甲状腺组织范文

甲状腺组织范文（精选5篇）

甲状腺组织 第1篇

甲状腺呈薄薄的一层,位于甲状软骨下紧贴在气管第3、4软骨环前面,由两侧叶和峡部组成,成人平均质量20~25 g,女性略大、略重。甲状腺是人体合成甲状腺激素、维持机体代谢的重要腺体,尤其在神经系统代谢、生长和发育成熟中起重要的作用。碘是合成甲状腺激素必需的微量元素,对甲状腺激素的合成和释放起重要的调节作用。研究表明,位于甲状腺滤泡细胞基底膜侧的特异性钠/碘转运体(Na+/I-symporter,NIS)是介导甲状腺细胞摄取碘的重要媒介。适宜的碘摄入水平是保证甲状腺正常功能的重要条件,而碘缺乏或碘过量会通过影响甲状腺功能和形态引起甲状腺的各种疾病[1,2]。

影像检查是目前临床上检查甲状腺疾病的重要手段,常见的包括B超、CT、MRI、发射型计算机断层扫描仪、放射性核素显像及影像引导下的针刺活检技术等[3]。各种检查手段都具有各自的优势,但也存在很多弊端,例如,B超对操作医生要求高、依赖性大,且不能独立判断肿瘤的良性或恶性;MRI检查成本较高,不适合长期监测;影像引导下的针刺活检技术为有创检查;由于甲状腺本身对射线的高敏感性,又使得CT等依赖射线的检查技术受到限制[4]。加之人体合成甲状腺激素的碘主要来源于饮食,随意性较大,碘对甲状腺功能和形态的改变又需要长期过程,因此,需要一种检测碘致甲状腺功能改变的新技术。该技术最好既可以用于甲状腺功能和形态检查,又可以做到实时监测,同时还可以尽量减少或避免上述常规检查技术的不足,从而为碘摄入量的随时调整提供指导,减少碘致甲状腺疾病的发生。

介电特性是一种以多频、复阻抗测量为基础的生物组织测量技术,它根据生物组织复电阻抗中阻性和容性成分的值随着加载电信号的频率不同而发生显著变化的规律,来反映生物组织结构、功能改变等丰富信息[5,6]。Skourou等[7]认为电阻抗扫描技术在检测肿瘤方面优越于CT、B超等传统影像检测技术。另有文献[8]报道以色列Alexander等利用电阻抗扫描设备,对欲行甲状腺肿瘤切除的患者进行在体检查,临床结果表明该方法用于检测甲状腺肿瘤的准确率为76.6%,但文献中并未提供甲状腺相关组织的具体介电特性信息。本课题组前期开展的乳腺、肺等组织的研究也表明介电特性可以用于区分组织形态和功能的改变[9]。由于碘致甲状腺疾病在短时间内不一定直接引起肿瘤,早期往往表现为甲状腺功能改变,且碘过量和碘缺乏引起的功能改变有明显差异,因此,上述研究结果为介电特性用于检测碘致甲状腺功能改变提供了可能。课题组在山东省自然科学基金资助下正逐步开展碘致甲状腺疾病的介电特性研究,由于甲状腺病变组织的介电特性研究需要正常组织介电特性数据提供依据,因此课题组首先对甲状腺正常组织的介电特性进行了实验分析。

1 材料和方法

1.1 甲状腺正常组织的分离与测量

本研究数据来自行甲状腺肿瘤切除术的135例甲状腺病变患者,依据《人体生物医学研究国际伦理指南》均征得患者及家属同意。当样本刚离开人体,立即在医生的指导下分离远离癌中心的正常组织。为了最大限度保持组织活性,整个测量过程于手术室内完成,自组织离体至测量结束时间控制在10 min之内。另外,整个过程严格按照外科手术规范无菌操作,且组织温度、湿度与患者手术环境一致。

课题组在前期大量实验研究的基础上,建立了适合腺体器官离体活性组织测量的标准化实验平台,整套数据采集系统由数据测量盒、精密阻抗分析系统和温控装置等组成。其中,数据测量盒由课题组在仿真基础上设计而成,测量盒为圆柱形,直径5 mm,长15 mm,盒壁材料为有机玻璃。为适合四电极测量,在测量盒内距离中心5 mm两侧各嵌入环形银针状电极,环形一端伸出筒壁,作测量电极,直径5 mm的银圆片被安在圆柱形筒的两侧作激励电极。

Haemmerich等[10]研究表明生物组织低频阻抗信息更丰富,但Laufer等[11]认为低频阻抗易受电极极化的影响。综合考虑后我们课题组在10 Hz~1 MHz范围内采用Solartron1294和Solartron1260阻抗测量仪,通过四电极测量技术减小电极极化对测量结果的影响,而在40 Hz~100 MHz范围采用Agilent4294两电极测量技术。

测量结束将测量样本做好标记放入福尔马林固定液中固定,后经病理科石蜡包埋、组织切片、显微镜观察,给出组织学详细报告。以病理报告结果为依据从保存的实验数据中挑选出正常组织的实验结果,通过上述方法最终获得甲状腺正常组织样本95例。

1.2 系统可靠性评估

由于目前所测甲状腺组织阻抗值(Z)通常为300Ω<|Z|<10 kΩ,为评价其测量结果的可靠性,分别以300Ω、1 kΩ、2.6 kΩ、5 kΩ、10 kΩ、11.3 kΩ精密电阻(精度为1‰)为目标进行了测量,结果如图1所示。100 MHz范围内最大相位小于1.5°。

1.3 甲状腺正常组织介电特性分析

分别对已确定的95例样本进行介电特性分析。利用阻抗分析仪器可以直接给出所测量组织的电阻值(R)和电抗值(X),但R、X与测量样本的几何尺寸有关,所以实际测量中通常利用式(1)对所得测量结果进行转化。

