成功与否范文
成功与否范文(精选8篇)
成功与否 第1篇
细胞转染成功与否的八大要素
摘要 : 转染是否成功的影响因素很多,如需要转染的细胞类型(对于困难的细胞系尤其如此),需要被转染的分子(DNA、RNA、寡核苷酸、蛋白质),转染试剂等。但无论在何种情况下,转染的成功均取决于
知己知彼,方能百战不殆。做细胞转染也一样道理。细胞转染实验的影响因素很多,如需要转染的细胞类型(对于困难的细胞系尤其如此),需要被转染的分子(DNA、RNA、寡核苷酸、蛋白质),转染试剂等。但无论在何种情况下,以下八个要素都不容忽视。
要素一:细胞
分裂细胞相比较非分裂细胞——分裂细胞往往要比静止细胞更易于摄取并表达外源DNA。因此对大多数转染操作而言,细胞都在转染当天或前一天种板。同样重要的是细胞在种板进行转染时不应处于过度生长的状态;此外,还常用促有丝分裂刺激物(如,病毒转化,生长因子,条件培养基,以及滋养细胞)来活化原代培养细胞。
贴壁细胞相比较悬浮细胞——在转染效率方面贴壁细胞和悬浮细胞之间的差异显著。相对于贴壁细胞(如HEK,CHO),悬浮细胞(如HL 60,Jurkat)非常难以转染,可能是因为细胞间膜结构的差异,但目前还没有分子水平上合理机制的解释。
分板方案——在对培养细胞进行分板传代培养之前,必须把贴壁细胞用胰蛋白酶消化使之脱离培养基质。这个常规操作可导致正常细胞功能受到严重损害。因此分批方案的不同(如,胰蛋白酶消化时间的长短,胰蛋白酶的灭活等)需要优化。
传代次数——传代次数是指对一个细胞系进行分批传代的频度(通常在一个实验室范围内)。某些细胞系相比较其他细胞系而言较不稳定,可能会随着培养时间的延长而改变,视不同的细胞系和培养条件而定。因此名称相同的同一细胞系在生理学和形态学(以及转染能力)性质也可能会有很大的差异。一般而言,细胞在冻存复苏后的一两代之内或直到它们完全复苏之前都很难转染。
细胞数量(融合率)——只要培养基质(组织培养皿)尚有空间,细胞就会按指数规律分裂。对于正常细胞而言,细胞生长的速度受细胞密度大小的抑制(接触抑制),但癌细胞则不受此限制而会继续生长并可互相叠加。营养物质的耗竭以及代谢废物的积聚会影响所有的细胞生长。细胞会因受到营养物质匮乏的压力而不适于转染。报告基因的表达率与转染开始时的细胞数量和细胞健康以及细胞溶解之前的生长情况相关。
培养物污染——培养物可被细菌、酵母、真菌、病毒、支原体、甚至其他细胞种类所污染。各种污染都会导致产生错误的结果。支原体污染——支原体污染在所有培养细胞中的比例为5-35%,它可改变细胞生长特性,酶的作用途径,细胞膜的组成,染色体结构,以及转染效率。特别是,支原体对采用脂质、DEAE-右旋糖酐、磷酸钙或腺病毒介导的转染技术有所干扰,其结果致使非典型转染或转染效率偏低。这些影响会导致实验结果的不可靠以及时间和珍贵细胞系的损失。和细菌及真菌不同,支原体污染无法通过视觉检查发现。它们非常小甚至能够通过大多数的无菌滤膜;它们还对常用抗生素有抗药性。所以必需进行支原体污染的常规筛查。
要素二:载体DNA
一般原则:对纯化所得的载体进行质量鉴定。确定维持其正常功能的基因序列是否适合于您的细胞体系。在测定细胞体系的参数时,一定要选用一种已知具有功能的载体做对照。
载体的完整性——载体是否具有功能取决于它结构的完整性。转染效率受到质粒制备物的超螺旋结构和舒展结构之间比例、双螺旋断裂、核酸酶的降解,以及来自于储存和处理过程中的物理压力的影响。
载体制备物——各种载体是按照不同的方案在细菌体系中制备并纯化。制备产物中残余的污染物(如CsCl,内毒素)可能会影响转染效率。
载体构造(启动子/增强子/ORI)—转染体系通常用带有强病毒调节元件(如,RSV,CMV,和SV40)的对照载体进行优化和比较。然而,病毒启动子/增强子体系的相对有效性在不同细胞系间的差异可大到两个数量级。例如,在某些细胞系中,由于自发的质粒扩增,SV40体系可高效表达large T抗原(如,COS);而在其他许多细胞系中,则是CMV启动子更为有效。
除此之外,各种CMV载体的表达率也会有超过一个数量级的差异,这部分是由于载体中其他调节元件所引起的。要素三:组织培养试剂
一般原则:优化您的细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂,并尽可能减少所用试剂的变更。基础培养基——培养基的成分包括营养物质(氨基酸,葡萄糖),维生素,无机盐,和缓冲物质。有些成分非常不稳定,因此如果在使用时不是新鲜,加入就可能会产生问题。配置时要使培养基务必避光保存;因为已知有一些组分和缓冲物质,如HEPES,当暴露于光照下就会分解产生细胞毒性物质。
胎牛血清——血清是一种含有白蛋白、球蛋白、生长促进因子和生长抑制因子的极为复杂的混和物。采集血清所用动物的年龄、营养水平和健康状况可影响到血清中这些成分的数量和质量,从而引起显著生物学变化。
添加剂——某些细胞的生长依赖于一些对生命力或细胞分裂必不可少的物质(如,生长因子,微量元素,必需代谢物和蛋白等)。CO2培养箱——细胞生长所需环境为37℃、相对湿度为95%的CO2培养箱。用CO2是为了控制pH值,细胞生理对pH的变化非常敏感,因此多数细胞培养基都含有碳酸氢盐缓冲体系。有些培养基需要CO2 浓度为5%来有效控制pH值,而另一些则需要10%的CO2。需要向您的培养基供应者核对一下适当的CO2浓度。如果培养箱内培养条件与所需条件不一致(温度、湿度和CO2)则会导致实验结果的板间变异。来自于培养箱内的污染物、化学物质,或真菌/细胞的污染也都可能影响到细胞生理。
