微生物学检验医疗

微生物学检验医疗（精选4篇）

微生物学检验医疗 第1篇

1 讲好绪论使学生产生浓厚的兴趣

通常学生在第1次上课时, 都是带着新鲜、期盼、好奇心来听课, 利用这一特点, 教师须特别重视绪论课教学的趣味性, 要像讲故事般地讲述。比如在讲微生物学的发展史时, 可以将人类第一次从宏观世界带到微观世界的荷兰人列文虎克 (Antony Van Leeuwenhoek) 自制人类第一台显微镜并用它从雨水、牙垢中观察到各种形态的微小生物的过程、法国科学家巴斯德 (Louis Pasteur) 为了解释葡萄酒变质的原因而发现巴氏消毒法的过程、德国医生郭霍 (Robert Koch) 在微生物学发展中的贡献及英国细菌学家弗莱明 (Alexander Fleming) 发现青霉素并获得诺贝尔奖的历程做为例子;另外在讲述具体某个微生物时, 可以形象地联系实际, 给学生介绍一些小典故或一些由病原体引起疾病的流行病学资料, 尽量从故事引申到教学, 使学生产生兴趣并认识到该章节内容的重要性[2]。

2 制定适合检验专业的教学大纲并选择合适的教材

目前我国可供检验专业选择的医学教育的本、专科专用教材较多。英文原版微生物学教材内容丰富, 实例、图示也较多, 且侧重于对问题、方法和结论的比较、归纳, 更为注重学生综合素质能力的培养, 是我们进行教学的基础。但由于其为纯英文版, 要求学生有较高的英文水平, 且教材的内容繁多, 学生难以抓住重点, 其知识覆盖广度和深度只适合教师的备课, 而不适合学生阅读领会[3]。因此, 教学中我们尽量选用内容难度和深度相对适中、要点明确的教材, 讲述微生物总论和各论前尽量带有实例或带有趣味性知识, 鼓励和促进学生在课前自学, 充分调动学生听课、学习的兴趣。我们根据执业医师考试大纲的要求, 取舍、调整现有的教学内容, 在制作幻灯片时尽量使用图示或动画来表示内容, 做到要点明确, 便于学生记录。

3 使用多种教学手段理论结合实践

教学中我们尽量理论与实践相结合。例如在《临床微生物学检验》教学中, 理论课中讲述的往往是肉眼不可见的细菌、病毒、真菌等微小生物, 由于其内容繁多, 很容易出现知识枯燥乏味, 使学生失去学习的兴趣。而实验课中接触到的却是具体微生物的培养、染色、菌落鉴定、生化反应等内容, 由于学生亲手操作, 内容具体可见, 所以相对容易掌握, 学习主动性强, 可以作为对于理论课的补充学习。在理论课教学中应充分利用多媒体设备, 帮助学生充分理解教学的难点和重点, 信息量大、缩短教学时间、提高教学质量和效果, 更好地实现教学目标[4]。教师教学过程中在保证课堂纪律的同时, 应尊重、爱护学生, 充分发挥学生的主动性和积极性, 同时还可考虑采取灵活多样的教学方式。如在讲解某个内容时, 尽量多地插入flash动画、实验教学录像等, 既能使学生更好地掌握理论知识、了解实验步骤, 并激发学生的学习兴趣。

4 注重与学生的交流、互动以活跃教学气氛

教学中应避免传统的灌输式教学, 加强互动, 营造活跃的课堂气氛。教学互动是指在教学过程中充分发挥教师和学生双方的主观能动性, 形成师生之间相互讨论、相互交流和相互促进的一种教学方法。讲授过程中, 教师应善用肢体、形体语言, 增加教师的亲和力, 并采用教师与学生互动的模式, 启发学生、鼓励学生学会提问。教学中, 应注意对一些教学信息的反馈, 如实际的学习效果与预期的教学效果存在一定的差异时, 要及时调整并修改教学方式。教师在授课过程中要充分注意学生的反应及情绪, 根据课堂教学效果调整教学方法;课间与学生交流, 注重关心学生的学习与生活。总之, 教师不仅要注意建立学生信息反馈途径, 注意信息的接收并据此及时调整教学方法, 通过不断完善教学过程, 努力提高教学质量。