其中,电导率σ(s/m)反映组织导电能力,S表示被测样本横截面积,L表示被测样本长度,Zre表示阻抗实部值,Zim表示阻抗虚部值。

阻抗虚部极大值对应的频率被称为特征频率,代表细胞外相和细胞膜相交界的介电弛豫过程,常可以区分不同组织或相同组织的病生理改变情况。为此,取L=1 cm、S=1 cm2,由式(2)~(4)求得组织的特征频率及阻抗虚部值。

其中,εr反映组织储存电荷的能力,ε0表示真空介电常数。

2 结果

2.1 甲状腺正常组织介电特性分析

甲状腺正常组织介电特性如图2所示。由图2(a)电导率结果可以看出,频率为1 k Hz之前,电导率基本不变,约为0.28 S/m。频率达到1 k Hz以后,随频率增加,甲状腺正常组织电导率显著增加,从0.28 S/m增加到0.8 S/m,表明甲状腺组织导电性较好。由图2(b)介电常数结果可以看出,介电常数从107(此时频率为10 Hz)开始,随频率增加而减小,当频率为100 MHz时,介电常数约为30。由图2(c)电阻率虚部结果可以看出,电阻率虚部在整个频率范围内表现为单峰样式,且随频率增大而先上升后下降,特征频率(顶点对应的频率值)两侧电阻率虚部值表现为明显不对称样式。特征频率左侧103Hz之前,虚部值上升缓慢,从103Hz到特征频率附近,虚部值上升速度加快。而在特征频率右侧,电阻率虚部先快速下降,大约从频率为106Hz开始,虚部值变化缓慢,此时电阻率虚部达到-25Ω·cm,至频率为107Hz虚部值又开始缓慢上升。由图2(d)电阻率实部结果可以看出,频率为103Hz之前,电阻率实部变化缓慢,位于400Ω·cm附近,从频率为103Hz开始,实部值迅速下降,但下降速度不一样,频率为103~105Hz时实部值下降速度明显快于频率为105Hz之后,当频率值为100 MHz时实部值降低到130Ω·cm。

2.2 统计分析和模型仿真

对甲状腺所有样本特征频率、频数分布进行统计,其特征频率的频数分布直方图如图3所示。其中横坐标采用10 Hz~100 MHz频率的对数形式进行表示。从图3可以看出,甲状腺组织的第一特征频率集中分布在104~105Hz,对应的电阻率虚部值为-38~-60Ω·cm(如图2(c)所示),靠近104Hz的占多数。另有部分样本,第一特征频率分布在105~106Hz。

利用Zsimpwin仿真软件对甲状腺正常组织电阻率实部和虚部数据进行仿真,甲状腺正常组织Cole曲线如图4所示,表现为一个完整的圆弧与一个半圆弧的组合。

3 讨论

甲状腺正常组织形态学显示,甲状腺实质主要由直径0.1~0.5 mm大小不等的圆形或椭圆形滤泡组成。滤泡由单层的滤泡上皮细胞围成,内部充满嗜酸性均质状胶质,即碘化的甲状腺球蛋白。滤泡有完整基膜,与周围结缔组织和丰富的有孔毛细血管隔开。

电导率是最基本的介电特性参数,反映了组织在电磁场中传导和储存电磁能量的能力。

目前实验结果表明,甲状腺正常组织的电导率在频率为1 k Hz之前基本不变,约为0.28 S/m。当频率为1 k Hz以后,随频率增加,甲状腺正常组织电导率增加显著,从0.28增加到0.8 S/m。根据散射弛豫理论,随频率变化,生物组织呈现4个主要的散射区,分别为α(10~103Hz)、β(103~107Hz)、δ(107~1010Hz)和γ(>1010Hz)散射区。说明甲状腺正常组织电导率特性改变主要发生在α散射区和β散射区。一般认为α散射区与细胞膜电位[12]、细胞连接缝隙[13]以及细胞膜周围相反离子的位移有关[14],而上述变化均可反映细胞膜内外的离子变化[15]。β散射区主要与细胞膜的电容效应及细胞膜表面的极化引起的Maxwell—Wagner效应有关。因此,可以推断频率为1 k Hz之前上皮细胞基膜完整,细胞内外无明显离子运动。而频率为1 k Hz以后,随频率增加,上皮细胞基膜发生Maxwell—Wagner效应,膜电容降低,滤泡腔内嗜酸性均质状胶质导电性增加,表现为电导率增加显著。

通过对甲状腺所有样本特征频率频数分布的统计发现,甲状腺组织的第一特征频率集中分布在104~105Hz。根据散射弛豫理论,该频率对应β散射区,主要与细胞膜的电容效应及细胞膜表面的极化引起的Maxwell—Wagner效应有关,这与频率为1 k Hz以后电导率随频率显著增加的结论一致。

甲状腺正常组织Cole曲线表现为一个完整的圆弧与一个半圆弧的组合,电阻率虚部绝对值从0升至最大值60Ω·cm,然后下降至25Ω·cm后再次出现上升趋势,与以往研究的乳腺、肺、肝脏等组织差异明显,能够较好地代表甲状腺组织的特征。上述研究结果表明介电特性能较好地反映甲状腺功能情况,这为介电特性用于检测碘致甲状腺功能改变提供了可能。本课题组将以此为基础在基金资助下继续开展后续研究。

摘要：目的 :研究甲状腺正常组织的介电特性,为电阻抗扫描技术用于检测碘致甲状腺疾病提供理论依据。方法 :从135例刚手术离体的甲状腺组织中分离正常组织95例,利用阻抗分析仪Solartron 1294、Solartron1260和Agilent4294测量组织10 Hz~100 MHz的介电特性,通过建立数学模型等手段获得甲状腺正常组织的电导率、阻抗虚部、Cole曲线等参数。结果:在所测频率范围内,甲状腺正常组织的介电特性反应良好,电导率为0.28~0.8 S/m,第一特征频率主要分布在104~105 Hz,该频率对应的虚部值为-38~-60Ω·cm。结论:介电特性可以反映甲状腺功能信息,提示电阻抗扫描技术有望用于碘致甲状腺疾病检测领域。

