核酸检测试剂盒简介
核酸检测试剂盒简介(精选6篇)
核酸检测试剂盒简介 第1篇
乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒
样本要求
1.适用标本类型:血清或血浆 2.标本采集
1)血清:用一次性无菌注射器抽取受检者静脉血2毫升,注入无菌的干燥玻璃管,室温放置30—60min,血标本可自发完全凝集析出血清,或直接使用水平离心机,1500 rpm离心5分钟,吸取上层血清,转移至1.5ml灭菌离心管
2)血浆:用一次性无菌注射器抽取受检者静脉血2毫升,注入含EDTA-2K或枸橼酸钠的玻璃管,立即颠倒玻璃管混合5—10次,使抗凝剂和静脉血充分混匀,5—10分钟后即可分离血浆,转移至1.5 ml灭菌离心管
3.标本保存与运送:所采集的标本可立即用于测试,也可以保存在—20℃待测,保存期为6个月,标本运送采用0℃冰壶。检验方法
1.DNA提取(样品制备区)
将待测样本、阳性定量参考品、阴性质控品、HBV 强阳性质控品、HBV临界阳性质控品进行同步处理。1)取200μl样品,加入450μlDNA提取液I和4μl的内标溶液,用振荡器剧烈混匀15秒,瞬时离心数秒。100℃恒温处理10±1分钟 2)12000rpm离心5分钟,备用 2.PCR试剂准备(试剂准备区)直接使用HBV-PCR反应管 3.加样(样品制备区)
往上述HBV反应管中用带滤芯吸嘴分别加入待测样本、阴性质控品、HBV 强阳性质控品、HBV临界阳性质控品和阳性定量参考品的上清液各20μl。盖紧管盖,8000rpm离心数秒后转移至扩增检测区。
4.PCR扩增(扩增和产物分析区)5.结果分析
反应结束后自动保存结果,根据分析后的图像调节baseline值得Start值、End值以及Threshold值,点击Analysis自动获取分析结果,在Repoet界面查看结果,记录未知样本数值(C)6.质量控制
(1)阴性质控品:FAM通道无对数增长期或Ct值等于30,VIC检测通道扩增曲线为明显对数增长期
(2)HBV阳性质控品:FAM通道有明显的对数增长期且Ct值小于30(3)HBV阳性定量参考品:FAM通道有明显的对数增长期,呈典型S形曲线。CT<29且R²>0.98 7.结果判断(1)如果在FAM通道无明显的对数增长期或Ct值等于30,在VIC检测通道扩增曲线有对数增长期,则判定样本的HBV DNA浓度小于检测灵敏度。(2)如果在FAM通道有对数增长期或Ct值小于30 则1)若样本的C<100,则样本的HBV DNA浓度<100IU/ml 2)若样本的100《C《5.00E+008,则样本的HBV DNA浓度= C IU/ml 3)若样本的C>5.00E+008,则样本的HBV DNA浓度>5×10 ⁿ IU/ml
核酸检测试剂盒简介 第2篇
临近年尾,当人们正沉浸在喜迎佳节之际,一位出生异国他乡,自认不可一世名为“德尔塔”的毒株乘着凛冽的寒风降落到我们这座曾有着秦扫六国之风范的古都并发起挑战。它可知,我们对它可是早有耳闻,对它的“嗜好、秉性”可谓心中有数。它来之前,我们就以持之以恒在与它的栾兄弟在常态化较量,并击退和控制一次次此起彼伏的进攻,面对这股趁着严冬来袭的毒株,严谨科学的攻略、精准得当的措施、顽强拼搏的团队、众志成城的民众,给了我们十足的勇气,必胜的信念,临阵不慌、有条不紊,沉着应对。它来的有多凶猛,我们抗击就有多顽强。
祝春梅便是这支抗击毒株队伍中的一员,是一位毫不犹豫、不计个人得失、不嫌苦不言累,无条件听从领导安排,倾己所能全力配合,当好得力助手的一员;是一位勇担重任,知危不推、欣然接受“两站一场”转运专班外出核酸采样任务,尤其是在此次疫情最为猛烈传播蔓延之时,重大局,轻小我,依然绝然担负起了我院24小时全民核酸采样重责的一员;是一位和队友夜色未退、晨曦未见出行,星星眨眼、霓虹闪烁而归,站在凛冽的寒风,浑身冻得瑟瑟发抖,双手还要忍受着一人一采一消毒刺骨的冰冷,脸颊遭受着着被口罩系带勒出了深深的一道道痕迹,双手接受着被双层乳