可流动性范文

可流动性范文（精选7篇）

可流动性 第1篇

为保障流动就业人员的合法权益，国家去年7月要求各地畅通医保关系转移接续。江苏省据此出台相关政策文件，而省内一些农民工较多的城市，考虑到筹资水平差异、基金支出等原因，相关实施意见迟迟没有出台。

按照《通知》规定，并非所有医保关系都可以“带着走”，只有劳动年龄段的就业人员才可以转移接续医保关系，退休人员的则不能转接。而且流动就业人员接续职工医保，必须在南京各类单位稳定就业并与用人单位建立劳动关系。参加居民医保和新农合，需凭其户籍地参保证明、就业证明、暂住证参加南京的居民医保或新农合。

参加职工医保的流动就业人员，在办理基本养老保险关系转移接续手续的同时，办理职工医保关系转移接续手续。流动就业人员在异地参保的国家承认的缴费年限，凭转出地的社会保险经办机构核准盖章，符合规定的经确认后予以累积计算。对于异地参加工作回宁后以灵活就业身份参保的、参加军队社会保险等人员，以前的缴费年限均予以承认。

大学生毕业一年内档案可自由流动 第2篇

人社部近日印发《关于简化优化流动人员人事档案管理服务的通知》(以下简称《通知》)，针对档案管理服务提出15项便民措施，这些措施包括杜绝以档案为载体的捆绑收费、隐形收费等行为、取消办理初次就业流动人员转正定级等手续、取消大学生毕业一年内档案流动限制等。

杜绝捆绑、隐形收费

《通知》明确，要贯彻落实取消档案收费和人才集体户口管理服务费的决定，严格规范基于档案的延伸服务的.收费行为，不得将参加社会保险、职称评审等业务与档案保管挂钩，杜绝以档案为载体的捆绑收费、隐形收费等行为。

根据中组部、人社部此前下发的通知，流动人员人事关系及档案保管费等已从1月1日起取消。人事关系及档案保管费、查阅费、证明费、档案转递费等费用也都一同取消。

“对基于档案延伸的其他服务，严格按物价部门核准的收费依据和标准进行收费，并且做到公开透明;没有收费项目和收费标准的，一律不得收费。”人社部相关负责人表示。

取消档案转正定级手续

《通知》还明确，今后对初次就业的流动人员不再办理转正定级手续。

人社部人力资源市场司相关负责人表示，转正定级是高校毕业生就业实行“统包统配”的计划分配制度下，用人单位为见习期满毕业生办理的一种人事手续，

随着社会的发展和各种法律法规的不断完善，到不同性质单位就业的毕业生有相应的人事管理制度予以规范，档案管理服务机构为流动人员办理转正定级手续已经失去原有的人事管理作用。

在北京某企业负责人事工作的杨冰告诉记者，毕业生签了三方协议后，会有一个报到证(派遣证)。等工作一年以后，需要填一份转正定级表，并在表上加盖与派遣证上用人单位一致的公章，这样就完成了档案上的转正定级手续。

《通知》中也明确，取消转正定级材料后，机关事业单位和国有企业在招考、聘用、招用流动人员时，可参考档案中的劳动合同、企业录用手续等材料及就业登记、劳动用工备案、社会保险缴费记录，认定参加工作时间和工作年限。

转递档案不再开介绍信

除对初次就业的流动人员不再办理转正定级手续外，《通知》还提出，档案管理服务机构在接收档案时，对缺少材料的要实行告知承诺制，转递档案时不再开具行政(工资)介绍信。

“应届高校毕业生档案被档案管理服务机构接收、成为流动人员人事档案后，即可按照有关规定进行转递。”人社部相关负责人表示，未来将推进前台业务受理、后台政策协调，提高档案管理服务信息化水平。

此次印发的《通知》还提到，针对毕业生工作一年内档案转递难，提出取消大学生毕业一年内档案流动限制。

为何存在毕业生工作一年内档案转递难的问题?

杨冰认为，这与人事档案的转正定级手续也相关。“因为初次就业报到1年后才会办理转正定级手续，因此，如果1年内换工作，原单位就没办法完成这个手续，造成档案转递上出现问题。”杨冰说。

流动花店万元投资可当老板 第3篇

“流动花店”正顺应了这种需求，但是开“流动花店”决非轻而易举的事，周密计划、灵活经营、科学管理是事业成功的关键：

1、先期投资不可太大。

“流动花店”的创业成本一般在1万一1.5万元左右即可，可以买辆旧面包车，购置小灵通等收费较低的通讯工具。同时，“流动花店”的生意需要和花卉批发商或花圃合作，最好采取赊销方式，待花卉卖完后再支付货款，不好卖的作退货处理，这样可以达到减少资金占用、合理控制投资成本的目的。

2、注重营销策略。

“流动花店”没有固定营业场所，所以多途径进行广而告之是非常重要的。车体广告的设计一定要美观、醒目、有品位，联系电话要便于记忆。除此以外，可以在收视率较高的电视节目打字幕广告，或者利用报纸的报花、百姓信息等形式作一些投资小、见效快的小广告；有条件的可以建立网站或网页，开通网上定花业务。另外，对于各媒体的采访要高度重视，因为这种免费的报道方式，往往比刻意花钱作广告效果更好。

3、合理控制利润。

一般情况下，送花上门的毛利应控制在40％左右，春节、元旦等重大节日前后，可以适当上浮销售价格：淡季时应采取让利销售、打折销售、买一赠一等手段实现薄利多销，以最大限度地增加营业收入。

