化血清白蛋白范文

化血清白蛋白范文（精选7篇）

化血清白蛋白 第1篇

1 材料与方法

1.1 动物

雄性健康Wistar清洁级大鼠 (甘肃省医学科学研究院动物房提供) , 体质量105～155g。

1.2 药物

批号为99041204的清开灵注射液 (北京中医药大学药厂提供) 。

1.3 试剂

NF-кB测试盒 (Ⅰ抗为NF-кB P65, Ⅱ抗为rB-IgG/FITC, 美国Santa Cruz公司) 。IL-2、IL-6、TNF-α测试盒 (中国人民解放军总医院免疫试剂研究所) 。

1.4 仪器

流式细胞仪 (型号Epics-XL, 美国Counter公司) , 12探头r计数仪 (德国DPC公司) 。

1.5 模型制备[6]

预免疫用0.5mL PBS液加入1mgC-BSA与等量弗氏不完全佐剂混匀配成乳悬液, 在大鼠背部皮下分多点注射。7d后, 模型组 (10只) 尾静脉注射C-BSA 2.5mg, 2d一次, 持续2个月;清开灵组 (10只) , 注射C-BSA同模型组, 清开灵注射液腹腔注射2mL/kg[7], 8次/周, 持续8周;还有1组 (10只) 正常对照组, 用生理盐水注射到腹腔与尾静脉, 次数与体积同上。

1.6 标本采集

第8周乙醚麻醉后处死大鼠, 分别取肾皮质、外周血检测相关指标。

1.7 指标测定

1.7.1 NF-кB的测定

单细胞悬液由新鲜肾皮质制备而成, 标记为Ⅰ抗 (抗鼠核转录因子P65抗体) 、Ⅱ抗与荧光素标记, 流式细胞术检测。

1.7.2 IL-2, IL-6, TNF-α测定

用放射免疫分析法, r计数仪测定血清。

2 结果

2.1 NF-кB含量检测结果

阳性率:模型组为 (13.12±2.83) %, 正常对照组为 (5.98±3.10) %, 差异较为明显 (P<0.01) ;治疗后, 清开灵组阳性率下降为 (8.03±1.98) %, 与模型组相比有显著差异 (P<0.05) 。

2.2 IL-2, IL-6, TNF-α含量检测结果

模型组明显上升于正常对照组 (P<0.05) ;清开灵组治疗后, 明显下降于模型组 (P<0.05) , 见表1。

注:与模型组相比*P<0.05

3 讨论

NF-кB作为一种重要的核转录因子, 在机体免疫调节反应中发挥作用较大。静息状态下, 抑制性蛋白跟NF-кB二聚体结合, 刺激活化IKK, IKK磷酸化降解其底物IкB, 释放出游离的NF-кB, 通过核内转移, 结合DNA相关单位, 对应的基因表达激活[8], 表达相关功能蛋白, 调控许多重要免疫因子的表达, 包括细胞因子 (如IL-2, IL-6, TNF-α等) 、细胞黏附因子 (如VCAM, ICAM等) , 这些因子有调节免疫细胞的趋化、增殖、分泌等作用。TNF-α与IL-2, IL-6协同促进病变的持续发展, 加重组织炎症损伤, NF-кB直接调控这些细胞因子的表达。

本研究模型组NF-кB活性增高, 同时IL-2、IL-6、TNF-α含量均上升, 说明肾皮质细胞中NF-кB的高表达与致炎性细胞因子的含量上升具有正相关性, NF-кB对这些重要免疫细胞因子的活化增殖和分泌至关重要, 最终介导加重肾脏组织的炎症导致免疫受损, 出现蛋白尿, 因此, NF-кB的过度表达与肾小球肾炎的发生、发展有密切关系, 可以作为肾小球肾炎治疗的靶点。由此可见, 清开灵注射液通过抑制肾脏皮质细胞中的NF-кB表达, 降低致炎性细胞因子含量, 抑制免疫细胞的增殖活化, 降低肾脏的炎症免疫反应。因此, 以清开灵注射液为代表的清热解毒药物抑制肾皮质细胞中NF-кB的表达, 降低致炎性细胞因子含量, 可能是其治疗肾炎的部分作用机制。

摘要：目的 探讨清开灵注射液 (QKL) 对实验性大鼠肾炎的作用机制。方法 采用牛血清白蛋白 (C-BSA) 建立肾炎大鼠模型, QKL腹腔注射治疗, 分别取大鼠肾皮质和全血, 检测NF-кB含量表达, IL-2、IL-6和TNF-α含量测定。结果 与正常对照组相比, 模型组的NF-кB表达显著增高 (P<0.01) , IL-2、IL-6和TNF-α含量显著增高 (P<0.05) ;与模型组相比, 清开灵治疗组NF-кB表达, IL-2、IL-6和TNF-α含量则明显降低 (P<0.05) 。结论 清开灵注射液通过抑制NF-кB的活化, 降低炎症免疫细胞因子表达, 起到治疗肾小球肾炎的作用, 因而从分子水平揭示了清热解毒药物治疗肾小球肾炎的部分机制。

关键词：清开灵注射液,C-BSA肾炎,NF-кB

参考文献

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[7]蒋玉凤.清开灵注射液治疗SHRsp出血性中风病的研究[J].北京中医药大学学报, 1997, 20 (2) :34.