甲状腺组织 第2篇

关键词：甲状腺癌,甲状腺切除术,放射性131I:治疗

甲状腺癌是常见的内分泌肿瘤, 近年来发病率不断升高, 其中分化型甲状腺癌 (DTC) 占绝大多数。分化型甲状腺癌的治疗以甲状腺切除术+131I清甲治疗+优甲乐抑制治疗为标准治疗方案, 其中131I清甲治疗是重要的一个环节。本文作者综合近4年的甲状腺癌清甲治疗的病例, 对影响疗效的因素进行了分析探讨, 报道如下。

1 资料与方法

1.1 资料来源:

230例DTC住院手术患者, 行甲状腺切除术, 术后病理均为甲状腺癌, 病理分类:甲状腺乳头状癌212例, 滤泡状癌18例。男患者59例, 女患者171例。

1.2 方法:

患者术后不服用左甲状腺素片 (优甲乐) , 4~6周后行131I清甲治疗。治疗前禁忌高碘饮食、药物, 治疗前常规测定FT3、FT4、TSH、TG、TG-AB、颈部彩超, 按照非高危组DTC患者给予131碘1.8~3.7 GBq (50~100 mci) , 中高危患者给予131I 3.7~5.55 GBq (100~150 mci) , 口服碘 (131I) 化钠溶液由北京原子高科股份有限公司生产。治疗后7 d行131I全身显像。

甲状腺摄碘率测定:空腹口服131I溶液185KBq (5uci) 后测定24 h摄碘率, 检测仪器使用北京核仪器生产的FH458B甲功仪。清甲治疗成功的标准:第1、6个月后第2次131I治疗前行甲状腺吸碘率测定<1%, 第2个月、第2次131I治疗后131I全身显像甲状腺部位不显影。

1.3 统计学处理:

采用SPSS16.0软件进行数据处理, 单因素分析进行χ2检验, 多因素采用logistich回归分析, 以P<0.05作为有统计学意义。

2 结果

2.1 清甲治疗疗效:

230例DTC的患者, 一次清甲治疗成功140例, 成功率为60%, 未成功者为90例, 占比例为40%。

2.2 影响清甲治疗的因素:

通过分析得出结论, 手术方式、残余甲状腺大小是131I清甲治疗的有效影响因素, 而年龄、性别、治疗前Tg水平、有无淋巴结及远处转移对首次清甲治疗没有影响。

2.3 清甲治疗效果与甲状腺手术方式之间的关系:

将DTC患者手术方式分为全切组、次全切组、甲状腺腺叶+峡部切除组, 发现全切组明显高于另外两组, P<0.05, 见表1。

2.4 清甲治疗效果与剩余甲状腺质量之间的关系:

按残余甲状腺质量将病例分为4组, 发现残留甲状腺越小, 清甲成功率越高, 差异具有统计学意义, P<0.05。见表2。

3 讨论

甲状腺癌中90%以上是分化型甲状腺癌 (DTC) , 目前对本病的规范治疗方案为外科手术切除+术后131I清甲治疗+优甲乐TSH抑制治疗。DTC恶性程度较低, 如规范治疗, 能大大延长患者生存期, 甚至不影响其寿命。甲状腺术后的131I清甲治疗是一个重要的环节。国内外对清甲治疗的成功率报道不一。刘晔[1]等报道清甲成功率为43%, 陈永辉[2]等报道成功率为63%, Verburg等报道清甲成功率为56.6%。本研究共230例DTC的患者, 一次清甲治疗成功140例, 成功率为60%, 与陈永辉、Verburg的报道相似, 高于刘晔的报道。

术后131I清甲治疗的意义在于: (1) 术后残留甲状腺组织被131I杀灭后, 去除了甲状腺球蛋白 (Tg) 的正常来源, 有利于通过血清Tg和131I全身显像 (wholebodyscan, WBS) 监测疾病进展。 (2) 有利于进行下一步的131I清灶治疗。 (3) 治疗隐匿的DTC微小病灶。

影像131I清甲治疗的因素有很多, 国内外报道不一。有研究认为131I清甲治疗效果与性别、年龄、病理类型无关, 本研究也证明了这一点。本研究发现甲状腺术式是影响131I清甲治疗的独立影响因素, 目前的甲状腺术式有全切、次全切、甲状腺腺叶+峡部切除, 其中甲状腺全切组清甲治疗效果较好, 而次全切术后DTC患者清甲成功率大大降低, 腺叶加峡部切除术患者首次清甲无一例成功。甲状腺手术全切难度较大, 如果甲状腺浸润至周围组织, 为了保护喉返神经、血管、甲状旁腺, 则造成手术切除不够彻底, 则甲状腺清甲治疗效果受到影响。

剩余甲状腺质量在本次研究中也是影响131I清甲治疗的独立影响因素, 甲状腺术后剩余甲状腺的质量测算是一个难题。本研究中术后质量测算采用SPECT甲状腺核素显像联合甲状腺彩超来确定, 力求准确。观察发现, 剩余甲状腺质量越小, 则清甲成功率越高, <1 g的DTC病例成功率为91.9%, 而>8 g的甲状腺清甲治疗成功率为0。剩余甲状腺质量与甲状腺术式有一定关系, 甲状腺全切与近全切组剩余甲状腺较小, 则清甲治疗成功率也高。

