa的压力能够引起部分蛋白质的变性, 200 MPa的压力能够引起细胞膜和细胞内结构的破坏; 压力增加到300 MPa或以上能够引起蛋白质和酶不可逆的变性, 并引起细胞膜破裂和胞内物质的外泄, 导致细菌死亡。王岁楼等[3]认为, 高压不仅可以使细胞的形态发生改变, 而且还能影响细胞内的生化反应, 对微生物体内的核酸也有一定的影响。核酸是具有一定的抗压力的, 适当的压力可以使核质浓缩, 使DNA与剪切酶充分结合, 内切酶打开DNA的双螺旋结构, 在复制时候压力主要作用在细胞膜上面, 从而影响转录和翻译让核酸分子失去SOS应急修复体制而发生了突变, 改变了原来的性状。

1. 2 环境条件对富锌酵母的影响

微生物的生长跟环境条件有很大的关系。不同的环境条件可能会导致酵母菌的富集锌元素的能力不同。关传飞等[4]利用原子吸收的方法测定在不同培养条件下酵母富集锌的能力, 结果发现, 锌离子浓度在100 ~ 900 mg/L范围内, 锌离子浓度为500 mg / L时, 酵母中锌含量最高, 若再提高锌离子的浓度, 酵母中锌含量开始下降, 这说明高浓度的锌已经开始抑制富锌酵母的生长了。他们研究还发现, p H值在3 ~ 6 范围内, p H值在4. 5 时酵母的锌含量最高, 随后升高p H值, 酵母的锌含量开始下降。另外, 酵母的投入量对酵母富集锌的能力也有一定的影响, 当酵母的投入量在0 ~ 70 g/50 m L时发现在10 g/50 m L时酵母的锌含量最高, 此后若增加酵母的投入量富集锌的能力反而下降。培养时间对酵母的富锌能力的影响为, 培养10 h时酵母的锌含量最高, 增加培养时间锌含量开始降低。由此可见, 环境条件对酵母菌的富集微量元素的能力是有一定的影响, 选择合适的培养条件不仅可以节约资源, 同时也可以获得高产锌的酵母菌株。

1. 3 富锌酵母的成分研究

富锌酵母的成分比较复杂, 但作为一种安全的补锌材料在食品和营养学方面已经有了广泛的应用。张海波等[5]认为, 通过生物发酵的酵母所含铬量比较高, 还含有蛋白质、各种B族维生素、多种矿物质以及谷胱甘肽、辅酶Q等生理活性物质。富集微量元素的酵母除了具有一定的营养保健作用, 还可以用食品工艺中进行营养强化和食品加工。王战勇等[6]通过红外光谱对富锌酵母比较富锌前后酵母锌含量的吸收峰的变化, 并推测酵母在吸附锌离子的过程中, 可能是蛋白质中的羟基和羧基等极性强的基团对锌离子起主要富集作用。他们比较了富锌酵母和不含锌酵母12 种氨基酸组分的变化, 发现富锌酵母中各种氨基酸大多高于不含锌的酵母, 主要是赖氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、异亮氨酸等人体必需氨基酸明显提高。这可能是由于锌元素的加入促使酵母细胞生长以及加强细胞内代谢反应, 使营养价值得到了提高。朱亚敏等[7]认为, 酵母锌本身就含有锌的生物蛋白质, 这些酵母蛋白质具有很完善的氨基酸配比, 而且必须氨基酸的含量丰富, 符合人体对氨基酸的需要。酵母中的锌除了会结合在部分蛋白质和氨基酸以外, 还会结合在少数的多糖和脂质上, 而这些脂质和多糖大多数也都是人体所必需的, 也会随着人体对他们的吸收而被利用。张丽萍等[8]认为, 酵母中的锌与酵母的结合机制还未能完全阐述清楚, 以下问题还需要进一步研究: 锌是与酵母中的多糖还是与蛋白质形成有机活性锌, 酵母锌在其特定的组织中的定位, 酵母锌在靶细胞内分子水平的代谢机理等。