化血清白蛋白 第2篇

1 资料与方法

1.1 一般资料

所选病例均为2008年12月至2010年9月我院神经内科住院患者。所有患者均于发病7d内入院, 大面积脑梗死组49例, 男26例, 女23例;年龄38~79岁, 平均 (61.4±5.7) 岁;其中出现意识障碍34例, 死亡22例。对照组腔隙性脑梗死34例, 男18例, 女16例;年龄39~78岁, 平均 (62.2±5.5) 岁。两组患者在性别、年龄、病情及病程等方面经统计学处理, 均无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。

1.2 研究方法

所有患者于入院时取静脉血10m L, 离心取上清液置-70℃保存待测。另对22例发病36h入院并存活者, 于发病后第36、72、120和168h按上述方法采集血样。采用酶联免疫吸附法检测血清中NSE和S100蛋白含量。NSE和S100蛋白试剂盒均由瑞典Can Ag Diagnostics AB提供。

1.3 统计学处理

采用SPSS13.0统计软件包分析处理, 计量资料用方差分析及t检验, P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 大面积脑梗死组患者血清中NSE水平和S100蛋白含量均明显高于腔隙性脑梗死组 (P<0.05) , 结果见表1。

注:与大面积脑梗死组比较, *P<0.05

2.2 大面积脑梗死有意识障碍组血清中NSE水平和S100蛋白含量较无意识障碍组明显升高 (P<0.05) , 结果见表2。

2.3 大面积脑梗死死亡患者较存活患者血清中NSE水平和S100蛋白含量明显升高 (P<0.05) , 结果见表3。

注:与无意识障碍组比较, *P<0.05

注:与死亡组比较, *P<0.05

2.4 动态观察22例发病36h入院并存活患者, 发现血清中NSE水平和S100蛋白含量随着发病时间的延长而逐渐升高, NSE水平72h达高峰, S100蛋白含量36h达高峰, 以后均逐渐下降。结果见表4。

注:与其他时间点比较, *P<0.05

3 讨论

大面积脑梗死好发于中老年高血压患者, 由于颅内长期高血压形成动脉粥样硬化斑块阻塞血管而导致大面积梗死。NSE是一种参与糖酵解的特异酶, 主要存在于大脑神经内分泌细胞和神经元内, 一旦突发脑梗死, NSE就会从缺血受损的细胞中释放出来, 通过血脑屏障进入体循环。因此可在外周血中检测NSE作为反映急性期脑损伤程度的重要指标[3]。S100蛋白为酸性钙结合蛋白, 分布于神经胶质细胞、少突胶质细胞等部位, 其含量变化也能反映脑细胞受损的严重程度。

本研究结果表明, 大面积脑梗死组患者血清中NSE水平和S100蛋白含量均比腔隙性脑梗死组高, 有意识障碍患者较无意识障碍患者、死亡患者较存活患者血清中NSE水平和S100蛋白含量显著增加。连续观察发现, 血清中NSE水平和S100蛋白含量随着发病时间的延长而逐渐升高。提示急性脑梗死后, 脑组织出现缺血、乏氧及坏死等病变, 造成神经元、神经细胞受损;NSE和S100蛋白透过血脑屏障进入血液中, 同步检测血清中NSE水平和S100蛋白含量能准确判断脑梗死患者脑损害情况, 对急性大面积脑梗死病情评估、预后判断有重要参考价值。

参考文献

[1]Lamers KJ, Vos P, Verbeek MM, et al.Protein S100B, neuron specific enolase (NSE) , myelin basic protein (MBP) and glial fibrillary acidic protein (GFAP) in cerebrospinal fluid (CSF) and blood of neurological patients[J].Brain Res Bull, 2003, 61 (3) :261-264.

[2]王晓明, 张国元, 龙存国, 等.同步测定血清神经元特异性烯醇化酶和髓鞘碱性蛋白含量对脑梗死及多发性硬化鉴别诊断的意义[J].中国危重病急救医学, 2002, 14 (9) :169.