5 注重启发式教育以培养学生的思维能力

启发式教学是指教学过程中教师与学生互动, 在保证教师主导性的同时, 注意发挥学生的主体性, 充分激发学生潜在的学习动力, 启发学生思考。教学中, 尽量从问题入手, 通过深入分析病例或生活事件, 引导学生思考并得出结论, 同时提出新的问题[5]。例如在讲述风疹病毒的致病性与微生物学检查时, 提出孕妇在妊娠期对TORCH感染的检查。TORCH感染是指常见的经垂直感染致胎儿畸形的病原体, TORCH它是一组病原微生物的英文名称缩写, 其中T (toxoplasma) 是弓形虫, R (rubella virus) 是风疹病毒, C (cytomegalovirus) 是巨细胞病毒, H (herpes simplex virus) 是单纯疱疹病毒Ⅰ/Ⅱ型, O (others) 是其他某些病原体。可以向学生提问, TORCH感染的危害性以及还有哪些病原体可以通过胎盘传播等问题, 以增加学生学习的趣味性。这种问题式教学, 在理论联系实际的同时, 可增加学生学习的主动性, 并能活跃课堂气氛, 使课堂不再成为教师一个人表演的舞台。

6 注重技能培训以提高学生实践能力

教学中注意教学内容的与时俱进。例如在传统的《临床微生物学检验》教学中, 在讲授分枝杆菌属时, 多数医学院校讲授的重点是在结核分枝杆菌一节中, 对于非结核分枝杆菌一般不讲授或只做简单的介绍。而近年来, 手术切口、注射部位的非结核分枝杆菌感染却时有发生, 在临床上做出诊断和治疗都比较困难, 而检验专业的学生在日后的工作中会涉及到具体的诊断, 因此应联系临床实际, 注意培养学生对常见的临床感染微生物的诊断知识。

基本技能训练是医学专业教学的重要环节, 特别是对于《临床微生物学检验》这一实践性很强的学科, 基本技能的培养更为重要。《临床微生物学检验》课程涉及的基本技能包括显微镜使用、临床标本采集、临床标本的接种、细菌分离培养和鉴定、细菌染色观察、体外细菌药敏试验等。我们在距正式授课之前半年就积极筹备, 做好授课安排。每个实验室做好试验试剂、菌种的准备, 对一些少见菌株或试验现象提前做好示教片, 保证良好的教学效果。

7 加大实验分数所占的比重

我们对考核方式进行适当的改革, 在成绩中适当调整了理论课与实验课在考试中的比例, 提高实践能力所占的比重。考试中让学生通过显微镜下的形态判断具体的细菌、观察学生培养细菌或染色的具体实践操作能力, 将考勤和课堂纪律表现作为平时成绩的一部分, 这样能综合评价其学习成绩, 改变了一张考卷决定其成绩的模式。

在教学过程中应不断摸索和完善适合医学检验专业特点的教学方法和教学模式, 不断地分析和总结经验、发现问题并采取有效应对措施, 为进一步改进医学检验教育提供重要参考。希望我们在临床微生物学检验教学实践和探索能够为其他医学院校开展临床检验教学提供参考和借鉴。

参考文献

[1]禹莉, 李玉云, 郝艳梅.医学留学生临床检验基础实验教学探索[J].山西医科大学学报 (基础医学教育版) , 2010, 12 (3) :320-323.

[2]刘东瀛, 刘斌波, 刘敏.改进医学微生物学教学方法探讨[J].基础医学教育, 2011, 13 (9) :785-786.