关于131I治疗剂量对清甲治疗的影响, 傅宏亮、敬兴果等认为131I剂量越大, 则清甲治疗效果越好。而陈永辉、Fish SA等认为清甲治疗效果与131I剂量无关, 1850 MBq与3700 MBq具有相同的疗效, 本研究结果与此基本一致。131I治疗剂量并不是影响清甲疗效的独立因素, 虽然在单因素分析中不同治疗量组清甲疗效差异有统计学意义, 这可能与入选本研究的患者有部分甲状腺次全切除、甲状腺腺叶+峡部切除组, 剩余甲状腺较大有关。但是在多因素分析中131I治疗剂量被排除。

综上所述, 笔者认为手术方式、残余甲状腺大小是影响清甲治疗的重要因素。外科大夫在DTC患者的术式选择上, 应尽量选择全切或近全切术, 尽可能的切除甲状腺组织, 以方便术后131I清甲治疗。

参考文献

[1]刘晔, 晋建华, 刘建中, 等.放射性131I去除分化型甲状腺癌术后残留甲状腺组织的疗效与影响因素分析[J].中国药物与临床, 2013, 13 (5) :556.

甲状腺组织 第3篇

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2002年1月～2005年12月福建医科大学附属泉州第一医院术后病理确诊的86例PTC病例(术前患者均未接受放疗或化疗),男21例,女65例,年龄18～86岁,平均38岁,中位年龄33岁,其中伴有颈部淋巴结癌转移者40例。所有患者的术后切除标本均经10%中性福尔马林固定10～12 h后取材,由全自动脱水机脱水、透明、浸蜡,然后石蜡包埋制成蜡块,对照HE切片随机挑取含有较为丰富癌组织的PTC原发与淋巴结转移癌灶的蜡块连续切片,待免疫组化染色备用。

1.2 方法

采用S-P免疫组化法染色。一抗鼠抗人即用型抗体MMP2(克隆号:42-5D11)、一抗兔抗人即用型抗体TIMP2、通用型Ultrasensitive S-P试剂盒及DAB显色试剂盒均购自福州迈新生物技术公司。用PBS缓冲液代替一抗做阴性对照,用已知阳性组织切片做阳性对照,严格按试剂盒说明书进行操作。

1.3 结果判断

MMP2和TIMP2的阳性信号定位于细胞浆,以细胞浆内出现棕黄色颗粒沉着为阳性染色。由两位高年资病理医师采用双盲法对PTC原发和颈部淋巴结转移癌灶的免疫组化染色切片进行观察,每张切片随机选取10个高倍视野(×400),按照相关文献所载的双评分半定量法[1,2],根据细胞浆的染色程度及阳性细胞百分率进行评分:细胞无染色为0分,浅棕黄色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分;阳性细胞占全部癌细胞百分率≤5%为0分,6%～25%为1分,26%～50%为2分,51%～75%为3分,>75%为4分,将每张切片着色程度得分与阳性细胞百分率得分各自相乘之积为其最后得分,0分为(-),1～4分为(+),5～8分为(++),9～12分为(+++)。

1.4 统计学方法

用SPSS 11.5软件包对数据进行统计学分析,采用非参数秩和检验Mann-Whitney方法和配对符号秩和检验Wilcoxon方法,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 甲状腺乳头状癌原发灶中基质金属蛋白酶-2、组织金属蛋白酶抑制剂-2蛋白表达强度的比较

MMP2以PTC的浸润前缘处的表达尤为明显,而且MMP2在PTC的纤维脉管性乳头间质中的纤维母细胞、吞噬细胞出现阳性表达。伴有颈部淋巴结转移的PTC原发灶中MMP2的表达强度高于无淋巴结转移者(Z=-4.416),而前者TIMP2的表达强度低于后者(Z=-4.823),两者的差异均有统计学意义(P<0.05),见表1。

(例)

2.2 甲状腺乳头状癌原发灶和转移灶中基质金属蛋白酶-2、组织金属蛋白酶抑制剂-2蛋白表达强度的比较

PTC原发灶中MMP2的表达强度高于转移灶(Z=-2.481,P<0.05),而TIMP2在原发灶与转移灶中表达强度的差异无具统计学意义(Z=-1.713,P>0.05),见表2。

(例)

2.3 甲状腺乳头状癌原发灶和转移灶中基质金属蛋白酶-2、组织金属蛋白酶抑制剂-2蛋白的自身对照

MMP2在同一例PTC原发灶的表达强度高于转移灶者有1例,等于转移灶者有21例,低于转移灶者有18例;TIMP2在同一例PTC原发灶的表达强度高于转移灶者有10例,等于转移灶者有30例,低于转移灶者0例,MMP2和TIMP2在同一PTC病例的原发灶和转移灶中对比表达的强度差异均有统计学意义(Z=-3.295,P<0.05;Z=-3.162,P<0.05)。

3 讨论

肿瘤的转移与蛋白酶有关,尤其是肿瘤细胞分泌的基质金属蛋白酶(matrix metal-proteinases,MMPs),组织金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs)能特异性与激活状态的MMPs以1∶1克分子比例发生非共价键稳定结合,使MMPs失去活性,因此目前认为MMP/TIMP的平衡是维持细胞外基质内环境稳定的重要因素[3,4]。在这些MMPs成员中,MMP2又称“明胶酶A”,是Ⅳ型胶原酶中的一种,是在肿瘤侵袭转移过程中最直接和最重要的基质金属蛋白酶,TIMP2可特异性结合MMP2,阻止酶原的活化及其与细胞表面接触,从而抑制MMP2降解基底膜的活性[5,6]。甲状腺癌是肿瘤外科的常见病,近年来其发病率有上升趋势,且发病年龄趋向年轻化[7],PTC是甲状腺癌中最常见的类型,其具有强烈的早期淋巴结转移倾向,约有1/2患者初诊时伴有颈部淋巴结肿大,很多临床检查淋巴结阴性的患者其实已存在淋巴结转移。本实验旨在分析MMP2、TIMP2在PTC原发灶及淋巴结转移灶中的表达对比状况,探讨它们与PTC颈部淋巴结转移的关系。