化血清白蛋白 第3篇

1.3统计学处理

采用SPSS16.0软件进行数据分析, 各组间比较应用t检验及χ2检验, 以P<0.05有统计学意义。

2 结果

2.1 各组患儿NSE对比。

见表1。

(ng/mL)

注:1为对照组与轻症、重症、危重症组间的对比;2为轻症组与重症、危重症组间的对比;3为重症组与危重症组间的对比

2.2 各组患儿S-100β蛋白对比。

见表2。

(ng/L)

注:1为对照组与轻症、重症、危重症组间的对比;2为轻症组与重症、危重症组间的对比;3为重症组与危重症组间的对比

2.3 轻症患儿S-100β蛋白高数值组和低数值组间转为重症、危重症的对比

轻症组60例患儿中有23例S-100β蛋白>1200ng/L, 将其定为高数值组;其余37例S-100β蛋白<1200ng/L为低数值组。高数值组患儿转化为重症、危重症的有9例, 低数值组患儿转化为重症、危重症的有5例。其对比见表3。

3 讨论

手足口病多发生于学龄前儿童, 特别是以3岁以下年龄组发病率最高。常见致病原为肠道病毒EV71、柯萨奇病毒等, 其中EV71感染除了引起手足口病以外, 还能够引起无菌性脑膜炎、脑干脑炎、脊髓灰质炎样的麻痹、神经源性肺水肿、神经源性心脏损害等并发症, 临床变化迅速, 病情凶险, 致死致残率高[3]。重症手足口病患儿起病急, 进展快, 且手足口病流行期间无法全面、及时行病原学、血清学检查, 颅脑CT影像真正阳性改变多需要5~7d以上[4]。而患儿一旦出现高血糖、呼吸改变、肢体无力等常提示病变累及脑干[5]。Chang等[6]报道232例EV71所致手足口病累及中枢神经系统的病例, 其中39例死于疾病的急性期或恢复期, 51例失访或拒绝随访。在剩余的142例随访中发现, 61例轻度中枢神经系统受累 (无菌性脑膜炎) 病例全部康复;53例严重中枢神经系统受累 (脑炎、脑脊髓膜炎、类脊髓灰质炎综合症) 病例中11例存在神经系统后遗症, 1例存在神经发育延迟;28例中枢神经系统受累合并心肺衰竭 (需用正性肌力药物和呼吸机治疗) 病例中, 21例存在后遗症 (包括17例吞咽困难需要鼻饲, 16例中枢性肺通气不足需要呼吸机通气支持) , 并且21例存在神经发育延迟。烯醇化酶普遍存在于生物体内, 在糖酵解过程中, 它催化α-磷酸甘油形成磷酸烯醇式丙酮酸, 有5种同工酶。免疫组织化学方法研究表明, γγ型特异定位于神经元和神经内分泌细胞, 称为神经元特异性烯醇化酶 (NSE) 。正常体液中含量甚微, 占脑内全部可溶性蛋白的1.5%, NSE不与细胞内肌幼蛋白结合, 所以最易释放出来进入脑脊液或血液中, 当神经元损伤或坏死后, 胞浆中的NSE通过脑脊液-脑屏障和血-脑屏障溢入脑脊液和血液中, 且升高程度和脑损伤程度呈正相关, 因此NSE成为判定脑损伤敏感的生化指标[7]。S-100β蛋白是酸性钙结合蛋白, 其主要存在于星形胶质细胞及施万细胞中, 对中枢神经系统组织具有高度特异性。实验证实, 颅脑损伤后常伴有脑细胞破坏和血脑屏障损害, 从而使S-100β蛋白进入血液循环。因此, 通过检测外周血S-100β蛋白的浓度可反映脑损害严重程度。Raabe等[8,9]认为S-100β蛋白是一种反映中枢神经系统损伤的特异性物质, 而且不同预后组之间的S-100β蛋白浓度存在非常显著的差异。重症手足口病患儿存在不同程度上的脑损伤情况, 通过我们本组检测研究发现重症、危重症手足口病患儿的NSE、S-100β蛋白浓度明显高于轻症及正常对照组患儿, 在一定程度上反映了患儿的脑损伤程度;轻症患儿S-100β蛋白数值与正常对照组对比P<0.05, 差异有统计学意义, 与有重症转化倾向患儿的高S-100β蛋白浓度密切相关。正是如此, 我们注意到轻症患儿中S-100β蛋白浓度增高的病例多有向重症、危重症转化的情况。综上所述, NSE、S-100β蛋白浓度的增高为我们的临床早期观察治疗提供了警示资料, 从而做到早发现、早重视、早治疗、早抢救, 为挽救重症、危重症手足口病患儿的生命赢得了时机。而NSE、S-100β蛋白浓度的增高与重症、危重症手足口病后遗症之间是否存在相关性, 仍有待我们进一步观察、随访。

参考文献

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[8]Raabe A, Grolms C, Seifert V.Serum markers of brain damage andoutcome prediction in patients after severe head injury[J].Br JNeurosurg, 1999, 13 (1) :56-59.