要素四:使用瞬时转染来生产蛋白瞬时转染表达蛋白
以往为了获得蛋白质的高表达产量,必须先转染细胞,然后挑选一个稳定的转染细胞系进行蛋白的扩增和富集。而挑选这样一个细胞系往往需要花费数周甚至数月的时间,这既可能是由于试剂的细胞毒性也可能是由于转染的低效率。如果是因为转染试剂具有细胞毒性,那么只有少数细胞能够存活,从而导致蛋白质的产量很低。而如果是因为转染成功的细胞太少,那么那些未转染的细胞生长速度大大超过转染成功的细胞,其结果同样也只能产生少量的目标蛋白。使用一种温和的可以转染大多数细胞的转染试剂,就可获得蛋白质的高表达。
现将一些影响蛋白高效表达的关键因素分列如下: 细胞系(有些类型的细胞比其他细胞产量高)质粒骨架(例如:增强子,启动子,转录调控元件)目的蛋白(有些蛋白很难获得高表达量)目的蛋白的cDNA序列(例如:密码子的优化)培养条件(营养物,代谢废物,转染抑制物)当这些因素都得到优化,并加入合适配比和数量的转染复合物(转染试剂-质粒)后,就可获得至少达到平均表达水平的稳定表达克隆。
要素五:瞬时转染和稳定转染
制备一种稳定细胞系的第一步是选择一种同时含有选择性标记物和目的基因的载体。选择性标记物通常是可以产生一种蛋白质或者酶来帮助细胞在某些毒性物质存在下存活的基因。
一旦选好了质粒载体,无论瞬时或者稳定表达都采用一样的转染方法。在加入选择性试剂之前,被转染的细胞至少要在标准培养基中培养过夜。这样就使细胞有时间表达足量的蛋白使之能够耐受选择性试剂的作用。细胞于是在加有选择性试剂的培养基中生长。那些未成功转染质粒的细胞即被杀死。而只有那些成功转染的细胞能够生长。有的时候,还可以将选择性试剂持续加入到培养基中,以维持对细胞的选择压力。
要素六:转染方案
一般原则:建立一套适当的转染方案;首先从一种标准方案开始,然后通过改变试剂/DNA的配比和复合物的剂量进行优化。转染复合物的制备——诸如转染试剂/DNA配比,离子强度,缓冲液pH值,以及温度等变量都会影响到转染复合物的组成和功能。质粒可用无菌水或TE缓冲液稀释。如果您要使用一种市售的转染试剂,就应当仔细阅读该试剂所提供的使用说明。在不含血清或其他蛋白的培养基中制备转染复合物;如果制备复合物所使用的培养基含有血清,它就会对转染产生抑制。制备转染复合物的最佳孵育时间是一个非常关键的环节,对于不同的转染试剂而言可能差别很大。
转染试剂/DNA配比(负载比)——所有的转染试剂都会在某一个试剂/DNA配比时最为有效。有时候这种最佳配比的所在范围非常狭窄;而且对于每种实验体系都必须进行优化才能得到最佳配比。形成转染复合物所用的稀释剂——对于多数试剂而言,很关键的一点是要使转染复合物能在普通基础培养基或盐溶液中形成。转染复合物的加入——有两种替换方法可用来将转染复合物加入转染细胞:1.将复合物浓缩液逐滴加入培养基,或者2.将转染复合物先用培养基稀释,然后进行培养基更换操作。第一种方法更简便,而第二种方法则更因为避免了试剂在局部浓聚而产生毒性,所以会使结果的一致性更好。
要素七:时间进度
一般原则提示:要确保最终结果的成功;建立一个合适的时间进度进行转染实验以保证您所需要的目的蛋白能得到最佳表达。转染的开始——在转染前12小时,将细胞分种于培养板中。在细胞达到50-80%的融合率时开始转染,这样就可以使它们在实验结束时达到接近100%的融合。细胞对转染复合物的摄取通常在0.5-6小时的时间内完成。在这段时间后,就不会再发现转染效率有所增长。
培养基更换——某些转染试剂在摄取阶段之后需要更换培养基。如果转染必须在没有胎牛血清存在的条件下进行,那么这一步骤就必不可少。而对于可在血清存在的情况下使用的无毒性转染试剂时,如果有足够的培养基用于后续表达阶段,就可以省略这一步。如果将转染复合物留在培养基中直到进行检测,那么对有些细胞系而言转染效率会有所提高,而另外一些细胞在转染开始几个小时之后其转染效率就不会再有升高。虽然在转染步骤之后转染试剂/DNA复合物通常不一定要从培养体系中清除,但在此后的长期生长阶段换用新鲜的培养基却是必须的。如果转染细胞需要生长3-7天,换培养基就尤其重要,这样一来就使它们有时间达到最高的蛋白表达量。
时间测定——转染开始后的24-48小时内,报告基因产物的浓度逐渐增加;而这种增加取决于增强子的强度、表达外源蛋白中所涉及的细胞反应,存活细胞的健康状态,以及营养因素等。在转染后等待3-7天收集蛋白进行纯化较为常见了。
最后就是平时可能会忽略的转染试剂本身的脱靶效应off-target effect,转染试剂本身对基因表达水平(高表达或低表达)的影响,有时候可能会造成假阳性的结果。
我自己的体会是,一般的细胞,用脂质体2000和fugeneHD转染效率相差不大,虽然最近有文献说脂质体2000脱靶效应很高,但国内在乎的人貌似不多;但是干细胞,原代细胞和肿瘤细胞等一些比较难转的细胞系,Fugene HD比较温和,细胞毒性很低,转染效率明显要好;悬浮细胞,各有千秋,不敢说一定可以,重在尝试,要是都不行,就电转吧。
要素八:交叉污染
如果同一个实验室同时培养不同种类的细胞,那就有可能发生交叉污染,即使遵循最严格的分离操作规程这种情况也有可能发生。如有许多细胞系被HeLa细胞所污染。和其他细胞系之间的交叉污染不总是能通过镜检发现。如果有少量某种生长快速的细胞掺入到培养细胞种,几个月过后它们就会完全取代目标培养物。
作者:keeii 点击:1087次
成功与否 第2篇