4、注意防范风险。

应选择信誉好、商品质量有保证的批发商作为进货主渠道，因为花卉如果带有病虫害，客户买回后出现枯萎、落叶甚至死亡等情况，会给“流动花店”带来信誉风险。同时，对不熟悉的客户要一手交钱一手交货；对要求先送货、日后付款的单位更不能掉以轻心，因为现在单位欠账比个人欠账风险更大。

5、保证服务质量。

基于可拓逻辑的员工流动研究 第4篇

员工流动有广义与狭义之分, 狭义的员工流动指的是员工离开所在的企业, 而广义的则指员工从一种工作形式换到另一种工作形式, 可以是横向的员工流动, 如企业的横向内部流动, 也可以是纵向的员工流动, 指员工流入或流出企业, 如企业的纵向调岗以及换到其他企业工作。员工流动是经济和社会发展的必然结果, 同时也反映了企业的经营状况、人力资源制度优劣等。统计结果显示, 不同性质企业的员工流动状态是不一致的, 民营企业的员工流动率较高, 三资企业的员工新陈代谢的速度也很快, 但是人员总体规模在一定范围内浮动, 国有企业的员工规模呈现规律性增长, 这主要是由于国有企业相对于三资企业和民营企业来说, 其福利待遇具有相对优势[1]。在这三种类型的企业中, 劳动密集型企业的员工流动率最高, 主要集中在一些服务业、零售业等, 这些行业的工作所需技能、文化水平较低, 传统意识里也将这类型的工作视为低下, 不令人看重。过高的员工流动率常常影响这类企业运作效率的提升。国内外各个学科的学者分别从各自的研究角度对员工流动的原因及相应的管理对策进行了研究, 跨学科、跨领域的研究也不少, 并取得了不少优秀的成果。本文在前人研究的基础上, 基于可拓学理论对员工流动进行研究, 以探讨企业如何选取最优策略降低员工流动率。

2 企业降低员工流动率的可拓模型及其可拓分析

事物开拓的可能性即为事物的可拓性, 为了进行事物的可拓性描述, 可拓学建立了物元R=[N, c, v]和事元I=[d, h, u]两个概念, 并在物元与事元的可拓性基础上描述了物与事的可拓性, 物与事具有众多特征, 某一特征产生的一系列矛盾问题, 可以通过另一特征值的改变去解决, 这是特征可拓性的作用, 我们可以用n维物元R和n维事元I来形式化描述物和事。同一特征c或同一特征元 (c, v) , 可以为很多事物所共有, 一事物所不能解决的问题, 可以用同一特征事物或同一特征元事物解决。

$R=\left[\begin{array}{l}{\rm N},c{}_1,v{}_1\\ c{}_2,v{}_2\\ ...,...\\ c{}_n,v{}_n\end{array}\right],{\rm I}=\left[\begin{array}{l}d,h{}_1,u{}_1\\ h{}_2,u{}_2\\ ...,...\\ h{}_n,u{}_n\end{array}\right]$

物元的可拓性包括发散性、蕴含性、相关性和可拓性。发散性是事物对外开拓的可能性;蕴含性是向不同层次的物元开拓的可能性;相关性是平行开拓的可能性;可扩性是组合与分解的可能性[2]。与物元一样, 事元也有类似的可拓性。从可拓性出发, 建立了相应的发散树方法、蕴含系方法、相关网方法等, 利用这些方法就可以进行相应的可拓性分析, 分析事与物开拓的可能性。

心理契约是组织与员工之间的互动关系, 在组织与员工的相互作用下构成了双方关系的实质和互动的推动力[3]。心理契约包括组织心理契约和员工心理契约, 组织的心理契约是指组织对于双方责任的期望;而员工心理契约则是员工对相互责任的期望, 是个体的知觉和信念系统起支撑作用。企业员工的高流动是员工对相互责任的期望得不到很好满足的最终行为结果, 换个说法就是员工的心理契约未能得到很好的维护, 使得员工个体的满足感、幸福感降低, 进而产生了流动意向。本研究旨在于通过发散性方法和蕴含性方法进行员工流动的可拓性分析, 探讨如何达到降低员工流动率的目的。

2.1 员工流动可拓模型的建立

如果在t0时刻, 员工u的流动率v1 (t0) <0, 企业所采用的心理契约策略为v2 (t0) , 则可建立如下用目标和条件表示的可拓模型[4]。其中, 企业的目标可用动态事元[2]表示为:

条件可用动态物元2表示为:

r1 (t0) =[员工u (t0) , 流动率, v1 (t0) ]=[u (t0) , c1, v1 (t0) ], v1 (t0) >0。

r2 (t0) =[企业N (t0) , 心理契约, v2 (t0) ]=[N (t0) , c2, v2 (t0) ]

则问题P=I (t1) (r1 (t0) Θr2 (t0) ) 为不相容问题, 即P=I (t1) ↑ (r1 (t0) Θr2 (t0) )

2.2 对条件进行发散分析

如果对企业所采用的心理契约策略进行发散分析[5], 则可以得到如下三种维度的心理契约。

r2 (t0) =[N (t0) , c2, v2 (t0) ]⇒

r21 (t1) =[N (t1) , c2, 交易维度]

r22 (t1) =[N (t1) , c2, 发展维度]

r23 (t1) =[N (t1) , c2, 关系维度]