胶手套捂得皱巴巴的发白,从容淡定的说“没关系,一切都会恢复的,一切都会好起来”,依然保持良好的工作状态,遵循步骤完成采样全程的一员;是一位每次对外出采样人员,都要絮絮叨叨、千叮咛万嘱咐“再检查物料是否备齐,规范操作,注重手卫生,勤消杀,定要做好个人防护!”,目送而出,翘首盼归的一员;是一位为合理安排人员,并时刻做好增援和替补,保证24小时不间断衔接,确保来院做核酸人员随到随采,减少在院内逗留时间,降低院内感染的风险;保障物资齐全,不言凌乱繁琐,时不时归整物料,做好幕后服务的一员;是一位严抓防护措施的具体落实,随时督导检查,查漏补缺,渐行渐完善,不厌其烦一而再再而三反复进行培训,恶性典型案例,强化防护意识,以错纠正,使院内所有参与工作的一线人员包括行政后勤人员均掌握各种防护技能尤其是防护服规范穿脱和七步洗手法的尽职尽责的医务感控的一员;是一位以自己坚守善念善行的人生价值观,似姐妹、似长辈,去引导、去影响、去鼓动,凝聚一个有战斗力、吃苦耐劳、团结奋进的团队的.一员。
多种角色拼成的祝春梅,呈现出一位普通的医务人员为打赢这场疫情之战的姿态,逆行而上,执甲上阵;立足本职,倾己所能所尽的微薄之力,没有耀眼的亮点、感人的壮举;然,“星之光,虽渺小虽微弱,但光泽依旧洒向大地,衬托出月亮的皎洁,点缀着宇宙的璀璨”。
核酸检测试剂盒简介 第3篇
结核分枝杆菌复合群核酸检测试剂盒,是由盖茨基金会赞助,日本荣研与FIND基金会共同研制,WHO全球推荐的结核病诊断新方法。是适合于现场快速检测结核分枝杆菌复合群的重要分子诊断产品。该试剂盒产品将反应试剂干粉化处理,集中保存于反应管盖中,可在常温条件下保存与运输。配套PURE-LAMP前处理试剂,操作简便。检测结果通过仪器自带的荧光目视检测单元进行绿色荧光的判读。配套仪器包括PURE前处理模块,LAMP®反应扩增模块,荧光目视检测模块三部分,可在一小时之内完成检测。
核酸检测 传感生命 第4篇
自此之后,曾令文团队便开始致力于生物传感器研究,不久前他们又成功开发出了基于核酸等温链置换反应技术与胶体金技术的核酸检测生物传感器,研究成果已在英国皇家化学杂志《化学通讯》上发表。据曾令文教授介绍,新型的核酸检测生物传感器灵敏度高,一次反应最低可以检测出6个待检核酸,同时特异性也很高,除了可以检测特异性病原体核酸外,也能区分单核苷酸突变,且简单、快速,不需要复杂仪器支持,仅需30分钟,肉眼就能见到所出的结果。
曾令文教授表示,核酸检测生物传感器适用于各种各样的基因检测,既能用于遗传性疾病基因缺失突变检测(如地中海贫血),也能进行疾病和药物易感基因检测(如SNP检测和耐药检测),还能用于癌症基因突变检测(如K-ras突变检测),以及用于个体化治疗基因检测(如肿瘤个体化用药指导)等。目前,该生物传感器已经在医院进行了实验验证,用它检测出的结果与医院常规检测方法检测出的一致。
任何科研成果的研发过程必定与困难相伴,核酸检测生物传感器同样如此。曾令文团队在研发该生物传感器过程中,就曾遇到特异性、交叉反应以及检测线不出线等问题。他说:“特异性是分子检测方法中的重点,所以我们在设计反应体系中发夹结构时,必须准确设计茎与环的碱基比。因为,当待检测核酸存在时,待检测核酸与环的结合力比其与茎的结合力强,才能把发夹结构打开,所以环要足够长,但太长又会降低反应的特异性。为了解决这些问题,我们进行了无数次比对和实验。”
近年来,我国分子生物学技术有了突飞猛进的发展,并带动了整个生物科学的全面发展,与国际先进水平之间的差距正在逐步缩小,甚至部分研究已经处于国际领先水平。但曾令文教授认为,我们还应该在源头创新方面不断努力。他说:“创新是科学的灵魂,对于分子生物学研究而言,除了了解学术动态之外,我们还应该解放思想,善于总结经验,并将经验上升到理论层面,提高理论修养,增强分辨能力和表达能力,并敢于坚持真理。”