一提到成功,很多人即刻会在脑子里给成功人士勾勒一幅画像:衣着体面,器宇不凡,事业辉煌,功成名就。在书店里逛一圈,教人成功的书可以随手抓起一摞。成功两个字像两只硕大的眼睛,在书的封面上露出炯炯的光。教人成功的书中,几乎清一色的采用名人成功的事例,教你怎样把握机会、发挥优势、打败对手,最终脱颖而出。
是谁给成功下了定义?成功难道非要出人头地、事业有成?成功难道必须脱颖而出、有所建树?难道只有赢了别人才算成功?难道只是拥有更多的财富名利才算成功?其实,成功没有定义,我们很多人都被世俗意义上的成功人生绑架了。于是,大部分人一生都在朝着某一个目标不停地追逐,他们殚精竭虑,几乎付出了全部的时间和精力,都希望自己成为人群中的佼佼者。对他们来说,人生的意义就在于登上了某一个高峰。
可是,如果不这样就不算成功吗?我的一个朋友,本来在事业上有很好的发展机会。可是那年,他刚刚30多岁的妻子突然从高处摔下来,半身瘫痪。他担负起照顾妻子的重担,从此把生活重心转向家庭。多年过去了,他在单位是个人微言轻的小角色,他的妻子在他的照顾下过得很好。一家人的生活虽然艰难一些,但很快乐。他儿子后来成为我的学生,是个很懂事的孩子。他写作文时,不止一次写过爸爸是他偶像,爸爸世界上最了不起的人。
有一次,我们聚在一起,谈起成功的话题,我的同事非常自信地说:我认为我很成功,我做了自己应该做并且愿意做的事,很满足,也很欣慰。大家都被他感动了。谁能否认他的人生不是成功的呢?成功没有定义,成功与幸福一样,只是一种感觉。成功与否不在于别人的评价,而是自己说了算。
我的`一个亲戚,大学毕业后选择去了一个山清水秀的小县城工作。他说自己这辈子就想过一种自由自在的生活,有份工作糊口,然后种种菜,养养花,轻轻松松生活最好。他闲暇时在院子里喝喝茶,去山里散散步,过得像陶渊明一样。他很满意这种生活状态。他说,这样活着,就活成了一朵花,自然惬意。谁又能说,他的人生是失败的呢?
如今,生活安定了,每个人都有选择自己生活方式的权力。不被功利化的成功学所束缚,乐于过一种自己喜欢的生活,本身就是一种成功。
成功与否 第3篇
1 注重孕期宣教
从围生期保健门诊建卡开始, 就要运用各种形式宣传母乳喂养的好处, 可以发小册子、放VCD等方式, 使孕妇能很早就了解母乳喂养的好处。在孕期要合理加强营养, 预防贫血, 因为贫血不仅影响胎儿的生长发育, 也后影响产后乳汁的分泌。要多吃高蛋白、新鲜的蔬菜水果。常规检查乳头情况, 如有乳头缺陷, 尽早纠正, 如乳头平坦, 可以用拇指和食指把乳头往外轻拉, 每天坚持, 能明显改善乳头平坦;对于乳头凹陷, 先尝试手法纠正, 实在不行, 可以用注射器或真空的吸奶器, 效果也不错。对乳头问题及早纠正, 为成功的母乳喂养打下良好的基础。妊娠28周后, 指导孕妇每天用温水清洗乳头, 避免使用肥皂水清洗, 增加乳头的韧性, 预防婴儿吸允时乳头疼痛;同时最好家属的宣教, 家属的支持是成功的一半。
2 住院期间的护理措施
2.1 待产期间的护理
产妇到了一个陌生的环境, 心理上总会有些紧张焦虑, 这时护士一定要做好心理护理, 用亲切温和的语言和产妇交流, 了解她的心理, 知道她担心的问题, 尽可能为她解决, 减轻她的紧张焦虑情绪。带她熟悉环境, 和产妇建立相互信任的关系, 在她信任的基础上进一步宣教母乳喂养的好处, 她就更易接受。在环境上, 要求清洁安全舒适, 使产妇能得到良好的休息。在病房的墙壁上可以张贴母乳喂养的宣传资料, 也可以把她带到已经母乳喂养成功的产妇的病房, 让产妇现身说法, 那会效果更好。
2.2 分娩期间的护理
分娩期间除了指导产妇如何配合, 也要告诉产妇早吸吮早接触的好处, 孩子一生下来, 初步处理后马上抱给产妇, 让孩子吸吮妈妈的乳头, 使母子尽早进行接触, 告诉产妇早吸吮早接触不但可以增进母子感情, 而且通过孩子的吸吮动作, 可以促进子宫收缩, 减少产后的出血[4]。
2.3 产后的护理
产后坚持母婴同室, 除非有医学指诊, 不然每次婴儿和乳母的分离不能超过1h;保持环境安静, 使产妇能有充足的睡眠, 如果休息不好, 也影响乳汁的分泌。指导产妇按需吸吮, 乳头得到多次刺激, 促进乳汁分泌[5]。护士要到床边亲自指导, 教会产妇正确的喂养姿势树立母乳喂养的信心。特别对于剖宫产的产妇, 传统的横抱式坐位是不合适的, 因为既要把住婴儿的身体, 腹部切口还要承受孩子的重量和摩擦, 导致妈妈的疲劳, 使含接姿势受到影响, 应教会产妇以环抱式坐位喂奶。如果2个乳房吃不完, 剩下的一定要挤掉, 防止奶胀。而且告诉产妇两侧都要给孩子吃, 有的产妇因为一个乳头长就一直给孩子吃, 告诉产妇这样不但以后乳房一大一小, 影响美观, 而且另一只会发生乳胀, 严重时可能会得乳腺炎。还有如果有月嫂, 一定从入院开始就要做好月嫂的宣教工作, 使她们能知道母乳喂养的好处, 配合我们工作。当然家属的工作也要继续做好, 教会家属如何协助产妇给抱奶。产妇的饮食上要多喝鱼汤等各种富含蛋白质的汤类, 多吃含铁钙丰富的食物, 新鲜的蔬菜和水果更不能少。
2.4 出院指导
我院从1994年创立爱婴医院来, 就建立了母乳喂养的支持系统和专职的随访人员, 有专门的母乳喂养热线电话, 产科的医务人员24h提供咨询服务, 遇到母乳喂养的问题可以随时打电话, 得到专业人员的帮助。
母乳喂养的好处众所周知, 所以需要产科工作者更好的做好各期的护理, 提高纯母乳的成功率。这也需要广大专业人士和全社会的支持和努力。
参考文献
[1]王芬, 段金巧.产前乳房护理对母乳喂养的影响[J].护理研究, 2010, 4 (11) :36.