对于企业所采用的基于心理契约交易维度的策略, 可以进一步运用发散分析, 确定战略的侧重点和方向。

r21 (t1) =[N (t1) , c2, 交易维度]=

r211 (t1) =[N (t1) , c2, 薪酬]

r212 (t1) =[N (t1) , c2, 福利]

r213 (t1) =[N (t1) , c2, 培训]

r22 (t1) =[N (t1) , c2, 关系维度]=

r221 (t1) =[N (t1) , c2, 工作氛围]

r222 (t1) =[N (t1) , c2, 工作压力]

r223 (t1) =[N (t1) , c2, 领导关系]

r224 (t1) =[N (t1) , c2, 伙伴关系]

r22 (t1) =[N (t1) , c2, 发展维度]=

r221 (t1) =[N (t1) , c2, 知识与技能的提升]

r222 (t1) =[N (t1) , c2, 人脉资源的维护]

r223 (t1) =[N (t1) , c2, 提升机会的获取]

r224 (t1) =[N (t1) , c2, 工作丰富性]

r225 (t1) =[N (t1) , c2, 工作挑战性]

其中N (t1) 表示企业基于心理契约某种维度采取了某种策略后, 在t1时点所处的一种状态。

2.3 对目标进行蕴含分析

企业的目标是降低员工流动率, 但不同类型员工的关键利益点是不同的, 企业需要不断找出不同类型员工所关注的心理满足点, 采取相应的对策, 才能真正达到降低员工流动率的目的。

员工流动率取决于员工工作中的满足感, 通过对员工工作中所取得的满足感的蕴含分析, 可以确定蕴含通道 (图1) 。

即蕴含通道有:

即, 企业为了有效降低员工流动率, 基于员工心理契约角度进行的发散性可拓分析后, 可采取的策略有物质激励策略, 提供发展空间策略, 有效改善工作环境和工作关系策略三项, 其中每项又有属于各自的对应策略:

1) 物质激励策略上, 企业可以制定合理的薪酬计划、福利计划, 并为企业的员工量身制定相应的培训计划, 使员工在物质上居于满足状态。

2) 提供发展空间策略, 开展各种活动, 使得员工有机会获得更多的知识与技能提升, 增加社会交往, 同时, 增加工作的丰富性和挑战性, 确保工作的稳定性。

3) 在改善工作环境与工作关系上, 创造良好的企业氛围, 将工作任务控制在合理范围内, 使得企业内员工与员工之间都能够以最愉快的心情参与工作。

3 基于可拓分析的员工流动管理

员工是企业利润的最终创造者与承担者, 合理的员工流动可以保持企业的活力, 适应社会竞争的需要, 而不合理的员工流动除了直接的成本损失外, 还有无形资产的损失, 包括品牌形象、公司声誉等的受损。在对员工流动进行可拓分析的基础上, 可以发现员工流动的形式多样, 原因也千奇百怪, 为了将员工的流动率控制在合理的范围内, 须有针对性的实行员工管理, 尽量做到具体问题具体分析。

从知识的含有量上, 可将员工分为知识型员工和非知识型员工;从公司职位等级看, 员工又可以划分为高层管理者、中层管理者和基层人员;而从人力资本视角[6]上来看, 可将其分为核心员工、独特员工、通用员工和辅助员工;也有学者从员工个性特征角度对员工进行分类的, 分为尽责程度较低的员工、外倾程度较低的员工、神经质程度高的爱抱怨员工、开放程度较高的具有领袖气质的员工以及宜人程度高、工作认真负责、任劳任怨但不善言辞的勤恳型员工等等。根据不同的员工分类企业所采取的员工管理策略也不一样。本文在可拓分析基础上, 着重对知识型员工和非知识型员工的管理策略进行探讨。

3.1 知识型员工的流动管理

美国学者彼得德鲁克对知识型员工的定义指出, 所谓的知识型员工是“那些掌握了运用符号和概念, 利用知识或信息工作的人”, 在当今, 更多的是指公司的白领阶层。知识型员工相对于非知识型员工的流动是流动方式多样, 如考任制、兼职制、交流制、优惠制和轮换制, 流动相对频繁。在整个社会中, 知识型员工属于收入较高的阶层, 也是压力最大的阶层, 需要经常性地更新知识, 以适应社会发展进步的要求。他们遵从于自己的心迹, 在工作中获得大量的满足感, 而一旦待遇不公, 或者未能达到期望值将会另谋出路, 其忠诚感更多来自于对自己的专业忠诚而非上级领导。

对知识型员工研究后发现, 知识型员工受四个主要因素影响[7], 包括个体成长、工作自主、业务成就和金钱财富, 个体成长和工作自主居上, 而金钱财富是影响因素的末尾。研究知识型员工的心理, 可以发现知识型员工有追求成就感和自我实现感、较强的自主性以及创新精神。而经过可拓分析可总结出, 若从心理角度分析员工流动, 可以从交易维度、关系维度以及发展维度三个维度分别管理。按照事物的轻重缓急、主要矛盾与次要矛盾的关系, 知识型员工的流动管理可以如图2所示。

由图2可归纳出, 对于降低知识型员工的流动可用物质激励与非物质激励相结合的办法, 但由于知识型员工普遍追求高成就, 急切的希望通过工作得到大家的认可, 因此, 对于知识型员工的激励应该以非物质激励为主, 物质激励为辅, 重发展维度的维护, 轻交易维度的维护。

3.2 非知识型员工的流动管理

顾名思义, 非知识型员工是指文化程度低, 主要靠出卖体力与时间而非知识进行工作的人。在当今, 非知识型员工基本处于公司底层, 大量出现于劳动密集型企业, 学历不高是相对普遍的特点, 且易于流动、没有形成稳定的价值观、自觉性差等特点。