化血清白蛋白 第4篇

1 材料方法

1.1 实验动物与分组

健康成年雄性SD大鼠30只, 体质量200～250g, 购自广东省医学实验动物中心, 随机分为2组, 即模型组和金纳多治疗组, 每组10只, 以标准饲料喂养。在大鼠心跳骤停模型建立后, 心脏停跳5min时两组均开始心肺复苏治疗, 治疗组除常规治疗外, 还同时给与静脉注射金纳多 (4ml/kg) 。

1.2 大鼠CA模型建立及治疗

根据R Christian等创建的窒息合并冰氯化钾停跳液致大鼠心跳骤停的方法[1]制备心肺复苏模型。并参照复苏实验研究Utstein模式[2]进行设计和记录实验参数。操作步骤简述如下:将SD大鼠仰卧固定于手术台上, 水合氯醛腹腔注射麻醉, 行左颈动脉置管, 接ASB-240U生物信号采集分析系统 (成都傲生科技公司生产) , 测量平均动脉 (MAP) 、心率 (HR) , 记录Ⅱ导心电图 (ECG) ;气管切开置管, 接ALC-V9动物呼吸机 (上海奥尔特生物科技有限公司生产) (查文献, 大鼠CPR操作所用仪器, 并做适当文字调整) 。大鼠术后室温下稳定10min, 于呼气末夹闭气管插管, 并腹腔注射氯化钾溶液 (剂量, 查文献) 致窒息心跳骤停 (CA) 。CA 5min后立即实施心肺复苏。胸外按压频率为160次/分, 按压深度为大鼠胸廓前后径的1/3, 并快速推注肾上腺素0.01mg/kg, 呼吸机辅助通气 (100%纯氧) , 通气频率80次/分, 潮气量6mL/kg, 连续监测并记录心电图、颈动脉血压。15min无效者放弃复苏。CA标准: (1) 心电图示心电静止、室颤、心电机械分离; (2) 心尖区心脏搏动消失; (3) 动物皮肤黏膜明显发绀 (查文献, 列出参考标准) 。

1.3 标本采集

复苏后存活超过24h的大鼠分别于CPR后3h、6h、12h、24h抽取静脉血2m L。于4℃, 5000r/min离心分离出血清, 将血清保存于-80℃备用。

1.4 S-100蛋白与NSE含量测定

S-100蛋白与NSE采用酶联免疫吸附法检测, S-100蛋白所用试剂盒购于瑞典CanAg Diagnostics公司, NSE检测试剂盒购自上海森雄科技有限公司。严格按操作说明书要求进行检测, 再根据标准曲线将所测数值换算成实际浓度。

1.5 统计学分析

所得数据用统计学软件SPSS16.0进行处理, 各项指标用均数±标准差 (x±s) 表示, P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

模型组和治疗组大鼠在CA-CPR过程中各死亡一只, 两组另外9只大鼠均完成整个实验过程。

2.1 金纳多治疗对CA-CPR大鼠血清中S-100蛋白浓度的影响

经检测显示, 模型组血清中S-100蛋白的浓度在CPR后3h、6h、12h、24h这几个时间点均显著高于金纳多治疗组, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。详见表1。

2.2 金纳多治疗对CA-CPR大鼠血清中NSE浓度的影响

模型组大鼠血清中NSE蛋白的浓度在相应的时间点也显著高于金纳多治疗组, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。详见表2。

与金纳多治疗组比较, #P<0.05;##P<0.01

3 讨论

心肺复苏后大脑功能的恢复代表着复苏的最终成功, 然而, 临床上心肺复苏后只有不到20%的心跳骤停病人经心肺复苏后能完全恢复, 而约50%的病人从未恢复任何意识[3]。因此, 在心肺复苏过程中给与中枢神经系统合理有效的药物保护十分重要。而药物对神经系统保护效果需要选择恰当的指标进行评价。

S-100蛋白在脑内主要由活化的星形胶质细胞产生, 是神经胶质细胞完整性的标志。心跳骤停导致脑缺血性, 损伤后胶质细胞胞膜的完整性遭到破坏, S-100蛋白进入脑脊液, 同时由于血脑屏障缺氧受损, 其通过血脑屏障进入血液, 血清和脑脊液中的S-100蛋白浓度迅速增高[4,5]。研究中发现, S-100蛋白是中枢神经系统损伤中具有特异性和敏感性的神经生化指标, 也是血脑屏障受损的标志, 且血清S-100蛋白的浓度与中枢神经损伤的预后密切相关。

烯醇化酶是糖酵解途径中的关键酶, 是由α、β和γ这三种不同的亚基以二聚体形式组成的同工酶。其中γ型同功酶特异地存在于神经元和神经内分泌细胞的胞浆内, 称为NSE。正常情况下, NSE在周围神经中含量远低于脑, 在外周血液几乎测不到。当脑损伤时神经元受损, 细胞膜完整性被破坏, NSE不与细胞内的肌动蛋白结合, 从而从细胞内释放出来, 进入脑脊液或者通过损伤的血脑屏障进入外周血[6,7]。许多动物实验证明了, 脑脊液和血清中的NSE可用来判断急性期脑损伤程度及预后[8]。