[2]杨云.产后常见的母乳喂养难题以及对策[J].中华临床护理杂志, 2008, 5 (10) :98.
[3]林瑞秋.剖宫产术后母乳喂养体位[J].广东微量元素科学, 2007, 14 (6) :407-409.
[4]张福荣.影响纯母乳喂养的心理因素及心理护理[J].中华临床医学研究杂志, 2006, 10 (12) :18.
成功与否在自身 第4篇
年初的时候,透过一次活动有缘接触到香港撒玛利亚防止自杀会的主席黄佑荣先生。记得当时他说过一句话,“一个人的成功与否,与别人的看法并没有太大的关系,而关键在于自身。”言下之意,要注意自我调节。对于我们学生来说,又何尝不是如此?在香港的生活,是忙,是累。可是,之前从小学到高中,那么多年的苦读,我们不也都熬过来了么?回想高三的时候,大家可能或多或少都陷入过对高考、对“未来”的茫然和焦虑。当把高考当作终点、当作结束来看待的时候,一切就有了押赌注的成份,有了些孤注一掷的味道。等到成绩揭晓,高考时的“英雄榜”相对以往的成绩,变化是多么的大。于是,几家欢喜几家愁。等到我们进入大学了,发现这里又是一个崭新的起点,高考并不真正具有决定终生的权力。那么,我们现在不也是一样么?把一切都看作是一段过程,走过,经历过,感悟过,成长过,便好。
我不是说人没有必要跟自己“较真”,而是要在追求理想的道路上学会调节与平衡。既然成才的道路千千万,人才的标准万万千,那又何苦要把自己逼向心灵的死胡同?
用健康的心态来看待成长与成功
内地知名电视人杨澜曾经说过,“这是个人人崇拜成功的年代,但是登上顶峰的人毕竟凤毛麟角。对成功,我们的定义很狭窄,往往感觉付出太多,收获却太少。”其实,这又何尝不是我们求学香港的内地学生所面临的问题?离开家人朋友这么远,大家身上都承受了希冀与期待。而尤其是在这种时候,我们更应该学会了解自己,认识自己,从而更好地定位自己。“每一个成功是困境的开始,人要想着怎样度过困境。人要想做独特的自己,就不要太容易受伤,脸皮要厚点。”“有时候,人并不喜欢自己工作的环境,环境给人相当大的压迫感,这时候,你一方面要寻求突破,另一方面,你心里要清楚你要什么。”
是的,差不多每一位成功的人士在他们的传记或者言谈之中,都会提出“你要什么”这个问题,而不是盲目地跟随潮流,做出违背自己意愿或者压根就没有“自己”意愿的抉择,逼迫自己去为了别人眼里的那个“自己”而改变。殊不知,连这也会因人而异。那么,何不选择“做独特的自己”?我们可以不成功,但不可以不成长。毕竟成功在生命中只是一两个点,成长却是我们可以真实把握住的东西。当我们把这一切都了然于胸时,便会发现:噢,原来只是转换了一个思维方式,世界便大不相同!
怀颗感恩的心生活
毕淑敏的《提醒幸福》相信大家都不会陌生。“享受幸福是需要学习的…… 人可以自然而然地学会感官的享乐,却无法天生地掌握幸福的韵律…… 幸福是一种心灵的振颤。它像会倾听音乐的耳朵一样,需要不断地训练…… 幸福并不与财富地位声望婚姻同步,这只是你心灵的感觉…… 所以,当我们一无所有的时候,我们也能够说:我很幸福。因为我们还有健康的身体。当我们不再享有健康的时候,那些最勇敢的人可以依然微笑着:我很幸福。因为我还有一颗健康的心。甚至当我们连心也不再存在的时候,那些人类最优秀的分子仍旧可以对宇宙大声说:我很幸福。因为我曾经生活过…… 常常提醒自己注意幸福,就像在寒冷的日子里经常看看太阳,心就不知不觉暖洋洋亮光光。”
那些初中语文课本里耳熟能详的文字,在此时此刻读起来,仿佛是有一语道破天机的魅力与魔力。可是,现实生活中的我们,又有几人可以记取呢?