相比于知识型员工, 非知识型员工重组织承诺, 轻职业承诺, 他们没有强大的理想抱负, 没有完成工作后获得成就的满足感, 他们更多的是安于平时重复性的工作, 较少自主创新意识。因此, 基于可拓分析的结果, 对非知识型员工的流动管理应该:

1) 侧重于交易维度的维护, 即物质上的满足, 完善薪酬福利制度, 并有针对性地对员工进行专业培训, 提高公司的整体竞争力。

2) 其次是关系维度的维护。非知识型员工自主意识较差, 他们更希望领导者用较多的绝对权威指导他们如何去做;创新意识弱, 也较少希望工作环境有何变化。只要组织上能够在交易维度上做到完美, 非知识型员工都会忠诚于自己的组织, 并且努力工作。

3) 最后才是发展维度的维护。对于非知识型员工, 很少需要通过发展维度的激励来降低其流动率。因此, 企业在经营过程中, 一定周期可由管理者进行评估, 选取一些企业的关键性人才 (其流失将会对企业的经营带来绝对影响) , 对其进行必要的发展维度的激励, 以期降低非知识型员工的流动。

4 结语

基于可拓理论从心理角度对员工流动进行分析, 也是对企业人性化管理的一个探索, 美国社会心理学家、人格理论家和比较心理学家亚伯拉罕马斯洛从心理进化的角度将人的需求分为五个层次:生理需求、安全需求、社会需求、尊重需求和自我实现需求, 对应于员工与企业心理契约的管理维度可将这五种类型的需求归于:交易维度生理和安全需求、关系维度社会需求、尊重需求以及发展维度自我实现需求。它是人类在现实社会的心理轨迹递变过程, 三者其内涵层次分明。但企业对于不同类型员工的流动要具体问题具体分析, 在以交易维度为主的时候, 不忘考虑关系维度和发展维度, 而以发展维度为主的时候, 也要以交易和关系维度为基础, 不可失之偏颇。

参考文献

[1]余晓忠, 郭森德.企业员工流动的系统分析[J].科技管理, 2003 (1) :109-111.

[2]蔡文, 杨春燕, 林伟初.可拓工程方法[M].北京:科学出版社, 1997.

[3]杨春燕.事元及其应用[J].系统工程理论与实践, 1998 (2) .

[4]杨春燕, 张拥军.可拓策划研究[J].中国工程科学, 2002 (10) :73-78.

[5]李原.企业员工的心理契约、概念、理论及实证研究[M].上海:复旦大学出版社, 2006 (9) .

[6]张培利.员工管理分类 (上) ——员工分类方法及其分类管理[J].管理学家:实践版, 2010 (5) :92-97.

[7]蒋春燕, 赵曙明.知识型员工流动的特点、原因与对策[J].中国软科学, 2001 (2) :85-88.

[8]CAI WEN.Extension Theory and Application[J].ChineseScience Bulletin, 1999 (17) :16-85.

[9]WEN CAI.Extension Management Engineering and Applica-tion[J].International Journal of Operations and QuantitativeManagement, 1999, 5 (1) :59-72;

保持可持续机动性的高铁城市建设 第5篇

流动性的剧增成为了一个挑战, 因为它不仅对交通系统产生了影响, 同时也对经济竞争力和人们的生活质量产生了影响。保护环境的需要以及能源来源的未来不确定, 强调了对于可持续流动性的迫切需求。私家车在20世纪六七十年代对很多人而言是自由的代名词, 而如今已时过境迁。为了缓解道路网络和领空拥堵问题, 正在不断发展使每种交通方式得以高效的新方法。从某种意义上来说, 高铁是交通系统的一个重要部分, 只要它能被正确地连接到当地和区域性网络中, 它将有助于创建具有吸引力的运输链。

“高铁巴塞罗那”项目的到来, 为欧洲城市在这一类型的基础设施上的可发展机会提供了例证, 它具有经济发展、地区融合和一体化的巨大潜力。就时间、价格和服务质量而言, 高铁以最佳的条件将不同的地区连接起来, 提供了对组成网络的节点的最佳可及性。距离——在过去一直是城市和区域之间互连的一个障碍, 现在则被大幅缩短。空间收缩, 变得更小, 同时新的火车速度更快, 相应的成本更低。从这个意义上说, 高铁已经成为一种空间和时间的结合, 一种空间的收缩。例如, 对于巴塞罗那, 其市中心距离马德里市中心不到3个小时车程, 或者多几分钟的话到达距离最近的中等城市。

高铁在本地域层面上也产生了影响, 特别是在城市基础设施的一体化以及与当地发展和经济潜力相关的机会方面。与主要基础设施 (如高铁站) 邻近, 成为经常使用它的企业和个人重要考虑的选址因素, 同时也是重新评估相邻土地吸引力的要素。此外, 我们也必须考虑车站环境所带来的日常交通潜力。因此, 车站能够引起使用范围和强度的变化, 对于某些类型的活动, 车站周围环境更具吸引力和价值。

巴塞罗那城市发展局在巴塞罗那引入高铁进程中的作用是至关重要的, 尤其是在两个大站之间的交界区域的配置上, 其目标是实现正确的城市化运作和主要相关基础设施的一体化。西班牙政府、加泰罗尼亚大区政府以及巴塞罗那市政府等在各行政机关之间进行了多年的政治辩论后, 巴塞罗那高铁系统最终使用了通过城市中心的路经以及建设萨格雷拉 (Sagrera) 火车站来解决, 和已有的双功能桑兹火车总站共同完善了整个计划。