[3]陈云, 冯东举, 刘根焰, 等.留学生医学微生物学理论教学的体会和建议[J].基础医学教育, 2013, 15 (8) :791-792.

[4]曹亚军, 郭伟, 杨光.留学生药理学理论课的实践与探索[J].中国高等医学教育, 2007, (1) :35-36.

完善食品微生物学检验工作的建议 第2篇

【关键词】 食品微生物学检验；完善；建议

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2012.08.710 文章编号：1004-7484（2012）-08-2992-01

食品微生物检验工作是评价食品卫生质量，保证消费者饮食安全必不可少的手段，所以本文从人员、设施环境、设备及检验物资的管理与配制六个等方面阐述了影响食品微生物检验的关键因素，完善食品微生物檢验工作，使其更加高效、快捷地对食品微生物进行检测，出具公正、准确、可靠的数据。

1 人员

检验人员应经过一定时期的正规化、专业化的培训，具备必须的的理论知识、实践操作能力。单位应对新参加检验工作的同志，进行专业知识培训经考试合格后方能持证上岗，同时要确保实验室人员得到及时培训不断更新知识，学习和掌握新标准、新理论、新技术和新方法。

2 设施、环境

2.1 实验室的设施建设 实验室的设施建设微生物实验室的建设应以生物安全为核心，应符合《生物安全实验室建筑技术规范》的要求，确保实验室人员的安全和实验室周围环境的安全。同时实验室应具有进行微生物检验适宜充分的设施条件，包括检测设施及辅助设施，特殊的设备要在特殊的环境下放置和操作。按照不同检验类别要求设置实验室，实验室内要合理布局，清洁区与污染区划分明确要有明显标识。

2.2 环境条件的检测 实验时实验室温度应控制在18-26℃，相对湿度控制在30%-70%，每次使用进行检测记录。无菌室应在每次实验前后进行消毒处理，其消毒效果每月检测一次，结果可参照GB15981-1995《医院消毒卫生标准》的效果标准要求进行评价。具体消毒方法与检测如下：

2.2.1 紫外线消毒 在室温下，220V30W紫外灯下方垂直位置lm处的253.7nm紫外线辐射强度应≥70μW/cm2，低于此值时应更换，设置适当数量的紫外灯，确保平均每立方米应不少于1.5W。紫外线消毒时无菌室内应保证清洁干燥，应在无人条件下进行，作用时间不少于30min。

2.2.2 无菌室空气消毒效果检验方法（自然沉降法） 一般情况下无菌室面积≤30m2时，设一条对角线上选取3点，即中心l点、两端各距墙1米处各取一点；无菌室面积>30m2时选取东、南、西、北、中5点，其中东、南、西、北点均距墙lm。在所选位点，将9cm直径普通营养琼脂平板距地面80厘米处开盖暴露l5min后送检。

2.2.3 无菌室工作台面消毒效果检验方法（涂抹法） 一般情况下采集工作台面100cm2，用5×5cm2灭菌规格板，放在台面上，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返涂抹5次，并随之转动拭子，连续采样4个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml灭菌生理盐水的试管中送检。

3 设备及检验物资管理与配制

3.1 根据检验项目的要求正确配备仪器设备，并按质量管理体系要求对购置、验收、运转情况进行控制，按仪器设备的检定状态分类加贴红、黄、绿三色状态标识以防误用。对所有影响检验结果的仪器设备均应建立仪器设备档案，定期检定，做好期间核查。