怀颗感恩的心生活,可以让我们从腐朽里看到神奇,从平凡中找寻精彩,从失败里总结教训;怀颗感恩的心生活,可以让我们在“一无所有的时候”仍然记得父母的养育之恩,让我们在悲观失望时坚强乐观地走下去,带着满脸倔强的微笑,大踏步地向前;怀颗感恩的心生活,可以让我们忘记一切暂时的忧虑与愁苦,只沉浸在幸福的回忆与积极健康的心态之中;怀颗感恩的心生活,我们所失去的只是烦恼,得到的则可能是我们对于生活的全部希冀与梦想。
成功与否 第5篇
1)终端产品陈列柜。终端陈列柜的质素高低,关系到消费者对此品牌的印象。首先,产品陈列柜所使用的颜色和造型要与品牌的理念相协调;其次,能更好地衬托、渲染产品;第三,要紧跟潮流,不会过时。
2)试衣间。试衣间不在于大,而在于精。感受一个品牌,就要试穿其产品,那呆在试衣间的这段时间,将会是消费者做出决定的关键所在。由此,对试衣间的规划要通风条件好、空气清新;要准备有挂衣服的地方和女性化妆的一些用品;还要有关于内衣穿着方面的“指引图”;墙面的颜色和灯光也很重要,要让女性感受到温馨,就像在自己房间一样。
3)收银台。是整个卖场空间的重要组成部分。重要的是要与陈列柜的能够协调一致、相辅相成,起着装点卖场,规范化的作用。另一方面,可以储存资料和便于结帐。
4)灯光。如何吸引女性的眼球?如何更好地取悦她们?留住她们?“良好的灯光”已被消费者列为最重要的环境因素之一,有75%的消费者认为卖场的灯光很重要,会直接影响她们的购买行为。尤其像内衣这样特殊的个人消费产品,大部分女性主要凭感觉来购买,灯光对于她们的影响就显得更为突出。
灯光分天花、橱窗、灯箱、陈列柜、试衣间、灯模等几个方面,主要是起烘托产品和渲染卖场气氛的作用。要想最大程度地发挥灯光的作用,就必须考虑到内衣产品的陈列方式和装潢设计的风格,不单纯追求灯的排列整齐和造型独特,更强调在有物体(含货物陈设及形象喷绘图)的地方有充足的直射的光线(以造型美的射灯为主)。没有展示的地方就通过间接光源,这样利用光线的疏密与变化,使卖场的层次更加多样化,空间感更强,购物气氛更浓。
另外重要的一点是要注意灯光的节能,以降低不必要的成本。
5)专卖店外墙及门头的设计规划。专卖店的门面也是一个品牌的门面,最主要是要能清晰地表现出品牌的名称和标志,要醒目、简洁、大气,并且能表达出品牌的文化理念。同时,在色彩和装潢上要能与旁边的店铺有明显的区别。如:高亮度的色彩吸引路人的注目,同时通过店面建筑的语言,体现出品牌的某种特性,是使品牌深入人心的重要途径。
6)货场区域的合理设置。货场区域的设置要有一条流动线,让消费者从进门到出去,能顺着产品陈列的指引方向,自觉地看完产品,不存在产品陈列的死角。它与试衣区、休息区有明显的区别,同时又形成一个整体。主要的目的是让消费者能更好地挑选自己满意的产品,并对全部产品有大致的了解。
7)消费者休息区设置。消费者休息区是一家内衣专卖店人性化的表现之一。陪伴女友或太太选购内衣对男士来说是件苦差事,而在休息区,他们就能感受到体贴、周到的服务。例如:在消费者休息区配有舒适的沙发、茶几、摆放各类时尚新潮的女性杂志及关于汽车、足球等方面的杂志,以及使用VCD/DVD播放品牌的动态新闻或精彩绝伦的内衣秀等。让每一个到专卖店的人,都能感受到温馨、细致的服务,进而树立品牌的美誉度和忠诚度。
8)POP广告的设置。POP广告是卖场必不可少的推广品牌的手段之一。具体功能:1/新产品告知的功能 2/唤起消费者潜在购买意识的功能3/取代售货员的功能4/渲染卖场气氛的功能5/提升品牌形象的功能。
POP是英文POINT OF PURCHASE的缩写。POINT是“点”的意思。PURCHASE是“购买”的意思,POINT OF PURCHASE即“购买点”。这里的“点”,具有双重含义,指时间概念上的点和空间要领上的点,即时点和空间的点。具体讲,POP广告是在有利的时间和有效的空间位置上,为宣传产品、吸引顾客、引导顾客了解产品,从而诱导顾客产生购买欲望的商业广告。
在内衣专卖店/专柜,可以进行如下的POP广告设置:
1.店面 P0P:是店铺的面部表情,包括招牌、橱窗、标识物等。一般以商品实物或象征物传达专卖店/专柜的个性特色以及季节感等。
2.地面POP:利用卖场内有效视觉空间,设置的展示架、立体形象版、X展架、易拉宝等。大致与顾客视线水平一致,是吸引顾客注意力的焦点。
3.壁面POP:利用墙壁、玻璃门窗、柜台等可应用的立面,粘贴商品海报、招贴传单等。以美化壁面、商品告知为主要功能,重视装饰效果和渲染气氛。
4.悬挂 POP:从天花板垂吊下来的展示,高度适中。如:品牌标志旗、服务承诺语、吉祥物、吊旗等。微风拂动,造成各种动感,从各个角度,都能直接促使注意。另外一点,要特别注重悬挂POP的造型特点,新颖、生动化的造型能更好地传达产品的信息和吸引消费者。
5.货架POP:利用商品货架的有效空隙,设置小巧的POP,如:落地架上“新品上市告知”、商品宣传册、精美折页、小吉祥物、赠送礼品等。近距离阅读,“强制”顾客接收商品信息。
6.指示POP:箭形标志是含有引发注意、指示方向、诱导等涵义的视觉传达要素。如:区隔商品销售域的指示牌,还有服务咨询台、导购图示、导购小姐等。以方便顾客购买为主要目的。
7.视听 P0P:在卖场内视野较为开阔领域放置电视录像或大型彩色屏幕,播放产品广告、品牌形象广告等。以动态画面和听觉抓住顾客的注意力。
9)品牌文化道具的运用。文化元素是表现一个品牌内涵的最佳元素,只有文化才能源远流长,经久不息,通过文化元素来突出内衣品牌内涵,能与消费者产生共鸣,拉近距离,令消费者从心去感受一个品牌,由内心到外表,接受此品牌的理念并发扬传播,忠诚度得到进一步的升华。