1. 4 富锌酵母的生产工艺研究

富锌酵母的发酵多采用流加法, 即在发酵的过程中向发酵罐中加入一种或者多种营养物质直到获得最终产物。采用连续流加法可以避免锌离子因浓度过高而影响酵母菌的生长。邓昌亮等[9]以酿酒酵母为菌种, 在30 L发酵罐上进行间歇、恒速及变速流添加锌离子的发酵方式培育高锌酵母, 研究表明, 在相同的接种量下恒速发酵优于间歇式流加法, 而变速流加法可以显著提高锌酵母的产量和还原糖的利用率。陈敏等[10]对富锌酵母在分批流加发酵过程中的发酵温度、p H值等控制变量的动态变化进行了研究, 获得基于发酵温度、p H值的富锌酵母生长动力学模型, 经优化计算得到最佳发酵温度和p H值, 在此条件下酵母浓度由原来的9. 90 g/L提高到11. 40 g/L, 平均浓度提高了13. 7% 。

2 富锌酵母的应用

2. 1 富锌酵母在人和动物营养方面的应用

富锌酵母作为食品和饲料的应用越来被人们广泛关注, 也是现在研究的热点。薛冬桦等[11]对450 名缺锌的儿童进行了研究, 把这450 名缺锌的儿童随机分成3 组: 第一组采用锌酵母补锌, 每日的给锌量10 mg/日, 第二组采用硫酸锌补锌, 每日的给锌量为10 mg/日, 第三组为对照组。通过比较服药后的儿童身高发现, 服用锌酵母组的补锌效果最好, 分析原因为: 硫酸锌为无机态锌, 不易被人体吸收利用。得出结论: 酵母锌的生物活性高, 其吸收率可以达到37. 4% , 且无毒副作用, 是应用于补锌的一种良好产品。赵金香等[12]选用80 头健康状况良好、遗传基础相近、平均体重接近的猪仔作为研究对象, 分成五组: 对照组加2 600 mg/kg的硫酸锌, 实验组分别加50 mg/kg、100 mg / kg、200 mg / kg、300 mg / kg的酵母锌, 研究表明, 猪仔的平均日增量、料肉比、腹泻率等生长指标并没有明显的变化, 但是对于日采食量, 实验组明显高于对照组, 且随着酵母锌浓度的增加而增加。由此表明, 酵母锌可以增加断奶猪仔的日采食量。

2. 2 富锌酵母在功能性食品方面的应用

目前, 酵母锌在功能性食品方面的应用也日益突显。陈键凯[13]把酵母锌添加到鲜奶中, 利用乳酸菌发酵制成富锌酸奶, 作为人体补锌的一种功能性食品。通过正交试验得出最优的原料配比: 鲜奶500 m L、菌剂3 m L、酵母锌5 g、奶粉6 g、糖30 g, 以及发酵参数: 发酵温度42. 5 ℃ 、发酵时间5 h、5 ℃后发酵48 h。俞晓红等[14]在30 ℃ 时将豌豆放入锌离子浓度分别为6 × 10- 4、7 × 10- 4、8 × 10- 4, p H值为5. 5 的硫酸锌溶液中, 经发芽糖化后添加富锌啤酒酵母菌, 研制出富锌豌豆啤酒。研究结果表明, 豌豆芽的浸泡液中硫酸锌含量为7 × 10- 4时, 可控制富锌啤酒的酵母增值倍数, 并使啤酒双乙酰和高级醇的含量适中, 所得的富锌啤酒也很符合现代清爽型啤酒风味的要求, 并且可以大大缩短发酵时间, 提高产率。

3 结语

富锌酵母的开发为人类提供了一个补锌的新思路。富锌酵母所提供的锌元素无论是在消化吸收还是生理转化效率方面都明显高于其他类的形式的锌。富锌酵母可以利用含有锌的废弃物, 可以把无机的无用锌转化成人体所必需的微量元素锌, 这不仅节约了资源, 而且改善了环境, 对可持续发展的政策来说是有深远的影响。富锌酵母的潜在应用价值很值得我们应用和研究。