就桑兹火车总站来说, 它作为巴塞罗那的中心火车站, 利用高铁扩建对现有基础设施的缺乏进行了一次全面改造, 其中包括覆盖目前将桑兹区一分为二的铁轨, 由此创建了新的公共空间, 同时以现代化的设施扩大现有车站。就圣安德鲁-萨格雷拉 (Sant Andreu-La Sagrera) 项目而言, 其运作具有更广泛的范围, 很大程度上得益于与城市整个东北部 (贝索斯区的沿海地区和波布雷诺区的22@新区) 的改造相关的最具战略性的层面。这一改造项目仍处于开发过程中, 在目前已经荒废的古老铁轨上建设新的基础设施, 将重新连接被隔断的街区。除了铁路基础设施和其覆盖范围, 以及全新的多模式联运车站 (一座新的多功能联运综合体, 其本地铁路服务将会连接都市圈、地区以及长途运输) 加上巴士终点站和出租车站点, 该项目涉及建设超过150万m2的住宅、设施和办公楼, 将对老的铁路和工业地区进行改造。

Currently, the movement of people, goods and information are increasingly important.In this context, cities have clear locational advantages, as they allow access to a large number of potential social and economic contacts.The cities become major transport interchanges and communications.The availability of a fast and efficient means of transport is a key element in the competition between cities and regions.

The strong increase in mobility has posed a cha llenge, as it influences not only the functioning of the transport system, but also the economic competitiveness and people's quality of life.The need to protect the environment, and the uncertain future of energy sources, are stressing the need for a sustainable mobility.The private car, a synonym of freedom for many people in the sixties and seventies, is no longer considered as such.A new approach based on an efficient use of each transport mode to alleviate the problems of congestion on the road network and airspace is gaining ground.In this sense, the high speed train is an important part of transportation system, and can contribute to the creation of attractive transport chains, provided it is properly connected to the local and regional network.

The arrival of the High Speed Barcelona exemplifies the opportunities associated with this type of infrastructure for a city in the European context, an element with great potential for economic development and territorial cohesion and integration.The high speed rail allows linking regions to each other in optimal condition, in relation to time, price and qua lity of service, providing a great accessibility to the nodes that make up the network.The distance, which has a lways been an obstacle to the interconnection between cities and territories is drastically reduced.The space shrinks, it becomes smaller, while the new trains can run faster and at lower relative cost.In this sense, the high speed train has been a convergence space-time, a space contraction.For example, in the case of Barcelona, Madrid is situated within 3 hours away from center to center, or reducing a few minutes connecting Barcelona with the nearest intermediate cities.

The High Speed Rail also has an impact at local level;specifically the integration of urban infrastructure and opportunities associated with their development, and the economic potential of this location.The proximity to major infrastructure, such as the high speed station, can be an important locational factor for both businesses and individuals that make intensive use of it, besides being an element of prestige that reassess the adjoining land.Moreover, we must take into account the potentia l of daily traffic derived by the station environment.Therefore, the station can induce processes of change of uses, both in extent and intensity, reassessing and making more attractive environment station for certain types of activities.

The role of Barcelona Regional in the advent of high speed Barcelona was crucia l, especia lly in the configuration of the boundary areas of the two great seasons with the aim of achieving a proper urban implementation and integration of the principal associated infrastructure.After years of political debate between competing administrations:the Spanish State, the Government of the Generalitat of Catalonia, and the Municipality of Barcelona.The final outline of the High Speed system in Barcelona was resolved with a path through the city center, and the construction of Sagrera station, complementing the scheme with the preexisting double function Sants station.

可流动性 第6篇

关键词：流动注射,化学发光,盐酸林可霉素

药物的化学发光分析[1,2,3],都是通过药物中的有益微量元素和有效成分等与发光剂在选择最佳条件下,产生化学发光反应来检测,应根据药物的有效成分和有益微量等的特定和特性,分别选择不同的化学发光反应,以简单、快速、灵敏和选择性好的发光体系进行分析或生产质量监控,有着广泛的前景。

盐酸林可霉素(LincomycinHydrochloride)是临床上广泛应用的林可胺类碱性抗生素之一,目前对其定量分析已有文献报道,主要有色谱法[4]、荧光法和量热滴定法[5],利用化学发光分析测定盐酸林可霉素报道较少。我们通过实验发现,在磷酸介质中盐酸林可霉素在KIO4-H2O2体系中产生强的化学发光,据此结合流动注射技术建立了在KIO4-H2O2-H3PO-4盐酸林可霉素体系中测定盐酸林可霉素的化学发光分析法。该方法仪器简单,操作方便,可用于注射针剂中盐酸林可霉素的测定。

1 实验部分

1.1 主要原料和试剂

盐酸林可霉素标准溶液:盐酸林可霉素标准品定容于100 mL 容量瓶中,配成1.3×10-3 mol/mL然后逐级取50 mL定容于100 mL容量瓶中,配成6.5×10-3 mol/L、3.25×10-6 mol/L、1.63×10-6 mol/L、8.12×10-7 mol/L、4.06×10-7 mol/L、2.03×10-7 mol/L、1.01×10-7 mol/L不同浓度的溶液备用。

H3PO4溶液:取85%的浓H3PO4溶液2.5 mL于250 mL容量瓶中,配成1.52×10-4 mol/L的溶液,再逐级配成1.52×10-4 mol/L、1.52×10-5 mol/L、1.52×10-6 mol/L、1.52×10-7 mol/L、1.52×10-8 mol/L不同浓度的溶液备用。