3.1.1 恒温培养箱、恒温水浴箱、干热灭菌箱、冰箱等首次安装时要对温度的稳定性和一致性进行校准。记录培养箱、水浴锅和干热灭菌箱的温度稳定性达到平衡所需的时间。

3.1.2 高压蒸汽灭菌器 新购买的高压蒸汽灭菌器的时间和温度指示的准确度应满足要求，同时进行消毒效果检测，检测合格后方可使用，并且定期进行监测。

3.1.3 生物安全柜 在基层疾控机构实验室中使用生物安全柜基本是Ⅱ级安全柜，初安装需由厂家专业技术人员进行培训及性能测试，使用过程中厂家专业技术人员应定期对高效过滤器进行检漏或更换，对风速或风量、温湿度、含尘浓度、噪声、照度等方面进行检测，以保证检测人员、周围环境、检测样本的安全性，防止交叉污染，同时做好消毒、使用、维护、维修等记录。

3.2 检验物资的管理与配制

3.2.1 培养基大多为半成品，按说明配制分装后进行灭菌，培养基通常采用高压蒸汽灭菌法不同的培养基进行灭菌的压力和时间均有不同的要求，部分培养基无需高压蒸汽灭菌只能煮沸灭菌。灭菌后应置于冰箱内保存，使用前应置培养箱内做无菌试验。

3.2.2 诊断血清来源必须可靠，在有效期内使用和保存，使用时严格按无菌操作要求，避免造成血清的二次污染。

3.2.3 标准菌株必须来自权威机构或具有资质证明的机构，专人管理存放地点和设施应采取措施，非管理人员无法随意获取。为防止多次传代后菌株发生变异，购买时尽量购买多孔小瓷珠保存的菌株，每次使用取一个进行复苏，剩下的继续放冰箱中保存以备下次使用。

4 样品的采集、运输和保存

要获得准确、可靠的检验结果，首先必须采集符合要求的微生物样品，根据检测标准、检测方法和检测目的选择和确定相应的采样工具、运送容器、采样方法、采样部位、采样时机和采样量。样品的采集必须具有代表性，要考虑到各种可能影响样品质量的因素，防止因样品受到外源性污染或者保存不当样品变质和细菌生长，导致检测结果失去意义。

5 操作

操作人员必须牢固树立无菌观念，整个操作过程均要求无菌操作，例如操作时尽量靠近火焰动作要迅速；样品管口火焰灭菌、接种环每次使用前后均需火焰灭菌等。进入无菌室从样品的制备到检验都要采取必要措施防止二次污染，取样加样前样品、培养皿、试管、三角瓶等摆放整齐便于操作，操作前要在心中演练一遍，包括一支吸管用几次加几回样。原始记录要真实准确，能够复述整个实验过程，要按照GB4789标准规定的方法进行数据处理及结果判定。

6 检测方法的选择

根据检测目的条件优先选用国家GB4789系列标准，并根据实验条件、人员、设备选择哪一法，优先选用第一法。目前新的国家标准《食品安全国家标准食品微生物学检验》不断发布，应及时购买新的国家标准检验方法，新方法要及时进行学习，使用前必须经确认批准后方能实施。

过去食品微生物检验工作职能一般是由政府和企业检验组成，社会中介力量不足，现在私营检验机构逐渐出现，对我们基层疾控机构起到很大的促进作用。虽然活跃了检验市场，但是不可避免的带来一些问题，这就需要采取政府部门监管、行业自律以及社会中介力量三种监督相结合的方式，加强食品微生物检验的公正性。为使微生物检测数据更加科学、可靠和准确，每一个实验室必须建立完善的质量管理体系，对实验室与检测活动相关的所有因素进行有效的质量控制，同时在日常工作中我们要遵守职业道德，要有严谨科学态度才能使微生物检验数据的准确性得以保证，为食品安全提供可靠技术保障。

参考文献

[1] 齐小秋.病原微生物检验.卫生部病原微生物检验教材编写组，2009，02.

[2] 李志勇，谢均宪，许龙岩.食品微生物检验的质量控制[J].检验检疫科学，2004，14（4）.