本研究结果发现在86例PTC癌组织以及其中40例颈部淋巴结转移癌灶中,有转移组MMP2的表达显著高于无转移组,而转移组的TIMP2的表达显著低于无转移组,其差异均有统计学意义,这提示了PTC癌组织中的MMP2/TIMP2比例失衡,破坏了细胞外基质内环境的稳态,促发了基质的降解过程,从而使PTC容易发生转移。此外,MMP2以PTC的浸润前缘处的表达尤为明显,这说明MMP2的表达与PTC的浸润有关,而且MMP2在PTC的纤维脉管性乳头间质中的纤维母细胞、吞噬细胞出现阳性表达,究其原因这可能是肿瘤细胞通过可溶性介质或膜结合分子与间质细胞进行信息交换,协同产生和调节MMP2,以有利于肿瘤细胞的浸润与转移[8]。

从MMP2和TIMP2在PTC原发灶和转移灶中对比表达情况的这个角度进行分析,结果得知:PTC转移灶中MMP2的表达强度显著高于原发灶,而TIMP2在原发灶与转移灶中表达强度的差异无统计学意义,但是两者在同一PTC病例的原发灶和转移灶中表达强度自身对比的差异均有统计学意义。这说明MMP2在PTC转移灶中表达增强,而且可能是在MMP2/TIMP2平衡失调中起着主导作用,由此推测癌组织中的部分癌细胞分子表型发生了改变,它们可能是独立的亚克隆,这种癌细胞胞浆具有高MMP2/TIMP2比例的蛋白组成,使得这种PTC癌细胞的转移侵袭力增强,这或许是PTC容易发生早期淋巴结转移的助推因素之一。

影响PTC颈部淋巴结转移的因素很多,其中与多种分子的表达异常有关,对比研究转移灶和原发灶的癌细胞的分子表型,有助于发现具有高转移能力的癌细胞亚克隆。综上所述,PTC癌组织中的MMP2/TIMP2表达比例失衡,可能是导致PTC淋巴结转移的因素之一,高MMP2/TIMP2比例蛋白组成的PTC癌细胞亚克隆在其中起着主导作用,这也许将对PTC针对性的基因干预治疗有启迪作用。

参考文献

[1]王婷,江昌新,李颖,等.基质金属蛋白酶-9、金属蛋白酶组织抑制因子-1、血管内皮生长因子和转化生长因子β-1在甲状腺乳头状癌和滤泡癌的表达及意义[J].中华病理学杂志,2009,38(12):824-828.

[2]陈罡,罗殿中,王云,等.肝细胞癌中DcR3表达与癌细胞凋亡的关系研究[J].中华病理学杂志,2007,36(2):113-117.

[3]Voland P,Besig S,Rad R,et al.Correlation of matrix metalloproteinasesand tissue inhibitors of matrixmetalloproteinase expression in ileal carci-noids,lymph nodes and liver metastasis with prognosis and survival[J].Neuroendocrinology,2009,89(1):66-78.

[4]Giannopoulos G,Pavlakis K,Parasi A,et al.The expression of matrixmetalloproteinases-2 and-9 and their tissue inhibitor 2 in pancreaticductal and ampullary carcinoma and their relation to angiogenesis andclinicopathological parameters[J].Anticancer Res,2008,28(3B):1875-1881.

[5]Alakus H,Grass G,Hennecken JK,et al.Clinicopathological signifi-cance of MMP-2 and its specific inhibitor TIMP-2 in gastric cancer[J].Histol Histopathol,2008,23(8):917-923.

[6]O'Grady A,Dunne C,O'Kelly P,et al.Differential expression of matrixmetalloproteinase(MMP)-2,MMP-9 and tissue inhibitor of metallopro-teinase(TIMP)-1 and TIMP-2 in non-melanoma skin cancer:implica-tions for tumour progression[J].Histopathology,2007,51(6):793-804.

[7]崔海东,贾忠,蔡阳,等.甲状腺癌146例临床分析[J].医学研究杂志,2008,37(1):71-73.

甲状腺组织 第4篇

关键词：甲状腺肿瘤,超声检查,多普勒,彩色,病理学,外科,肿瘤分期

近10年来,甲状腺癌发病人数呈上升趋势[1],随着高频超声的广泛应用,甲状腺肿瘤的超声检查已成为临床医师采用重要检查手段。本研究通过分析超声疑诊为甲状腺癌的125例患者的声像特点,探讨超声对甲状腺癌临床分期的价值,旨在提高甲状腺癌的识别和诊断准确率,以帮助临床治疗。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2010-08-01~12-01在上海市复旦大学附属肿瘤医院和焦作市第二人民医院行甲状腺病变切除活检术的超声诊断可疑甲状腺癌的125例患者为研究对象,术后病理证实122例为甲状腺癌。

1.2 仪器与方法

采用Philips IU 22彩色超声诊断仪和GE 730彩色超声诊断仪,7.5~10MHz的宽高变频探头。选择一起预设的甲状腺检查条件,根据病灶的具体情况调整深度、增益、聚焦部位,使图像最佳。患者取仰卧位并垫高颈肩部,充分暴露颈前区,由超声科有经验的医师检查甲状腺,发现病灶后,分别采用纵切、横切及多层断面仔细观察病灶的大小、位置、数目、类型、内部回声及病灶内彩色血流情况,记录各项超声征象,输入数据库。

1.3 判断标准

恶性肿块的超声声像[2]定义:肿块多为低回声;肿瘤边缘不规则;微钙化;彩色血流;肿瘤前后径和横径比(anterposterior and transverse diameter ritio,A/T)>1。