在专卖店/专柜中,通过一些道具来衬托品牌、表现品牌文化,要注意以下几点:1/所使用的道具的质感,必须与品牌所宣传的文化点相协调,例如表现品牌“时尚”元素,千万不要使用“传统、古朴”的道具;2/道具造型要生动,摆设的位置要适当,切忌盖过产品的陈列。3/渲染和加强品牌所具有的文化理念。
10)导购人员的行为。(因为一个卖场空间环境不能缺少人员,所以我把其归纳进来。)包括导购人员站立的位置、服务态度和笑容。我们称之为“软终端”。对于一些软终端,如导购员的礼仪举止、热情口碑,店长的现场推荐等,要在对产品知识深入了解的基础上,进行生动化的运用。据权威杂志报道,55.1%的女性认为别人(导购员和亲朋)的意见是决定购买的主要因素;32%的女性认为店员现场推荐,17.5%的人受产品摆放位置及醒目程度的影响。以上数据得出:由导购人员的口碑宣传这样的软终端形式,往往能形成销售产品上的叠加效应。
11)装饰材质的设定。材料的风格与品牌的风格要一致。也就是说,装修材料的运用效果给人的印象如何,与品牌的定位给消费者的感受,两者是相吻合的。举例说明:如使用“罗马柱”来装饰,那么这个品牌给消费者的印象应该是欧化、奢华的风格。如果要表现一个品牌的“时尚、简约”,那么,使用玻璃、金属的线条的材料来装潢,就比较贴切些。
12)符合品牌风格的整体色调确定。请参照“基础视觉要素”篇中的色彩原理。
13)橱窗展示设置。橱窗是一个店面的灵魂,消费者在进入店面之前是必须看到的,橱窗具有店内最大的展示面积,必须谨慎设计,充分利用,其作用主要表现在:
1. 展示产品,增加顾客购买欲望。
2. 营造格调,配合店内、外环境因素,以不同的设计手法,材料运用来营造格调,凸显产品的视觉感受。
3. 传递信息。例如“新品上市”、“打折优惠”等等。
4. 发掘潜在消费者,透过店面橱窗可以使店内情景及产品得到展示,从而使人流驻足成为可能。
14)音乐播放。音乐方面的运用:配以欢快、抒情的歌曲,来增强购买现场的气氛、增强品牌所要表现情感因素。同时,让来到店面/专柜的每一位顾客,感受音乐带来的愉悦,心情得到放松,从而细心地挑选自己喜欢的产品。
15)形象壁设计。形象壁是整个店面/专柜的视觉中心,也是展示品牌文化和形象的重点。因而要求色彩和造型的设计与品牌的个性、定位要完美结合。不同的店面面积要适当地对形象墙进行调整,以达到与整个店面的融合。专卖店形象墙设计应从以下几方面考虑:
◆ 色彩:颜色是视觉的第一要素。所采用的颜色按照“品牌标准色彩”进行设计。
◆ 造型:形状是视觉的第二要素。造型设计需与品牌的行业性质、产品定位、品牌文化特色相匹配。
◆ 材质:质感是视觉的细腻之处。参照上面材质设定的做法。
成功与否 第6篇
一场活动举办的成不成功,除了可以达到预期的效果外还应该是可以引起更深层次的反响。
有人会说:活动现场只要不出乱子就好,我们可以按照计划把活动做完就挺成功的。一场活动
成功与否 第7篇
为什么你对环境下满,老想跳槽?
为什么下属们私下叫你“女魔头”?
为什么你老是害怕解雇员工、招聘新人?
每一个看似平常的工作和职场问题,背后都有不平常的“父亲的影响力”!
很多人在职场奋斗中撞上了玻璃天花板(一种看似没有却实际上挡在上方的障碍)或水泥墙,这就是所谓的父亲的因素,你的父亲在你的生活中扮演了什么角色?这是个不可知的变化因素,但它必定会对我们产生重要影响,因为我们都是为人儿女的人。
你在工作中是获得成功还是失败,与你拥有一位什么样的父亲有相当大的关系。你是个吹毛求疵的老板,还是个任人差遣的下属,很大程度上都依赖于父亲养育你的方式。大量的研究结果证实,父母通过家庭生活不仅影响到孩子的个性,也影响了孩子在社会交往中的为人处事能力。
而无论是男性还是女性,父亲在他们的生活中所扮演的角色能反映在他们在职场中与领导的关系中。父亲如何与你互动提供了判断你的重要信息,有助于理解你的职业选择、人际关系和发展潜力。
你的职场人际关系模式,就是与父亲相处模式的复制
“我一直想要寻求父亲的认可,但是我却很少如愿以偿。现在与同事和客户相处时,我仍然想得到这种认可。这简直成了恶性循环:我很想得到父亲的支持,但是又知道自己无法如愿——因为父亲根本不是那种人。”——Mike,37岁
“直到在短短6个月内和男上司发生了第三次冲突,我才注意到自己的行为模式存在问题。那时我想,职场上的问题可能来自于我与父亲的关系。”——Sarah,28岁
许多人会说“我从不了解我的父亲”,其实,你了解你母亲对他的怨气,你自己对他的不满,甚至你认为他是一个失败者。所以请相信我,你是了解自己父亲的。有些人非常怀疑父亲对他们事业的影响,尤其是那些选择了与父亲不同职业的人。
实际上,不管你是否追随父亲的职业脚步,父亲的影响力都在以多种方式发挥着作用。它既可以造成你工作上最大的弱点,又可能形成你的主要优势,还可以决定你对工作的满意度。不论女性、男性、中年人抑或年轻人,它都适用。如果想在事业和人生中挖掘个人的最大潜能,每个人都应当正视这种作用久远的影响力。
作为事业方向的基础,父亲的影响力在有意或者无意间主导了你的事业选择和发展,影响着你追求卓越的能力,以及你建立有意义的职业关系的能力。而父亲的教养方式则是形成你事业中的父亲影响力的模板。
如果你对它的存在仍然心生疑惑,可以做一个试验。想想你和老板或者下属之间最近发生的一次冲突:或许是,你的老板把你叫到他的办公室,抱怨你最近表现不佳;或许是,你要考察自己下属的表现。把这期间发生的事情用一段话总结出来,重点是你的言辞与感受。
• 例如:回忆一下你对下属的一次批评或发火,或你与公司同事间的一次沟通冲突:
• 该情境下你所说的话,有没有让你回想起小时候父亲对你说话的方式?