此外,曾令文教授还表示,分子生物学的发展离不开优秀的团队,因此如何科学管理团队也显得非常重要。“科研团队的管理是对知识生产过程中的社会活动的管理,它不同于其他管理,科研活动具有较大的灵活性和不确定性,科研管理是对以探索性、创造性为主的脑力劳动的管理,工作过程中出现的问题也是难以预测的。”曾令文教授认为,只有富含创新热情,拥有良好学习氛围,有一定产出,且成员之间相互交流与合作的团队才能被称为优秀团队。
MTT简介及试剂盒说明 第5篇
1.MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被广泛应用于细
胞增殖和细胞毒性的实验方法。由于细胞活力与细胞数呈正相关,因此常常用来检测细胞的增殖情况。MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物formazan。在特定溶剂存在的情况下,可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。
2.本试剂盒采用了独特的Formazan溶解液配方,无需去除原有的培养液,可以直接加入Formazan溶解
液溶解formazan。从而避免了由于去除培养液时formazan被部分去除而引起的误差。
3.本试剂盒背景低,灵敏度高,线性范围宽,使用方便提高了可靠性。
4.本产品为500 次(5个96孔细胞培养板)操作。
产品内容:
MTT染色液5ml
Formazan溶解液55ml
说明书1份
保存条件:
MTT染色液需-20℃避光保存;Formazan溶解液可以室温保存。
注意事项:
1.由于使用96孔板进行检测,如果你的细胞要养48 h或更长,建议不要吝啬96-孔板的四周边孔,这32个边孔不能使用,建议加入灭菌PBS以饱和中间64个孔的水分。因为细胞培养过程中,边孔的水分蒸发很快,培养液及里面的药物会出现浓缩现象,细胞的状况就复杂了
2.MTT溶剂在低温情况下会凝固,使用前请室温放置或20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3.MTT一般最好4ºC避光保存两周内有效,保存在-20度长期保存,避免反复冻融,最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解,尤其当MTT变为灰绿色时就绝对不能再用了。
4.Formazan溶解液结冻或产生沉淀时可以37℃水浴孵育以促进溶解,并且必须在全部溶解并混匀后使用。
5.孵育时,须避光
6.MTT有致癌性,用的时候小心,有条件最好带那种透明的簿膜手套.配成的MTT需要无菌,MTT对菌
很敏感。
使用说明:
1.收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔,(边
缘孔用无菌PBS填充)。
2.5%CO2,37℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板,具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。加入浓度梯度的药物,原则上,细胞贴壁后即可加药,或两小时,或半天时间,每孔0-10ul,设3-5个复孔.建议设5个。
3.5%CO2,37℃孵育16-48小时,倒置显微镜下观察。
4.每孔加入10微升MTT染色液,继续培养4h。若药物与MTT能够反应,可先离心后弃去培养液,小
心用PBS冲2-3遍后,再加入含MTT的培养液。
5.每孔加入100微升Formanzan溶解液,置摇床上低速振荡10min,使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测
仪570nm测定吸光度。如无570nm滤光片,可以使用560-600nm的滤光片。
6.同时设置调零孔(培养基、MTT染色液、Formanzan溶解液),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介
质、培养液、MTT染色液、Formanzan溶解液)
MTT法
什么是MTT法?