金纳多是银杏叶提取物制成的注射液, 其有效成分为总黄酮 (24%) 和萜类 (6%) (银杏苦内酯) , 其药理作用主要有[9, 10]: (1) 改善血液动力学和调整循环系统:通过刺激前列环素和内皮舒张因子的生成而产生动脉舒张作用, 共同保持动脉和静脉血管的张力, 降低全血黏度、增进红细胞的可塑性; (2) 清除自由基和抑制血小板聚集的作用:清除机体内过多的自由基, 并抑制血小板的聚集, 防止自由基的膜紊乱, 抑制细胞膜的脂质发生过氧化反应, 从而保护细胞膜, 防止自由基对机体造成的一系列伤害; (3) 对大脑及血脑屏障的保护作用:增加对缺血组织葡萄糖的供应量, 并增加神经递质受体的数量, 改善患者的脑部循环和神经功能。总之, 金纳多具有防止细胞膜紊乱, 保护组织, 改善血液循环等作用, 且不良反应较少。对于脑部缺血、缺血后再灌注损伤的治疗效果较好, 能有效地改善微循环, 改善神经功能, 使心脏复苏的预后较好。

本研究显示, CA-CPR大鼠血清中S-100蛋白与NSE浓度在均显著升高, 而经金纳多治疗后其表达水平明显下降, 与模型组比较, 差异有显著性 (P<0.01) 。可见, 金纳多在CA-CPR的过程中使用可以有效地减轻减轻心跳骤停造成的神经损伤。

参考文献

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化血清白蛋白 第5篇

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择上虞市人民医院2011年1月~2012年6月急诊行手术治疗颅脑外伤患者80例。纳入患者术前CT检查均提示一侧脑挫裂伤并发脑内血肿, 且格拉斯哥昏迷评分 (GCS) 评分<9分。排除原有心、肝、肾和血液系统疾病, 术前发生脑疝、术中发生恶性脑膨出等病情严重患者。采用随机数字表将患者分为丙泊酚组与对照组, 每组各40例。两组患者性别、年龄、外伤原因和手术时间等比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。见表1。本研究方案经医院伦理委员会讨论通过, 两组患者入组前均签署知情同意书。

1.2 治疗方法

两组患者术前均肌注阿托品0.5 mg, 并常规留置胃管、导尿, 开放静脉通路和保持气道通畅。连续监测心电图、血压、氧饱和度、呼吸末二氧化碳分压及尿量。所有患者均采用气管插管全身麻醉, 麻醉诱导使用维库溴铵0.1 mg/kg、利多卡因1 mg/kg、芬太尼2μg/kg依次静推, 丙泊酚组使用丙泊酚 (商品名:力蒙欣, 西安力邦药业有限公司, 规格:200 mg/20 m L) 0.1~0.2 mg/ (kg·h) 、芬太尼1~2μg/ (kg·h) 及维库溴铵0.02~0.03 mg/ (kg·h) 静脉维持。对照组使用异氟醚 (美国雅培制药有限公司, 规格:100 m L/瓶, 批号8676212) 0.8%~1.2%吸入及芬太尼1~2μg/ (kg·h) 、维库溴铵0.02~0.03 mg/ (kg·h) 静脉维持。观察两组患者术前、术中1 h、术毕时血清S100B蛋白、NSE和TNF-α水平的变化。

1.3 观察指标

采集患者外周静脉血2~4 m L, 2500 r/min离心10 min, 分离出上层血清, 置-70℃冰箱待测。采用酶联免疫吸附法检测血清S100B蛋白、NSE和TNF-α水平, 试剂盒分别由美国Sigma公司、天津灏洋生物制品科技有限公司和深圳晶美生物公司提供, 操作方法均严格参照试剂盒说明书步骤进行。

1.4 统计学方法

采用统计软件SPSS 17.0对数据进行分析, 正态分布计量资料以均数±标准差 (±s) 表示, 两独立样本的计量资料采用t检验;重复测量的计量资料比较采用方差分析, 两两比较采用LSD-t检验。计数资料以率表示, 采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

两组患者术前血清S100B蛋白、NSE和TNF-α水平比较无明显统计学差异 (P>0.05) , 两组患者术中1 h和术毕时血清S100B蛋白、NSE和TNF-α水平均较术前明显上升 (P<0.05或P<0.01) , 且丙泊酚组上升幅度明显低于对照组 (P<0.05) 。见表2~4。