病灶内彩色血流判定标准采用梁建平等[3]的半定量方法进行血流分级评价。0级:无血流信号,结节内部测不到血流信号,或仅能测到星点状血流信号;Ⅰ级:少量血流信号,结节内部短棒状彩色血流信号;Ⅱ级:中量血流,肿块内部血流粗大、杂乱,呈树叉状。

2 结果

2.1 甲状腺癌的病理类型

根据超声声像诊断为甲状腺癌的125例中,122例经术后病理诊断正确,其中甲状腺乳头状癌(thyroid papillary carcinoma,TPC)96例(78.7%),滤泡状癌12例(9.8%),未分化癌9例(7.4%),髓样癌5例(4.1%)。

2.2 不同病理类型的声像特点与临床分期

2.2.1 声像特点

根据声像判断为甲状腺恶性结节的病变中,96例TPC声像显示不规则低回声结节,89例伴微钙化,15例粗大钙化,69例A/T≥1,71例合并颈部淋巴结转移,1例甲状腺散在混合回声团块并散在钙化,术后证实为弥漫性硬化性乳头状癌;12例滤泡癌表现为单发、圆形低回声,边缘全部或区域性模糊,包膜不完整,全部A/T<1,9例内部无明显钙化,3例有粗大钙化,2例有肺部转移;5例髓样癌表现为不规则低回声,4例内部有致密粗大钙化,1例有骨转移;9例未分化癌表现为生长迅速伴有液化的不规则低回声,2例肿块较大者有钙化,3例有远处转移(表1)。所有恶性肿块血流信号以Ⅱ级为主,除外少数直径<10mm的微小肿块。

2.2.2 TNM分期

经病理诊断证实的122例甲状腺癌,Ⅰ期35.5%(43/122),Ⅱ期43.3%(53/122),Ⅲ期6.7%(8/122),Ⅳ期14.5%(18/122)。

注:T1:原发肿瘤<2cm,局限于甲状腺内;T2:原发肿瘤2~4cm,局限于甲状腺内;T3:肿瘤>4cm,或肿瘤<4cm但有轻度甲状腺外侵犯,如侵犯胸骨甲状肌;T4a:肿瘤侵犯皮下组织、气管、食管或喉返神经;T4b:肿瘤侵犯椎前筋膜或包住颈血管。N0:组织学或临床检查未见淋巴结转移;N1a:转移到第Ⅵ组(气管旁、气管前和喉前);N1b:转移到单侧、双侧,对侧或纵膈淋巴结。M0:无远处淋巴结转移,M1:远处转移

3 讨论

目前使用的高频超声检查技术在空间、对比、速度等的分辨力均超过CT和MRI技术,可以显示甲状腺细微的信息,包括解剖结构、血流动力学和循环灌注等,能发现1~2mm大小的微小结节,显示结节内砂粒样钙化斑,发现和区别甲状腺周围软组织和淋巴结的性质[4]。

3.1 不同病理类型甲状腺癌的超声声像特点

3.1.1 TPC

甲状腺癌最多见。镜下可见其呈乳头状生长,间质有较多的纤维和血管,常可见砂粒体和粗糙颗粒状的不规则钙盐沉积[5],即为超声图像中的微小钙化。因此,微小钙化对TPC的诊断具有十分重要的意义。本组96例TPC患者中92.7%(89/96)结节内有点状、簇状砂粒样钙化灶,与文献[6]报道符合。声像图上A/T≥1是诊断TPC特异度较高的指标[7]。本组患者71.9%(69/96)肿块A/T≥1,声像特点与文献[8]报道相符。弥漫性硬化型乳头状癌是一种罕见变型[9],组织学表现为腺体广泛纤维化、鳞状上皮化生、严重淋巴细胞浸润和多发砂粒体;声像表现为甲状腺弥漫性散在微钙化,由于此型TPC颈部淋巴结转移发生率很高,因此,结合颈部淋巴结扫查更有利于乳头状癌的诊断。

3.1.2 滤泡状癌

滤泡状癌与滤泡状腺瘤声像特征基本相似,形态上趋于扁平状椭圆形,平行于组织平面生长,本组12例肿块A/T<1。有2例患者首先发现肺部转移,进一步检查发现甲状腺肿块。由于癌细胞不均匀浸润生长,生长速度快,78%的滤泡状癌局部或全部边缘呈微小分叶或不规则,可以与滤泡状腺癌腺瘤相鉴别[10]。与乳头状癌相比,滤泡状腺癌淋巴结转移较少见,肺转移、骨转移常见。本组12例患者肿块大体呈类圆形结节,仔细观察均可见局部有微小分叶,分叶处边缘毛糙,与周边组织粘连;彩色多普勒显示内部血流分布杂乱,因此超声提示甲状腺癌。彩色多普勒超声对滤泡状癌和滤泡状腺瘤的鉴别诊断可以提供有益信息,Miyakawa等[11]观察到80%的滤泡状癌表现为以结节中央血管为主型的血供,而84%的滤泡状腺瘤表现为以肿瘤边缘血管为主型的血供。本研究纳入样本数少,未对血供类型进行详细分类,有待于进一步研究。

3.1.3 髓样癌

声像特点为无明显包膜低回声肿块,肿块内钙化,肿块无声晕。这3项特征结合诊断髓样癌的敏感度为89%,特异度≥90%。髓样癌淋巴结转移率很高,并且转移淋巴结内可见点状钙化,有利于甲状腺髓样癌的超声诊断[12]。本组9例髓样癌患者肿块边界表现为相对清晰的低回声肿块,边缘不规则,内部多有致密钙化;7例出现颈部淋巴结肿大;5例转移性淋巴结内也出现点状钙化。因此临床工作中,可疑髓样癌病例应进行降钙素检测。