又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。MTT法MTT 溶液的配制方法
通常,此法中的MTT 浓度为5mg/ml。因此,可以称取MTT 0.5克,溶于100 ml的磷酸缓冲液(PBS)或无酚红的培养基中,用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌,放4℃ 避光保存即可。在配制和保存的过程中,容器最好用铝箔纸包住。
MTT法MTT法实验步骤
贴壁细胞:
1、收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔,(边缘孔用无菌PBS填充)。
2.、5%CO2,37℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入浓度梯度的药物,原则上,细胞贴壁后即可加药,或两小时,或半天时间,但我们常在前一天下午铺板,次日上午加药.一般5-7个梯度,每孔100ul,设3-5个复孔.建议设5个,否则难以反应真实情况
3.、5%CO2,37℃孵育16-48小时,倒置显微镜下观察。
4、每孔加入20ulMTT溶液(5mg/ml,即0.5%MTT),继续培养4h。若药物与MTT能够反应,可先离心后弃去培养液,小心用PBS冲2-3遍后,再加入含MTT的培养液。
5、终止培养,小心吸去孔内培养液。
6、每孔加入150ul二甲基亚砜,置摇床上低速振荡10min,使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪OD490nm处测量各孔的吸光值。
7、同时设置调零孔(培养基、MTT、二甲基亚砜),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜)
悬浮细胞:
1、收集对数期细胞,调节细胞悬液浓(储存液100 1640)。g/ml,需预试寻找最佳稀释度,1:10-1:20);③需检测物10ul;④细胞悬液50ul(即5×104cell/孔),共100ul加入到96孔板(边缘孔用无菌水填充)。每板设对照(加100度1×106/ml,按次序将①补足的1640(无血清)培养基40ul ;②加Actinomycin D(有毒性)10ul用培养液稀释 l2、置37℃,5%CO2孵育16-48小时,倒置显微镜下观察。
3、每孔加入10 ul MTT溶液(5 mg/ml,即0.5%MTT),继续培养4 h。(悬浮细胞推荐使用WST-1,培养4 h后可跳过步骤4),直接酶联免疫检测仪OD570nm(630nm校准)测量各孔的吸光值)
4、离心(1000转x10min),小心吸掉上清,每孔加入100 ul二甲基亚砜,置摇床上低速振荡10 min,使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪OD570nm(630nm校准)测量各孔的吸光值。
核酸检测试剂盒简介 第6篇
新兽药证书新兽药证书由令昭片千例 (禽流感病毒H7亚型RT-PCR检测试剂盒) (禽流感病毒RT-PCR检测试剂盒) 我们可以做得更好C致力于敏感、便捷的禽病诊断解决方案) *禽流感核酸系列诊断试剂盒禽流感通用型RT-PCR检测试剂盒禽流感H5亚型RT-PCR检测试剂盒禽流感H7亚型RT-PGR检测试剂盒禽流感H7亚型荧光定量PCR检测试剂盒可靠、先进的技术产品技术来源于中国农业科学院哈尔滨兽医研究所禽流感国家参考实验室�OIE流感参考实验室、FAO联合国粮农组织国际动物流感参考中心) , 产品特异性好、敏感性高、检测快速^产品优势我国禽流感参考实验室禽流感病毒检测专用产品;禽流感H 5亚型R T-PCR检测试剂盒和禽流感H7亚型RT-PGR检測试剂盒是国内率先开发成功的禽流感病毒分子诊断试剂盒, 居国内领先水平。准$角*稳定*快速动物用被物喇品�S家工程砑究中乂哈尔滨切物法物刷品 (S_p零列珍断试剂盒 (通用型、H5亚型、H7亚型、) 高致病性禽流感病毒可以直接感染人类, 并造成死亡。世界动物卫生组织�OIE) 将高致病性禽流感列为必须报告的动物传染病, 我国国务院办公厅发布的《国家中长期动物疫病防治规划 (2012-2020年) 》将高致病性禽流感作为一类动物疫病列入优先防治的16种国内动物疫病之中。目前, 农业部发布的《国家动物疫病监测与流行病学调查计划》中规定, 对禽流感病原监测阳性个体利用反转录聚合酶链式反应�RT-PCR) 或荧光定量PCR检测技术进行判定。
核酸检测试剂盒简介
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