注:与同组术前比较, *P<0.05、**P<0.01;与对照组同时点比较, ▲P<0.05

注:与同组术前比较, *P<0.05、**P<0.01;与对照组同时点比较, ▲P<0.05

注:与同组术前比较, *P<0.05、**P<0.01;与对照组同时点比较, ▲P<0.05

3 讨论

目前评估颅脑损伤损伤的血清学指标较多, 其中S100B蛋白、NSE和TNF-α是较常用。S100B蛋白主要存在于神经胶质细胞中的一种多功能神经营养蛋白, NSE主要存在于神经元细胞轴突胞质和神经内分泌细胞中一种可溶性胞浆蛋白[7]。当颅脑损伤后脑细胞受损, S100B蛋白和NSE从受损崩解的神经胶质细胞和神经元中漏出, 通过受损血脑屏障进入血液, 引起血液S100B蛋白和NSE水平的上升, 因此, 血液S100B蛋白和NSE水平可判断脱髓鞘改变和颅脑损伤的严重程度[8,9]。TNF-α主要由活化的单核巨噬细胞分泌产生的多肽调节因子, 是机体免疫防御、炎症反应损伤过程中的重要炎症递质。近年来研究发现TNF-α可诱导神经胶质细胞和内皮细胞的黏附因子表达, 促进中性粒细胞在微血管内的表达, 参与促进血脑屏障的损伤过程, 可作为判断颅脑损伤的严重程度的敏感指标[10]。

急性颅脑外伤是临床常见的急危重症, 易继发性缺氧、缺血性表现。同时开颅手术本身对患者是一个应激过程, 会造成脑组织损伤。对急性颅脑手术的患者在选择麻醉药物时既要保证术后麻醉的需要, 还要保护患者的脑细胞功能, 减少继发性脑损伤[2]。以往颅脑手术麻醉常采用异氟醚吸入, 麻醉效果较满意, 但异氟醚易造成患者颅内压增高, 不利于患者康复, 加上颅脑手术引起氧自由基升高的共同作用易加重患者脑细胞损伤, 从而限制了其的临床使用[11]。丙泊酚是一种快速强效新型全身麻醉药物, 具有起效快, 苏醒迅速、平稳, 不良反应少等优点[12]。近年来研究发现丙泊酚具有良好脑细胞保护作用, 其主要机制是能抑制氧自由基引起的脂质过氧化, 稳定脑细胞膜结构, 减少S100B蛋白和NSE外溢, 减少兴奋性氨基酸合成与释放, 降低兴奋性氨基酸对脑组织毒性作用;还能保护细胞内钠泵的完整性, 防止细胞内水钠滞留, 减轻脑细胞水肿[13]。叶伟标等[14]研究发现丙泊酚与异氟醚均能明显抑制急性颅脑外伤手术时血清S100B和NSE水平的异常升高, 但丙泊酚的抑制作用较异氟醚更强。宋晓阳等[15]丙泊酚麻醉对急性颅脑外伤手术患者血清S100B蛋白和神经元特异性烯醇化酶和肿瘤坏死因子-α的影响研究也发现丙泊酚可明显降低颅脑外伤患者手术期间NSE的升高, 在一定程度上可减轻患者术后的认知功能下降, 改善患者的预后, 具有明显的脑保护作用。本研究结果发现丙泊酚组患者术中1 h和术毕时血清S100B蛋白、NSE和TNF-α水平上升幅度明显低于对照组。提示丙泊酚麻醉能明显降低急性颅脑手术患者S100B蛋白、NSE和TNF-α水平, 降低急性颅脑损伤的程度, 具有良好的脑细胞保护作用[16]。

化血清白蛋白 第6篇

关键词：乌司他丁,心脏双瓣膜置换术,神经元特异性烯醇化酶,S-100β蛋白,作用机制

自人工心肺机问世以来,其在心脏、大血管手术中发挥着重要作用;然而体外循环(cardio pulmonary bypass,CPB)术后所引起的脑组织损伤成为困扰临床医生的一大难题。调查显示[1],心血管术后患者常伴有不同程度中枢系统功能障碍,提示可能有脑损伤的发生。王小康[2]称,心脏术后暂时记忆力减退及认知功能障碍发生率为30%~60%;然而目前针对这种脑损伤仍然缺乏有效的治疗手段。 乌司他丁是一种新型的蛋白酶抑制剂,能够有效抑制各种炎性反应。 国外有研究称[3]乌司他丁可以通过诱导脑组织在缺血、缺氧情况下产生早期耐受,提示其可能对心脏手术围术期脑组织具有保护作用。 本研究对张家口市第一医院行心脏双瓣膜置换术患者在麻醉诱导期间给予乌司他丁, 并观察患者血清S-100β 蛋白、神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)的变化水平,以期为心脏手术中减轻脑损伤提供理论依据,现将研究成果报道如下:

1资料与方法

1.1一般资料

选择2009年9月~2014年9月在张家口市第一医院行 心脏双瓣 膜置换术 的患者40例作为研 究对象,男27例,女13例;年龄43~68岁,平均(57.3± 5.9) 岁 。 纳入标准 : 按照纽约心脏病协会 (New York heart association,NYHA) 分级[4]标准 Ⅰ~Ⅱ 级 ; 术前超声检查无颈动脉狭窄;患者拟行二尖瓣置换+主动脉瓣置换术;经医院伦理委员会批准;取得患者及家属同意,并签署知情同意书。 排除标准:合并糖尿病、肝肾功能异常者;血管栓塞性疾病、精神疾病或脑血管疾病者;左心室射血分数(left ventricular enjection fraction,LVEF)≤40%。 将符合标准的40例患者按照随机数字表法分为试验组20例和对照组20例, 两组患者性别、年龄、LVEF、心功能分级等一般资料比较差异无统计学意义(P > 0.05),具有可比性。 见表1。