摘要：富锌酵母又称酵母锌或者锌酵母, 是在酵母生长发育的过程中向酵母中加入无机锌从而得到富锌能力强的酵母菌株。作为一种补锌的安全原料, 富锌酵母在各个方面都有着广泛的应用, 把无用的含锌的废弃物利用起来不仅可以充分地节约资源, 而且是未来补锌的一种方向。本文主要就富锌酵母的研究进展进行简要综述。

酵母汤密码 第10篇

商晓娜

我這边愁云惨雾，可孔西西那边却是云开日朗。

说起来也奇怪，我和孔西西明明是一起参与把人变小变大的研究，现在我的学习成绩受到很大影响，直线下降，孔西西那家伙却仍然霸占我们班第一名的宝座。也就是因为這个原因，王老师对孔西西十分放心，完全放松了对孔西西的监视。

孔西西正希望這样，没有大人的监管，她恰好可以做自己想做的事情。

就在我被爸爸、妈妈严密监控起来的第一个周末，孔西西喝了一杯特制的酵母汤，把自己变成了二十来岁的模样。

一开始，我心里也充满了疑惑，为什么我变大的时候是四十多岁，而孔西西变大的时候，就是二十多岁呢？后来，还是孔西西在电话里帮我解开了谜团。孔西西说她发现喝一羹匙酵母汤可以长大一岁，喝两羹匙酵母汤就可以长大两岁，依此类推——孔西西和我今年都是十一岁，如果我们想变成二十岁的话，二十减十一等于九，我们就需要再喝进九羹匙酵母汤。上次我变成四十多岁，完全是因为酵母汤喝得太多，如果用羹匙来计量的话，差不多有三十多匙呢！

看吧，孔西西就是比我聪明！很多在我這里转不过弯的问题，到了她那里立即就能够迎刃而解了。

此刻，二十岁的孔西西就站在我家楼下，她梳着披肩发，穿了一条粉红色的吊带裙，脚上配了一双同样是粉红色的镶嵌着亮片的高跟鞋。我正打算把身子探出去和孔西西打个招呼，却不料被我爸爸拦腰抓了回来。

爸爸说：“孔东东，你要弄清楚這里是十七楼！哪有人像你這样把大半个身子探出窗外看热闹的！”

我撇撇嘴巴不说话，也不知道這个表情触动了爸爸的哪根神经，他竟然摸了摸我的头，叫我到楼下去活动活动。

我生怕爸爸说完了這句话之后又反悔，连忙蹬上鞋子，用最快的速度冲出了家门。电梯显示停在八楼，我可没工夫等它上来——我更担心等电梯的时候被爸爸喊回家去——我推开楼梯间的门，顺着楼梯往下跑。

从十七楼跑到一楼，也不知究竟迈了多少级楼梯，等我跑到孔西西面前时，早就流了一身的臭汗，连衣服领子都湿得透透的了！

本来，孔西西没有我长得高，可她现在“长大”了，一下子比我高出半个头。我看她时，还得稍微仰着脖子，把眼皮抬起来，這让我有些不习惯。而更不习惯的是，我突然发现二十岁的孔西西居然具备了“美女”的一切条件——忽闪忽闪的大眼睛，挺翘的小鼻子，朱红色的嘴唇……

我像个傻瓜一样盯着孔西西看，我真想跟她说点儿什么，可是你也知道我這个人，越到关键时刻越紧张，越紧张就越说不出话来。

我的傻样子逗得孔西西哈哈笑。最后，还是孔西西先开的口，孔西西说：“孔东东，我要去报名当环保志愿者，你去不去呀？”

我当然得去！我还没当过志愿者呢！过去，我只在报纸上看过、在广播里听过“志愿者”這三个字，我觉得能当上志愿者，为我们居住的這座城市尽一点儿微薄的力量，是特别光荣的一件事。

环保志愿者的报名处设在市政府广场的阅报栏附近，我和孔西西一起往那里走。孔西西现在的身高将近170厘米，我走在她身边，那感觉就像一个小弟弟跟在一位大姐姐旁边打转，别提有多别扭了！