KIO4溶液:精确称量11.4996 g KIO4;容于100 mL的容量瓶中,配成0.5 mol/L的溶液,再逐级稀释到0.5 mol/L、 0.05 mol/L、0.005 mol/L、0.0005 mol/L不同浓度的溶液备用。

H2O2溶液:10%、1%、0.1%、0.01%、0.001%不同浓度用30%的H2O2配制;其它选用试剂:硫酸、盐酸、磷酸、重铬酸钾、吐温40等,均为分析纯;水为一次蒸馏水。

1.2 仪器

整个分析系统分别如图1所示。IFFM-D流动注射化学发光/光谱/光度分析仪, IFFS-A型多功能化学发光检测器(西安瑞迈电子科技有限公司)。整个分析过程中采样、注样、实验数据采集及处理,均由Windows98系统下Remax软件完成的。

P.蠕动泵;V.进样阀;C.流通池;PMT.光电倍增管;AMP.放大器;R.记录仪;HV.负高压;W.废液;a.分析液;b.H2O2溶液;c.样品液;c.反应

1.3 实验方法

实验装置按如图1所示。在烧杯中加入一定量的盐酸林可霉素溶液,以此作为流路a。以一定量浓度的H2O2溶液作为流路b。以KIO4-H3PO4溶液作为流路c。流路a和b流经三通混合后泵入采样环,到达采样时间时,进样阀自动切换,流路c的KIO4-H3PO4溶液经采样环,将采集的样品推出,与流路d混合,经内径为0.8 mm聚四氟乙烯管进入流通池进行发光反应。各流路的泵速均为3 mL/min。采样时间为15 s。开启IFFM-D型流动注射化学发光仪,以一次水为空白进行测定。记录化学发光强度信号,以峰高进行定量。具体测量参数设计如表1。

2 结果与讨论

2.1 测定条件选择

2.1.1 反应介质与浓度的影响

酸介质及浓度对体系的发光强度有较大影响,通过对H2SO4、HCl、HClO4 和H3PO4为介质时体系发光信号的测量表明,H3PO4为介质时发光强度最大;考察H3PO4浓度改变对KIO4-H2O2体系发光信号的影响结果表明,在H3PO4浓度为1.52×10-4mol/L～1.52×10-7mol/L时,发光有最大信噪比。本文工作选择1.52×10-5mol/L H3PO4为介质。(如图2)

2.1.2 KIO4浓度的影响

KIO4作为体系的氧化剂影响反应的化学发光强度,考察了磷酸介质中不同KIO4浓度对KIO4-H2O2-盐酸林可霉素体系的发光强度,结果表明其中KIO4浓度为0.05 mol/L时体系有最大化学发光强度,本文选择0.05 mol/L(如图3)。

2.1.3 H2O2浓度的影响

通过对考察不同H2O2浓度对体系发光信号的影响,结果表明当H2O2质量 分数为0.1%时体系的发光反应信号有最大信噪比。本文选择质量分数为0.1%的H2O2,并在此条件下对H2O2稳定性进行了考察,结果表明在室温下(25±5) ℃质量分数为0.01%的H2O2放置半个月对体系的发光强度亦无影响(如图4)。

2.2 校准曲线、精密度及检出限

在最佳的试验条件下,相对化学发光强度ICL与盐酸林可霉素浓度在1.3×10-5～2.03×10-7 g/mL范围内呈良好的线性关系,标准曲线按数量级分段绘制。对1.0×10-6 g/mL盐酸林可霉素标准溶液连续6次测定的RSD为1.1%,按IUPAC法求出的检出限为4.5×10-9 g/mL,结果如表2。

2.3 干扰试验

对2.0×10-6g/mL盐酸林可霉素标准溶液在选定的条件下进行干扰测定[6],结果表明,在允许相对误差为2%时,1000倍的K+、Na+、Mg2+、Ca2+;500倍的Ba2+;200倍的Cu2+、Co2+;150倍的Fe3+;70倍的羧甲基纤维素;150倍的淀粉;3倍的Mn2+;2倍的乙醇,葡萄糖对体系化学发光反应不发生干扰。

2.4 样品分析

随机抽取不同批号注射用盐酸林可霉素,将表示为0.6 g活性盐酸林可霉素的安瓶在250 mL烧杯中小心敲碎后无损定容至500 mL容量瓶,准确移取一定体积于50 mL容量瓶,定容摇匀后作为样品测定液;另取一定体积样品液和一定量标准溶液于50 mL容量瓶,定容摇匀后测定回收率,结果如表3。

3 结 论

(1)在室温下考察了影响KIO4-H2O2-H3PO-4盐酸林可霉素体系化学发光的各种因素,自动进样后从开始到发光强度达峰值仅需几秒,结果表明化学发光反应为快速反应。盐酸林可霉素发光反应与其浓度呈良好线性关系,它们的检出限为4.5×10-9g/mL,相对标准偏差为1.1%(n=6),线性范围为1.3×10-5～2.03×10-7g/mL;

(2)对于KIO4-H2O2-H3PO-4盐酸林可霉素体系,测定的最佳条件为1.52×10-5 mol/L H3PO4、0.05 mol/L KIO4和0.01% H2O2;

(3)KIO4是氧化剂也是发光剂,KIO4在酸性介质中发光强度较强;

(4)H2O2还原化剂,影响反应的发光强度,发光强度随着浓度的增大而增大,到一定浓度后反而减小。

参考文献

[1]韩鹤友,林祥钦.化学发光分析法应用新进展[J].光谱实验室,2002,19(1):39-40.