• 你的语调和内容,有没有与父亲和你谈话时相同,或者恰恰相反?
• 你在该情境中,是否与小时候和父亲争辩时的感觉类似或者相反?
这些问题很可能立即让你感觉到,职场上某些情境中你的话语和感觉,让你回想起与父亲的相处。人们普遍表示,自己与下属讲话时就像父亲与自己讲话时一样,有时甚至连表达方式都一模一样。他们也常常表示,自己与老板的关系和自己与父亲的关系很相似。更多的例子表明,父亲对子女成年后的工作行为的影响,比人们预想的更为复杂。
父亲因素的确存在。如果认识不到它的存在,父亲因素将会对你的事业产生负面影响;而认清它的影响并学会如何控制,父亲因素就会成为一种积极的力量。
父亲对我们人生和事业有深远影响
——超越死亡、性别和亲近程度
阻碍对父亲因素深远影响的认识的,往往是貌似理性的抗拒。比如:“我父亲已经去世l5年了,他怎么可能还在影响我的事业呢?”,“我是女性,母亲对我的职业选择和工作表现的影响应该比父亲更深远。”,“我和父亲不是特别亲近,我不认为他对我有多大的影响。”,“我父亲没什么专长,一份工作一直于到退休。而我有专业特长,已经换了两次工作,在每个工作上都没有超过4年时间。”,“我根本不认同父亲的工作理念和工作经验,我和他完全不同。”让我们看看这些说法为什么似是而非。
1. 父子/女关系永远存在
如果你的父亲已经去世,这并不代表由父子关系产生的感情也不复存在。人生许多重要的关系都是永恒的。那些父亲已经去世的人,不论年龄大小,即使他们声称与父亲的关系疏远,都会惊讶于自己受父亲的影响之深。人们往往使用诸如“毁灭性的”、“无法抗拒的损失”等字眼来描述他们的感受。子女们通常都会感到沮丧和绝望,开始思考生命的意义。而且在父亲去世后,很多成年的子女往往会质疑和重新审视他们的职业,好像突然之间,他们曾经喜欢的工作变得微不足道、毫无意义,
多年之后,父亲的去世仍然具有强大的影响。有些人在父亲去世后很久,想要考虑辞职时,仍能听到父亲的声音在耳边回响,“我的孩子没有一个是轻言放弃的”。另一些人,当他们决定做出重大的职业改变时,通常会解释说:“我可不愿像父亲一样,始终没有机会做自己真正想做的事情”。
所以,不要低估了父亲对你的职业生涯的影响。如果你的父亲去世了,好好想想他去世时你的感想;如果你的父亲还健在,那就去和那些父亲已经去世了的朋友或同事谈谈,问问他们的职业决定是否受到了对父亲的回忆的影响。
2. 父亲的影响不亚于母亲
实际上多数女性和部分男性都认为,母亲对自己成年后从事的职业有更大的影响。没有人会否认母亲对于孩子的成长具有无比重要的价值。母亲整天操劳家务、父亲老不在家或者不关心子女,在这样 的环境中长大,母亲当然对我们的生命影响极大,因为她多数时间都在我们身边。母亲是女儿们的榜样,而主张父亲同样是女儿的榜样,则有点可笑。由于许多父女之间的关系疏远,父亲的重要性和对职业的长期影响似乎大打折扣。
尽管如此,大多数生于“婴儿潮”时期的人,父亲都是家庭中的经济支柱。在典型的核心家庭或者由核心家庭组合的家庭里,爸爸们每天穿着套装、制服或者工作服出去上班,而妈妈们留在家里做家务。即使母亲有工作,从职业和收入方面来说,她们的重要程度也会被视为是第二位的。
很有代表性的情况是,男人挣钱较多,他们抽不出时间照顾子女;而且,相对于女性从事的辅助性的职业(比如教师、护士、社会工作者等等),他们的工作才是“真正的”工作(比如医生、律师、商人等等)。这里很有必要声明,教师、护士或者社会工作者这样的职业,在社会需要程度和重要性等任何方面都不逊于传统的男性职业。不过,文化上对女性的偏见已经存在了很多年,到现在仍会不时地表现出来。女性仍被认为是父母亲中对孩子具有第一位影响的人。
在这样的传统家庭中长大的女性,需要了解母亲在家庭中的角色以及父亲在职业方面的传承。对于自己的职业生涯来说,她们握有一把双刃剑,一边是父亲的职业角色和工作理念,另一边是母亲对职业女性的观念和看法。理解父母两人对于家庭和职业的信念对她们非常重要。要在父亲的专业成就和母亲认为女性“应该”做什么的观念之间,发展自己的职业能力,对于女儿们来说实属不易。
出于以上理由以及人类千百年来的历史,父亲在孩子的职业选择和工作习惯方面,确实具有超过母亲的重大影响。职场一直都是男性的竞技场,男性也总是根据他们的工作和取得的事业成就来定位。多数男性将事业的失败视为个人的失败,而许多女性对于事业不成功的男人也持有同样的看法。另一方面,女性在家庭中则是主角,养育子女和操持家务的能力决定着女性的定位。不管对错与否,这样的文化观念根深蒂固,而且已经存在了几千年。越来越多的男性和女性正在挑战这些陈旧的文化教条,然而,理解父亲的职业理念与子女事业的关联作用,能够使子女们获益良多。
3. 父子关系疏远,不代表父亲没有影响力
再来谈第三种不同意见,也就是“孩子和父亲的关系疏远,父亲不太可能有大的影响”。这种反对意见似乎正确。我们生活的社会里,父亲在家庭中经常情感缺位,相对于母亲,父亲们推卸了很多养育子女的责任。孩子们拥有一种自然的心理和情感需要,就是希望父母亲都在身边,如果缺少一方,就会引起负面作用。缺少父爱的负面作用,往往在职业道德、事业心和权威认同上敏感地反映出来。父亲对子女们很重要,孩子们本能地渴望父亲存在于自己的生活中。