注:LVEF:左心室射血分数

1.2方法

1.2.1麻醉方法两组患者入室后行动脉压监测,分别用芬太尼(江苏恩华药业股份有限公司,批号:090713) 5~15 μg/kg、依托咪酯 (江苏恩华药业股份有限公司 , 批号:081210)0.1~0.2 mg/kg、维库溴铵(重庆药友制药有限责任公司,批号:090321)0.15 mg/kg进行麻醉诱导;试验组于麻醉诱导后静脉给予乌司他丁(广东天普生 化医药股 份有限公 司 ,2 m L:1.0×105k U, 批号:090830)1.0×104k U/kg , 对照组给予等量生理盐水。 麻醉诱导后两组患者均行机械通气,吸入50% 氧气联合压缩空气,维持呼气末二氧化碳分压;麻醉维持吸入七氟 烷 (鲁南贝特 制药有限 公司 ,批号 : 091022)0.6%~1%、丙泊酚 (西安力邦制药有限公司 , 批号:081027)0.04 mg/(kg·min),间断注射维库溴铵与芬太尼。

1.2.2手术方法患者取仰卧位 , 将胸部正中做一切口,肝素化后常规建立体外循环,将升主动脉阻断后, 再于右房-房间隔做切口和左动脉根部切口, 冷氧合血停跳液灌注降低心肌温度。 将病变部位二尖瓣切除后置入双叶机械瓣,再将病变主动脉瓣切除后置入双叶机械瓣膜;将右房和升主动脉连续缝合后复温、排气;升主动脉开放,复跳心跳,辅助循环并停机;再于心包内、胸骨后置入引流管,最后关胸。

1.3观察指标

1记录两组患者升主动脉阻断时间、CPB时间、 机械通气时间、术后拔管时间、术后清醒时间。 2分别于中心静脉通路建立后(T0)、CPB开始30 min (T1)、 CPB结束时 (T2)、手术结束时 (T3)、术后6 h (T4) 抽取静脉血5 m L,高速离心分离血清,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清S-100β、NSE水平,相关试剂盒由上海纪宁生物科研有限公司提供,操作严格参考试剂盒说明书。 3分别于术前1 d、术后1、3、5 d采用精神状态检查量表(mini-mental state examination, MMSE)[5]对两组患者认知功能进行评价,MMSE包括定向力、注意和计算、记忆、概念形成、语言能力5个部分;以MMSE<24分认为存在认知功能障碍。

1.4统计学方法

采用SPSS 17.0统计学软件进行检验,计量资料采用均数±标准差(±s)表示,组间比较采用t检验, 多组间比较采用方差分析,计数资料采用百分率表示,组间比较采用 χ2检验。 以P < 0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1两组患者手术一般情况比较

术后两组均无死亡病例,试验组有1例患者术后第2天出现心律失常,行电复律;对照组出现急性肾衰,后行血液净化治疗;将此2例患者剔除本研究。 其余病例中,两组患者升主动脉阻断时间、CPB时间、机械通气时间、术后拔管时间、术后清醒时间比较,差异无统计学意义(P > 0.05)。 见表2。

2.2两组患者各时段MMSE评分比较

两组患者 术前MMSE评分比较 差异无统 计学意义(P > 0.05),术后1、3、5 d试验组MMSE评分显著高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05),见表3。

2.3两组患者各时段血清S-100β、NSE水平比较

两组患者T0时血清S-100β、NSE比较差异无统计学意义(P > 0.05),血清S-100β、NSE水平从T1开始升高,至T2时达到高峰,随后逐渐降低,至T4时降低至T0水平;其中试验组T1、T2、T3时血清S-100β、 NSE水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05), 见表4。

注:与 T0比较,*P < 0.05;与对照 ,△P < 0.05;NSE:神经

3讨论

CPB所致脑损伤的机制目前尚不完全清楚 ,有报道称[6],心脏瓣膜置换术行CPB会导致机体出现急性炎性反应,体内释放大量细胞因子,而细胞因子又会进一步加重全身炎性反应,给机体组织或器官造成一定损伤。有国外报道称[7],心脏手术后患者会出现缺血再灌注损伤,导致机体释放大量细胞因子,其中肿瘤坏死因子-α 会激活磷脂酶A2,从而降解细胞膜,导致神经细胞结构遭到破坏;另外细胞因子还会介导巨噬细胞和中性粒细胞出现“呼吸暴发”[8,9],产生更多炎性介质,加重脑组织损伤,因此降低细胞因子的释放,从理论上能够起到一定脑保护作用。 乌司他丁是一种蛋白酶抑制剂,它可以改善机体内环境,并稳定溶酶体膜和清除自由基,抑制细胞因子释放[10]。 许建强等[11]报道称乌司他丁能够抑制由肿瘤坏死因子-α 介导的中性粒细胞脱颗粒释放氧自由基和蛋白酶,从而缓解机体炎性反应。 国外一项研究还证实[12],乌司他丁能够降低血栓烷B2、 内皮素等水平来改善局部脑组织缺血区血供,从而缓解对神经细胞的继发性损害作用。