微生物学检验医疗 第3篇

【关键词】临床微生物；检验；感染检测

【中图分类号】R-1 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2015）04-0227-01

引言：医院感染的发生有三个重要环节，其中包括传播途径、传染原的存在与易感人群，这三个环节与微生物学检查有着直接的联系。医院感染的发生有以下这两种类型，分别为外源性感染（指的是由于患者本身以外微生物所引起的感染）与内源性感染（指的是由于患者本身携带微生物所引起的感染）。必须要正确诊断各种不同类型的感染，并对微生物学进行检查。因此在医院感染的诊断、监测、流行病学调查、抗菌药物的使用等等方面临床微生物学检验都有着非常重要的作用。

1.做好分析前的质量控制

分析前的质量控制是确保微生物检验结果准确最重要也是最难控制的环节。鉴于此，首先临床微生物检验工作者应结合本医院的实际情况以文件形式制定一系列标本采集标准操作规程，为临床医护人员提供实质性的参考；其次，由于很多护士的质量控制意识较为淡薄且人员流动性相对较大等等，微生物检验工作者需要深入到临床科室并采用多种形式对其进行宣传，使所有医护人员都能明确了解标本质量对于检验结果的意义，同时，微生物室必须要定期监测标本质量，并且将结果通报给相关科室与感染控制部门，充分发挥它的督促作用；最后，微生物检验工作者必须要加强自身的责任意识，对于接收的标本严格执行核对制度，并将处理时间控制在规定时间之内，坚决退回一些不合格的标本并说明退回原因，防止由于标本质量而导致误诊。

2.重视原始标本直接涂片的诊断价值

原始标本涂片检查不但能对微生物检验过程起到导向作用，而且还能快速的为诊断提供具有价值的信息。在细菌培养的过程当中，受到培养特异性与细菌生长缓慢这两方面的制约，而不能快速的回报结果，可以在细菌培养之前对标本进行涂片镜枪，其中包括染色标本片检查与未染色湿片位相显微镜观察，并与患者的临床表现相结合，快速提供诊断信息，对一些感染性疾病特别是急重症感染有重要的实用价值。例如无菌体液如胸腹水、血液等等的阳性标能够直接根据涂片上的细菌形态与染色特征快速回报临床结果，并指导用药，在细菌鉴定中，显微镜形态学所体现的价值远甚于此，然而目前临床由于分子生物学技术与自动化仪器的广泛应用，似乎存有忽视形态学检查的这一倾向，同时，由于缺少模式菌株形态学图谱，以及鉴定镜下形态必须要具有丰富的经验，使得各医院在展开显微镜形态学检查时困难重重，这就需要所有的检验工作者在态度上给予高度重视，反复练习，总结归纳。除此之外，相关机构必须要尽快建立起形态学检查的标准方法，使临床有据可依，充分体现显微镜形态学所具有的应有价值。

3.发展快速准确的诊断技术

对于一些发病率与病死率都非常高的感染性疾病，尤其是对于那些体外难培养的病原微生物，临床迫切需要准确且快速的诊断方法。目前基因芯片、血清免疫学、多重聚合酶链反应（PCR）等等技术在微生物领域的应用，使各种疑难病原的确诊率得到提高。由于条件限制一些前沿技术很难在基层医院开展，如何更有效地提高此类医院快速诊断感染性疾病的水平，是所有微生物检验工作者所需要考虑的一个崭新课题。

4.做好细菌药敏试验标准化

加强药敏试验规范化与标准化是获得药敏试验准确性的关键。首先，必须要标准的试验方法与合格的药敏试剂才能获得准确的药敏试验结果。目前很多国内医院的微生物室都采用K-B纸片扩散法来进行药敏试验，该方法是受到实验室标准化协会（CLSI）与美国临床认可的，但是该方法非常容易受到纸片质量、菌液浓度等等因素的影响，因此，想要得到准确的药敏试验结果，就必须要严格控制室内质量，确保药敏纸片与菌液浓度等等因素都在控状态，同时还必须要充分了解K-B法的局限性，对于一些不能使用该方法进行检测的菌株，应参照最低抑菌浓度（MIC）法检测。