孔西西這回倒是没怎么在乎我的想法，她穿着高跟鞋，得意扬扬地迈着大步往前走。真难为她能走得那么稳当，她甚至还不停地催促我再走快点儿。

我跟着孔西西的后脚跟，拐了两个弯，又过了一条宽马路，市政府广场就在眼前出现了。阅报栏在广场的西侧，那里已经聚集了不少报名当志愿者的人。

我撇下孔西西，一头扎进人群里，左钻右钻，好不容易才钻出个空，挤到报名的桌子前。

负责报名接待的是一位女士，看样子有二十七八岁，我正犹豫应该称呼她为阿姨还是姐姐。就在這时，紧随在我后面的孔西西十分响亮地喊了一声“大姐”，并且抢在我前面，从“大姐”手里拿到了一份报名表格。

孔西西举着她刚拿到的表格，特意在我眼前晃了两下，才闪出人群。

在孔西西面前，我当然不能示弱！我依葫芦画瓢，学着孔西西刚才的腔调，也喊了那位女士一声“大姐”，可是這回“大姐”却没买账，她抬起头来看了我一眼，说：“小朋友，你才多大？你应该叫我阿姨才对。”

阿姨就阿姨，我按照她的要求，又重新称呼她一次。不过，她已经开始接待其他来报名当志愿者的人了，过了好久才搭理我。阿姨问：“小朋友，你有什么事吗？”

听听吧，短短的时间内，她就叫了我两次“小朋友”，却把孔西西那家伙当大人看待。我心里不服气，可还是装成了一副乖孩子的模样，耐着性子，把要当志愿者的事情原原本本地给她说了一遍。

我以为交代得如此详细，阿姨准会发一张报名表格给我，可是没想到她却绷着脸说：“没有家长的陪同，我们可不能让一个小孩子参加环保志愿者的行动。”

我还想再求求情，可求情的话才说了半句，就被后面拥上来的人挤出了报名队伍。我心情沮丧地站在人群的最外围，却意外地发现孔西西并没有走远，她正搂着一摞刚领到的宣传单冲我招手。

孔西西对我说：“孔东东，你还是跟我走吧，现在就由我来担任你的家长。”

孔西西這家伙，真是想得美！尽管她现在变成了二十岁的模样，可真论起生日来，她还比我小两个月呢，我可不愿意让她来当我的家长。

我站在原地不动，孔西西只好往我這边走了几步，她竟然主动地把工作人员发给她的志愿者T恤衫套在了我身上，并且把她手里的宣传册分了一半给我。

孔西西说：“這回你总该同意让我来当家长了吧？”

我被孔西西這两颗“糖衣炮弹”轰炸得晕头转向。此时此刻，我只顾着欣赏身上穿着的這件绿色大T恤衫，还有阅读宣传册上的环保话题，哪还能分出精力去反驳孔西西呢？我除了傻里傻气地点头之外，再也没有其他动作了。

酵母谱写食品配料发展新篇章 第11篇

人类对酵母的应用起源于公元前3000年前古埃及人对发酵面包的制作, 而我国对酵母的应用始于酿酒行业和发酵面食。随着食品工业的发展, 我国对酵母特性有了更深入的研究, 如今酵母已被广泛应用于发酵、调味、烘焙、饲料、基因工程等多个领域。

神奇的酵母具有无穷的魅力, 食用酵母以其天然、健康、营养等特点成为食品企业首选的食品配料。而酵母提取物因具有普通调味料所不具备的特性 (为食品增鲜、增咸、缓和酸味、去除苦味) , 已成为目前可有效降低食品含盐量的最佳调味配料。随着人们对食品安全和健康的日益重视, 酵母及酵母抽提物在未来食品配料中将具有很大的发展潜力。本期添加剂配料栏目精心策划了“酵母谱写食品配料发展新篇章”专题, 邀请安琪酵母股份有限公司、大连兴和酵母有限公司以及对酵母有研究的学者为大家介绍酵母的发展及其应用趋势, 希望帮助更多企业了解酵母, 为食品配料的发展增添新的活力。