3.1.4 甲状腺未分化癌

是恶性程度最高的组织类型。声像表现为边界不清的不均匀团块,常累及整个腺叶或腺体,有坏死区,常见于有原发性甲状腺疾病的患者。本组5例未分化癌中,3例以颈部迅速增大的肿块就诊;1例声像表现为肿块占据整个甲状腺腺体,内部伴有无回声及不规则强回声钙化;2例以转移灶出现临床症状来诊,穿刺结果提示未分化癌。2002年美国癌期划分联合委员会(American Joint Commission for Cancer Staging,AJCC)甲状腺癌TNM分期将未分化癌不论原发灶大小均归为Ⅳ期,以对临床治疗提供诊断依据。3.2彩色多普勒超声对甲状腺癌的诊断价值彩色多普勒超声鉴别病灶良、恶性是基于二者的血流差异,良性病灶血供是依赖于已存在的血液供应,以0、Ⅰ级周边点状、环状血流信号出现;大多数恶性肿瘤受血管生成因子的刺激,在局部形成丰富的血管网,随着肿瘤的生长,血管数量不断增加,在一些较大的癌块内血流极丰富,血管粗大,走形杂乱,收缩期最高峰值流速(Vmax)、阻力指数(RI)均明显高于良性病灶。另一方面,在极少数良性结节内部也有丰富的血流信号;极少量恶性肿瘤中也可存在少量血流信号。因此,彩色多普勒血流显像能客观地反映大多数甲状腺良、恶性结节的特性。

3.3 彩色多普勒超声在甲状腺癌临床分期中的价值

颈部淋巴结转移往往是甲状腺癌最早出现的临床表现,并且甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移常出现特征性的液化坏死和点状钙化,有助于甲状腺乳头状癌的诊断[13]。根据AJCC的分期标准,甲状腺原发肿瘤的T分期主要依据肿瘤的大小和肿瘤对甲状腺周围组织及颈部结构的侵犯情况,超声可以通过对肿瘤大小的测量以及对甲状腺包膜和颈部软组织、肌肉、血管、气管及食管的评估初步进行肿瘤分期。Shimamoto等[14]报道,通过超声可使81.8%的患者术前获得准确的T分期。AJCC的N分期中的N0是甲状腺癌未出现区域淋巴结转移,如果发生了淋巴结转移,则属于N1。其中N1a指累及气管前、气管旁和喉前等Ⅳ区淋巴结;N1b通常指累及双侧和对侧颈侧区淋巴结。尽管敏感度不高,但是超声无疑仍是评价甲状腺癌颈部淋巴结的最佳影像学手段。

甲状腺组织 第5篇

1 材料

1. 1 实验动物90 只裸鼠 ( BALB /C) , 体重18 ~ 20g, 购于中山大学动物实验中心, 许可证号: SCXK ( 粤) 2011 -0029。SPF级, 雄性, 饲养于中山大学动物实验室, 按中山大学实验动物伦理委员会批准的方案进行实验。

1. 2 细胞系甲状腺癌细胞: 选用NIH3T3HOOK3 － ＲET所构建的稳定细胞株, 由中山大学附属第五医院甲状腺专科研究小组惠赠。

1. 3 主要药品及试剂黄芪注射液: 成都地奥九泓制药厂生成, 批号:0904089。HIF -1α 单克隆抗体、鼠抗人单克隆抗体D2 - 40、DAB显色试剂盒、生物素标记抗小鼠IgG、PV9000 检测试剂盒: 均购自北京中杉金桥生物技术公司。

2 实验方法

2. 1 造模方法参考孙辉等［5］甲状腺肿瘤祼鼠皮下移植模型的建立方法。培养液采用含10% 胎牛血清的WE培养液。NIH3T3HOOK3 － ＲET细胞接种于25mL培养瓶内, 置37℃、5% CO2孵箱内培养, 时间为6 ~7 天, 待细胞长满瓶底时, 以0. 25% 胰酶进行消化、离心, 单细胞悬液用PBS液制成, 调整细胞浓度为2 ×107·mL－ 1。于裸鼠颈背部皮下注射细胞悬液100μL。每2 天称量裸鼠体重, 测量使用精密卡尺, 肿瘤体积按公式 ( 体积=π/6 ×长径 ×短径2) 计算。

2. 2 动物分组将90 只裸鼠随机分为3 组, 每组30 只, 即正常对照组、模型组和黄芪注射液组。模型组于造模后第2天腹腔注射生理盐水 ( 5.0mL/kg) , 黄芪组腹腔注射黄芪注射液 ( 5.0mL/kg) , 正常对照组未造模, 同样方法腹腔注射生理盐水 ( 5.0mL/kg) , 每天1 次, 连续7 天。

2. 3 观察指标测定第8 天将裸鼠称重后用10% 水合氯醛 ( 0.4mL/100g体重) 腹腔麻醉, 模型组与黄芪组处死后完整切除肿瘤, 正常对照组切除相应部位组织。

2. 3. 1微淋巴管密度测定免疫组化Envision法进行D2- 40 标记。以40g /L甲醛溶液将标本固定, 脱水包埋, 免疫组化Envision法二步法染色。染色程序严格按照试剂盒规程要求进行, 严格按照说明书操作。MLVD计数: MLVD计数以及D2 -40 阳性标准参照本研究组吕宝军等［6］方法, 高倍镜下测量窗面积为0.906mm2, 选取4 个视野内的微淋巴管数, 取其平均数作为该肿瘤的MLVD值。

2. 3. 2 HIF - 1α 表达的测定免疫组化Envision法。同样以40g/L甲醛溶液将标本固定, 脱水包埋, 免疫组化Envision法二步法染色。HIF -1α 蛋白以细胞核内有棕黄色颗粒为阳性。