5.积极与临床科室进行有效沟通

目前，临床微生物检验的快速发展，新的菌株与耐药形式被不断的发现，专业检验人员尚且应接不暇，部分临床医生更是知之甚少，怎样才能将有限的实验数据变为实用的诊断信息，为患者提供更好的服务，这就需要所有微生物检验工作者与临床进行积极有效的沟通交流，微生物检验工作者在鉴定病原学前需要多了解患者信息，包括患者年龄、性别、推测性诊断等等一系列信息，还需要结合患者体征与症状进行正确判断，便于分析（属于有菌部位或无菌部位的标本，属于典型致病菌或条件致病菌），从而进行下一步的检验。

6.积极参与医院感染控制工作

微生物检验工作者必须要监测每一批医疗器械的灭菌情况，对手术室，换药室、重症监护病房、治疗室等等重点部位进行空气监测，及时发现问题并联系感染控制部门与临床。同时还需要掌握本院常见病原菌的趋势与耐药概率，定期将数据反馈给临床医生与感染控制部门，为编写本院的抗微生物药物指南提供帮助，指导合理用药，延缓细菌产生耐药性。对一些医院的重要病原菌进行重点监测，防止发生院内感染。

综上所述，在感染性疾病仍然是人类健康严重威胁的今天，临床微生物检验工作者更应提高理论素养，丰富自己在感染性疾病诊治方面的知识；同时使自身职能得到充分发挥，在快速准确做好病原微生物诊断的基础上，和临床进行及时有效的沟通交流，积极参与到诊疗活动当中；做好医院感染监测工作，指导临床实施科学的消毒与隔离，从而真正发挥在医院感染控制中的作用。

参考文献：

[1]郝淑贤.临床微生物学检验与医院感染相关性研究[J]. 当代医学. 2012（14）

[2]左丽，黄抗美，陶莉.肿瘤专科医院恶性肿瘤院内感染123例临床分析[J]. 实用肿瘤杂志. 2012（01）

解析食品微生物检验 第4篇

关键词：食品微生物检验

食品检验的特点是：

①法规性：检验方法必须采用国家法定的检验方法，检验结果具有法律效力。

②要检验的菌少、杂菌含量多。

a需要增加要检验的细菌。

b抑制杂菌。

③检验的范围广。

④检验结果具有数量界限。

⑤采样后要求应尽快检验，快出结果，操作要慎重，结果要准确。

1 生产实验原理

在各种法规检验方法中很重要的环节就是生化试验，设计生化试验的原则就是：在试验过程中加入某些化学物质，使细菌的代谢产物与加入的化学物质产生肉眼可见的变化或特征。以下是我对部分生化试验原理的解释。

①过氧化氢酶及过氧化物酶试验原理：有些微生物可以将过氧化氢分解为水和氧气.

②甲基红试验原理：一些细菌分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸可被进一步分解为甲酸、乙酸、乳酸和琥珀酸，使培养基的pH值下降到4.5以下，加入甲基红呈红色，阳性。

③V-P试验原理：一些细菌分解葡萄糖为丙酮酸，进一步脱酸产生乙酰甲基甲醇，乙酰甲基甲醇在碱性溶液中被空气中的氧氧化成二乙酰（丁二酮），进而与培养基内蛋白胨中所含的精氨酸的胍基发生反应生成红色化合物。

④柠檬酸盐试验原理：一些微生物可以以铵盐作为唯一的氮源，以柠檬酸盐作为唯一的碳源，在柠檬酸盐培养基上生长，分解柠檬酸盐生成碳酸盐使培养基变成碱性，酸性指示剂变色。