[2]YaoDong Liang;Jun-Feng;Tian tian.Determination of pipemidic acid based on flow-injection chemiluminescence due to energy transfer from peroxynitrous acid synthesized on line[J].Analytical Bioanalytical Chemistry,2004,12,918-923.

[3]张丽丽,臧利国,陈蓁蓁,唐波.化学发光分析法应用进展[J].理化检验化学分册,2004,4(40):243-244.

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[5]孟德凡,刘学才,崔才三.华西药学杂志,1998,13:193.

可流动性 第7篇

1 ESBLs的概述

ESBLs是丝氨酸蛋白酶的衍生物, 由细菌质粒介导的能水解青霉素、第3 代头孢菌素如头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶和氨曲南,并能被克拉维酸所抑制[1],主要由大肠埃希菌和克雷伯菌属产生, 也可由其他肠杆菌科细菌如肠杆菌属、变形菌属和沙雷菌属等产生。

ESBLs最早来源于普通的 β- 内酰胺酶基因( TEM-1、TEM-2、SHV-1)[2,3],自英国1982 年报道发现首例( TEM) 型ESBLs,德国1983 年报道首例SHV型ESBLs,1990 年报道首例CTX型ESBLs,ESBLs在各地革兰阴性杆菌中的检出率也逐年上升。 目前,被证实报道的ESBLs至少有10 型[4], 包括CTX- M、TEM、OXA、PRE、SHV、BES、VEB、TLA、STO和GES。 产ESBLs菌基因型的分布存在着明显的地域差异, 研究报道的TEM有130 多型, SHV有50 多型[5]。 我国大陆主要以CTX- M为主,其次为SHV。

ESBLs的产生机制目前仍不是非常清楚, 普遍认为有以下两点[6]:一为基因转移,编码ESBLs基因主要位于质粒DNA序列中,其抗性基因盒是由耐药基因及其侧面的调控序列共同组成的, 并可通过某些已知或未知的机制在质粒间、 质粒与染色体间甚至同种或不同种属的革兰阴性菌间转移, 使细菌产ESBLs并使其抗药性迅速扩散;二为基因突变,某些窄谱ESBLs能通过侧翼调控序列或耐药结构基因的突变, 提升产酶效率或扩展底物轮廓, 由此演变为对多种氧亚胺基β- 内酸胺类抗生素具有催化水解效应的ESBLs。

产ESBLs大肠埃希菌检出率逐年增高, 国内外已有多起由其引起疾病暴发流行的相关报道。 由于ESBLs流行机制的复杂, 流行的防治工作也有很大困难, 对其耐药机制的研究对临床用药的指导作用是显著的。

2 可移动遗传元件( HMEs) 及其转移介导的耐药

基因的水平转移由可移动遗传元件( 质粒、 转座子、插入序列、整合子等) 介导各种耐药基因完成,它们可在同种甚至不同种细菌菌株间传递, 使得细菌的耐药性迅速传播,使细菌表现为多重耐药。

2.1质粒及其转移介导的产ESBLs大肠埃希菌的耐药

质粒是细菌染色体以外的遗传物质, 分为接合性质粒和非接合性质粒。 编码耐药性的质粒, 称为R质粒,在环境和临床的细菌中接合性R质粒分布广泛,是耐药性基因的主要传播途径。

质粒上有编码一整套F质粒相关的接合转移系统基因(F- tra系统基因),可在不同菌种或菌株中进行接合转移,将耐药基因在细菌间进行基因水平转移,从而引起了耐药菌株的播散。 位于质粒上的ESBLs编码基因往往可在质粒相关的接合转移tra超纵子、非接合性质粒的诱动系统、整合子以及转座子的作用下,通过转化、转导、结合、易位等方式在同种属甚至不同种属细菌的质粒与质粒间、质粒与染色体间转移,使更多的细菌产ESBLs,并可通过特异整合或重组,使许多种耐药基因在细菌的耐药质粒上聚集在一起, 导致细菌产生多重耐药性。 tra A基因和trb C基因均属于接合性质粒遗传标记, 近年来国内外均有从大肠埃希菌中检出tra A、trb C的报道[7,8]。

大肠埃希菌的质粒使其耐药性广泛横向传播并可接受外源耐药性,自R质粒的发现以来,在我国Qnr质粒、DHA1[9]、Qep A质粒、 质粒介导的165r RNA甲基化酶、 质粒介导的Ampc酶这些耐药质粒不断被发现;在国外,NDM- 1 基因、 耐 β- 内酰胺酶中的ACC- 4、PMB1 和P15A、p ET- 30a ( +) 、CTX- M、KPC- 3 质粒最常见[10]。

法国报道,证实了CTX- M编码质粒可通过低数量的大肠埃希菌肠外致病基因获得,表明CTX- M的获得可出现在大肠埃希菌菌株[11];以色利报道,证实KPC- 3质粒在对碳青霉烯类敏感的大肠埃希菌中易水平传播,导致大肠埃希菌对碳青霉烯类的耐药,以产ESBLs最明显[12]。

据报道,在产ESBLs大肠埃希菌中bla CTX基因与Inc F-、Inc I1、Inc FII、Inc L/M-、Inc HI2-、Inc N-、Inc K-和Inc N2型质粒相关[13,14,15];另有报道,Inc I1、Inc A/C-、Inc N-和Inc X-型质粒与bla TEM基因的传播相关[14,16,17],Inc F、Inc L/M-、Inc I1-型质粒与bla SHV基因有关[13,18]。