2. 4 统计学分析使用SPSS16. 0 统计软件进行数据分析。计量资料采用t检验; 计数资料采用 χ2检验。

3 结果见表1。

与正常组比较*P<0.05, **P<0.01;与模型组比较△P<0.05

4 讨论

HIF - 1α 作为在缺氧环境下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种蛋白性调节因子, 近年来受到广泛关注。研究表明, 它可以诱导血管内皮生长因子的表达, 促进血管生成, 在肿瘤的产生到凋亡以及浸润、转移的整个过程均起着十分重要的作用。HIF -1 由 α 和 β 两个亚基组成, 其中HIF -1α为HIF -1 的特异亚单位, 受氧调节。HIF -1α 在缺氧时可调节VEGF的信号传导途径, 能够增加VEGF的转录活性［7］。目前的研究表明, HIF -1α 过度表达对结直肠癌的肿瘤血管有重要影响, 对肿瘤血管的生成以及肿瘤的浸润转移起重要作用［8 －9］。

淋巴转移是肿瘤远处转移的重要途径之一, 由于缺乏特异性的淋巴管标记物, 淋巴道转移机制的研究相比血循环转移机制的研究要滞后。而在最近的研究中, D2 -40 的发现主要是从唾液酸糖蛋白的研究开始, M2A仅存在于淋巴管内皮细胞, 能够被D2 -40 特异性地结合, 从而使研究人员认识到, D2 -40 可以作为淋巴管内皮细胞标记物研究淋巴管生成和肿瘤转移之间的关系［10 －11］。

黄芪味甘, 性微温, 归肝、脾、肺、肾经, 具有益气固表、敛汗固脱、托疮生肌、利水消肿之功效。研究发现, 黄芪使红细胞C3b受体活性增加, 并对辅助T细胞有一定的刺激作用, 可以使免疫黏附功能增强, 黄芪注射液用于体外培养的人鳞癌细胞株的裸鼠移植瘤模型, 裸鼠脾细胞密度和NK细胞活性均明显提高［12］。因此笔者在前期对分化型甲状腺癌微淋巴管密度与HIF -1α 研究的基础上, 探讨黄芪注射液对分化型甲状腺癌微淋巴管密度与HIF -1α 的影响。

本实验应用免疫组织化学方法, 利用D2 -40 这种特异性淋巴管内皮标记物, 进行分化型甲状腺癌组织MLVD以及HIF -1α 在分化型甲状腺癌中表达情况的研究, 分析3 组MLVD和HIF - 1α 表达的相关性, 结果表明, 模型组与黄芪组组织中MLVD的表达水平与HIF -1α 阳性率均较正常对照组明显增加 ( P <0.05) , 与模型组相比, 黄芪组分化型甲状腺癌中MLVD的表达水平与HIF -1α 阳性率降低, 有统计学差异 ( P <0.05) , 表明黄芪注射液可明显降低分化型甲状腺癌中MLVD的表达水平与HIF -1α 阳性率。结合本研究组前期研究中发现, MLVD和HIF -1α 在分化型甲状腺癌组织中的表达具有正相关性［6］, 提示黄芪注射液对淋巴管的形成可能有一定的抑制作用, 可能对分化型甲状腺癌的淋巴转移也有抑制功能, 其具体机制尚待进一步研究。

参考文献

[1]Peix J L, Lifante J C, Borson C F, et al.Prophylactic thyroidectomy in medullary thyroid cancer.Bull Acad Natl Med, 2012, 196 (7) :1247.

[2]Zhou J, Zhang S, Xue J, et al.Activation of peroxisome proliferator-activated receptor alpha (PPARalpha) suppresses hypoxia-inducible factor-1alpha (HIF-1alpha) signaling in cancer cells.J Biol Chem, 2012, 287 (42) :35161.

[3]Cui H, Grosso S, Schelter F, et al.On the pro-metastatic stress response to cancer therapies:evidence for a positive cooperation between TIMP-1, HIF-1alpha, and miR-210.Front Pharmacol, 2012, 3:134.

[4]黄智芬, 刘俊波, 黄常江, 等.黄芪注射液配合西药治疗肿瘤化疗后血小板减少症30例.中国中医药科技, 2010, 17 (1) :21.

[5]孙辉, 王金国, 付言涛, 等.人甲状腺未分化癌细胞裸鼠皮下移植模型的建立.吉林大学学报:医学版, 2003, 29 (4) :457.

[6]吕宝军, 侯冰宗, 苟新敏, 等.分化型甲状腺癌中微淋巴管密度与缺氧诱导因子-1α表达的相关性.中华临床医师杂志:电子版, 2011, 5 (16) :4661.

[7]Riddell J R, Maier P, Sass S N, et al.Peroxiredoxin 1 stimulates endothelial cell expression of VEGF via TLR4 dependent activation of HIF-1alpha.Plos One, 2012, 7 (11) :e50394.

[8]Zhdanov A V, Dmitriev R I, Papkovsky D B.Bafilomycin A1 activates HIF-dependent signalling in human colon cancer cells via mitochondrial uncoupling.Biosci Rep, 2012, 32 (6) :587.

[9]Huang Y, Fang W, Wang Y, et al.Transforming growth factor-beta1 induces glutathione peroxidase-1 and protects from H2O2-induced cell death in colon cancer cells via the Smad2/ERK1/2/HIF-1alpha pathway.Int J Mol Med, 2012, 29 (5) :906.

[10]Weber S K, Sauerwald A, Polcher M, et al.Detection of lymphovascular invasion by D2-40 (podoplanin) immunoexpression in endometrial cancer.Int J Gynecol Cancer, 2012, 22 (8) :1442.

[11]Wada H, Shiozawa M, Sugano N, et al.Lymphatic invasion identified with D2-40 immunostaining as a risk factor of nodal metastasis in T1 colorectal cancer.Int J Clin Oncol, 2012, 29 (3) :710.