⑤马尿酸盐试验原理：一些细菌可以水解马尿酸生成苯甲酸和甘氨酸，苯甲酸和氯化铁反应生成苯甲酸铁沉淀。

⑥硫化氢试验原理：有些微生物分解含硫氨基酸产生硫化氢，硫化氢与培养基中的亚铁盐反应生成硫化亚铁沉淀，使培养基变黑。

⑦靛基质试验（吲哚试验）原理：一些细菌可以分解蛋白胨中的色氨酸，产生靛基质，靛基质可与对二甲氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而成红色。

⑧卵磷脂酶试验原理：一些细菌产生卵磷脂酶，分解卵磷脂产生甘油脂和水溶性的磷酸胆碱，在菌落周围形成一个乳白色的沉淀环或浑浊带，在周围有一个透明圈。

⑨脱氢酶试验原理：微生物有脱氢酶，可使氯化三苯四唑（TTC）还原，由无色变为红色，所以菌落变红色。

⑩淀粉酶实验原理：一些细菌可产生淀粉酶将淀粉分解为双糖或单糖，加入碘，菌落周围不变色。

⑾明胶液化实验原理：一些细菌可产生胞外酶，使明膠蛋白分解为氨基酸，从而失去明胶凝固能力。液化为阳性，仍为固态为阴性。

⑿重点试验——三糖铁试验（TSI）原理：

1.1 成分：牛肉膏、蛋白胨（氮源）

三糖：葡萄糖0.1%、乳糖1%、蔗糖1%。

酚红指示剂、琼脂（pH值调至7.4，培养基摆成高层斜面）。

1.2 接种：

①穿刺接种。

②斜面划线接种（36℃培养18-24h）。

1.3 观察结果：

①分解葡萄糖、乳糖和蔗糖。斜面产酸变为黄色（阳性），底层产酸变为黄色（阳性）。

②分解乳糖、蔗糖，不分解葡萄糖。斜面、底层都产酸，都变为黄色（阳性）。

③分解葡萄糖，不分解乳糖和蔗糖。斜面产碱显红色（阴性），底层产酸显黄色（阳性）。

④分解含硫氨基酸产硫化氢。硫化氢与亚铁离子生成硫化亚铁，使培养基变黑。

⑤分解糖类产气，培养基中有气泡或裂缝。

2 前沿技术的应用原理

2.1 酶联免疫吸附测定﹙ELISA﹚原理：酶与Ab或Ag与相应的Ag或Ab结合，事先将待测标本吸附在固相载体表面，标本中的Ag（或Ab）亦吸附在固相载体的表面，加入酶标Ab（或Ag），酶标Ab（或Ag）与相应Ag（或Ab）结合后不能被缓冲液冲掉。当加入酶相应的底物时，由于酶的催化作用，底物发生反应可呈现颜色反应，颜色的深浅与酶作用于底物所形成的有色物质的量有关，即与待测标本中相应的Ag（或Ab）的量成正比。

2.1.1 注释：固相载体：（聚苯乙烯）

①吸附（也称包被）；Ag或Ab吸附到固相载体的过程，也称之酶标板的致敏。

②封闭：用牛血清填补固相载体上剩余的位点。

2.1.2 基本方法：

①4℃过夜包被Ab或Ag。

②PBS冲洗三遍，每次3分钟。

③加入酶标Ab或Ag（37℃湿盒孵育30分钟）。

④PBS冲洗三遍。

⑤加入OPD和Ｈ2Ｏ2反应15-30分钟。

⑥用2Ｍ浓硫酸终点反应（酶作用时间越长，颜色越深，浓硫酸使酶失去活性）。

⑦用酶标仪测OD值（吸光值）。

此测定方法简便易行、灵敏度高，但易出现假阳性（非特异反应）。

2.2 PCR技术（P-聚合酶 C-链 R-反应）

2.2.1 仪器：PCR仪

2.2.2 三个温度：变性温度90-95℃

退火温度40-60℃

反应温度（合成ＤＮＡ）70-75℃

2.2.3 引抑为一小段寡聚合苷酸，酶为Tag酶。