2.2转座子及插入序列介导产ESBLs大肠埃希菌的耐药

转座子(transposon,Tn)是一种比质粒小,能在细菌染色体、质粒或噬菌体之间自行移动的DNA片段,亦称跳跃基因(jumping genes)。转座子的中间区域多为编码1种或多种抗生素抗性和其他功能的基因。

转座子的遗传标记有tnp A、mer A、tnp U和tns A基因,tnp513[19]为新发现的转座酶基因。 产ESBLs大肠埃希菌中转座子遗传标记mer A携带率较高[20]。

插入序列( ISs) 是最小的转座子,可以在生物体中独立换位, 从而引起插入突变和基因重排,ISs可编码转座酶使遗传元件移动,并可激活沉默子或增强子,表达启动子下游的决定元件。 ISs作为HMEs元件在整合子、转座子、质粒和染色体之间转移,从而提高了耐药性。

转座子、 插入序列自带启动子可引起下游耐药基因高水平表达[19,21],即转座子、插入序列介导的获得性耐药基因与耐药程度相关。到目前为止,插入序列有20个家族,以IS3 和IS5 家族的成员最多见,其次是IS256和IS4 家族,这4 个家族的成员总数超过插入序列总数的50.0%。 国内已报道在铜绿假单胞菌中检出ISPa7[22],在鲍氏不动杆菌检出ISAba1[23],在大肠埃希菌中检出IS26、IS903、ISEcp1、ISCR[8]。

目前, 插入序列及转座子被发现与大肠埃希菌的CTX- M型ESBLs基因的转移和高度表达相关。 插入序列ISEcp1、 与I型整合子结构相关的ISCR1 以及噬菌体相关的元件都在bla CTX- M基因的捕获和转移的过程中起重要作用[24,25,26];Shahid[26]在插入到ISEcp1 的tnp A区域内检测到了IS26,并发现IS26 会抑制ISEcp1 介导的bla CTX- M- 15 基因转移,增强bla CTX- M- 15 基因的表达。

2.3整合子及其转移介导产ESBLs大肠埃希菌的耐药性

在耐药质粒和转座子的系统研究过程中发现一种天然的克隆和表达系统,即整合子,存在于细菌质粒或染色体上, 是具有移动性的基因捕获和表达的遗传单位, 整合子能携带多种耐药基因, 包括对氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类以及消毒剂等耐药的基因,目前约有40 种耐药基因都有存在于基因盒中的报道[27]。 整合子至少可分为6 类[12],其中Ⅰ~Ⅲ类与耐药性相关,临床产ESBLs大肠埃希菌中分布最广泛的整合子为I类整合子,并在耐药性传递方面有着重要的作用。

整合子的作用机制, 主要体现在其介导的耐药基因水平传播和转移[28],这有两方面的含义,一是整合子通过整合酶特异切除和整合作用来捕获外源基因盒,1个整合子可以捕获1 个或多个基因盒, 同样1 个基因盒可以整合到不同的整合子上, 从而导致基因盒的移动; 二是整合子携带重组的基因盒插入到转座子或接合性质粒中,在质粒、转座子、染色体间移动,实现基因的水平传播和转移。

由于临床使用的抗生素种类、剂量及时间不同,进而引起对产ESBLs大肠埃希菌的筛选及诱导不同,以及实验采集的标本来源不同, 临床分离菌株中整合子的比例差别很大, 而且不同菌株整合子携带的基因盒种类和数目亦具有明显的个体差异[29]。在没有抗生素压力的自然环境中,整合子的发生率极低,且半数以上的整合子不携带耐药基因盒,而韩珍等[30]报道,产ESBLs大肠埃希菌I类整合子相关基因盒检出率高达85.2%,并推测其可能是产ESBLs大肠埃希菌产生耐药性的重要原因。 由此可见,在抗生素的强选择压力下,耐药基因盒更易被整合子捕获和播散。

含有整合子的产ESBL s大肠埃希菌在播散过程中,除了 β- 内酰胺类抗菌药物所起到的筛选作用外,整合子上其他耐药基因所对应的抗菌药物也会起到筛ESBLs基因的作用。 随着时间的变迁,在抗生素选择压力下,整合子不断进化,可携带编码ESBLs基因的耐药基因盒,通过质粒或转座子水平传播,使非ESBLs菌转化为ESBLs菌[31],甚至可引起医院的暴发感染。

自Laurent[32]等首次发现了携带有NDM- 1 基因并表达CTX- M- 15 的多重耐药大肠埃希菌以来, 在携带NDM- 1 或多重耐药的ESBLs菌中检测到整合子时有报道[33,34,35]。 目前的研究表明,1 类整合子和ESBLs的存在, 共同介导的大肠埃希菌分离株对一些抗菌剂的耐药,使临床耐药形势越来越严峻[36]。

在医院内多种的抗菌药物压力下,ESBLs的播散速度和范围会大大增加。 目前,整合子在ESBLs大肠埃希菌多重耐药性中的作用已引起学者们的高度重视。

3 结语

随着抗菌药物的广泛使用, 在药物筛选和诱导的双重作用下,细菌普遍呈现出高水平耐药,产ESBLs大肠埃希菌检出率越来越高。 明确产ESBLs大肠埃希菌的水平转移的分子机制, 以便快速准确地获取细菌耐药的信息,可望为整合酶抑制剂、整合的位点突变、插入碱基以降低转座子和整合子启动子的活性等方面提供新思路,为ESBLs耐药菌的感染、控制和治疗奠定基础和提供新的思路和方法, 为新药的开发奠定理论依据。