当然,缺少父爱并不是引起孩子的职业问题的惟一原因。父子关系存在问题、关系紧张或者父亲的愤怒和失望,会影响职业选择、同事关系等方方面面。不管这些影响有多么消极,其中也同样存在着积极的因素。与父亲(或者继父,抑或者其他父亲样的人物)的关系,能够给你提供丰富的阅历和见识——即使父子关系很差,也能提供!你可以运用这些阅历和见识重整旗鼓、收复失地,或者让自己的事业更上一层楼。了解父亲在人际关系、工作、财务等方面的宝贵精神遗产,你就会拥有力量的源泉与事业的跳板。
4. 父亲与你职业不同,仍然会有影响
第四种意见认为,父亲的职业生涯与自己无关。这种想法短视而危险。打个比方,你的父亲在战后进入通用电气公司(General Electric)工作,在非管理职位上待了48年,直到退休;而你上了大学,拿到高等学历后,在多个管理职位上工作过,由于公司的兼并也曾经被解雇过两次。表面上看,你和父亲的职业经历毫无共同之处。
但是请想想你父亲的工作动力、职业选择、工作的稳定性和耐力,以及人际关系的模式。这些默默进行的日常行为,构建和奠定了你的父亲因素。即使你是女性,也受自己的“父亲因素”的影响,你的行事风格、专业程度以及其他方面都受到父亲的影响。
你会观察父亲的职业,你看到他在同一家公司干了48年。父亲的工作行为给你提供了有价值的指示,引导你去面对自己的工作。父亲如何在职场中生存,如何应对难以相处的上司,如何在一个岗位上坚持了那么久,你可以从中发现数量可观的智慧和技巧。不要因为职业不同,就忽视父亲的职业生涯,父亲曾经用来解决问题的手法,也会有助于你的职场生存。
5. 不论你认不认同父亲,他的影响力都在
持有最后一种意见的人,父亲也许不会成为他们的职业榜样或者想要效仿的人。这种关系中的子女们,不管年纪大小,都会陷人到恼火、怨恨和愤怒的泥潭中难以自拔,极力想成为父亲无法成为的专业人士。
成功与否 第8篇
选择大于努力选项应选朝阳实业好项目
众多创业专家共同认为如果你还想选择什么小吃、药品等项目, 你已经OUT了, 健康环保实业项目才是大势所趋, 每年呈几何倍增速度在增加, 有上万亿的市场。
防病于未然保健养生是如今媒体街头巷尾的热门话题, 很多人都知道一年四季应该顺应时令, 吃什么好, 什么不好。 告别自来水, 喝经过净化的健康的水, 呼吸新鲜健康的空气。 PM2.5的到来使人们感觉到纯净健康空气的重要性, 让很多人明白室外的空气我们个人无能为力, 但是家庭的空气一定要保证健康, 所以近几年来, 人们在室内空气健康净化方面比以前更舍得花钱, 几千几万的净化电器已经进入寻常百姓家里。 但是人们专注室内净化的同时, 却忽视了室内的污染源头。
【何谓源头至关重要 】众所周知, 家庭存在两大污染源头:厨房和卫生间。 厨房已有油烟机解决, 卫生间的污染源头就是每天人们如厕时人体排泄物产生的有毒有害气体。 即使是价格昂贵的净化电器也不能从源头解决。 独家专利新品做如康填补了空白。 专注卫生间源头净化, 解决了人们多年的烦恼, 保证了家居的健康环保, 让人们乐享品味时尚的新生活。
不难看出, “坐如康” 健康环保新家电, 必然如抽油烟机等家用电器一样迅速普及亿万家庭、宾馆。 市场容量巨大, 商机无限。
抢占市场先机就是赚到了第一桶金
做如康总部针对大多数加盟商缺乏营销经验, 人脉、强大的资金等不利因素, 帮助代理商顺势借力。 化不利为有利, 抢占市场先机, 独家占有市场垄断权, 发展下级有实力的分销商 , 这样代理商就能轻松拓展市场 , 快速赚到第一桶金 。
和有前途的企业一起合作 , 当然会有更大的前途 。
李永祥自有资金只有几万元 , 想做独家代理不但资金缺乏 , 更缺少人脉和销售经验 。 分管李永祥区域的招商经理李军经过与他多次沟通 , 感觉他是一个长久做事的创业者 , 于是帮他向公司做了申请 , 先用少量资金独家占有市场 。 然后总部因人而异 , 因地制宜的帮他进行全面策划 , 用极低的成本在本地不到一个月的时间找到了三家分销商 , 其中有一家分销商第二个月就做了一个320台的团购订单 , 李永祥不但回笼了资金更大赚了一笔 。
原来这家分销商是做某大品牌产品的代理商 , 不仅资金雄厚而且人脉客户众多 , 当有人问及李永祥的创业成功之道时 , 他总结道 : 独家专利做如康 , 超级ZRK营销秘籍 , 双剑合璧 , 我不赚都难 。
温馨提示 : 并不是因为事情难 , 我们不敢做 , 而是因为我们不敢做 , 事情才难的 。
实业智电坐如康邀您共享一个千亿级的蓝海市场
坐如康市场多大?有多少WC就有多大
健康环保新家电 , 独行生意赚大钱
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诚然 , 谁想闻到自己拉屎的臭味呢 ? 谁不想过健康品位的生活呢 ?
美女完美电器 “ 康吧1号 ” 坐如康应运而生了 !
大环境 :PM2.5时代来临 , 各种环境污染 , 特别是室内污染极大危害人们的身心健康 。 众所周知 : 家庭的两大污染源1是厨房 、2是卫生间WC, WC是居室最主要的污染源 , 而WC的污染源头人体排泄物产生的有毒有害气体 , 即异味 。
天天面对 : 人每天在座便器上方便时 , 排泄的粪便产生大量难闻的含有氨和硫化氢等气体的臭气 。 这些恶臭气体从座便器便池内向卫生间释放 , 并扩散到整个住宅空气当中 , 危害自我健康 。
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2013年07月22日02:20京华时报微博我有话说 (3356人参与 ) 老人 ___ 与海 [ 北京 ]
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