S-100β 是一种酸性钙结合蛋白[13],它由两个 β 亚基组成,主要由神经胶质细胞合成并分泌;当发生脑损伤后S-100β 起到两种作用:低浓度S-100β 能够营养神经细胞,促进轴突生长,稳定神经元,有利于神经细胞的修复;而高浓度S-100β 会直接诱导神经细胞凋亡和通过直接神经毒作用,从而加重脑损伤。 Wada等[14]采用免疫组化法检测缺血性脑损伤大鼠脑组织S-100β 蛋白表达水平,结果发现大鼠缺血后第1天星形胶质细胞S-100β 蛋白表达显著增加, 提示S100β 升高可以反映脑组织损伤程度。 周国俊等[15]研究也提示血清S-100β 含量变化与脑损伤程度密切相关,神经保护剂能够降低脑水肿患者S-100β 水平并能减轻脑水肿,而无神经保护剂只用高渗甘油虽然能缓解脑水肿,但对血清S-100β 影响较小。NSE来源于神经元细胞, 当脑组织受损后会改变神经脱髓鞘,导致神经细胞和血脑屏障损害,存在于神经元细胞胞浆中的NSE会被大量释放。 由于NSE不与细胞内肌动蛋白相结合,因此可以通过检测血清NSE水平来评价脑损伤程度。 漆敏等[16]研究亦提示,血清NSE水平与脑损伤程度呈正相关,损伤越重,血清NSE水平越高。

本研究发现两组患者升主动脉阻断时间、CPB时间、机械通气时间、术后拔管时间、术后清醒时间比较差异无统计学意义,而术后各时段试验组MMSE评分显著高于对照组,提示乌司他丁对麻醉效果影响较小,且能够减少术后认知功能障碍的发生,这与黄贵金等[17]报道结论一致。 进一步分析发现,术后两组患者血清S-100β、NSE水平开始升高,至CPB结束时达高峰,随后开始降低,至术后6 h时降低至术前水平,提示心脏瓣膜置换术后患者会出现一定程度的脑损伤,这符合关正等[18]报道结论。 其中T1、T2、T3时试验组血清S-100β、NSE水平显著低于对照组,说明乌司他丁可能作用机制为抑制机体炎 性反应 , 降低CPB期间血清S-100β、NSE水平,从而起到脑保护作用。 值得注意的是,本研究纳入的患者基础条件较好, 患者对CPB造成各脏器损伤耐受较好,而对于基础条件差、病情加重、CPB时间交叉的患者,其炎性反应更明显,乌司他丁的脑保护效果可能更好。 另外还需考虑本研究样本量偏少,乌司他丁的用量、用法还需要进一步验证。

稻米生产人血清白蛋白技术 第7篇

人血清白蛋白是指人血浆中的蛋白质, 在血浆中其浓度为42g/L, 约占血浆总蛋白的60%。在体液中人血清白蛋白可以运输脂肪酸、氨基酸、类固醇激素、金属离子和许多治疗分子等, 同时维持血液正常的渗透压。在临床上人血清白蛋白可用于治疗休克与烧伤, 用于补充因手术、意外事故或大出血所致的血液丢失, 也可以作为血浆增容剂。从人的血浆中提取的人血清白蛋白, 我国每年临床和疫苗辅料需要150170吨人血清白蛋白, 完全从血浆中提取, 相当于要2亿人年均献血100毫升。所以我国人血清白蛋白每年临床需要量是很大的, 市场供应远远不够。我国的科研人员经过4年的研究, 建立了水稻胚乳细胞生物反应器技术平台。利用该技术平台在稻米中生产人血清白蛋白, 大约500亩水稻就可以提取1000公斤人血清白蛋白。

此项科技成果已经通过专家鉴定, 认为达到了世界先进水平, 将对传统的医药蛋白生产体系产生革命性影响, 也标志着我国植物生物反应器研究与利用取得了重要突破, 使我国植物生物反应器技术研究与利用跻身于世界先进行列。据专家介绍, 利用该技术平台生产重组人血清白蛋白, 不仅完全满足人血清白蛋白的市场需求, 而且成本低, 安全可靠, 可以杜绝病原菌污染。

目前, 此课题组已获得高纯度的重组人血清白蛋白, 正在与生物科技有限公司联合进行开发, 有望再经过4至5年的努力, 重组人血清白蛋白进入医药市场, 满足医疗部门在这方面的需要。